董國興，陽愛國，陳 烺，郝力力，袁東波*

（1.四川省南充市動物疫病預(yù)防控制中心，四川 南充 637000；2.四川省動物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041；3.西南民族大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，四川 成都 610041）

棘球蚴病俗稱包蟲病，由棘球絳蟲幼蟲所引起的一類人畜共患寄生蟲病，屬于我國二類動物疫病。本病主要以犬、狐及狼為傳染源和終末宿主，人、牛羊等家畜以及鼠等嚙齒類動物為中間宿主［1］。包蟲病對我國畜牧業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失，并嚴(yán)重危害人的健康，是我國西部牧區(qū)因病返貧的主要因素之一［2］。本試驗(yàn)通過對犬糞樣品進(jìn)行檢測，對川西地區(qū)阿壩州、甘孜州、涼山州以及雅安市部分包蟲病流行地區(qū)的感染情況進(jìn)行分析，給四川省包蟲病防控提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 樣本采集和處理 共采集犬糞樣本3 200份。采集地點(diǎn)包括阿壩藏族羌族自治州的馬爾康市、阿壩縣、松潘縣、壤塘縣、理縣、九寨溝縣，甘孜藏族自治州的石渠縣、雅江縣、鄉(xiāng)城縣、德格縣、理塘縣、甘孜縣，涼山彝族自治州的木里縣、越西縣，雅安市的寶興縣和天全縣。每個(gè)市（縣）各200份。

取犬糞樣1 g，放入盛有1 mL 樣品稀釋液（試劑盒）的1.5 mL離心管中，充分振蕩混勻糞樣，在3 000 r∕min條件下離心10 min，取上清液備用。

1.2 儀器設(shè)備和試劑

1.2.1 儀器設(shè)備 離心機(jī)；最終測定儀器為萊恩德LD-96A酶標(biāo)儀。

1.2.2 試劑 棘球絳蟲糞抗原夾心ELISA 檢測試劑盒。

1.3 檢測方法和結(jié)果判定

1.3.1 檢測方法（1）按照棘球絳蟲糞抗原夾心ELISA 檢測試劑盒說明書進(jìn)行樣本處理，記錄樣本順序，取出包被板。

（2）按順序加入已處理樣品100 μL。陽性對照、陰性對照各1孔，臨界對照3孔。于37 ℃放置60 min。

（3）洗板機(jī)洗板6次，洗板結(jié)束將微孔板倒置在吸水紙上拍干。

（4）每孔加酶標(biāo)記物50 μL，于37 ℃放置30 min。洗板。

（5）每孔加顯色液A、B 各50 μL，振蕩混勻，置37 ℃避光30 min。

（6）每孔加入終止液50 μL，混勻后用酶標(biāo)儀讀數(shù)，450 nm波長測定OD值。

1.3.2 結(jié)果判定 根據(jù)試劑盒說明書判定結(jié)果，陽性：樣品OD 值比臨界對照OD 值平均值≥1.0；陰性：樣品OD 值比臨界對照OD 值平均值＜1.0。

2 結(jié)果與分析

2.1 各縣陽性率情況 阿壩州阿壩縣陽性率為1.0%；甘孜州德格縣陽性率為5.5%，鄉(xiāng)城縣陽性率為4.5%；涼山州木里縣陽性率為5.0%；雅安市天全縣陽性率為0.5%，其余市（縣）均未檢測出陽性樣本。具體結(jié)果如表1所示。

表1 各縣陽性率情況

2.2 分析 本次檢測阿壩州涉及1個(gè)市、5個(gè)縣，共采集犬糞樣品1 200份，總陽性率為0.2%；甘孜州涉及6 個(gè)縣，共采集犬糞樣品1 200 份，總陽性率為1.7%；涼山州涉及2 個(gè)縣，共采集犬糞樣品400 份，總陽性率為2.5%；雅安市涉及2 個(gè)縣，共采集犬糞樣品400份，總陽性率為0.3%。2021年四川省包蟲病部分流行地區(qū)的總陽性率為1.0%，如表2所示。

表2 各地陽性率情況

本次調(diào)查結(jié)果與2012年及2018年四川省犬細(xì)粒棘球絳蟲的平均陽性率相比（圖1）［3］，其感染率大幅度降低，如阿壩州的馬爾康市、甘孜州的石渠縣、涼山州的越西縣以及雅安市的天全縣均未檢測出陽性樣本。

圖1 四川省近年犬細(xì)粒棘球絳蟲感染情況對比

3 討論

本次共檢測犬糞樣本共3 200 份，陽性率約為1.0%。與四川省2012年及2018年流調(diào)的平均陽性率32.3%、8.1%相比，2021 年陽性率明顯降低。其中，阿壩州的馬爾康市、松潘縣、壤塘縣、理縣、九寨溝縣，甘孜州的石渠縣、雅江縣、理塘縣、甘孜縣，涼山州的越西縣以及雅安市的寶興縣感染率大幅度降低。分析原因如下：（1）各地建立了相應(yīng)的犬只管理系統(tǒng)，對各家各戶的犬進(jìn)行登記，且大力提倡家犬拴養(yǎng)；（2）限制了牧區(qū)居民養(yǎng)殖犬的數(shù)量，及時(shí)對流浪犬撲殺；（3）本著“犬犬投藥，月月驅(qū)蟲”的防控原則，定期用吡喹酮對家犬進(jìn)行藥物驅(qū)蟲；（4）對羊群進(jìn)行免疫接種，機(jī)體具有了一定的保護(hù)力［4］。（5）集中屠宰牛羊，及時(shí)對動物臟器進(jìn)行無害化處理，很大程度上避免了犬誤食患病動物臟器，從而降低感染本病的風(fēng)險(xiǎn)。作為包蟲病重度流行的甘孜州石渠縣，在本次調(diào)查中未檢測出陽性樣本，但是涼山州木里縣作為包蟲病輕度流行區(qū)域，本次檢測陽性率為5.0%，提示當(dāng)?shù)貞?yīng)引起重視。

此外，在包蟲病防控工作中依舊存在幾點(diǎn)問題：（1）驅(qū)蟲工作存在不足。使用藥物吡喹酮對家犬進(jìn)行驅(qū)蟲時(shí)，由于藥物適口性差，增加了藥物驅(qū)蟲的難度，犬在不食或攝入藥量不足情況下都會直接影響驅(qū)蟲效果。經(jīng)藥物驅(qū)蟲后，由于當(dāng)?shù)啬撩窬幼》稚?，糞便無法做到集中定點(diǎn)無害化處理，糞便中的蟲卵仍存在感染隱患。（2）屠宰工作存在不足。部分地區(qū)無法做到集中屠宰，存在牧民自行屠宰的現(xiàn)象，屠宰后的動物臟器也未能及時(shí)集中銷毀。因此，當(dāng)?shù)卣嚓P(guān)部門應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)宣傳，讓廣大居民了解包蟲病的生活史、傳播途徑等相關(guān)知識，同時(shí)做好犬的驅(qū)蟲工作，避免糞便中的蟲卵污染環(huán)境；加強(qiáng)屠宰檢疫工作和培訓(xùn)工作，做到集中屠宰和集中處理動物臟器，并對屠宰場進(jìn)行動物疫病防控知識及技能的培訓(xùn)。

4 結(jié)論

四川省部分包蟲病流行地區(qū)的犬不僅存在細(xì)粒棘球絳蟲感染，還存在多房棘球絳蟲以及混合感染［5］。然而，本次檢測所用試劑盒只能檢測到細(xì)粒棘球絳蟲，無法檢測到多房棘球絳蟲。因此，后期可采用熒光PCR方法對犬糞樣本進(jìn)行細(xì)粒棘球絳蟲和多房棘球絳蟲檢測，從而提供更為完整的數(shù)據(jù)參考?！?/p>