賈春燕，帕爾哈提·艾別提，孫佳楠，馬若婷，張海英,

（1. 新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院，新疆 烏魯木齊 830000；2. 塔城市自然資源局，新疆 塔城 834700；3. 新疆醫(yī)科大學(xué) 第四臨床醫(yī)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830000；4. 新疆中藥炮制研究重點實驗室，新疆 烏魯木齊 830000）

神香草全球約15種，分布于亞洲中部、西亞至南歐及北非，最早作為一種香料植物，添加于食物中或制成精油，在歐洲廣泛使用[1]。中國有硬尖神香草 （Hyssopus cuspidatusBoriss.）和寬唇神香草（Hyssopus latilabiatusC. Y. Wu et H. W. Li）兩個種，《中國植物志》[2]、《中華本草-維吾爾藥卷》[3]、《維吾爾藥志》[4]、中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)（維吾爾藥分冊）等收載的均為硬尖神香草。在印度、伊朗和中國新疆地區(qū)，神香草為民間傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)習(xí)用藥材，其中硬尖神香草全草入藥，維吾爾名為“祖帕奇尼”，功能主治為化痰、止咳、祛風(fēng)寒、殺菌[4]?，F(xiàn)代藥理研究表明，神香草提取物具有祛痰、止咳、平喘、解痙、抑制血糖升高、抗衰老、抑菌、抗血小板等作用[5-8]。本課題前期研究發(fā)現(xiàn)新疆僅在阿勒泰、塔城地區(qū)有野生神香草，且寬唇神香草蘊藏量比硬尖神香草更大。硬尖神香草主要生長在礫石質(zhì)山坡上和巖石縫中，寬唇神香草生長于荒蕪?fù)恋?、平原及河灘地上。對比生長環(huán)境和繁殖條件，可知寬唇神香草生長地域廣泛，易于大量人工培育及采集。目前文獻(xiàn)中可查到有關(guān)神香草的報道，均以硬尖神香草為主，寬唇神香草的化學(xué)成分、藥理作用均不清楚。本實驗通過揮發(fā)油的氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）分析，進(jìn)行硬尖神香草與寬唇神香草的比較研究，為寬唇神香草藥用價值的研究提供實驗依據(jù)。

1 儀器及試藥

1.1 儀器

安捷倫5977A MSD-7890B氣質(zhì)聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）。

1.2 試藥

硬尖神香草（采自布爾津縣），寬唇神香草（采自吉木乃縣），經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院李永和主任中藥師鑒定為正品。乙醚，正己烷，氯化鈉，無水硫酸鈉均為分析純；高純氦氣（純度：99.999 %）。

2 方法與結(jié)果

2.1 GC與MS條件

2.1.1 GC條件 色譜柱為PE-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）毛細(xì)管柱；程序升溫：50 ℃，保持3 min，3 ℃/min升至200 ℃，5 ℃/min升至280 ℃，保持30 min； 進(jìn)樣口溫度：290 ℃；進(jìn)樣量：1.0 μl；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比為5:1；載氣：氦氣，載氣流速為1.0 ml/min；

2.1.2 MS條件 離子源溫度為230 ℃；傳輸線溫度：200 ℃；掃描范圍：35～600 amu；功率：70 ev；電離方式：電轟擊電離（EI）；光電倍增：270 V。

2.2 樣品處理

取硬尖神香草與寬唇神香草的全草100 g，加水1000 ml浸泡0.5 h，水蒸氣蒸餾6 h，收集蒸餾液，用氯化鈉飽和，乙醚萃取，乙醚層用無水硫酸鈉干燥，低溫回收乙醚，得到具有芳香氣味的棕黃色揮發(fā)油，密封保存，揮發(fā)油得率0.6 %。

2.3 樣品測定

準(zhǔn)確稱取神香草揮發(fā)油樣品0.20 g，用混合溶劑[甲醇-二氯甲烷（1:4）]溶解并定容至10 ml，0.45 μm濾膜過濾，按2.1項下GC與MS條件進(jìn)樣檢測。圖1為硬尖神香草揮發(fā)油總離子流色譜圖，圖2為寬唇神香草揮發(fā)油總離子流色譜圖，根據(jù)總離子流色譜圖，經(jīng)檢索Wiley質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫并結(jié)合質(zhì)譜裂解規(guī)律進(jìn)行解析，結(jié)果硬尖神香草揮發(fā)油鑒定出48種化合成分（見表1），其中含量較高的是松香芹酮（26.73 %）、β-蒎烯（22.13 %）、反式-3-蒎烷酮（21.15 %）；寬唇神香草揮發(fā)油鑒定出45種化學(xué)成分（見表2），其中含量較高的是D-檸檬烯（29.14 %）、里哪醇（18.04 %）、3-甲基-4-亞甲基雙環(huán)[3.2.1]辛-2-烯（20.54 %）。

圖1 硬尖神香草揮發(fā)油總離子流色譜圖

圖2 寬唇神香草揮發(fā)油總離子流色譜圖

表1 硬尖神香草揮發(fā)油各化學(xué)成分含量

表2 寬唇神香草揮發(fā)油各化學(xué)成分含量

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 精密度 按2.2項下方法處理硬尖神香草與寬唇神香草樣品，并按2.1項下條件進(jìn)行分析，1 d內(nèi)重復(fù)測定6次。分別選取其中的12個含量相對較高的化合物的峰面積計算日內(nèi)精密度。經(jīng)計算，所有分析物的日內(nèi)精密度RSD在 0.43 %～3.2 % 之間，符合測定要求。

2.4.2 重復(fù)性 按2.2項下方法分別平行處理6份硬尖神香草與寬唇神香草樣品，并按2.1項下條件進(jìn)樣分析，測定其中12個含量相對較高的化合物的峰面積，計算RSD在0.30 %～3.9 %之間，說明該方法重復(fù)性良好。

2.4.3 穩(wěn)定性 按2.2項下方法處理硬尖神香草與寬唇神香草樣品，并按2.1項下條件分別于0，6，12，18，24 h進(jìn)樣，測定并記錄12個含量相對較高的化合物的峰面積，計算RSD在1.65 %～3.47 %之間，說明硬尖神香草與寬唇神香草的揮發(fā)油成分在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

3 討論

GC-MS聯(lián)用技術(shù)在中藥揮發(fā)油成分的研究中應(yīng)用廣泛，《中華人民共和國藥典》（2020年版）收載多種藥材揮發(fā)油GC-MS分析方法，經(jīng)文獻(xiàn)檢索，尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)寬唇神香草揮發(fā)油成分的報道。本實驗用GC-MS法對硬尖神香草、寬唇神香草揮發(fā)油成分進(jìn)行研究，對神香草化學(xué)成分的系統(tǒng)研究具有一定意義。

對比硬尖神香草與寬唇神香草揮發(fā)油成分GC-MS分析結(jié)果，發(fā)現(xiàn)其主要化學(xué)成分差別較大，硬尖神香草揮發(fā)油主要成分是β-蒎烯、松香芹酮、反式-3-蒎烷酮；寬唇神香草揮發(fā)油主要成分是D-檸檬烯、里哪醇、3-甲基-4-亞甲基雙環(huán)[3. 2. 1]辛-2-烯。

硬尖神香草揮發(fā)油和寬唇神香草揮發(fā)油有17種成分是相同的：3-側(cè)柏烯、β-蒎烯、2, 3-去氫-1,8-桉葉素、β-月桂烯、D-檸檬烯、反式-β-羅勒烯、β-羅勒烯、γ-萜品烯、里哪醇、1-松香芹醇、松香芹酮、4-萜烯醇、桃金娘烯醇、D-香芹酮、喇叭茶醇、匙桉醇、喇叭茶腦，但各成分含量均不相同，其中β-蒎烯、松香芹酮在硬尖神香草含量較高，D-檸檬烯、里哪醇在寬唇神香草中含量較高，其余成分含量基本相近。

硬尖神香草揮發(fā)油成分文獻(xiàn)報道較多，帕麗達(dá)·阿不力孜[9]檢測到硬尖神香揮發(fā)油的主要成分是D-大葉香根烯、B-大葉香根烯、反式-石竹烯、斯巴醇；符繼紅等[10]檢測到硬尖神香草揮發(fā)油的主要成分是γ-欖香烯、α-蒎烯；劉力等[11]檢測歐神香草揮發(fā)油化學(xué)成分主要為β-蒎烯、異松茨酮、松茨酮；對比文獻(xiàn)和本研究中硬尖神香草揮發(fā)油化學(xué)成分，相同成分較少，出現(xiàn)差異的原因可能是神香草藥材的采集地方不同、生長環(huán)境不同等，還需做進(jìn)一步的研究。

神香草水提取物和神香草揮發(fā)油除了對金黃色葡萄球菌有一定的抑制作用外，還可抑制大腸桿菌和白色念珠菌的增殖，神香草揮發(fā)油比水提物的抗菌效果更為顯著[12]。此外，神香草揮發(fā)油還可抑制化膿鏈球菌和埃希菌活性[13]。神香草揮發(fā)油具有顯著的抗炎、止咳、祛痰和鎮(zhèn)痛作用[14-15]，可舒張離體血管平滑肌，且作用為非內(nèi)皮依賴性[16]。神香草揮發(fā)油中的活性成分包括里哪醇、α-蒎烯和γ-欖香烯等。

綜上，硬尖神香草、寬唇神香草揮發(fā)油成分差別較大，寬唇神香草揮發(fā)油含量高，化學(xué)成分種類豐富，含抗菌、抗炎、抗氧化、解痙成分，但具體藥用價值如何，還需進(jìn)一步深入研究。