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洋紫荊粉色花的化學(xué)成分及其酪氨酸酶抑制活性研究

2022-09-13 09:27:54王亞鳳謝桃結(jié)朱鴻杰黃永林
關(guān)鍵詞:層析柱紫荊酪氨酸

梁 蒙,王亞鳳,謝桃結(jié),朱鴻杰,黃永林*

(1.桂林醫(yī)學(xué)院,廣西 桂林 541004;2.廣西壯族自治區(qū)中國科學(xué)院廣西植物研究所;廣西植物功能物質(zhì)研究與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣西 桂林 541006;3.柳州市園林科學(xué)研究所,廣西 柳州 545005)

宮粉羊蹄甲,俗名洋紫荊,屬于豆科羊蹄甲屬落葉喬木[1-2]。洋紫荊一般生長在多山或多坡地區(qū),在落葉林和混交林中也有分布。洋紫荊樹冠雅致,花大而艷麗,且花期較長,通常在1月至4月開放[3-4],是一種優(yōu)良觀花園林植物,現(xiàn)作為柳州市市花在柳州市區(qū)綠地、公園、道路兩旁大量栽種。洋紫荊的根、莖皮、葉和花有著悠久的民間藥用歷史,莖皮可以用于治療消化不良和急性腸胃炎,花具有清熱解毒、止咳平喘、消炎等功效[5]。化學(xué)成分研究表明,洋紫荊中含有黃酮類、三萜類、甾體類、生物堿、菲醌類、酚酸類等成分[6]?,F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)洋紫荊提取物具有抑制B16F10黑色素瘤小鼠腫瘤增長及抗氧化作用,洋紫荊提取物中的生物堿類成分具有抑制K562細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用[7-9]。目前有關(guān)洋紫荊花化學(xué)成分的研究較少[10],同時(shí),洋紫荊花又分為白色、粉色、紅色、紫色等4種花色,且鮮明易鑒,不同花色主成分是什么、相互間的成分差別是否顯著等值得研究。Toyopearl Butyl-650C層析柱,是一種甲基丙烯酸聚合物,具有很高的化學(xué)穩(wěn)定性,可用于離子交換、疏水作用或親和分離等替代色譜模式,650C型粒徑為100 μm,適用于親水性或者水溶性較大的酚酸類分離;Chromatorex C18層析柱為硅膠柱,吸附量小,適合分離螯合化合物和酸、堿性化合物,是正、反相分析及制備HPLC和MPLC的理想填料;MCI gel CHP 20P基體是聚苯乙烯和二乙烯基共聚物或聚甲基丙烯酸酯,可用于反相色譜分離,CHP樹脂高分介質(zhì)的化學(xué)穩(wěn)定性好,可以滿足提高分離效率和精細(xì)分離的需要。因此,本研究采用多種類型層析柱對洋紫荊粉色花的甲醇提取物中水溶性部分進(jìn)行了成分分離,共分離得到14個(gè)化合物,并進(jìn)一步運(yùn)用酪氨酸酶催化左旋多巴氧化速率法對14個(gè)化合物的酪氨酸酶抑制活性進(jìn)行了篩選,用以評價(jià)其抑制酪氨酸酶活性的能力,以期為洋紫荊花的進(jìn)一步開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

洋紫荊粉色花,采自廣西柳州市,經(jīng)柳州市園林科學(xué)研究所劉思鑒定為洋紫荊(BauhiniavariegataL.)的粉色花,憑證樣品(2020.03.18)存放于廣西植物功能物質(zhì)研究與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。曲酸、左旋多巴(L-DOPA),上海源葉生物科技有限公司;酪氨酸酶,上海麥克林生化科技有限公司;磷酸鹽緩沖液(PBS),北京索萊寶科技有限公司;乙醇、甲醇等,均為市售分析純。

Bruker Avance 500 MHz超導(dǎo)核磁共振波譜儀,德國Bruker公司;LC52半制備液相色譜儀,北京賽譜銳思公司;WFH-203紫外分析儀,上海精科實(shí)業(yè)有限公司;F254硅膠薄層板(0.2 mm)、GF254薄層色譜硅膠,德國Merck公司;Toyopearl Butyl-650C層析柱(100 μm)、Toyopearl HW-40F層析柱(30~60 μm),日本TOSOH公司;Sephadex LH-20層析柱(25~100 μm),瑞士GE Healthcare Bio-Science公司;Chromatorex C18層析柱,日本Fuji Silysia Chemical公司;MCI gel CHP 20P層析柱(75~150 μm)、Diaion HP20SS層析柱(75~150 μm),日本Mistubishi Chemical公司。

1.2 提取與分離

取新鮮洋紫荊粉色花33.1 kg用純甲醇室溫浸提3次,每次50 L,每次7 d,合并提取液并過濾,減壓濃縮后得浸膏1 344.89 g,加水溶解后用石油醚萃取3次,水溶液部分經(jīng)Diaion HP20層析柱(10 cm×65 cm)分離,甲醇-水(0→100%,每10%為1梯度)為洗脫劑梯度洗脫,得到Fr.1~Fr.7共7個(gè)組分。Fr.2(156.01 g)經(jīng)Sephadex LH-20層析柱分離,甲醇-水(0→100%,每10%為1梯度)為洗脫劑梯度洗脫,得到7個(gè)組分:Fr.2.1~Fr.2.7。Fr.2.2(9.30 g)經(jīng)Chromatorex C18、Diaion HP20SS、Sephadex LH-20等柱色譜反復(fù)層析分離純化得到化合物10(10 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比8∶2)。Fr.2.5(0.21 g)經(jīng)Toyopearl Butyl-650C、Toyopearl HW-40F、Chromatorex C18等柱色譜反復(fù)層析分離純化得到化合物1(16 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比8∶2);由于分離得到化合物溫度和純度沒有達(dá)到結(jié)晶的條件,因此只是粉末狀。Fr.2.6(0.10 g)經(jīng)半制備HPLC(C18,10 mm×250 mm,5 μm)色譜分離得到化合物2(10 mg,洗脫液為乙腈/水,體積比2∶8)。Fr.2.7(0.30 g)經(jīng)Diaion HP20SS、Sephadex LH-20等柱色譜反復(fù)層析分離純化得到化合物9(8 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比3∶7)、7(12 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比5∶5)、5(15 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比8∶2)、6(15 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比8∶2)。Fr.3(17.71 g)經(jīng)Sephadex LH-20層析柱層析,甲醇-水(0→100%,每10%為1梯度)為洗脫劑梯度洗脫,得到8個(gè)組分:Fr.3.1~Fr.3.8。Fr.3.2(0.22 g)在甲醇、水溶液中析出晶體,過濾得到化合物11(22 mg)。Fr.3.3(0.15 g)經(jīng)半制備HPLC(C18,10 mm×250 mm,5 μm)色譜分離得到化合物12(8 mg,洗脫液為乙腈/水,體積比3∶7)。Fr.3.4(0.15 g)經(jīng)Chromatorex C18、Diaion HP20SS、Sephadex LH-20等柱色譜反復(fù)層析分離純化得到化合物3(12 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比8∶2)。Fr.3.6(0.18 g)經(jīng)Sephadex LH-20、Toyoperal Butyl-650C、Diaion HP20SS等柱色譜反復(fù)層析分離純化得到化合物4(18 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比8∶2)、8(17 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比6∶4)、13(10 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比8∶2)。Fr.4(63.71 g)經(jīng)MCI層析柱,甲醇-水為洗脫劑梯度洗脫,得到5個(gè)組分:Fr.4.1~Fr.4.5。Fr.4.1(42.50 g)經(jīng)Diaion HP20SS、Sephadex LH-20等柱色譜反復(fù)層析分離純化得到化合物14(20 mg,洗脫液為甲醇/水,體積比8∶2)。

1.3 酪氨酸酶抑制活性測試

參考酪氨酸酶催化L-DOPA氧化速率的方法測試14個(gè)化合物的酪氨酸酶抑制活性。以0.2 mol/L PBS為溶劑,配置100 U/mL的酪氨酸酶溶液,以曲酸為陽性對照。將部分樣品配制成不同質(zhì)量濃度的溶液,以96孔板為載體,實(shí)驗(yàn)分為4個(gè)組:樣品組、樣品背景對照組、空白組和空白對照組。

向96孔板中依次加入樣品溶液20 μL和酪氨酸酶溶液10 μL,每個(gè)樣品孔均設(shè)置3個(gè)復(fù)孔作平行對照?;旌暇鶆蚝笾糜?7 ℃水浴中孵育10 min,接著加入40 μL的L-DOPA溶液,繼續(xù)于37 ℃水浴中孵育5 min 后,于475 nm 波長下測定吸光度值,得到樣品組吸光度值(A1);以10 μL 的PBS替代10 μL的酪氨酸酶溶液,重復(fù)以上步驟,測得樣品背景對照組吸光度值(A2);以20 μL的PBS替代20 μL的樣品溶液,測得空白組吸光度值(A3);以30 μL的PBS替代20 μL的樣品溶液和10 μL 的酪氨酸酶溶液,測得空白對照組吸光度值(A4)。所有試驗(yàn)均重復(fù)3次。

按照下式計(jì)算酪氨酸酶抑制率(η),并用SPSS軟件計(jì)算半數(shù)抑制質(zhì)量濃度(IC50)值。

η=[1-(A1-A2)/(A3-A4)]×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 化合物結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1:白色粉末,C6H6O2。ESI-MS(m/z):110.039[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.88(2H,d,J=8.5 Hz,H-4,5),6.80(2H,d,J=8.5 Hz,H-3,6);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:163.2(2C,C-1,2),132.9(2C,C-4,5),115.1(2C,C-3,6)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]對照基本一致,故鑒定化合物1為鄰苯二酚。

化合物2:白色針晶,C7H6O4。ESI-MS(m/z):154.029[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.44(1H,brs,H-2),7.41(1H,d,J=8.0 Hz,H-6),6.79(1H,d,J=8.0 Hz,H-5);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:170.3(—COO),151.5(C-4),146.0(C-3),123.9(C-6),123.2(C-1),117.7(C-5),115.8(C-2)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]對照基本一致,故鑒定化合物2為原兒茶酸。

化合物3:白色針晶,C7H6O3。ESI-MS(m/z):138.032[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.86(2H,d,J=8.8 Hz,H-2,6),6.80(2H,d,J=8.8 Hz,H-3,5);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:170.3(—COO),163.3(C-4),132.9(2C,C-2,6),123.0(C-1),116.0(2C,C-3,5)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]對照基本一致,故鑒定化合物3為對羥基苯甲酸。

化合物4:無色針晶,C9H10O4。ESI-MS(m/z):182.060[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:6.69(1H,dd,J=3.5,6.0 Hz,H-3),6.60~6.62(2H,m,H-5,6),3.67(3H,s,—OCH3),3.61(2H,s,H-7);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:174.7(C-8),146.2(C-4),145.0(C-1),122.7(C-2),120.3(C-6),118.5(C-3),115.3(C-5),52.3(—OCH3),36.3(C-7)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]對照基本一致,故鑒定化合物4為2,5-二羥基苯乙酸甲酯。

化合物5:棕色粉末,C9H8O3。ESI-MS(m/z):164.050[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.56(1H,d,J=15.9 Hz,H-7),7.43(2H,d,J=8.5 Hz,H-2,6),6.80(2H,d,J=8.5 Hz,H-3,5),6.27(1H,d,J=15.9 Hz,H-8);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:171.6(C-9),160.9(C-4),146.1(C-7),130.9(2C,C-2,6),127.4(C-1),115.8(2C,C-3,5),115.1(C-8)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]對照基本一致,故鑒定化合物5為反-對香豆酸。

化合物6:棕色粉末,C9H8O3。ESI-MS(m/z):164.050[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.57(2H,d,J=8.6 Hz,H-2,6),6.72(2H,d,J=8.6 Hz,H-3,5),6.66(1H,d,J=12.8 Hz,H-7),5.78(1H,d,J=12.8 Hz,H-8);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:171.6(C-9),159.3(C-4),132.9(C-1),130.2(2C,C-2,6),130.1(C-7),127.4(C-8),116.0(2C,C-3,5)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]對照基本一致,故鑒定化合物6為順-對香豆酸。

化合物7:黃色晶體,C9H8O4。ESI-MS(m/z):180.038[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.55(1H,d,J=15.8 Hz,H-7),7.04(1H,d,J=1.5 Hz,H-2),6.92(1H,dd,J=1.5,8.1 Hz,H-6),6.79(1H,d,J=8.1 Hz,H-5),6.24(1H,d,J=15.8 Hz,H-8);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:171.1(C-9),149.4(C-4),147.0(C-3),146.7(C-7),127.8(C-1),122.9(C-6),116.5(C-5),115.5(C-8),115.1(C-2)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]對照基本一致,故鑒定化合物7為咖啡酸。

化合物8:白色粉末,C11H12O4。ESI-MS(m/z):208.071[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.54(1H,d,J=15.9 Hz,H-7),7.05(1H,d,J=1.7 Hz,H-2),6.95(1H,dd,J=1.7,8.2 Hz,H-6),6.77(1H,d,J=8.2 Hz,H-5),6.25(1H,d,J=15.9 Hz,H-8),4.60(2H,d,J=7.5 Hz,H-10),1.25(3H,t,J=7.5 Hz,H-11);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:168.7(C-9),149.6(C-4),147.1(C-3),146.8(C-7),127.8(C-1),123.0(C-6),116.8(C-5),115.3(C-8),115.2(C-2),72.0(C-10),38.2(C-11)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]對照基本一致,故鑒定化合物8為咖啡酸乙酯。

化合物9:淡黃色粉末,C10H10O4。ESI-MS(m/z):194.058[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.61(1H,d,J=15.9 Hz,H-7),7.18(1H,d,J=1.9 Hz,H-2),7.07(1H,dd,J=1.9,8.2 Hz,H-6),6.82(1H,d,J=8.2 Hz,H-5),6.33(1H,d,J=15.9 Hz,H-8),3.89(3H,s,OCH3);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:171.2(—COO),150.4(C-3),149.4(C-4),146.8(C-7),127.9(C-1),123.9(C-6),116.5(C-5),116.2(C-8),111.7(C-2),56.4(—OCH3)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]對照基本一致,故鑒定化合物9為阿魏酸。

化合物10:白色固體,C13H18O8。ESI-MS(m/z):302.101[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.60~7.63(2H,m,H-5,6),7.17(1H,d,J=8.5 Hz,H-3),5.77(1H,d,J=6.2 Hz,H-1′),4.53(1H,d,J=12.5 Hz,H-6′a),3.86~3.90(4H,m,H-2′,4′,5′,6′b),3.68~3.71(1H,m,H-3′),3.41(3H,s,—OCH3);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:151.1(C-1),150.1(C-2),123.3(C-6),123.1(C-3),116.4(C-5),114.6(C-4),102.2(C-1′),78.9(C-5′),78.3(C-3′),74.8(C-2′),71.3(C-4′),62.5(C-6′),56.7(—OCH3)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]對照基本一致,故鑒定化合物10為愈創(chuàng)木酚-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物11:白色粉末,C13H16O8。ESI-MS(m/z):300.080[M]+。1H NMR(500 MHz,DMSO)δ:7.86(2H,d,J=8.7 Hz,H-2,6),6.86(2H,d,J=8.7 Hz,H-3,5),5.52(1H,d,J=7.4 Hz,H-1′),3.10~3.81(6H,m,H-2′,3′,4′,5′,6′a,6′b);13C NMR(125 MHz,DMSO)δ:164.6(—COO),162.4(C-4),132.1(2C,C-2,6),119.9(C-1),115.5(2C,C-3,5),94.6(C-1′),77.9(C-5′),76.6(C-3′),72.6(C-2′),69.6(C-4′),60.7(C-6′)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]對照基本一致,故鑒定化合物11為對羥基苯甲酸葡萄糖酯。

化合物12:無色油狀物,C14H16O6。ESI-MS(m/z):280.091[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.57(1H,d,J=16.0 Hz,H-8),7.06(1H,d,J=2.0 Hz,H-2′),6.95(1H,dd,J=2.0,8.2 Hz,H-6′),6.78(1H,d,J=8.2 Hz,H-5′),6.29(1H,d,J=16.0 Hz,H-7),5.36~5.40(1H,m,H-1),4.15(1H,m,H-2),3.69(1H,m,H-3),2.06~2.16(4H,m,H-4a,H-4b,H-5a,H-5b);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:169.1(C-6),149.5(C-4′),146.9(C-3′),146.8(C-8),127.8(C-1′),122.9(C-6′),116.5(C-5′),115.5(C-7),115.1(C-2′),74.8(C-2),72.7(C-1),72.5(C-3),40.2(C-4),38.9(C-5)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[21]對照基本一致,故鑒定化合物12為2,3-二羥基環(huán)戊基-3-(3′,4′-二羥基苯基)丙烯酸酯。

化合物13:白色粉末,C16H18O9。ESI-MS(m/z):354.101[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.54(1H,d,J=15.8 Hz,H-9),7.05(1H,d,J=1.7 Hz,H-2′),6.94(1H,dd,J=1.7,8.2 Hz,H-6′),6.77(1H,d,J=8.2 Hz,H-5′),6.25(1H,d,J=15.8 Hz,H-8),5.33(1H,m,H-3),4.18(1H,m,H-5),3.72(1H,dd,J=2.7,8.5 Hz,H-4),2.22(1H,m,H-6a),2.16(2H,m,H-2),2.06(1H,m,H-6b);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:175.9(—COO),167.4(C-7),148.2(C-4′),145.8(C-3′),145.4(C-9),126.5(C-1′),121.6(C-6′),115.1(C-5′),113.9(C-8),113.9(C-2′),74.9(C-1),72.2(C-4),70.6(C-3),70.02(C-5),37.5(C-2),36.9(C-6)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[22]對照基本一致,故鑒定化合物13為綠原酸。

化合物14:淺黃色粉末,C21H20O11。ESI-MS(m/z):448.377[M]+。1H NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.36(1H,brs,H-2′),6.89(1H,d,J=8.0 Hz,H-5′),6.55(1H,s,H-3),6.49(1H,s,H-8),4.91(1H,s,H-1″),3.47~4.60(6H,m,H-2″,H-3″,H-4″,H-5″,H-6″a,H-6″b);13C NMR(125 MHz,CD3OD)δ:184.0(C-4),166.3(C-2),164.9(C-7),162.0(C-5),158.7(C-9),151.1(C-4′),147.1(C-3′),123.5(C-1′),120.3(C-6′),116.8(C-5′),114.1(C-2′),109.2(C-6),105.2(C-10),103.9(C-3),95.2(C-8),82.6(C-5″),80.1(C-3″),75.3(C-1″),72.6(C-2″),71.7(C-4″),62.8(C-6″)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[23]對照基本一致,故鑒定化合物14為異葒草苷。

鑒定的14個(gè)化合物結(jié)構(gòu)式見圖1,其中化合物5、6、9、10、11、12、14為首次從該植物中分離得到。

圖1 化合物1~14的結(jié)構(gòu)式

2.2 化合物對酪氨酸酶抑制活性的篩選結(jié)果

采用酪氨酸酶催化左旋多巴(L-DOPA)氧化速率的方法,對從洋紫荊粉色花的水溶性部分中分離得到的14個(gè)化合物進(jìn)行體外酪氨酸抑制活性的篩選,當(dāng)質(zhì)量濃度為4 g/L時(shí),化合物1~14的酪氨酸酶抑制率分別為11.9%、39.2%、16.5%、6.8%、2.3%、4.2%、29.6%、14.3%、3.0%、7.8%、1.2%、19.8%、10.5%和9.5%。其中,陽性對照曲酸的IC50值為(0.696±0.298)×10-4g/L,相比而言,化合物2的酪氨酸酶抑制活性最好,其IC50值為(4.804±0.939)g/L,其次是化合物7,其IC50值為(7.339±0.549)g/L,其余化合物的IC50值均大于8 g/L,沒有明顯的酪氨酸酶抑制活性。不同質(zhì)量濃度條件下,化合物2和7對酪氨酸酶抑制率的影響如圖2所示。由圖2可知,化合物2和7對L-DOPA的清除率與質(zhì)量濃度成正的量效關(guān)系,表明其酪氨酸酶抑制活性隨著化合物質(zhì)量濃度的提高而增強(qiáng)。

圖2 不同質(zhì)量濃度時(shí)化合物2和7對酪氨酸酶的抑制作用

通過查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),分離得到的化合物2和7有不同程度的抗炎、抗氧化、抗病毒等生物活性。研究發(fā)現(xiàn)原兒茶酸(2)對金黃色葡萄球菌性肺炎和過敏性哮喘有一定的治療作用,對MCF-7細(xì)胞株有顯著的細(xì)胞毒性,此外還有較強(qiáng)的抗氧化及防治肝纖維化等作用[24-25];咖啡酸(7)可通過抑制玉米屬(ZEA)誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,恢復(fù)顆粒細(xì)胞活性,能抑制晚期糖化終末產(chǎn)物所誘導(dǎo)的炎癥、凝血及抗凝血、抗病毒、抗氧化等作用[26-27]。因此,推測化合物2和7表現(xiàn)出一定的酪氨酸酶抑制活性與其結(jié)構(gòu)有一定的相關(guān)性。本研究為洋紫荊花抗炎、抗癌、抗氧化、抗菌等藥理活性提供了物質(zhì)基礎(chǔ),但是否為主要活性成分還有待于深入研究加以證明。

3 結(jié) 論

從洋紫荊粉色花甲醇提取物水溶液部位分離鑒定了14個(gè)化合物,通過結(jié)構(gòu)鑒定并與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)對比,分別為鄰苯二酚(1)、原兒茶酸(2)、對羥基苯甲酸(3)、2,5-二羥基苯乙酸甲酯(4)、反-對香豆酸(5)、順-對香豆酸(6)、咖啡酸(7)、咖啡酸乙酯(8)、阿魏酸(9)、愈創(chuàng)木酚-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、對羥基苯甲酸葡萄糖酯(11)、2,3-二羥基環(huán)戊基-3-(3′,4′-二羥基苯基)丙烯酸酯(12)、綠原酸(13)、異葒草苷(14)。采用酪氨酸酶催化左旋多巴氧化速率的方法,測試了14個(gè)化合物的酪氨酸酶抑制活性。結(jié)果表明:化合物2和7的抑制活性相對較好,IC50值分別為(4.804±0.939)g/L和(7.339±0.549)g/L,并且表現(xiàn)出正的量效關(guān)系。本研究豐富了洋紫荊粉色花的化學(xué)成分多樣性,并為洋紫荊花的開發(fā)與利用提供了一定的理論依據(jù)。

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