閆 圓 李小全

河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南省開(kāi)封市 475001

原發(fā)性肝癌是臨床常見(jiàn)的惡性腫瘤，發(fā)病率和死亡率均居高不下，嚴(yán)重影響患者生命健康[1-2]。血清甲胎蛋白(Alpha fetoprotein，AFP)是臨床常用于診斷原發(fā)性肝癌的標(biāo)志物，但有15%～30%的早期原發(fā)性肝癌患者因癌病灶體積較小、癌組織液化壞死程度較低，使AFP表達(dá)呈低水平狀態(tài)(AFP<200ng/ml)，使此類(lèi)人群應(yīng)用AFP、AFP-L3等輔助診斷時(shí)靈敏度、特異度下降[3-5]。為此，尋找AFP低水平原發(fā)性肝癌的早期診斷指標(biāo)對(duì)該疾病患者的早期干預(yù)具有重要意義。α-L-巖藻糖苷酶(α-L-Fucosidase，AFU)是一種水解酶，是原發(fā)性肝癌診斷的新腫瘤標(biāo)志物[6]。高爾基體蛋白73(Golgi protein 73，GP73)是一種跨膜蛋白，在肝臟損傷、炎性反應(yīng)、癌病灶等表達(dá)升高[7]。GP73、AFP、AFU等均常用于原發(fā)性肝癌診斷之中，但原發(fā)性肝癌患者的AFP表達(dá)水平是否影響上述指標(biāo)的診斷效能相關(guān)研究報(bào)道罕見(jiàn)。本研究以60例AFP低水平原發(fā)性肝癌患者作為研究對(duì)象，探討GP73、AFP、AFU單一診斷和聯(lián)合診斷對(duì)該疾病的診斷效能，以期為臨床早期發(fā)現(xiàn)和干預(yù)此類(lèi)患者提供參考。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取我院2018年2月—2020年1月收治的AFP低水平的原發(fā)性肝癌患者、肝臟良性疾病患者和健康體檢者,各60例，分別作為AFP低水平肝癌組(n=60)、肝臟良性疾病組(n=60)和對(duì)照組(n=60)。AFP低水平肝癌組男35例，女25例；年齡47～67歲，平均年齡(55.75±5.33)歲。肝臟良性疾病組男33例，女27例；年齡51～70歲，平均年齡(55.93±5.10)歲；疾病類(lèi)型：肝硬化13例、慢性乙型肝炎43例、慢性丙型肝炎4例。對(duì)照組男37例，女23例；年齡47～73歲，平均年齡(55.37±5.82)歲。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者及家屬均知情同意。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：原發(fā)性肝癌患者符合《原發(fā)性肝癌的診療規(guī)范(2017)》[8]診斷要求，且血清10ng/ml

1.3 方法 從我院自制的《原發(fā)性肝癌診斷效能分析相關(guān)數(shù)據(jù)記錄表》中收集三組患者的性別、年齡、肝臟良性疾病組疾病類(lèi)型、GP73、AFP、AFU等指標(biāo)情況。所有患者均晨起空腹采血5ml，3 000r/min離心10min得血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定三組患者血清GP73水平(參考范圍：GP73<150ng/ml)；采用微粒子酶聯(lián)免疫法測(cè)定三組患者血清AFP水平(參考范圍：AFP<20ng/ml)；采用化學(xué)閉塞速率法測(cè)定三組患者血清AFU水平(參考范圍：11.3U/L

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0軟件處理數(shù)據(jù)。采用F檢驗(yàn)分析三組正態(tài)性、方差齊性的計(jì)量資料差異；采用LSD-t檢驗(yàn)分析組間差異；繪制GP73、AFP、AFU以及聯(lián)合診斷的ROC曲線，分析指標(biāo)的診斷效能；采用Delong檢驗(yàn)分析指標(biāo)診斷效能的差異，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組GP73、AFP、AFU水平變化情況 AFP低水平肝癌組GP73、AFP水平均高于肝臟良性疾病組和對(duì)照組，組間比較差異顯著(P<0.05)；AFP低水平肝癌組AFU水平高于對(duì)照組，組間比較差異顯著(P<0.05)；AFP低水平肝癌組與肝臟良性疾病組AFU水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 三組GP73、AFP、AFU水平變化情況

2.2 GP73、AFP、AFU診斷AFP低水平原發(fā)性肝癌的診斷效能 聯(lián)合診斷的準(zhǔn)確度為87.78%，靈敏度為82.76%，特異度為90.16%，曲線下面積為0.892(0.791～0.953)。經(jīng)Delong檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合診斷的診斷效能高于GP73、AFP、AFU單獨(dú)診斷效能，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-2.810、-2.577、-2.371，P<0.05)，見(jiàn)表2、圖1。

表2 GP73、AFP、AFU診斷AFP低水平原發(fā)性肝癌的診斷效能

圖1 GP73、AFP、AFU診斷AFP低水平原發(fā)性肝癌的ROC曲線圖

3 討論

早期原發(fā)性肝癌因疾病病灶體積、液化及患者自身因素等影響，使該疾病部分患者血清AFP表達(dá)水平低于200ng/ml，導(dǎo)致AFP、AFU等原發(fā)性肝癌特異性指標(biāo)診斷效能下降。本研究中，AFP、AFU的靈敏度分別為67.16%、54.93%，均處于較低水平，提示臨床應(yīng)用AFP、AFU診斷AFP低水平原發(fā)性肝癌患者發(fā)生漏診、誤診的可能性較高，影響臨床醫(yī)師判斷患者具體肝臟疾病進(jìn)展情況的準(zhǔn)確性，使患者錯(cuò)失早期診斷時(shí)間[11-12]。為此，尋找更為靈敏的指標(biāo)診斷AFP低水平原發(fā)性肝癌具有重要意義。

GP73是一種跨膜蛋白，在各類(lèi)肝炎病毒感染、肝炎肝硬化、肝損傷等影響下，其擴(kuò)散進(jìn)入患者血循環(huán)，進(jìn)而導(dǎo)致表達(dá)升高，是臨床常用于診斷原發(fā)性肝癌的特異性指標(biāo)。粟勁松等[13]對(duì)40例原發(fā)性肝癌患者血清谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(Glutamyltranspeptidase，GGT)、GP73、AFP進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)GP73診斷原發(fā)性肝癌準(zhǔn)確率達(dá)75.0%，AFP準(zhǔn)確率為70.0%，兩者聯(lián)合診斷的準(zhǔn)確率高于單一診斷。郭鴻雁等[14]研究表明，GP73診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度為78.5%、特異度為88.8%、準(zhǔn)確度為81.6%，均高于AFP單一診斷效能。本研究也證實(shí)上述結(jié)論，發(fā)現(xiàn)GP73診斷效能均高于單一AFP、AFU診斷，提示GP73對(duì)AFP低水平原發(fā)性肝癌的診斷效能較好，更適用于AFP低水平原發(fā)性肝癌患者的臨床診斷，但GP73診斷的最佳臨界值以及混雜因素校正方法探討等仍需進(jìn)一步大樣本、多中心研究。

本研究發(fā)現(xiàn)，AFP低水平肝癌組GP73、AFP水平均高于肝臟良性疾病組和對(duì)照組，AFU水平高于對(duì)照組，符合原發(fā)性肝癌的生物學(xué)特征[15]，并提示GP73、AFP、AFU升高對(duì)AFP低水平原發(fā)性肝癌診斷具有提示性作用。本研究發(fā)現(xiàn)，GP73聯(lián)合AFP、AFU診斷AFP低水平原發(fā)性肝癌的診斷效能高于單一使用GP73、AFP、AFU的診斷效能，提示聯(lián)合診斷能互補(bǔ)各指標(biāo)的不足，改善單一指標(biāo)靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度等一項(xiàng)或多項(xiàng)指標(biāo)無(wú)法滿足臨床的局限，減少漏診、誤診的發(fā)生，也表明AFP低水平原發(fā)性肝癌患者需多項(xiàng)指標(biāo)同時(shí)監(jiān)測(cè)，以減少AFP、AFU等單一指標(biāo)的應(yīng)用局限，避免患者錯(cuò)失早期診斷時(shí)間，利于患者的康復(fù)。

綜上所述，GP73聯(lián)合AFP、AFU能提高AFP低水平原發(fā)性肝癌診斷效能，對(duì)臨床診斷此類(lèi)疾病具有指導(dǎo)意義，本研究下一步將擴(kuò)大樣本量，借鑒國(guó)外多因素分析在ROC曲線的應(yīng)用，減少年齡、性別、疾病進(jìn)展等對(duì)診斷效能的影響，進(jìn)一步驗(yàn)證GP73聯(lián)合AFP、AFU診斷AFP低水平原發(fā)性肝癌的可靠性。