隨著我國高等教育大眾化進(jìn)程的不斷推進(jìn)，高校畢業(yè)生的供給數(shù)量逐年大幅度增加。與此同時，近年來應(yīng)屆畢業(yè)生的崗位數(shù)量和崗位質(zhì)量卻大幅降低。如何合理地解決大學(xué)生的就業(yè)問題，直接影響到家庭和睦、社會和諧和國家穩(wěn)定。輔導(dǎo)員作為高校從事就業(yè)指導(dǎo)工作的基礎(chǔ)力量，在大學(xué)生就業(yè)工作中的地位不容忽視。但輔導(dǎo)員就業(yè)指導(dǎo)隊伍由于整體素質(zhì)不高、指導(dǎo)觀念不強(qiáng)、指導(dǎo)技術(shù)落后等，影響了畢業(yè)生就業(yè)工作的有效開展。因此，提高輔導(dǎo)員隊伍就業(yè)指導(dǎo)工作的能力，成為各高校促進(jìn)畢業(yè)生順利就業(yè)、實現(xiàn)人才培養(yǎng)目標(biāo)和社會人才資源合理配置的重要途徑。

皮膚是保護(hù)人體免受外界傷害與刺激的重要保護(hù)層，當(dāng)外界刺激給人體造成損傷時，皮膚的免疫系統(tǒng)會啟動信號，促進(jìn)炎癥因子（如白介素等）以及組胺過度表達(dá)

，引起血流加快、細(xì)胞的通透性增加，導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)緊繃和發(fā)紅、瘙癢、脫屑甚至燒灼和刺痛等癥狀

。

特應(yīng)性皮炎（atopic dermatitis，AD）是以慢性、炎癥性、瘙癢性為主要表現(xiàn)的皮膚病。過去30年，AD患病率在全球范圍內(nèi)逐步上升，歐美國家兒童患病率為7%～30%，成人1%～10%。我國2015年一項流行病學(xué)調(diào)查顯示，1～7歲兒童AD患病率為12.94%，而成人AD的患病率尚無大樣本流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)

。

臨床上對于AD治療主要應(yīng)用糖皮質(zhì)激素類外用藥物進(jìn)行，但是長期應(yīng)用激素類外用藥物會導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)萎縮、色素沉著以及毛細(xì)血管擴(kuò)張等不良現(xiàn)象

，進(jìn)一步對皮膚加以損害。

2,4-二硝基氟苯（DNFB）模擬的AD模型，可通過破壞皮膚的屏障功能達(dá)到表皮厚度增加和表皮出現(xiàn)紅斑等癥狀來模擬AD癥狀

。本研究通過DNFB模擬的AD模型，基于南沙參多糖、枸杞多糖、玫瑰多糖、云芝多糖以及黃芩多糖良好的免疫調(diào)節(jié)以及抗炎功效，將5種多糖配方組合制備成5種天然多糖組合物，研究該多糖組合物的抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等機(jī)制，探索利用天然多糖緩解AD的作用及機(jī)理。

沙參在歷代本草中都有記載，《本草從新》首次把沙參分為南沙參和北沙參。南沙參性甘，微寒；歸肺、胃經(jīng)；有養(yǎng)陰清肺，化痰，益氣等功效，用于肺熱燥咳，陰虛勞嗽，干咳痰黏，氣陰不足，燥熱口干。枸杞子始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品?！侗静菥V目》對枸杞子的功效記載頗為詳細(xì)，可補(bǔ)腎生精，養(yǎng)肝，明目，堅筋骨，去疲勞，易顏色，明目安神，令人長壽

。云芝隸屬真菌門擔(dān)子菌亞門多孔菌科栓菌屬，具有增強(qiáng)免疫、抗氧化等功效

。玫瑰在《藥性考》中有記載，可行血破積，損傷瘀痛，浸酒飲。黃芩是中醫(yī)臨床常用藥材，具有清熱解毒、活血祛瘀、消腫止痛之功效

。

南沙參多糖能夠?qū)ρ蹇贵w的水平產(chǎn)生顯著的提高作用，從而對免疫有一定的調(diào)節(jié)作用

；枸杞多糖作為枸杞子中主要化學(xué)成分及活性成分，具有多種生物活性，有很好的消炎止痛作用，且不良反應(yīng)小、藥物依賴性弱

；云芝多糖能提高機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體抗感染能力，對自身免疫性疾病、感染性疾病的治療有重要意義

；玫瑰多糖可以增強(qiáng)鼠巨噬細(xì)胞的白細(xì)胞介素6的產(chǎn)生，具有有效的免疫調(diào)節(jié)活性

。

01 材料與方法

1.1 主要材料、試劑、儀器與試驗動物

丙二醇（≥99.9%），華韻生物；九水合硫化鈉（≥99.9%），阿法埃莎；生理鹽水（0.9%），廣州美侖生物科技有限公司；無水乙醇，廣州化學(xué)試劑廠；多聚甲醛（4%），阿拉丁；橄欖油（酸度≤0.3%），黛尼；DNFB（98%），麥克林；蒸餾水，實驗室自制。

超高壓均質(zhì)機(jī) JN-02HC，廣州聚能納米有限公司；電熱恒溫水浴鍋DK-S22，上海精宏試驗設(shè)備有限公司；離心機(jī)Z326K，德國賀默公司；數(shù)控超聲波清洗器KQ3200DE，昆山市超聲儀器有限公司。

由圖5可以看出以目前工區(qū)所有采用板墻厚度可以滿足集中拉底后的充填需要，如局部拉底高度過高，例如25#進(jìn)路、26#進(jìn)路和29#進(jìn)路拉底較高的進(jìn)路，可以考慮板墻砌筑厚度由400 mm增加到800 mm，防止由于進(jìn)路高度增加進(jìn)路內(nèi)充填料漿體積增大對板墻的壓力增大，造成板墻倒塌[3]，影響工區(qū)正常生產(chǎn)。

1.2 天然多糖的制備、篩選及多糖組合物的復(fù)配

參考王淑萍等的實驗方法

，取曬干之后的南沙參，粉碎后取20g，與200 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇溶液混合，密閉靜置過夜。后過濾加入150 mL純化水，置于90℃恒溫水浴鍋恒溫加熱3 h，用300目濾袋過濾得懸濁液，靜置2h后，將懸濁液用雙層中速定性離心紙過濾，得到植物多糖水溶液，烘干得到植物多糖提取物。枸杞多糖、玫瑰多糖、云芝多糖、黃芩多糖的提取方法與南沙參多糖提取方法相同，均為水提醇沉法提取。

“行政法治存在于一個國家的法治體系中，也存在于一個國家的社會治理機(jī)制之中。通常情況下，行政法治都與一個國家的特定時代相對應(yīng)，是這個國家特定時代的產(chǎn)物。”[3]在新時代社會主義社會治理目標(biāo)模式下，公物的提供與管理不再只是行政權(quán)得以作用的對象和手段，而是國家或行政主體保障公民權(quán)益、實現(xiàn)社會和諧發(fā)展的法定職責(zé)，成為代表社會文明與法治進(jìn)步水平的重要標(biāo)志。

大鴨婆從海南島回來了，只在白家灣待了三天，就回海南島去了。兩個月后，他結(jié)束了海南島的制種工作，不光自己回來了，還帶回了兩個姑娘，一個挺著大肚子，一個又黑又瘦，說是兩姐妹，說話伊伊呀呀，吉里丫里，只有大鴨婆聽得清白。兩姐妹同一天嫁給了大鴨婆和二鴨婆。白家灣的人后來才知曉，杏子拍電報要大鴨婆回來，大鴨婆當(dāng)時是把人家的肚子搞大了，脫不得身。若不是杏子和招財兩人造孽，大鴨婆還不知道怎么在海南島了難。

移取一定量植物多糖水溶液至100 mL容量瓶，用純化水定容至刻度線，移取2 mL該溶液至試管，再各加5 %苯酚溶液1.0 mL，搖勻，然后加入5.0 mL濃H

SO

使其充分混勻，置于沸水浴中加熱15 min，取出后在冰浴中冷卻至室溫。取100 μL溶液于96孔板中，在酶標(biāo)儀中在490 nm處對樣品測定吸光值。將吸光度與多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線對比，得出該溶液多糖含量。

觀察各組小鼠每天的背部皮損變化情況，依據(jù)PASI評分標(biāo)準(zhǔn)給予小鼠皮損處紅斑（erythema）、鱗屑（scales）和浸潤增厚程度（thickness）0～4的積分：0，無；1，輕度；2，中度；3，重度；4，極重度。將三者積分相加得到總積分（0～12），對各組小鼠積分取平均值后繪制趨勢線。

1.3 AD動物模型及給藥方法

伴隨著醫(yī)改的實施，不少醫(yī)院為了適應(yīng)醫(yī)改的要求而將很多改革注意力集中在提高醫(yī)院臨床治療的水平與服務(wù)質(zhì)量上，但卻忽略了對財務(wù)會計內(nèi)部控制工作的管理，導(dǎo)致醫(yī)院財務(wù)會計內(nèi)部控制工作形式化嚴(yán)重。另外，一些醫(yī)院的領(lǐng)導(dǎo)也缺乏對財務(wù)會計控制工作重要性的認(rèn)識，在安排與調(diào)度上缺乏考慮，導(dǎo)致醫(yī)院財務(wù)會計內(nèi)部控制工作很難真正發(fā)揮控制作用，甚至出現(xiàn)財務(wù)管理混亂無章的局面，直接對醫(yī)院財務(wù)資金的使用和管理產(chǎn)生負(fù)面影響。

1.4 PASI評分

多糖組合物包括復(fù)配1～5：枸杞多糖、玫瑰多糖、云芝多糖組合形成復(fù)配1；黃芩多糖、南沙參多糖、云芝多糖組合形成復(fù)配2；南沙參多糖、枸杞多糖、玫瑰多糖組合形成復(fù)配3；黃芩多糖、云芝多糖、玫瑰多糖組合形成復(fù)配4；黃芩多糖、枸杞多糖、南沙參多糖組合形成復(fù)配5。以上5種復(fù)配的多糖質(zhì)量濃度均為0.5%（w/v）。

1.5 H&E染色

通過對小鼠背部皮膚HE染色，測量其背部皮膚厚度，結(jié)果如圖2所示。與空白組比較，模型組小鼠背部表皮厚度增厚；與模型組比較，各多糖復(fù)配組的小鼠背部表皮厚度均顯著下降，其中復(fù)配3組的小鼠背部表皮厚度接近空白組。

參考Motoyama K等的實驗方法

，取BALB/c雄性小鼠70只，4周齡，體重20～25g，購自廣東省醫(yī)學(xué)試驗動物中心【動物批號：SCXK(粵)2016-0041】。小鼠標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境飼養(yǎng)，室溫維持在（24±0.2）℃，保持晝夜12 h節(jié)律，自由飲水、攝食。適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后進(jìn)行實驗。小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、復(fù)配1、2、3、4、5組（共7組，每組10只）。實驗前一周剔除小鼠背部毛發(fā)（面積約2cm×4cm），直至皮膚完全顯露。脫毛次日，除空白組外，其余各組用0.5% DNFB涂抹小鼠背部脫毛皮膚，每只100 μL，連續(xù)涂抹7 d。造模第7天，模型穩(wěn)定，各給藥組開始給予相應(yīng)的受試物，連續(xù)給藥15 d。給藥期間，除正常組外，其余各組每周3次動物背部及右耳涂抹0.2%DNFB，其中背部100 μL，右耳 50 μL。各治療組從造模第7天開始外用涂抹給藥，1次/d，連續(xù)15 d，將受試物少量涂于患病右耳及背部皮膚，模型組及空白組不涂抹。

1.6 甲苯胺藍(lán)染色測定皮膚肥大細(xì)胞密度

用于實驗的石蠟切片的皮膚組織用曲別針反貼固定在硬質(zhì)塑料卡上，防止組織固定時卷曲。經(jīng)10%福爾馬林固定后，進(jìn)行石蠟包埋和常規(guī)切片，甲苯胺藍(lán)染色法對小鼠皮膚組織石蠟切片進(jìn)行染色，觀察各組小鼠患部皮膚組織中肥大細(xì)胞數(shù)量變化。使用ImageJ 1.48軟件在放大倍率200×下進(jìn)行肥大細(xì)胞計數(shù)。

2.Have you ever been to Beauty Salon? Tell your experience of beauty treatment?

1.7 實時熒光定量PCR檢測

將受試小鼠處死后剪去受試小鼠背部皮膚約1cm×1cm的面積（＞100mg）的全層皮膚組織。檢測皮膚組織中IL-6 mRNA、MCP-1 mRNA、cAMP mRNA表達(dá)。使用總RNA提取試劑盒，從小鼠皮膚組織中提取mRNA，測定RNA含量、純度符合要求。使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA。以GADPH作為內(nèi)參基因，根據(jù)2-ΔΔCt算法進(jìn)行各組mRNA表達(dá)量檢測。引物由廣州賽維爾生物科技有限公司合成，總RNA提取試劑盒購自賽維爾，貨號：G3013。引物序列見表1。

1.8 統(tǒng)計學(xué)處理

通過對小鼠耳部皮膚HE染色，測量其耳部皮膚厚度，結(jié)果如圖3所示，圖3A中刺激為涂抹了98% DNFB的小鼠右耳，未刺激為沒有涂抹98% DNFB的小鼠左耳。涂抹了98% DNFB的模型組小鼠與空白組比較，模型組小鼠耳部表皮厚度增厚；與模型組比較，各多糖復(fù)配組的小鼠耳部表皮厚度均顯著下降，其中復(fù)配1、復(fù)配4組的小鼠耳部表皮厚度接近空白組。

如某年一個中午，單位組織沙漠徒步，在一條大河中間，一個女同事被急流沖倒，盡管沒有被卷走，其他同事齊聲驚叫，有的甚至穿著鞋子跳入河中，奮力施救，而他卻爆發(fā)出一陣刺耳的笑聲。那種笑，在烈日之下，讓人渾身打顫。還有一個冬天，單位組織掃雪，在寒風(fēng)凜冽、雪粒橫飛的馬路上，一個騎摩托車的人，因為車速太快而摔倒，滑出十多米遠(yuǎn)。雖然有些滑稽，但這個同事爆發(fā)出來的笑，在我和其他同事的耳朵里，卻有些毛骨悚然。

02 結(jié)果

2.1 多糖提取及含量測定結(jié)果

5種植物提取的多糖如表2所示，其中枸杞多糖固重達(dá)到8.44 g，多糖含量達(dá)到43.85%；黃芩多糖固重達(dá)到7.10 g，多糖含量達(dá)到35.50%。

2.2 DNFB模型小鼠背部皮膚PASI評分

與空白組比較，模型組小試背部皮膚出現(xiàn)紅、腫等癥狀；與模型組比較，各多糖復(fù)配組紅、腫等癥狀明顯好轉(zhuǎn)；其PASI評分如圖所示。各多糖復(fù)配組的第17天PASI評分均明顯低于模型組。

2.3 DNFB模型小鼠背部皮膚厚度測量及統(tǒng)計

將耳部及背部皮膚組織用4%多聚甲醛固定，常規(guī)脫水后，石蠟包埋。將修整好的蠟塊放置在石蠟切片機(jī)上切成厚度為4 μm的切片。切片漂浮于攤片機(jī)40 ℃溫水上，將組織展平，用載玻片將組織撈起，并放進(jìn)60 ℃烘箱內(nèi)烤片。待水烤干蠟烤化后取出常溫保存?zhèn)溆?。切片于顯微鏡下觀察并隨機(jī)選取視野進(jìn)行拍照并測量其厚度。

2.4 DNFB模型小鼠耳部皮膚厚度測量及統(tǒng)計

實驗結(jié)果采用單因素方差分析，采用GraphPad軟件作圖。使用Image J軟件處理甲苯胺藍(lán)染色圖片，所有數(shù)值均用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差”。各組間差異比較用單因素方差分析（One-Way ANOVA），進(jìn)行組間兩兩多重比較。

2.5 各天然多糖組合物復(fù)配對小鼠背部炎癥皮膚組織中肥大細(xì)胞密度抑制情況

與空白組比較，模型組肥大細(xì)胞密度顯著升高；與模型組比較，各多糖復(fù)配組肥大細(xì)胞密度均顯著降低，見圖4。

2.6 CAMP、MCP-1、IL-6在mRNA中的表達(dá)量

實時熒光定量PCR結(jié)果表明，與模型組相比，給予多糖復(fù)配1的小鼠背部全層皮膚組織中CAMP mRNA的表達(dá)量顯著升高，如圖5所示。

4) 在罐區(qū)防火堤外應(yīng)設(shè)置緊急切斷閥的現(xiàn)場操作開關(guān)，其接點信號直接送至氣動執(zhí)行機(jī)構(gòu)的電磁閥或電液、電動執(zhí)行機(jī)構(gòu)的緊急停車系統(tǒng)(ESD)動作端子或相應(yīng)的SIS，用于在緊急情況下現(xiàn)場手動開關(guān)緊急切斷閥。

與空白組比較，模型組小鼠背部全層皮膚組織中MCP-1 mRNA的表達(dá)量顯著升高。與模型組相比，給予多糖復(fù)配1、3、4、5組的小鼠背部全層皮膚組織中MCP-1 mRNA的表達(dá)量明顯降低，給予多糖復(fù)配2、4組的小鼠背部全層皮膚組織中IL-6 mRNA的表達(dá)量明顯降低。

03 討論

患AD后，皮膚免疫屏障受損，導(dǎo)致免疫調(diào)節(jié)下降，體內(nèi)肥大細(xì)胞活化，炎癥反應(yīng)增強(qiáng)

。肥大細(xì)胞是炎癥的主要啟動細(xì)胞，發(fā)生炎癥反應(yīng)時，肥大細(xì)胞向外周組織過度浸潤加劇、放大炎癥反應(yīng)

。

有研究表明，AD患者外周血中肥大細(xì)胞的數(shù)量增多。AD慢性期，免疫屏障受損，白介素-6等Th1型細(xì)胞因子和趨化因子表達(dá)水平提高，Th2細(xì)胞因子蛋白表達(dá)受抑制，刺激肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞增多[25-28]。但同時，患AD后，巨噬細(xì)胞的遷移過程受阻，吞噬作用降低，導(dǎo)致無法抵御污染源，MCP-1在巨噬細(xì)胞的遷移過程中起到至關(guān)重要的作用。研究表明，cAMP參與了多種重要炎癥信號通路的調(diào)控，如MAPKs、NF-κB、JAKSTAT等通路。

亂作為的背后，往往是扭曲的政績觀在作祟。為了能迅速樹立自己的“能人形象”，充分展示自己的“治理能力”，少數(shù)干部特別熱衷上項目，搞工程。而進(jìn)一步梳理中央“打虎”榜單，我們還不難發(fā)現(xiàn)，那些“政績項目”“形象工程”的背后，也往往隱藏著權(quán)錢交易的魅影。

本研究通過DNFB誘導(dǎo)小鼠成功模擬AD模型。結(jié)果表明，通過給予多糖復(fù)配的小鼠皮膚狀況顯著好轉(zhuǎn)，明顯抑制了小鼠耳部及背部紅、腫等癥狀。

從組織學(xué)結(jié)果可以看出，南沙參多糖、枸杞多糖、玫瑰多糖、云芝多糖以及黃芩多糖組合物通過調(diào)節(jié)提升小鼠體內(nèi)Th1/Th2平衡，從而抑制了肥大細(xì)胞的活化，降低肥大細(xì)胞密度。實時熒光定量PCR檢測結(jié)果表明，多糖組合物提升了cAMP在mRNA中的表達(dá)水平，同時調(diào)節(jié)MAPKs、NF-κB通路中MCP-1的表達(dá)，增強(qiáng)了皮膚角質(zhì)層屏障功能，修復(fù)了受損細(xì)胞。同時，多糖組合物通過抑制白介素-6在mRNA的表達(dá)量，使機(jī)體Th1/Th2平衡得以調(diào)節(jié)以及巨噬細(xì)胞的活化，從而有效緩解了AD的癥狀。

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