堯 忱，劉朝猛，龔 軍，胡瑩瑩

（華潤(rùn)三九（雅安）藥業(yè)有限公司，四川 雅安 625000）

引言

金銀花為忍冬科植物忍冬（lonicera japonica thunb）的干燥花蕾或帶初開(kāi)的花[1]，具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱之功效，所含化學(xué)成分有綠原酸、異綠原酸、黃酮化合物、芳樟醇和雙花醇等，具有抑菌、抗病毒、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等作用，為最常用中藥之一[2]。綠原酸（CM omgemcacid）和異綠原酸（isochlorogenicaeid）是金銀花的抗菌有效成分，銀黃注射液、雙黃連注射液、茵梔黃口服液等多種中藥復(fù)方制劑均含有金銀花[3]。金銀花提取物的提取精制工藝常為水提醇沉法。采用水提取法的水提液往往溶解有大量的淀粉、樹(shù)膠、蛋白質(zhì)、果膠、多糖、黏液質(zhì)色素等，通過(guò)加入適量的乙醇，使這類醇不溶物析出沉淀，吸取的乙醇上清液含有鞣質(zhì)、生物堿、醇溶性氨基酸、甙類等，藉此來(lái)除去雜質(zhì)，提取藥用有效成分[4]。水提液經(jīng)醇沉后需進(jìn)行固液分離，收集液體，棄去固形物（雜質(zhì)）。因金銀花水提液醇沉后析出物較多且沉淀物含液量較高，醇沉后的固液分離如只是簡(jiǎn)單抽取上清液直接棄去沉淀物，在大生產(chǎn)中存在兩個(gè)問(wèn)題：一是藥液損失較大，造成提取物收率降低；二是含醇含液量較高的沉淀物直接棄掉，有安全、環(huán)保風(fēng)險(xiǎn)。因此在金銀花提取物的制備工藝中，在醇沉后的固液分離中如何降低醇沉固形物中的含液率，提高分離效率，是需要重點(diǎn)考慮的。中藥提取液常用分離設(shè)備有板框過(guò)濾器、管式離心機(jī)、平板式（三足式）離心機(jī)、碟片式離心機(jī)及隔膜式壓濾機(jī)等，且分離設(shè)備往往配套不同材質(zhì)的濾布及濾紙等，需根據(jù)提取液及醇沉析出物的特點(diǎn)進(jìn)行選擇使用，以過(guò)到最佳效果。本文對(duì)大生產(chǎn)中使用板框過(guò)濾器、平板式吊袋離心機(jī)、隔膜式壓濾機(jī)三種設(shè)備分離金銀花醇沉液的方法進(jìn)行研究，考察分離后的藥液量、澄清度及綠原酸含量，對(duì)三種分離方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1 試驗(yàn)儀器與材料

1.1 儀器設(shè)備

平板式吊袋離心機(jī)，PSD1250 型，蘇州業(yè)之峰離心機(jī)制造有限公司；板框過(guò)濾器，TY400 型，海寧永勝膜過(guò)濾設(shè)備制造有限公司；隔膜式壓濾機(jī)，XMYG20/800X800-u 型，景津環(huán)保股份有限公司；高效液相色譜儀，Agilent 1260。

1.2 試劑與對(duì)照品

色譜乙腈，默克，批號(hào)JA 089830；甲醇，分析醇，成都市科隆化學(xué)品有限公司；綠原酸對(duì)照品，批號(hào)：110753-201817，中國(guó)食品藥品檢定研究院。

1.3 試驗(yàn)樣品

金銀花醇沉液，批號(hào)200301-200309。

2 方法與結(jié)果

2.1 金銀花醇沉液不同分離方法（見(jiàn)下頁(yè)表1）

表1 分離金銀花醇沉液的不同方法

方法一：金銀花加水煎煮，合并濾液減壓濃縮，加入2.8 倍乙醇，攪拌1 h，靜置1 h 后，抽取上清液經(jīng)板框過(guò)濾機(jī)（濾紙）過(guò)濾，濾液減壓濃縮，測(cè)定綠原酸含量。

方法二：金銀花加水煎煮，合并濾液減壓濃縮，加入2.8 倍乙醇，攪拌1 h，在攪拌狀態(tài)下抽取藥液經(jīng)平板式吊袋離心機(jī)（尼龍濾布）過(guò)濾，濾液減壓濃縮，測(cè)定綠原酸含量。

方法三：金銀花加水煎煮，合并濾液減壓濃縮，加入2.8 倍乙醇，攪拌1 h，在攪拌狀態(tài)下抽取藥液經(jīng)隔膜式壓濾機(jī)（錦綸濾布）過(guò)濾，濾液減壓濃縮，測(cè)定綠原酸含量。

2.2 濾液澄清度檢查

取經(jīng)分離（過(guò)濾）后的藥液約100 mL，倒入容量為250 mL的三角燒瓶?jī)?nèi)，對(duì)光目視，應(yīng)澄清。

2.3 綠原酸含量測(cè)定

2.3.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-磷酸溶液（0.4%）（體積比為13∶87）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為327 nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算應(yīng)不低于1 000。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備

取綠原酸對(duì)照品，精密稱定，置棕色量瓶中，加75%甲醇制成每10 mg/mL 的溶液，即得。

2.3.3 供試品溶液的制備

精密量取金銀花醇沉濾液的濃縮液2 mL，置50 mL量瓶中，加注射用水稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，即得。

2.3.4 測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

方法一采用抽取上清液采用板框過(guò)濾器過(guò)濾金銀花醇沉液，時(shí)間最短，但藥液損失最大，主要原因?yàn)榻疸y花醇沉物較為松散，內(nèi)含藥液較多；方法二使用離心機(jī)分離金銀花醇沉液，濾液較為渾濁，達(dá)不到工藝要求。此外，藥液損失仍然較大，離心機(jī)濾袋上攔截的醇沉物（濾餅）含液量仍然較高；方法三使用隔膜式壓濾機(jī)過(guò)濾金銀花醇沉液，時(shí)間較長(zhǎng)（約一半時(shí)間為停機(jī)去除濾布上的濾餅，濾餅含液量很低），藥液損失較低，收率最高。實(shí)驗(yàn)及檢測(cè)數(shù)據(jù)見(jiàn)表2，不同方法的實(shí)驗(yàn)及檢測(cè)數(shù)據(jù)均值比較見(jiàn)表3。

表2 不同方法分離金銀花醇沉液比較

表3 不同方法分離金銀花醇沉液比較（均值）

3 結(jié)果討論

用不同分離方法分離金銀花醇沉液，從時(shí)間上看，方法一（板框過(guò)濾器）≤方法二（平板式離心機(jī)）≤方法三（隔膜式壓濾機(jī)）；從濾液澄清度上看，方法一、三澄清，方法二渾濁達(dá)不到要求；從過(guò)濾收率上看，方法一（板框過(guò)濾器）≤方法二（平板式離心機(jī)）≤方法三（隔膜式壓濾機(jī)）；從含量上看，三者無(wú)差別。方法一和方法二分離出的醇沉固形物含液量較高，如應(yīng)用于大生產(chǎn)，不僅影響產(chǎn)品收率，且處理濾餅較困難，不易達(dá)到環(huán)保要求；而方法三優(yōu)點(diǎn)是收率高，濾餅含液量極低，符合環(huán)保要求，雖然分離時(shí)間較長(zhǎng)一些（高于其他二種方法20%），但相對(duì)于它的優(yōu)點(diǎn)（收率高、濾餅符合環(huán)保要求）是完全可以接受的。此外，隔膜式壓濾機(jī)使用的濾布經(jīng)清洗處理可以反復(fù)使用，而板框過(guò)濾機(jī)使用的濾紙為一次性用品，從成本及環(huán)保上考慮使用隔膜式壓濾機(jī)都是更好的選擇。因此，綜合安全（環(huán)保）、質(zhì)量、成本三個(gè)生產(chǎn)管理的重要指標(biāo)考慮，推薦在大生產(chǎn)中使用隔膜式壓濾機(jī)分離金銀花醇沉液。

金銀花醇沉液析出物特點(diǎn)是黏性較小、呈松散狀，使用隔膜式壓濾機(jī)分離效果較好，生產(chǎn)結(jié)束后壓濾機(jī)濾布上的濾餅也易于清除；同理，醇沉析出物物理性質(zhì)相似（黏性較小、呈松散狀）的梔子、五味子等中藥醇沉液，也可使用隔膜式壓濾機(jī)進(jìn)行分離。但如茵陳、麥冬、紅花等中藥醇沉液，醇沉析出物黏稠且較為致密，使用壓濾機(jī)不僅易造成濾布過(guò)早堵塞影響過(guò)濾，且濾布上的濾餅因黏性較大清除困難，造成生產(chǎn)效率低下。

使用隔膜式壓濾機(jī)，濾布的選擇很重要，在過(guò)濾過(guò)程中起著很關(guān)鍵的作用；濾布有丙綸、滌綸及錦綸等。丙綸布具有質(zhì)輕、強(qiáng)度高、彈性好、耐酸、耐堿、耐磨損，質(zhì)地堅(jiān)牢耐用，而且無(wú)毒；滌綸濾布耐酸不耐堿,耐高溫；錦綸布耐堿不耐酸。濾布性能的好壞，直接影響過(guò)濾的效果，為了達(dá)到比較理想的過(guò)濾效果和速度，需根據(jù)物料的顆粒大小、密度、黏度、化學(xué)成分和過(guò)濾工藝條件來(lái)進(jìn)行選擇。