崔嶸 潘龍 張吉利 王爍榮貴純 理永霞 張星耀

(中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院生態(tài)保護(hù)與修復(fù)研究所，北京，100091)(中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院寒溫帶林業(yè)研究中心)(中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院生態(tài)保護(hù)與修復(fù)研究所)(中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院森林環(huán)境與保護(hù)研究所)

松材線蟲(chóng)病(Pine Wilt Disease)即松樹(shù)萎蔫病，是一種以松材線蟲(chóng)(Bursaphelenchusxylophilus)為病原[1]，墨天牛屬(Monochamusspp.)昆蟲(chóng)為主要媒介，綜合人為參與、寄主松樹(shù)和環(huán)境等因素互作的一種復(fù)雜的病蟲(chóng)害[2-5]。松材線蟲(chóng)的生活史可分為繁殖型周期和擴(kuò)散型周期，在適宜的環(huán)境下，松材線蟲(chóng)進(jìn)入繁殖型周期，種群數(shù)量不斷增加，造成松樹(shù)生長(zhǎng)衰弱或發(fā)病死亡；在不良環(huán)境條件下，松材線蟲(chóng)進(jìn)入擴(kuò)散型周期即滯育型周期。當(dāng)媒介昆蟲(chóng)羽化為成蟲(chóng)時(shí)，松材線蟲(chóng)進(jìn)入媒介昆蟲(chóng)體內(nèi)[6-7]，在媒介昆蟲(chóng)羽化后取食健康松樹(shù)時(shí)，松材線蟲(chóng)侵入健康松樹(shù)體內(nèi)，在適宜的環(huán)境條件下解除滯育轉(zhuǎn)型并發(fā)育為成蟲(chóng)，進(jìn)入繁殖周期開(kāi)始大量繁殖危害松樹(shù)，導(dǎo)致病害擴(kuò)散蔓延。在自然條件下形成松材線蟲(chóng)(病原)、松墨天牛(傳播媒介)和松樹(shù)(寄主)三者之間的侵染循環(huán)[8-9]。線蟲(chóng)在低溫不利條件下(-20～80 ℃)會(huì)進(jìn)入“假死”(隱生)狀態(tài)[10-12]，可以在低溫等極端環(huán)境中生存，并在環(huán)境恢復(fù)適宜的情況下結(jié)束隱生狀態(tài)繼續(xù)危害樹(shù)木[13-15]。被松材線蟲(chóng)感染后的松樹(shù)，針葉黃褐色或紅褐色，萎蔫下垂，樹(shù)脂分泌停止，樹(shù)干可觀察到天牛侵入孔或產(chǎn)卵痕跡，病樹(shù)整株干枯死亡，最終腐爛[16]。

由于松材線蟲(chóng)病發(fā)病致死速度快，傳播蔓延迅速，難以預(yù)先診斷，防治難度大，且感染后的松樹(shù)無(wú)法被治愈，被稱為“松樹(shù)的癌癥”[17]。在我國(guó)松材線蟲(chóng)病的分布區(qū)，自然感病的寄主包括馬尾松(Pinusmassoniana)、黑松(Pinusthunbergii)、白皮松(Pinusbungeana)、紅松(Pinuskoraiensis)等松科松屬樹(shù)種[18-19]。目前松材線蟲(chóng)病在我國(guó)已造成180.92萬(wàn)hm2的松樹(shù)的死亡[20]，對(duì)我國(guó)森林森態(tài)系統(tǒng)造成極大的威脅。據(jù)國(guó)家林業(yè)局2021年第5號(hào)和14號(hào)公告，松材線蟲(chóng)病疫情已擴(kuò)散19個(gè)省市自治區(qū)[21-22]。而遼寧省、和吉林省爆發(fā)松材線蟲(chóng)病的現(xiàn)象，標(biāo)志松材線蟲(chóng)病已向北擴(kuò)展到年均溫2～8 ℃，且冬季寒冷干旱，最低溫在-20 ℃以下季風(fēng)控制的中溫帶地區(qū)[23-25]。

目前，許多關(guān)于松材線蟲(chóng)風(fēng)險(xiǎn)分析預(yù)測(cè)的相關(guān)報(bào)道，從不同角度對(duì)松材線蟲(chóng)病的擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了分析。韓陽(yáng)陽(yáng)[26]利用Maxent生態(tài)位模型，結(jié)合地理信息系統(tǒng)ArcGIS，對(duì)松材線蟲(chóng)在中國(guó)的適生區(qū)范圍進(jìn)行了預(yù)測(cè)；于治軍等[27]以經(jīng)典的生物學(xué)、生態(tài)學(xué)理論方法為基礎(chǔ)，建立松材線蟲(chóng)適生性數(shù)學(xué)生態(tài)模型預(yù)測(cè)不同增溫模式下松材線蟲(chóng)氣候適生性概率分布；葉明福[28]運(yùn)用有害生物風(fēng)險(xiǎn)分析( PRA)原理，對(duì)松材線蟲(chóng)生物學(xué)特性、地理分布區(qū)、寄主植物、傳播媒介、氣候條件、天敵、擴(kuò)散途徑等方面進(jìn)行總結(jié)和分析的同時(shí)，利用林業(yè)有害生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指標(biāo)體系，量化賦值計(jì)算分析評(píng)估松材線蟲(chóng)病在安徽省舒城縣擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)；季英超利用氣候動(dòng)態(tài)模型CLIMEX預(yù)測(cè)松材線蟲(chóng)病在山東省的適生性，并根據(jù)有害生物危險(xiǎn)性分析方法對(duì)松材線蟲(chóng)病在山東省的風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí)作了綜合評(píng)價(jià)[29]；有的采用區(qū)域性林業(yè)有害生物風(fēng)險(xiǎn)分析指標(biāo)體系對(duì)未發(fā)生松材線蟲(chóng)病地區(qū)的松材線蟲(chóng)病的入侵風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了賦值風(fēng)險(xiǎn)分析評(píng)估[30-31]。然而對(duì)加格達(dá)奇地區(qū)松材線蟲(chóng)病入侵風(fēng)險(xiǎn)性評(píng)估的研究卻很少。

加格達(dá)奇地區(qū)是我國(guó)用材林以及防護(hù)林等重要的區(qū)域，有大量興安落葉松(Larixgmelinii(Rupr.) Kuzen)和樟子松(Pinussylvestrisvar.mongolica)人工林的分布。因此，對(duì)該地區(qū)松材線蟲(chóng)病的監(jiān)測(cè)預(yù)警以及風(fēng)險(xiǎn)性分析預(yù)測(cè)具有重要意義。本研究采用多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)的方法對(duì)松材線蟲(chóng)病在寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)的松材線蟲(chóng)病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)性進(jìn)行綜合分析，為寒溫帶林區(qū)的松材線蟲(chóng)病風(fēng)險(xiǎn)防控提供理論支撐。

1 研究區(qū)概況

加格達(dá)奇位于黑龍江省西北部，地理坐標(biāo)為東經(jīng)123°45′45″～126°4′，北緯50°5′16″～51°12′40″，年平均氣溫為-2 ℃，最低氣溫可達(dá)-45 ℃，年平均降水量為495 mm，其森林覆蓋率為60.2%。該地區(qū)針葉林樹(shù)種以興安落葉松和樟子松為主[32]，部分林區(qū)有紅松(Pinuskoraiensis)、偃松(Pinuspumila)、紅皮云杉(Piceakoraiensis)等針葉樹(shù)種分布。

2 研究方法

2.1 松材線蟲(chóng)適生區(qū)分析

根據(jù)松材線蟲(chóng)病的已知分布及其生物學(xué)數(shù)據(jù)，使用氣候動(dòng)態(tài)模型CLIMEX 3.0設(shè)定其適生區(qū)預(yù)測(cè)的初始參數(shù)值，并根據(jù)其在全國(guó)的分布范圍作為參數(shù)調(diào)整的依據(jù)，確定松材線蟲(chóng)適生區(qū)預(yù)測(cè)模型的最終參數(shù)值：發(fā)育起點(diǎn)溫度為10 ℃，最適溫度范圍15～29 ℃、發(fā)育致死溫度為33 ℃，冷和熱抑制開(kāi)始積累時(shí)的溫度閾值分別為-18、35 ℃、冷和熱抑制積累速率分別為-0.01、0.002，干和濕抑制開(kāi)始積累時(shí)的濕度閾值分別為0.05、1.5)、干和濕抑制積累速率分別為-0.005、0.001 5，以及有效積溫為150 ℃/d。使預(yù)測(cè)的適生區(qū)與當(dāng)前分布最大程度擬合得到最終參數(shù)值并獲得加格達(dá)奇區(qū)所有氣象站點(diǎn)的生態(tài)氣候指數(shù)(EI)值，導(dǎo)入ArcGIS10.2軟件，最終生成松材線蟲(chóng)寒溫帶的適生區(qū)分布圖。

2.2 媒介昆蟲(chóng)的種類統(tǒng)計(jì)

于2019年和2020年6—9月天牛羽化高峰期，在加格達(dá)奇營(yíng)林局樟子松與興安落葉松人工林樣地中懸掛松墨天牛誘捕器(杭州費(fèi)洛蒙生物科技有限公司)，收集墨天牛屬天牛，每隔7 d收集一次，對(duì)收集到的天牛成蟲(chóng)可參考《東北天牛志》、《中國(guó)經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng)志：鞘翅目：天?？?一)》、《中國(guó)經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng)志：鞘翅目：天?？?二)》、《中國(guó)經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng)志: 鞘翅目：天?？?三)》等書籍[33-36]，從體色、體長(zhǎng)、鞘翅斑紋、小盾片、前胸背板和觸角等形態(tài)特征對(duì)收集到的天牛成蟲(chóng)樣品進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定，并統(tǒng)計(jì)各個(gè)時(shí)間內(nèi)的不同種類的天牛數(shù)量。

2.3 線蟲(chóng)的分離與鑒定

選取樣地內(nèi)針葉呈黃綠或黃褐色，尚未完全枯萎，樹(shù)皮尚未脫落，材質(zhì)尚未腐朽的落葉松與樟子松的優(yōu)勢(shì)木，觀察羽化孔、排糞孔和刻槽，綜合判斷是否有疑似媒介昆蟲(chóng)的危害。在離地1.5 m處取樣，在取樣部位分別截取5 cm厚的圓盤帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行后續(xù)試實(shí)驗(yàn)。所取的樣品記錄樣品號(hào)、取樣地點(diǎn)、樹(shù)種、樹(shù)高、樹(shù)齡、胸徑和健康等級(jí)，是否存在羽化孔、排糞孔、刻槽等天牛危害特點(diǎn)，最后標(biāo)注取樣時(shí)間和取樣人等信息。

將采樣獲得的木段用枝剪剪成“火柴桿”狀大小后，用兩層紗布包好，放入漏斗中，采用貝爾曼漏斗法進(jìn)行線蟲(chóng)分離，24 h后用離心管收集線蟲(chóng)分離液，離心后用 200 μL 移液槍吸取底部線蟲(chóng)混合液滴至載玻片上進(jìn)行松材線蟲(chóng)形態(tài)鑒定[37]。

用10 μL移液槍在顯微鏡下挑取分離線蟲(chóng)液中50頭線蟲(chóng)，裝入離心管內(nèi)，利用DNA制備試劑盒AP-MN-MS-GDNA-50(美國(guó)Axygen公司生產(chǎn))，按照試劑盒要求的步驟提取線蟲(chóng)DNA，進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增和測(cè)序[38]。PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系：共25 μL，包括12.5 μL PCR Mix，正反向引物各1 μL，DNA模板1 μL，9.5 μL ddH2O(雙蒸水)。選擇ITS(內(nèi)源轉(zhuǎn)錄間隔區(qū))(上游引物F1：5’-CGT AAC AAG GTA GCT GTA-3’，下游引物V2：5’-TTT CAC TCG CCG TTA CTA AGG-3’)通用引物和28S(上游引物D2A：5’-ACA AGT ACC GTG AGG GAA AGT TG -3’，下游引物D3B：5’-TCG GAA GGA ACC AGC TAC TA-3’)松材線蟲(chóng)特異性引物。PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性2 min，94 ℃變性1 min，55 ℃退火1 min，72 ℃延伸1 min，共35個(gè)循環(huán)；最后72 ℃延伸5 min。將PCR獲得的產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，并將測(cè)序結(jié)果與NCBI(美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心)文獻(xiàn)進(jìn)行比對(duì)。

2.4 松材線蟲(chóng)傳入加格達(dá)奇地區(qū)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

松材線蟲(chóng)病在加格達(dá)奇地區(qū)的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)評(píng)估，借鑒有關(guān)文獻(xiàn)[30，39]的風(fēng)險(xiǎn)分析指標(biāo)體系及賦分標(biāo)準(zhǔn)，從當(dāng)下松材線蟲(chóng)分布范圍以及對(duì)于加格達(dá)奇潛在的危害性、傳播與定殖的可能性、當(dāng)?shù)丶闹鞯慕?jīng)濟(jì)重要性和檢疫管理的難易性等多個(gè)指標(biāo)，并結(jié)合松材線蟲(chóng)病的發(fā)生、傳播、危害、檢疫和控制等的實(shí)際情況，對(duì)加格達(dá)奇地區(qū)傳入松材線蟲(chóng)病的風(fēng)險(xiǎn)性進(jìn)行賦值評(píng)估，并根據(jù)計(jì)算結(jié)果，確定加格達(dá)奇地區(qū)傳入松材線蟲(chóng)病的風(fēng)險(xiǎn)性。

3 結(jié)果與分析

3.1 松材線蟲(chóng)適生區(qū)分析

由1圖可知，根據(jù)氣候條件及松材線蟲(chóng)生物學(xué)特性，我國(guó)多數(shù)地區(qū)為松材線蟲(chóng)的適生區(qū)，其中我國(guó)寒溫帶地區(qū)同樣也在適生區(qū)范圍(東經(jīng)119°1′46″～127°38′31″，北緯50°～53°37′12″區(qū)域)，該地區(qū)低適生區(qū)與中適生區(qū)的分界在東經(jīng)125°12′9″，北緯50°～51°16′39″。根據(jù)寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)經(jīng)緯度信息(東經(jīng)123°45′45″～126°4′，北緯50°5′16″～51°12′40″)，可判定加格達(dá)奇地區(qū)大部分位于松材線蟲(chóng)適生范圍內(nèi)的中適生區(qū)，松材線蟲(chóng)侵入寒溫帶加格達(dá)奇地具有很大的風(fēng)險(xiǎn)，也就是說(shuō)松材線蟲(chóng)具有在該地區(qū)適生、傳播并危害可能性，因此，后續(xù)的監(jiān)測(cè)預(yù)警工作十分有必要進(jìn)行。

圖1 松材線蟲(chóng)在我國(guó)的適生區(qū)

3.2 加格達(dá)奇地區(qū)枯死松樹(shù)線蟲(chóng)鑒定

3.2.1 形態(tài)鑒定結(jié)果

由圖1可知，經(jīng)過(guò)貝爾曼漏斗法后從寒溫帶地區(qū)部分病死的樟子松枯立木分離到的線蟲(chóng)，雄蟲(chóng)基頂鈍圓交合刺大，彎成弓狀，遠(yuǎn)端膨大無(wú)引帶(見(jiàn)圖2A、圖2B)。雌蟲(chóng)尾部呈圓椎形，尾端指狀，有明顯的尾尖突(如圖2C，圖2D)。顯微鏡下觀察到的形態(tài)特征與松材線蟲(chóng)(B.xylophilus)和擬松材線蟲(chóng)(Bursaphelenchusmucronatus)的部分形態(tài)特征相符合，而具體分離到的線蟲(chóng)為哪種，需要利用分子鑒定進(jìn)一步確認(rèn)。

A. 雄蟲(chóng)形態(tài)特征；B. 雄蟲(chóng)尾部特征；C. 雌蟲(chóng)形態(tài)特征；D. 雌蟲(chóng)尾部特征。

3.2.2 分子鑒定結(jié)果

選擇ITS序列引物，對(duì)加格達(dá)奇地區(qū)枯死的樟子松中分離到線蟲(chóng)的DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增和測(cè)序。結(jié)果發(fā)現(xiàn)ITS通用引物和28 S松材線蟲(chóng)特異性引物均無(wú)松材線蟲(chóng)的序列產(chǎn)生；而ITS通用引物產(chǎn)生的長(zhǎng)度為876 bp的序列片段，與NCBI上已提交的擬松材線蟲(chóng)的ITS序列HM590212.1的相似度為98%，同源覆蓋率為95.07%，E值為0。

3.3 加格達(dá)奇地區(qū)媒介昆蟲(chóng)調(diào)查

3.3.1 媒介昆蟲(chóng)種類確定

依據(jù)《東北天牛志》等書籍相關(guān)內(nèi)容從體色、體長(zhǎng)、鞘翅斑紋、小盾片、前胸背板和觸角等形態(tài)特征對(duì)收集到的天牛成蟲(chóng)樣品進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定：

1.鞘翅基部1/3處有清晰的橫壓痕，小盾片有密集整齊的淡黃絨毛

2

鞘翅基部1/3處無(wú)清晰的橫壓痕,小盾片有1條從基部到端部或僅基半部的光滑縱中線

3

2.鞘翅端部1/4有密集明顯的黃白色絨毛，刻點(diǎn)在翅端很細(xì)密

云杉大墨天牛

鞘翅端部1/4沒(méi)有明顯密集的黃白色絨毛，刻點(diǎn)分散而明顯粗糙

云杉粗鞘墨天牛

3.鞘翅僅在基部1/4有清晰密集的刻點(diǎn),端部區(qū)域有很密的暗褐色絨毛，點(diǎn)綴著白色或淡黃色斑，其上只有微小細(xì)弱稀疏的刻點(diǎn)；光滑的縱中線縱貫整個(gè)小盾片

云杉花墨天牛

整個(gè)鞘翅具有明顯而粗糙的刻點(diǎn),即使覆蓋有濃密的絨毛也能看見(jiàn),小盾片有1條從基部到端部完整或僅存在于基半部的光滑縱中線

4

4.小盾片上光滑縱中線從基到端部完整；在鞘翅基部，小盾片之后主要為簡(jiǎn)單的刻點(diǎn)，刻點(diǎn)間平坦

云杉小墨天牛

僅在小盾片基部有光滑的短縱中線;鞘翅基部，小盾片后方有顆粒狀刻點(diǎn)，刻點(diǎn)間表面凸出

樟子松墨天牛

依據(jù)上述形態(tài)特征對(duì)收集到的天牛成蟲(chóng)樣品進(jìn)行種類鑒定，并結(jié)合前人研究所報(bào)道的研究確定媒介昆蟲(chóng)種類[40-42]，確定寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)存在的媒介昆蟲(chóng)種類主要為有樟子松墨天牛(Monochamus.galloprovincialis)、云杉大墨天牛(Monochamusurussovi)、云杉小墨天牛(Monochamussutor)以及云杉花墨天牛(MonochamussalturariusGebler)(見(jiàn)圖3)。

A．樟子松墨天牛；B. 云杉小墨天牛；C. 云杉大墨天牛；D. 云杉花墨天牛。

3.3.2 羽化后不同時(shí)間下的媒介昆蟲(chóng)種群密度調(diào)查

將所有誘捕器中誘捕到天牛制作成標(biāo)本，將各個(gè)時(shí)間段誘捕器內(nèi)的媒介昆蟲(chóng)(墨天牛屬天牛)數(shù)量進(jìn)行整理，并計(jì)算單誘捕器內(nèi)媒介昆蟲(chóng)的平均數(shù)量。由表1可知，寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)媒介昆蟲(chóng)成蟲(chóng)在6月中上旬開(kāi)始羽化，7月下旬至8月上旬成蟲(chóng)的單誘捕器平均數(shù)量最多，9月上旬之后基本沒(méi)有羽化后的成蟲(chóng)活動(dòng)。

表1 不同時(shí)段不同林分類型樣地內(nèi)平均每個(gè)誘捕器誘捕媒介昆蟲(chóng)數(shù)量

P1可直接根據(jù)表內(nèi)的評(píng)分指標(biāo)賦分得到。P2采用連乘關(guān)系，P3和P5采用累加關(guān)系，P4采用替代關(guān)系。計(jì)算公式如下：

P1=P11；

P3=0.4×P31+0.4×P32+0.2×P33；

P4=Max(P41，P42，P43)；

P5=(P51+P52+P53)/3。

建立風(fēng)險(xiǎn)綜合評(píng)價(jià)值(R)與風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)的對(duì)應(yīng)關(guān)系，其計(jì)算方式為：

根據(jù)計(jì)算，加格達(dá)奇地區(qū)風(fēng)險(xiǎn)綜合評(píng)價(jià)值R=2.69。參照結(jié)合現(xiàn)有的林業(yè)有害生物風(fēng)險(xiǎn)分析等級(jí)劃分R值的區(qū)間(2.50≤R<3.00 為特別危險(xiǎn)，2.00≤R<2.50為高度危險(xiǎn)，1.50≤R<2.00為中度危險(xiǎn)，0≤R<1.50為低度危險(xiǎn))判定，松材線蟲(chóng)病入侵寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)的風(fēng)險(xiǎn)為特別危險(xiǎn)等級(jí)。

3.4 松材線蟲(chóng)傳入加格達(dá)奇地區(qū)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

由表1可知，根據(jù)松材線蟲(chóng)病生物學(xué)特性、發(fā)生規(guī)律、危害特點(diǎn)、防治情況，參考目前有害生物風(fēng)險(xiǎn)分析評(píng)價(jià)體系，并結(jié)合加格達(dá)奇當(dāng)?shù)丶闹鞣N類、種植面積以及當(dāng)?shù)販貪穸鹊纫蛩卮_定松材線蟲(chóng)病在寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)的入侵風(fēng)險(xiǎn)性評(píng)估指標(biāo)[39]，包括一級(jí)指標(biāo)5項(xiàng)，二級(jí)指標(biāo)14項(xiàng)，并參考相關(guān)松材線蟲(chóng)病以及其它病蟲(chóng)害風(fēng)險(xiǎn)性分析的賦值依據(jù)[30]，對(duì)寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)的松材線蟲(chóng)病入侵的風(fēng)險(xiǎn)性評(píng)估進(jìn)行權(quán)重賦值[43-47]。

表1 松材線蟲(chóng)病在寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)入侵風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)及賦值權(quán)重

4 結(jié)論與討論

據(jù)國(guó)家林業(yè)局 2021 年第14號(hào)公告，目前我國(guó)松材線蟲(chóng)疫區(qū)最北已經(jīng)擴(kuò)散到我國(guó)吉林省汪清、通化等區(qū)域[22]。加格達(dá)奇地區(qū)作為寒溫帶的代表地區(qū)，其所在大興安嶺林區(qū)擁有我國(guó)保存完好面積最大原始森林，具有大量的落葉松與樟子松的人工林分布。本研究利用氣候動(dòng)態(tài)模型CLIMEX模型方法，并綜合氣候因素與松材線蟲(chóng)生物學(xué)特性的因素預(yù)測(cè)了松材線蟲(chóng)的潛在適生地理分布。根據(jù)寒溫帶所在的地區(qū)的松材線蟲(chóng)適生情況，并結(jié)合當(dāng)?shù)丶闹髦参矬w內(nèi)線蟲(chóng)分離、以及媒介昆蟲(chóng)情況，對(duì)加格達(dá)奇地區(qū)松材線蟲(chóng)侵入風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了預(yù)測(cè)。由于松材線蟲(chóng)病的發(fā)生是多重因素互作的結(jié)果，物種對(duì)氣候的適宜性并不是確定物種潛在分布區(qū)的唯一標(biāo)準(zhǔn)，物種的擴(kuò)散、物種間相互作用關(guān)系、寄主種類及適應(yīng)性、傳播媒介、人為干擾等也是需要考慮的重要因素[48-49]。因此，在排除人為干擾的情況下，本研究預(yù)測(cè)的松材線蟲(chóng)適生區(qū)的結(jié)果較為可靠。預(yù)測(cè)結(jié)果顯示加格達(dá)奇大部分地區(qū)為松材線蟲(chóng)中適生區(qū)，當(dāng)松材線蟲(chóng)侵入到寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)能夠在該地區(qū)適生傳播并危害當(dāng)?shù)厮蓸?shù)。

在加格達(dá)奇地區(qū)對(duì)枯死松木進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分離中，雖然未分離到松材線蟲(chóng)，證明了加格達(dá)奇地區(qū)暫無(wú)松材線蟲(chóng)病的發(fā)生。但是分離的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了活體的擬松材線蟲(chóng)(B.mucronatus)，許多研究證明擬松材線蟲(chóng)和松材線蟲(chóng)的生理所需的環(huán)境條件幾乎相同，并同樣也對(duì)松樹(shù)產(chǎn)生一定的危害[50]，側(cè)面證明了松材線蟲(chóng)能夠在加格達(dá)奇地區(qū)適生[51]。加格達(dá)奇地區(qū)媒介昆蟲(chóng)的調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)該地區(qū)具有4種可傳播松材線蟲(chóng)的媒介昆蟲(chóng)的分布，證明了松材線蟲(chóng)傳入后可以被媒介昆蟲(chóng)攜帶并擴(kuò)散。前期研究發(fā)現(xiàn)松材線蟲(chóng)在我國(guó)高緯度低溫地區(qū)定殖時(shí)會(huì)以擴(kuò)散型3齡幼蟲(chóng)的蟲(chóng)態(tài)存在，在溫度低于-20 ℃的情況下，線蟲(chóng)將脫水休眠進(jìn)入隱生狀態(tài)，以保證在極寒狀態(tài)下保持存活，當(dāng)溫度回暖到適宜正常生理活動(dòng)時(shí)，線蟲(chóng)將復(fù)水解除隱生狀態(tài)繼續(xù)危害松樹(shù)[15，52]。

對(duì)松材線蟲(chóng)適生區(qū)預(yù)測(cè)、媒介昆蟲(chóng)收集和線蟲(chóng)分離鑒定的結(jié)果可作為傳入定殖、擴(kuò)散可能性危險(xiǎn)性的一級(jí)指標(biāo)賦值的重要參考；適生區(qū)預(yù)測(cè)的結(jié)果直接為二級(jí)指標(biāo)中的松材線蟲(chóng)存活率、適應(yīng)性、擴(kuò)散能力的賦值提供參考；媒介昆蟲(chóng)直接為二級(jí)指標(biāo)中的松材線蟲(chóng)被攜帶的可能性、自然擴(kuò)散能力的賦值提供參考；線蟲(chóng)分離鑒定的結(jié)果側(cè)面為二級(jí)指標(biāo)中的松材線蟲(chóng)存活率、適應(yīng)性的賦值提供參考。結(jié)合松材線蟲(chóng)寄主植物種類與分布、松材線蟲(chóng)病的潛在的危害性、傳播與定殖的可能性、寄主的種類和分布、以及檢疫管理的難易性等5個(gè)指標(biāo)[35]，賦值評(píng)價(jià)松材線蟲(chóng)侵入加格達(dá)奇地區(qū)的風(fēng)險(xiǎn)性，加格達(dá)奇地區(qū)風(fēng)險(xiǎn)綜合評(píng)價(jià)值R=2.93，判定加格達(dá)奇地區(qū)為侵入風(fēng)險(xiǎn)性極大。綜合媒介昆蟲(chóng)和當(dāng)?shù)貧夂驐l件以及松材線蟲(chóng)隱生特性，判斷松材線蟲(chóng)侵入寒溫帶加格達(dá)奇地區(qū)，必然會(huì)在該地區(qū)適生擴(kuò)散并對(duì)當(dāng)?shù)厮闪仲Y源產(chǎn)生重大的危害。

綜上所述，加強(qiáng)該地區(qū)對(duì)防止松材線蟲(chóng)病入侵的相關(guān)管控十分必要。首先，要嚴(yán)格把控檢疫關(guān)口防止可疑木材或木制品進(jìn)入寒溫帶地區(qū)，作為松材線蟲(chóng)病的適生區(qū)，對(duì)來(lái)自疫區(qū)省份或來(lái)源不明的松科植物及其產(chǎn)品進(jìn)行嚴(yán)格復(fù)檢和跟蹤調(diào)查；其次完善檢疫手段及相關(guān)設(shè)備的購(gòu)置，增加普及分子生物學(xué)鑒定技術(shù)，并不斷學(xué)習(xí)先進(jìn)有效的松材線蟲(chóng)檢疫技術(shù)，提高基層檢疫準(zhǔn)確率；再次加強(qiáng)該地區(qū)媒介昆蟲(chóng)的監(jiān)測(cè)與預(yù)警措施做好預(yù)防，除林間踏查外，應(yīng)在重點(diǎn)地區(qū)設(shè)置松材線蟲(chóng)病媒介昆蟲(chóng)誘捕器、誘木截獲媒介昆蟲(chóng)、誘集天牛產(chǎn)卵等方式阻斷松材線蟲(chóng)傳播。同時(shí)加強(qiáng)林業(yè)及相關(guān)工作人員(檢疫人員、普查隊(duì)員、護(hù)林員)對(duì)松材線蟲(chóng)病專業(yè)知識(shí)的培訓(xùn)提高業(yè)務(wù)水平，增強(qiáng)林業(yè)從業(yè)人員對(duì)于松材線蟲(chóng)病的防范意識(shí)。