許海燕, 王珊, 彭修娟, 陳衍斌, 侯敏娜, 劉艷紅, 王青, 劉峰,*

秦嶺龍膽開花前后多糖含量的比較及其提取工藝優(yōu)化與抗氧化活性

許海燕1, 王珊1, 彭修娟1, 陳衍斌2, 侯敏娜1, 劉艷紅1, 王青1, 劉峰1,2*

(1. 陜西國際商貿(mào)學(xué)院，陜西 咸陽 712046；2. 陜西步長制藥有限公司，西安 710075)

為了解秦嶺龍膽()開花前后的多糖含量變化，利用響應(yīng)面法優(yōu)化多糖的提取工藝，并對多糖抗氧化活性進(jìn)行測定。結(jié)果表明，秦嶺龍膽開花后的多糖含量高于未開花的。秦嶺龍膽開花藥材的多糖最佳提取工藝為提取3 h，料液比1∶16，醇沉比為1∶10，離心速率1 537×，多糖的提取率為5.13%，與預(yù)測的5.42%接近。多糖對DPPH和ABTS均有一定的抗氧化能力，且高于維生素C (Vc)和二丁基羥基甲苯(BHT)。因此，秦嶺龍膽除作為藥用外，也可作為抗氧劑用于食品、保健品領(lǐng)域。

秦嶺龍膽；多糖；提取工藝；抗氧化活性

秦嶺龍膽()為龍膽科(Gentianaceae) 龍膽屬植物，別名太白龍膽、茱苓草。藥用全草, 民間以未開花及開花兩種方式應(yīng)用。其味苦，性寒, 具有調(diào)經(jīng)活血、清熱燥濕、保肝明目、瀉肝定驚等功效，臨床主要治療月經(jīng)不調(diào)，痛經(jīng)，頭暈失眠，小便不利，淋癥，崩漏，白帶，痢疾，腹痛。有研究結(jié)果表明，秦嶺龍膽主要含有三萜、黃酮、環(huán)烯醚萜、有機(jī)酸、生物堿、多糖及揮發(fā)油等化學(xué)成分[1]。其中，多糖作為龍膽中最主要的功效成分之一，具有抗氧化、抗腫瘤、降血糖、降血脂、保肝、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒、抗炎等療效[2–5]。中藥療效與功效成分含量呈量效關(guān)系，藥材采收期不同，其功效成分的含量也會(huì)有所差異，從而極大影響療效；其次，中藥提取方法不同，其功效成分及其含量也會(huì)有所差異。因此，對秦嶺龍膽開花前后多糖含量進(jìn)行比較并對其提取工藝及抗氧化活性進(jìn)行研究，除了可以確定藥材的采收期，提高藥物療效及多糖提取率外，對其多糖的抗氧化活性研究，可為秦嶺龍膽的開發(fā)利用提供依據(jù)，也為其開發(fā)成藥品、食品、保健品提供理論參考。

1 材料和方法

1.1 儀器和試劑

葡萄糖對照品(中國食品藥品檢定研究院, 110833-201803, 純度≥99.8%)；紫外可見分光光度計(jì)(TU-1810, 北京普希通用儀器有限責(zé)任公司)；離心機(jī)(Anke, TDL-60B, 上海安亭科學(xué)儀器廠)；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)、二丁基羥基甲苯(BHT)、維生素C (Vc)、無水乙醇、丙酮、苯酚、濃硫酸、石油醚均為分析純。

1.2 方法

材料 試驗(yàn)材料均采自陜西省眉縣太白山脈，經(jīng)陜西國際商貿(mào)學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院雷國蓮教授鑒定為秦嶺龍膽()的全草。分別取秦嶺龍膽未開花和開花藥材去除雜質(zhì)，于60 ℃烘箱烘干后粉碎過80目篩，取適量粉末置于索氏提取器中, 加入石油醚進(jìn)行脫脂處理后，放置陰涼通風(fēng)處，干燥備用。

多糖的提取 取脫脂干燥的樣品，加水煎煮，濾液濃縮后加入無水乙醇冷藏放置過夜，高速離心后沉淀用無水乙醇和丙酮洗滌，干燥后即為粗多糖。

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 參照呂曉帆等[6]的方法。精密稱量10 mg葡萄糖對照品，蒸餾水定容于100 mL容量瓶中，即得0.1 mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。移液管移取配制好的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液2、4、6、8、10 mL，分別置于10 mL容量瓶中，蒸餾水定容至刻度，混勻，分別得0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別移取配制好的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液和蒸餾水1 mL置具塞試管中，再加入5%的苯酚溶液1 mL和濃硫酸5 mL搖勻，以蒸餾水為空白對照，將具塞試管于100 ℃水浴鍋中加熱反應(yīng)20 min后，置于冷水浴中冷卻至室溫，用紫外分光光度計(jì)測定波長480 nm下的吸光度，以葡萄糖濃度(C, mg/mL)為橫坐標(biāo)，吸光度(A)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并獲得回歸方程。

多糖提取率的計(jì)算 將提取的粗多糖樣品溶解并定容于容量瓶中搖勻，即得供試品溶液，用移液管移取供試品溶液，用苯酚-硫酸法顯色后用紫外分光光度法測定其吸光度。根據(jù)回歸方程計(jì)算多糖含量，多糖提取率(%)=多糖含量/秦嶺龍膽質(zhì)量× 100%。

單因素實(shí)驗(yàn) 采用控制變量法，在其他條件固定的情況下，考察提取時(shí)間、料液比、醇沉比、離心轉(zhuǎn)速對秦嶺龍膽多糖提取率的影響。稱取5份相同質(zhì)量脫脂后的秦嶺龍膽開花前后的藥材粉末, 試驗(yàn)時(shí)固定3個(gè)因素，考察另1個(gè)因素的變化對多糖提取率的影響，最終得到最佳提取時(shí)間、料液比、醇沉比、離心轉(zhuǎn)速。

響應(yīng)面分析法 在單因素分析的基礎(chǔ)上，確定響應(yīng)面設(shè)計(jì)的自變量，以多糖提取率為變量，選取提取時(shí)間、料液比、醇沉比、離心轉(zhuǎn)速4因素進(jìn)行響應(yīng)曲面分析，每次實(shí)驗(yàn)平行重復(fù)3次，取平均值。數(shù)據(jù)處理采用Design-Expert 8.0.6統(tǒng)計(jì)軟件分析，并對最終分析結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證，以獲得最佳提取工藝方案。

1.3 抗氧化活性研究

參照胡文兵等[7]的方法，多糖樣品用蒸餾水溶解配制成0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 mg/mL的溶液。稱取適量的Vc、BHT配制成相同濃度梯度的對照品溶液。

DPPH自由基清除率的測定 參照Zhang等[8]的方法。稱取DPPH用無水乙醇配制成0.04 mg/mL的溶液。取不同濃度的供試品溶液2.0 mL和DPPH自由基溶液2.0 mL，在室溫下充分混合均勻，避光反應(yīng)30 min，在517 nm波長下測定混合溶液的吸光度(A)，樣品溶液和無水乙醇溶液的吸光度(A), 無水乙醇和DPPH溶液的吸光度(0)，無水乙醇為空白對照，以Vc和BHT溶液做陽性對照。DPPH自由基清除率(%)=[1-(A-A)/0]×100%。

ABTS+清除率的測定 參照Ha等[9]的方法。稱取ABTS配制成10mmol/L的溶液，加入4 mmol/L的過硫酸鉀溶液混合搖勻，避光放置10 h，獲得ABTS+原液。取不同濃度供試品溶液0.1 mL，與ABTS+原液3.9 mL混合，室溫下避光反應(yīng)6 min, 在734 nm波長處測定吸光度(1)，供試品與無水乙醇混合溶液的吸光度(2)，無水乙醇為空白對照, 以VC和BHT溶液做陽性對照。ABTS+清除率(%)=[1-(1)/2]×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件處理，采用鄧肯氏法進(jìn)行顯著性分析，<0.05為顯著差異。所有試驗(yàn)重復(fù)3次，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果和分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制結(jié)果

由圖1可見，葡萄糖濃度為0.02～0.10 mg/mL時(shí)，線性關(guān)系良好，其回歸方程為=7.05+0.0922，相關(guān)系數(shù)2=0.999 4。

圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 單因素實(shí)驗(yàn)

提取時(shí)間的影響 固定料液比、醇沉比和離心轉(zhuǎn)速，考察提取時(shí)間(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 h)對多糖提取率的影響。從圖2: A可見，隨提取時(shí)間的延長多糖提取率增加，提取時(shí)間大于2 h后提取率增加緩慢，可能是提取2 h后多糖的溶解達(dá)到相對飽和或已基本提取完全，故選擇最佳提取時(shí)間為2 h。

料液比的影響 固定醇沉比和離心轉(zhuǎn)速，提取2 h，考察不同料液比(1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25)對多糖提取率的影響。從圖2: B可見, 提取率在料液比小于1∶15時(shí)快速增加，1∶15之后增加緩慢，可能多糖在料液比1∶15時(shí)幾乎完全溶解。故選擇料液比為1∶15為最佳。

醇沉比的影響 固定離心轉(zhuǎn)速，提取2 h和料液比1∶15，考察醇沉比(1∶1、1∶3、1∶6、1∶9、1∶12)對多糖提取率的影響。從圖2: C可見，醇沉比小于1∶9時(shí)與提取率成正相關(guān)，此后多糖的提取率隨醇沉比增加而下降，可能是隨醇濃度的增加多糖溶解度降低，有利于多糖沉淀，但當(dāng)醇沉濃度過高時(shí)，多糖會(huì)包裹一些雜質(zhì)沉淀析出，導(dǎo)致多糖不純使提取率下降。故選擇醇沉比1∶9為最佳。

離心轉(zhuǎn)速的影響 在提取2 h，料液比1∶15和醇沉比1∶9條件下，考察離心轉(zhuǎn)速(909、1 309、1 782、2 328、2 946×)對多糖提取率的影響。從圖2: D可見，多糖提取率在離心轉(zhuǎn)速1 309×達(dá)到最大，此后多糖提取率隨離心轉(zhuǎn)速的增加反而下降, 可能是1 309×?xí)r多糖基本沉降完全。故選擇離心轉(zhuǎn)速1 309×為最佳。

從單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果還可看出，秦嶺龍膽開花后的多糖含量高于未開花的，故藥材以開花后采收最佳。因此本文對秦嶺龍膽藥材的多糖提取工藝進(jìn)行考察時(shí)，只對開花后藥材用響應(yīng)面法進(jìn)行優(yōu)化。

2.3 響應(yīng)面法優(yōu)化

依據(jù)Box-Behnken響應(yīng)曲面法對秦嶺龍膽開花藥材多糖提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。以多糖提取率()為響應(yīng)值，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案(表1), 共29組試驗(yàn)(表2)。應(yīng)用Design-Expert 8.0.6 Trial軟件分析，得到多元二次回歸模型方程：=–32.822+0.405A+1.118B+0.311C+0.015D+0.039AB–0.041AC+ 1.650×10–4AD–2.333×10–3BC–1.600×10–4BD+ 2.700×10–4CD+0.365A2–0.021B2–0.052C2–2.436×10–6D2，式中，為多糖提取率，A為提取時(shí)間，B為料液比，C為醇沉比，D為離心轉(zhuǎn)速。

方差分析表明(表3)，回歸方程的<0.0001,= 58.67>0.05，說明二次多項(xiàng)式方程極顯著。失擬項(xiàng)=4>0.05，失擬項(xiàng)不顯著[10]?？梢?，響應(yīng)值與自變量間的多元回歸關(guān)系顯著，可以很好的用該模型表示，最佳提取工藝條件可利用該模型確定。模型的調(diào)整確定系數(shù)2Adj=0.966 5，說明96.65%的響應(yīng)值變化能夠用該模型解釋。此外，從表3可見，各因素的一次項(xiàng)對響應(yīng)值均有顯著作用，說明提取時(shí)間、料液比、醇沉比、離心轉(zhuǎn)速對多糖提取率均有影響；交互因素只有料液比和離心轉(zhuǎn)速(BD)、醇沉比和離心轉(zhuǎn)速(CD)之間的影響較顯著。這表明各因素與響應(yīng)值間并非單純的線性關(guān)系。一次項(xiàng)反映出各因素對響應(yīng)值的影響，為提取時(shí)間(A)>離心轉(zhuǎn)速(D)>料液比(B)>醇沉比(C)。

圖2 提取時(shí)間(A)、料液比(B)、醇沉比(C)、離心轉(zhuǎn)速(D)對多糖提取率的影響

表1 因素水平

表2 Box-Behnken設(shè)計(jì)方案及結(jié)果

續(xù)表(Continued)

表3 方差分析

2=0.983 2；2Adj=0.966 5；=9.47;**:<0.000 1;*:<0.05.

圖3為各因素對秦嶺龍膽開花藥材多糖提取率影響的響應(yīng)面圖和等高線圖，可見4個(gè)因素的最適范圍及其交互作用，最佳提取時(shí)間為2～3 h；最佳料液比為1∶14～1∶16；最佳醇沉比為1∶8～1∶10；最佳離心轉(zhuǎn)速為1 309～1 537×。由圖3: E, F可見，等高線近似橢圓，曲面圖較陡峭，說明料液比和離心轉(zhuǎn)速及醇沉比和離心轉(zhuǎn)速之間的交互作用較顯著，與表3方差分析結(jié)果相吻合。

根據(jù)Design-Expert軟件對模型方程計(jì)算求解回歸方程，最終得到秦嶺龍膽開花藥材多糖的最佳提取工藝為提取時(shí)間3 h，料液比1∶16，醇沉比1∶10，離心轉(zhuǎn)速1 537×，預(yù)測多糖的提取率為5.42%。在此條件下平行驗(yàn)證操作3次，取平均值，多糖提取率約為5.13%，比理論值僅下降0.29%，說明該模型可信度高，可較好反映秦嶺龍膽多糖的提取條件，用于多糖提取率預(yù)測。

圖3 各因素響應(yīng)面與等高線分析圖

2.4 抗氧化活性分析

DPPH自由基清除率 從圖4可見，不同濃度秦嶺龍膽多糖溶液對DPPH自由基的清除率有顯著差異，隨濃度的升高對DPPH清除率呈增加趨勢(<0.05)。多糖濃度大于1.4 mg/mL時(shí)，多糖對DPPH的清除率仍然呈緩慢上升趨勢，且其清除率均大于標(biāo)準(zhǔn)品VC和BHT (<0.05)，說明秦嶺龍膽多糖對DPPH自由基有很好的清除作用。

圖4 多糖對DPPH的清除率

ABTS+的清除率 從圖5可見，不同濃度多糖溶液對ABTS自由基清除率有顯著差異，且清除率隨多糖濃度的增加而逐漸增大(<0.05)，當(dāng)多糖溶液濃度大于1.4 mg/mL時(shí)，對ABTS+的清除率呈緩慢上升趨勢(<0.05)，且秦嶺龍膽多糖對ABTS+的清除率均高于VC和BHT (<0.05)，表明秦嶺龍膽多糖對ABTS+也具有清除能力。

圖5 秦嶺龍膽多糖對ABTS+的清除率

3 結(jié)論和討論

秦嶺龍膽民間應(yīng)用有開花和未開花2種，本研究表明，開花藥材中多糖含量高于未開花藥材，故采收藥材時(shí)應(yīng)在待開花后，以極大地提高藥效。由于秦嶺龍膽的多糖類化合物親水性較強(qiáng)，故本研究選擇水提醇沉法結(jié)合高速離心，以提高多糖的提取效率。與傳統(tǒng)的水提醇沉法相比，本研究具有節(jié)約溶劑、縮短提取時(shí)間、減少能耗等優(yōu)點(diǎn)，符合綠色環(huán)保的現(xiàn)代化提取理念，而且在提取多糖的過程中采用傳統(tǒng)煎煮法與現(xiàn)代高速離心法相融合，并對提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，獲得較高的提取率。

植物中廣泛存在多種多糖類化合物，且具有明顯的抗氧化作用，多為中草藥中的有效活性成分, 目前在醫(yī)藥與食品領(lǐng)域應(yīng)用廣泛[11–12]。有研究表明, 多糖的抗氧化作用主要是通過內(nèi)源性抗氧化應(yīng)激通路Nrf2-ARE通路，調(diào)節(jié)編碼下游抗氧化酶基因的表達(dá)，阻斷自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，從而減少自由基的生成，消除過多自由基，從根源上防治疾病的產(chǎn)生[13–14]。本研究對秦嶺龍膽多糖抗氧化研究結(jié)果也顯示，秦嶺龍膽多糖具有顯著的抗氧化活性，且隨劑量的增加抗氧化性逐漸增加，比對照品VC和BHT的抗氧化性強(qiáng)，可作為抗氧劑使用。

近年來，隨著對中藥療效作用要求的進(jìn)一步提高，對中藥提取工藝的研究越來越廣泛且越來越受重視，然而在提取工藝研究上還存在一些問題，例如提取秦嶺龍膽以多糖提取率為指標(biāo)，其提取方法不同，結(jié)果差異也較大，提取次數(shù)、提取溫度及粉碎度等都會(huì)影響提取率，提取工藝不同其化學(xué)組分、含量也不統(tǒng)一，因而提取次數(shù)對秦嶺龍膽多糖提取率及化學(xué)組分造成的差異還有待于進(jìn)一步研究。

[1] WANG N. Qualitative analysis of chemical components in[J]. J Qinghai Univ, 2004, 22(6): 1–2. doi: 10.3969/j.issn.1006- 8996.2004.06.001.

王寧. 秦嶺龍膽化學(xué)成分的定性分析[J]. 青海大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2004, 22(6): 1–2. doi: 10.3969/j.issn.1006-8996.2004.06.001.

[2] FU J, Lü Y, CHENG Z Y. Optimization in pectinase-assisted extraction process of polysaccharides fromand their antioxidant activity [J]. Chem Bioeng, 2020, 37(9): 33–37. doi: 10.3969/j.issn. 1672-5425.2020.09.007.

付晶, 呂洋, 程振玉. 龍膽多糖的果膠酶法提取工藝及抗氧化活性研究[J]. 化學(xué)與生物工程, 2020, 37(9): 33–37. doi: 10.3969/j.issn. 1672-5425.2020.09.007.

[3] ZHANG B X, SUN J Z, JIANG Y J, et al. Liver protecting effect of total polysaccharides and total iridoid glycosides from wine-processedBge. [J]. CS Pharm, 2019, 17(7): 1001–1005. doi: 10. 7539/j.issn.1672-2981.2019.07.005.

張北雪, 孫建之, 姜宇珺, 等. 酒龍膽中總多糖和總環(huán)烯醚萜苷保肝作用的研究[J]. 中南藥學(xué), 2019, 17(7): 1001–1005. doi: 10.7539/j. issn.1672-2981.2019.07.005.

[4] GONG J N, YUN C Y, YANG Y J. Optimization of refinement of polysaccharide fromBunge through macroporous adsorption resin AB-8 [J]. J Guizhou Norm Univ (Nat Sci), 2018, 36(2): 39–43. doi: 10.3969/j.issn.1004-5570.2018.02.007.

宮江寧, 云成悅, 楊義菊. AB-8大孔吸附樹脂純化龍膽多糖的工藝優(yōu)化 [J]. 貴州師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2018, 36(2): 39–43. doi: 10.3969/j.issn.1004-5570.2018.02.007.

[5] GONG J N, WEI Y J, YANG Z Y. Extraction optimization and antioxidant activity of gentian polysaccharides by response surface methodology [J]. China Brew, 2017, 36(8): 134–138. doi: 10.11882/j. issn.0254-5071.2017.08.029.

宮江寧, 韋元凈, 楊子藝. 響應(yīng)面優(yōu)化龍膽多糖的提取工藝及抗氧化性研究 [J]. 中國釀造, 2017, 36(8): 134–138. doi: 10.11882/j.issn. 0254-5071.2017.08.029.

[6] Lü X F, ZHOU X H, WANG Y, et al. Component analysis ofanthocyanin extract and its antioxidant activity and irritation[J]. J Trop Subtrop Bot, 2021, 29(4): 374–381. doi: 10.11926/jtsb.4327.

呂曉帆, 周新紅, 王瑩, 等. 秋石斛花青素提取液成分分析及其體外抗氧化活性和刺激性研究[J]. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào), 2021, 29(4): 374–381. doi: 10.11926/jtsb.4327.

[7] HU W B, YANG Z W, CHEN H, et al. Optimization of ultrasonic and enzyme-assisted extraction of polysaccharides fromby plackett-burman and box-behnken experiment and analysis of its structure [J]. Nat Prod Res Dev, 2017, 29(4): 671–679. doi: 10.16333/ j.1001-6880.2017.4.024.

胡文兵, 楊占威, 陳慧, 等. Plackett-Burman和Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化超聲波-酶法提取青錢柳多糖工藝及結(jié)構(gòu)初探[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2017, 29(4): 671–679. doi: 10.16333/j.1001-6880.2017. 4.024.

[8] ZHANG R, MA C J, WEI Y L, et al. Isolation, purification, structural characteristics, pharmacological activities, and combined action ofpolysaccharides: A review [J]. Int J Biol Macromol, 2021, 183: 119–131. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2021.04.139.

[9] HA S J, KIM M J, PARK J, et al. Erythorbyl laurate suppresses TNF--induced adhesion of monocytes to the vascular endothelium [J]. J Funct Foods, 2021, 80: 104428. doi: 10.1016/j.jff.2021.104428.

[10] YANG B Y, YE L P, LIN L L, et al. Ultrasonic condition optimization for anthocyanin extraction from purple cabbage by using response surface methodology (RSM) [J]. J Trop Subtrop Bot, 2014, 22(4): 373– 382. doi: 10.3969/j.issn.1005-3395.2014.04.008.

楊碧云, 葉麗萍, 林琳琳, 等. 響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助提取紫色小白菜花青苷的工藝研究 [J]. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào), 2014, 22(4): 373–382. doi: 10.3969/j.issn.1005-3395.2014.04.008.

[11] QIU S M. Study on medicinal and edible plant extracts and antioxidant properties [D]. Qingdao: Qingdao University, 2014.

邱書梅. 藥食兩用植物提取物及抗氧化性能的研究 [D]. 青島: 青島大學(xué), 2014.

[12] GAO J. Natural antioxidants and synergistic effects [J]. J Food Saf Qual, 2020, 11(6): 1859–1864. doi: 10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2020. 06.030.

高靜. 天然抗氧化劑及其協(xié)同作用[J]. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào), 2020, 11(6): 1859–1864. doi: 10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2020.06.030.

[13] WANG L X, XIE Y H, ZHANG G G. Application of phytogenic antioxidants and its mechanisms [J]. Chin J Anim Nutri, 2017, 29(5): 1481–1488. doi: 10.3969/j.issn.1006-267x.2017.05.005.

王麗雪, 解玉懷, 張桂國. 植物源性抗氧化劑的應(yīng)用及其作用機(jī)制 [J]. 動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào), 2017, 29(5): 1481–1488. doi: 10.3969/j.issn.1006- 267x.2017.05.005.

[14] ZHAO C Y, WANG X L, PENG Y. Role of Nrf2 in neurodegenerative diseases and recent progress of its activators [J]. Acta Pharm Sin, 2015, 50(4): 375–384. doi: 10.16438/j.0513-4870.2015.04.012.

趙春陽, 王曉良, 彭英. Nrf2在神經(jīng)退行性疾病中的作用及激活劑的研究進(jìn)展 [J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào), 2015, 50(4): 375–384. doi: 10.16438/j. 0513-4870.2015.04.012.

Comparison of Polysaccharide Content inBefore and After Flowering and Optimization of Extraction Process and Antioxidant Activities

XU Haiyan1, WANG Shan1, PENG Xiujuan1, CHEN Yanbin2, HOU Minna1, LIU Yanhong1, WANG Qing1, LIU Feng1,2*

(1. Medical college, Shaanxi Institute of International Trade,Xianyang 712046, Shaanxi, China; 2. Shaanxi Buchang Pharmaceutical Co., Ltd.,Xi’an 710075, China)

In order to understand the changes of polysaccharide content inbefore and after flowering, the extraction process of polysaccharides was optimized by response surface method, and the antioxidant activities of polysaccharides were determined. The results showed that the content of polysaccharide inafter flowering was higher than that before floweringThe optimal extraction process were extraction 3 h, the solid-liquid ratio of 1∶16, the alcohol precipitation ratio of 1∶10, and the centrifugal speed at 1 537×. Under optimal extraction conditions, the extraction rate of polysaccharide was 5.13%, close to the predicted value of 5.42%. Polysaccharides had certain antioxidant capacity to DPPH and ABTS, which was higher than that of Vitamin C and butylated hydroxytoluene. Therefore, it was suggested thatcan also could be used as antioxidant in food and health care products except for medicine.

; Polysaccharide; Extraction process; Antioxidant activity

10.11926/jtsb.4515

2021-09-02

2021-12-04

陜西省科技廳項(xiàng)目(2021SF-365)；陜西省教育廳青年創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)科研計(jì)劃項(xiàng)目(21JP011)；大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目(S202113123008)資助

This work was supported by the Project of Department of Science and Technology in Shaanxi (Grant No. 2021SF-365), the Project for Scientific Research of Youth Innovation Team Construction of Department of Education in Shaanxi (Grant No. 21JP011), and the Project for Innovation and Entrepreneurship of College Students (Grant No. S202113123008).

許海燕(1977生)，女，碩士，副教授。E-mail: xpzwd@126.com

. E-mail: liufeng1720@163.com