陳瑾 （哈密市食品藥品檢驗所）

張勇 （哈密市檢驗檢測中心）

0 引言

食品檢驗是食品安全管控的一個重要環(huán)節(jié)。食品檢驗主要依據(jù)相應(yīng)的國家標準、行業(yè)標準、地方標準、企業(yè)標準和團體標準，以及一些非標準方法和自制方法。在RB/T 214—2017《檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認定能力評價 檢驗檢測機構(gòu)通用要求》4.5.14方法的選擇、驗證和確認中規(guī)定：“在使用標準方法前應(yīng)進行驗證”。這種驗證不僅需要識別相應(yīng)的人員、設(shè)施設(shè)備和環(huán)境等技術(shù)能力滿足要求，還應(yīng)通過試驗證明結(jié)果的準確性和可靠性，如精密度、回收率、線性范圍、正確度、檢出限和定量限等。

秦曉娟等在保健食品中鈣含量測定時，選用5種不同的方法計算檢出限，結(jié)果發(fā)現(xiàn)應(yīng)用空白標準偏差法可信度較高。孫明坤在測定生活飲用水及其水源中氯化物時通過測定其精密度、準確度、線性方程、方法檢出限等參數(shù)進行了方法驗證。張麗琴對食品中總酸測定時采用同一種檢測方法的精密度實驗和同一種樣品的不同檢驗方法相對標準偏差的比較進行新標準的確認及方法驗證。本文以葡萄酒中組胺的測定為例，參照GB/T 27404—2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》附錄F和HJ 168—2020《環(huán)境監(jiān)測分析方法標準制訂技術(shù)導則》檢測方法確認的技術(shù)要求分別對組胺測定的方法檢出限、準確度、精密度、加標回收等特性指標進行了方法驗證試驗，以期為食品檢驗人員在方法驗證工作中提供借鑒和參考。

1 試驗方法及過程

葡萄酒中組胺的測定采用國家標準GB 5009.208—2016《食品安全國家標準 食品中生物胺的測定》。試驗用儀器設(shè)備為高效液相色譜儀。試驗用試劑、標準溶液的配置、色譜條件、樣品處理、含量計算等均嚴格按GB 5009.208—2016標準執(zhí)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性試驗

分別配制低、中、高系列標準溶液，濃度分別為 1.0 mg/L、2.0 mg/L、2.5 mg/L、4.5 mg/L、5.5 mg/L；4.5 mg/L、5.5 mg/L、7.5 mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L；7.5 mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L、40.0 mg/L、50.0 mg/L，按照樣品方法衍生化后分析，以系列標準溶液濃度為橫坐標，目標化合物的峰面積與內(nèi)標的峰面積的比值為縱坐標，繪制標準曲線。所得方程分別為=0.0005-0.0005,相關(guān)系數(shù)=0.9946；=0.0005-0.0006，相關(guān)系數(shù)=0.9958；=0.0006-0.0006，相關(guān)系數(shù)=0.9992，均滿足GB 27404—2008標準中規(guī)定的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99的要求。線性關(guān)系圖見圖1至圖3。

圖1 低濃度標準溶液線性關(guān)系圖

圖2 中濃度標準溶液線性關(guān)系圖

圖3 高濃度標準溶液線性關(guān)系圖

2.2 加標回收驗證試驗

表1 加標回收測試數(shù)據(jù)

2.3 精密度與準確度驗證試驗

表2 方法精密度、準確度測試數(shù)據(jù)

2.4 方法檢出限、定量限驗證實驗

表3 方法檢出限、定量限測試數(shù)據(jù)

3 結(jié)果

本方法采用高效液相色譜法分別對其方法檢出限、準確度、加標回收等特征指標進行了方法驗證實驗，結(jié)果表明本方法使用設(shè)備的檢出限、定量限均優(yōu)于GB 5009.208—2016標準的規(guī)定。低、中、高三個濃度的加標回收率為：99.3%～101.8% ,低、中、高三條校準曲線的相關(guān)系數(shù)分別為=0.9946；=0.9958；=0.9992，精密度為 0.24%～0.73%,準確度為-1.28%～0.02% ,均滿足GB/T 27404—2008的相關(guān)要求，該方法可以使用。