黃銘奇 花秀鳳 陳銑 王艷娜 朱朝輝

(福州市蔬菜科學(xué)研究所，福州 350111)

冬瓜(Benincasa hispidaCogn.)為葫蘆科冬瓜屬一年蔓生或架生草本植物，是國內(nèi)廣泛種植的瓜類蔬菜。白粉病屬于一種氣傳病害，在我國，瓜類白粉病的病原菌主要為白粉菌屬二孢白粉菌和單囊殼屬單囊殼菌[1-2]。白粉病為冬瓜的常發(fā)病、多發(fā)病，冬瓜在發(fā)生白粉病時(shí)，其莖蔓、葉片、葉柄均會出現(xiàn)白色粉斑，且隨著病情的加重，白色粉斑越來越多，并逐漸布滿葉片和瓜蔓。冬瓜白粉病以在冬瓜生長中后期，田間不通風(fēng)、濕度大的情況下發(fā)生重，若不及時(shí)防治，會造成冬瓜產(chǎn)量和品質(zhì)顯著下降，進(jìn)而給冬瓜生產(chǎn)造成重大影響。目前，冬瓜白粉病防治主要依靠化學(xué)農(nóng)藥，但是，在冬瓜結(jié)果期頻繁使用化學(xué)農(nóng)藥，不僅會污染環(huán)境，而且會影響冬瓜的食用安全。因此，培育抗病冬瓜品種并進(jìn)行種植，是防治冬瓜白粉病最經(jīng)濟(jì)有效的方法，而其中對冬瓜品種進(jìn)行白粉病抗性鑒定是選育抗病冬瓜新品種過程中的重要環(huán)節(jié)。

目前，前人對于冬瓜白粉病已進(jìn)行了較多的研究。例如，趙志祥[3]等采用形態(tài)觀察、致病性測定、分子鑒定和生物信息學(xué)分析相結(jié)合的方法，將黑皮冬瓜白粉病的病原鑒定為蒼耳叉絲單囊殼。肖敏[4-5]等對瓊海市冬瓜白粉病的發(fā)生情況和發(fā)病原因進(jìn)行了調(diào)查分析，并結(jié)合冬瓜白粉病的發(fā)病規(guī)律，提出了對應(yīng)的防治對策；同時(shí)，對黑皮冬瓜白粉病發(fā)生與氣候的關(guān)系進(jìn)行了研究，并結(jié)合黑皮冬瓜白粉病的發(fā)病規(guī)律，提出了對應(yīng)的防治方法。潘禮增[6]等研究了生物制劑依天得對冬瓜白粉病的防效，結(jié)果表明，依天得可濕性粉劑800倍液在第1次施藥后8 d對冬瓜白粉病的防效達(dá)73.16%～83.41%，在第2次施藥后8 d對冬瓜白粉病的防效達(dá)82.30%～83.45%，該藥劑是目前防治冬瓜白粉病效果較好的生物制劑。與此同時(shí)，前人還對甜瓜、黃瓜、苦瓜、南瓜、西瓜、西葫蘆等瓜類作物對白粉病的抗性及其鑒定方法等進(jìn)行了研究[7-16]。例如，張若緯[7]等以薄皮甜瓜自交系“KR-89”為試驗(yàn)材料，研究出一種高效的甜瓜白粉病苗期抗病性鑒定方法。齊振宇[8]等采用人工氣候箱活體接種、離體葉片圓盤接種兩種方法，對6個(gè)甜瓜白粉病病原菌生理小種鑒別寄主進(jìn)行了白粉病接種試驗(yàn)，結(jié)果表明，兩種方法均能夠準(zhǔn)確測定甜瓜白粉病病原菌生理小種鑒別寄主對白粉病2F生理小種的感抗性。杜玉寧[10]等采用盆栽接種試驗(yàn)和田間自然發(fā)病調(diào)查相結(jié)合的方法，進(jìn)行了10個(gè)黃瓜新品種和2個(gè)黃瓜主栽品種對白粉病的抗性鑒定，明確了不同黃瓜品種對白粉病的抗性水平。屈淑平[13]等采用孢子懸浮液噴霧法，將南瓜白粉病病菌接種于13個(gè)通用寄主的葉片上，通過寄主的抗感反應(yīng)來區(qū)分白粉病病原菌生理小種。孫瑞杰[16]等借助室內(nèi)西葫蘆苗期人工噴霧接種法，系統(tǒng)鑒定了58個(gè)西葫蘆品種對白粉病的抗性。然而，目前關(guān)于冬瓜品種對白粉病的抗性鑒定的相關(guān)研究尚未見報(bào)道。因此，筆者采用冬瓜苗期實(shí)驗(yàn)室人工接種鑒定與采瓜期田間自然抗性鑒定相結(jié)合的方法，對2020年配制的12個(gè)小果型冬瓜組合的白粉病抗性進(jìn)行了鑒定，以期從中篩選出抗白粉病能力強(qiáng)的冬瓜組合?，F(xiàn)將相關(guān)試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料為福州市蔬菜科學(xué)研究所于2020年配制的12個(gè)小果型冬瓜組合（引進(jìn)小果型冬瓜種質(zhì)資源，以經(jīng)6代自交純化的穩(wěn)定自交系為親本，于2020年配制而成），編號為2020-1～2020-12。

1.2 冬瓜苗期實(shí)驗(yàn)室人工接種鑒定

1.2.1 鑒定材料準(zhǔn)備

各冬瓜組合的種子均用5%次氯酸鈉溶液消毒10 min，用清水沖洗干凈后，置于30 ℃恒溫培養(yǎng)室中催芽，待其長出胚根后，播種于已消毒過的營養(yǎng)袋育苗基質(zhì)中。出苗后，進(jìn)行室內(nèi)培養(yǎng)（12 h光照、30 ℃，12 h黑暗、20 ℃）。

1.2.2 接種液制備

田間采集自然發(fā)病的早期冬瓜病葉，撣掉葉面上的老孢子，然后置于底部鋪有濕濾紙的白瓷器盤內(nèi)，于室溫25 ℃左右保濕16 h。用毛筆刷取葉片上長出的新鮮孢子置于盛有無菌水的燒杯中，再滴加Tween-20(滴至濃度為0.05%），即配制成約105個(gè)孢子/mL的孢子懸浮液。

1.2.3 接種方法

在各冬瓜組合幼苗1片真葉期，采用噴霧接種法進(jìn)行接種，即使用小型手持噴霧器，將制備好的接種液均勻地噴于幼苗第1片真葉的正面，每個(gè)冬瓜組合重復(fù)3次，每重復(fù)10株幼苗。接種后，幼苗進(jìn)行室內(nèi)培養(yǎng)（先12 h黑暗保濕、25 ℃，然后調(diào)整為12 h光照、28 ℃，12 h黑暗、20 ℃）。

1.2.4 病害調(diào)查

在接種后8 d，各冬瓜組合進(jìn)行白粉病發(fā)病情況調(diào)查，記錄病株數(shù)和病級，并計(jì)算病情指數(shù)。白粉病分級標(biāo)準(zhǔn)及病情指數(shù)計(jì)算方法均參照《冬瓜和節(jié)瓜種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)》。

各冬瓜組合對白粉病的抗性依照病情指數(shù)分為5級：高抗(HR)，病情指數(shù)≤15；抗病(R)，15＜病情指數(shù)≤35；中抗(MR)，35＜病情指數(shù)≤55；感病(S)，55＜病情指數(shù)≤75；高感(HS)，病情指數(shù)＞75。

1.3 冬瓜采瓜期田間自然抗性鑒定

1.3.1 冬瓜種植

12個(gè)小果型冬瓜組合均于2021年3月18日在大棚內(nèi)進(jìn)行播種育苗，于3月30日進(jìn)行定植，每個(gè)冬瓜組合定植20株。定植田塊為福州市蔬菜科學(xué)研究所的試驗(yàn)地，前茬作物為小白菜，畦面覆蓋銀灰色地膜。在各冬瓜組合的生長期間防蟲害不防病害，其他栽培管理措施均按常規(guī)露地栽培進(jìn)行操作。

1.3.2 病害調(diào)查

在各冬瓜組合的第一茬瓜采收后（6月25日），每組合隨機(jī)調(diào)查5株，挑選植株上白粉菌斑最多的5張葉片進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，通過葉片的病情指數(shù)進(jìn)行抗性鑒定。

白粉病分級標(biāo)準(zhǔn)為：0級，全葉無白粉菌斑；1級，白粉菌斑面積占整個(gè)葉面積的5%以下（含5%，下同）；2級，白粉菌斑面積占整個(gè)葉面積的5%～15%；3級，白粉菌斑面積占整個(gè)葉面積的15%～30%；4級，白粉菌斑面積占整個(gè)葉面積的30%～60%；5級，白粉菌斑面積占整個(gè)葉面積的60%以上。

病情指數(shù)計(jì)算方法：病情指數(shù)＝[∑（各病級葉片數(shù)×該病級值）÷（調(diào)查總?cè)~片數(shù)×最高級值）]×100%。

各冬瓜組合對白粉病的抗性級別統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)同1.2.4。

2 結(jié)果與分析

2.1 冬瓜組合苗期實(shí)驗(yàn)室人工接種鑒定

由表1可知，各冬瓜組合的白粉病病情指數(shù)在13.3～76.4之間。其中，組合2020-3對白粉病表現(xiàn)為高抗，組合2020-2、2020-4、2020-5、2020-7、2020-9、2020-11、2020-12對白粉病均表現(xiàn)為抗病，組合2020-6、2020-10對白粉病均表現(xiàn)為中抗，組合2020-8對白粉病表現(xiàn)為感病，組合2020-1對白粉病表現(xiàn)為高感。

表1 冬瓜組合對白粉病的抗性鑒定結(jié)果（苗期實(shí)驗(yàn)室人工接種鑒定）

2.2 冬瓜組合采瓜期田間自然抗性鑒定

由表2可知，各冬瓜組合均有不同程度的白粉病發(fā)生，病情指數(shù)在9.4～68.2之間。其中，組合2020-3對白粉病表現(xiàn)為高抗，組合2020-2、2020-4、2020-5、2020-7、2020-9、2020-11、2020-12對白粉病均表現(xiàn)為抗病，組合2020-6、2020-10對白粉病均表現(xiàn)為中抗，組合2020-1、2020-8對白粉病均表現(xiàn)為感病，沒有組合對白粉病表現(xiàn)為高感。

表2 冬瓜組合對白粉病的抗性鑒定結(jié)果（采瓜期田間自然抗性鑒定）

2.3 兩種方法的鑒定結(jié)果比較

比較兩種方法的鑒定結(jié)果，僅組合2020-1的抗性鑒定結(jié)果有所差異（在苗期實(shí)驗(yàn)室人工接種鑒定中，該組合的白粉病病情指數(shù)為76.4，抗性鑒定表明該組合對白粉病表現(xiàn)為高感；在采瓜期田間自然抗性鑒定中，該組合的白粉病病情指數(shù)為68.2，抗性鑒定表明該組合對白粉病表現(xiàn)為感?。?，但在所有組合中，該組合的白粉病病情指數(shù)均為最大；其他組合的抗性鑒定結(jié)果表現(xiàn)均保持一致，僅是白粉病病情指數(shù)稍有變化?？紤]到這兩種方法在接種條件上差別較大，且白粉病分級標(biāo)準(zhǔn)也不一致，計(jì)算出的病情指數(shù)必然有所差異。因此，經(jīng)綜合考慮，可以初步認(rèn)為本試驗(yàn)采用的兩種鑒定方法對冬瓜組合的白粉病抗性鑒定結(jié)果基本一致。值得注意的是，冬瓜抗白粉病品種選育的目的是品種在生產(chǎn)上表現(xiàn)出抗病，故在冬瓜新品種的育種實(shí)踐中，可綜合應(yīng)用兩種方法進(jìn)行抗性鑒定，以進(jìn)行鑒定結(jié)果的互相驗(yàn)證。

3 結(jié)論與討論

白粉病是冬瓜生產(chǎn)上的主要病害，冬瓜白粉病病菌在溫度和濕度適宜時(shí)會產(chǎn)生子囊孢子，并主要通過氣流傳播侵染。培育抗病冬瓜品種并進(jìn)行種植，是防治冬瓜白粉病最經(jīng)濟(jì)有效的方法，而其中對冬瓜品種進(jìn)行白粉病抗性鑒定是選育抗病品種的重要環(huán)節(jié)。

試驗(yàn)結(jié)果表明，不同冬瓜組合對白粉病的抗性存在巨大差異。在本試驗(yàn)中，冬瓜苗期實(shí)驗(yàn)室人工接種鑒定結(jié)果表明，12個(gè)小果型冬瓜組合的白粉病病情指數(shù)在13.3～76.4之間，鑒定出高抗組合1個(gè)、抗病組合7個(gè)、中抗組合2個(gè)、感病和高感組合各1個(gè)；冬瓜采瓜期田間自然抗性鑒定結(jié)果表明，12個(gè)小果型冬瓜組合的白粉病病情指數(shù)在9.4～68.2之間，鑒定出高抗組合1個(gè)、抗病組合7個(gè)、中抗組合2個(gè)、感病組合2個(gè)。經(jīng)綜合考慮，可以初步認(rèn)為這兩種鑒定方法對冬瓜組合的白粉病抗性鑒定結(jié)果基本一致。因此，采用冬瓜苗期實(shí)驗(yàn)室人工接種鑒定與采瓜期田間自然抗性鑒定相結(jié)合，能為冬瓜抗白粉病育種提供技術(shù)支持。

在本試驗(yàn)中，冬瓜苗期實(shí)驗(yàn)室人工接種鑒定是將白粉病病菌孢子直接接種在冬瓜幼苗葉片上，且各冬瓜組合的幼苗生長環(huán)境條件一致，故鑒定結(jié)果能較好地體現(xiàn)各冬瓜組合的抗白粉病能力。而冬瓜采瓜期田間自然抗性鑒定的結(jié)果與田間栽培管理好壞、周圍環(huán)境有無白粉病病菌息息相關(guān)。在苗期，田間通風(fēng)透光條件較好，各冬瓜組合的白粉病發(fā)生較少，隨著瓜蔓的生長，田間通風(fēng)透光性變差，且濕度增大，在周圍環(huán)境有白粉病病菌的現(xiàn)實(shí)下（試驗(yàn)地里的其他瓜類有白粉病發(fā)生），大部分冬瓜組合開始發(fā)生白粉病。鑒于白粉病通常先從老葉發(fā)生，隨后逐漸向新葉和莖蔓擴(kuò)展，故本試驗(yàn)中各冬瓜組合及時(shí)剪除了植株下部不見光的老葉，并保證了良好一致的栽培管理?xiàng)l件（如充足的肥水）。從調(diào)查結(jié)果來看，不同冬瓜組合對白粉病的抗性仍存在巨大差異。其中，高抗白粉病的冬瓜組合的老葉上零星分布1～5個(gè)白色模糊的小菌斑，新葉抽生正常，新葉和莖蔓沒有發(fā)現(xiàn)菌斑，植株生長良好，產(chǎn)量未受影響；高感白粉病的冬瓜組合的老葉和莖蔓上均布滿白粉菌斑（甚至連接成片），新葉長出少，葉片枯黃，結(jié)瓜少，瓜生長緩慢，瓜皮上有白粉菌斑，瓜的商品品質(zhì)變差。