朱雪丹，曾繁文，潘學(xué)情，馬君艷，張守全

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，國家生豬種業(yè)工程技術(shù)研究中心，廣東省農(nóng)業(yè)動(dòng)物基因組學(xué)與分子育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州，510642）

促卵泡激素（Follicle-Stimulating Hormone，F(xiàn)SH）是哺乳動(dòng)物垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素（Glycoprotein Hormone，GPH），對(duì)卵巢卵泡發(fā)育和睪丸精子發(fā)生至關(guān)重要，是輔助生殖中不可或缺的促性腺激素。FSH 與促黃體激素（Luteinizing Hormone，LH）、絨毛膜促性腺激素（Chorionic Gonadotropin，CG）同為異二聚體，屬于GPH 家族，擁有一個(gè)共同的由92 個(gè)氨基酸殘基組成的亞基和1 個(gè)決定受體特異性的亞基。兩亞基只有組裝在一起才具有活性，F(xiàn)SH完全缺陷的模型小鼠中，雌性卵巢功能嚴(yán)重受損，表現(xiàn)出不孕，雄性雖可育但支持細(xì)胞數(shù)量減少一半，精子密度也嚴(yán)重降低。

天然FSH 主要通過腎臟、肝臟被滅活，在外周血中的半衰期為2～4 h。為了提高哺乳動(dòng)物的繁殖效率，臨床上需要長(zhǎng)效的FSH 以滿足周期卵泡的發(fā)育與成熟。20 世紀(jì)以來，隨著基因重組技術(shù)和高精度細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的問世與推廣，研究者在體外成功構(gòu)建了不同類型的重組FSH（Recombinant FSH，rFSH），它們具有成分單一、活性高、半衰期長(zhǎng)、生產(chǎn)成本低、產(chǎn)品批次穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。研究表明，通過糖基化修飾或添加具有rFSH 保護(hù)作用的片段均可增加其在體內(nèi)的穩(wěn)定性與高效性。本綜述主要圍繞FSH 的信號(hào)通路及FSH 的N-糖基化修飾、O-糖基化修飾、新生兒可結(jié)晶片段受體（Neonatal Fragment Crystallizable Receptor，F(xiàn)cRn）和聚乙二醇（Polyethylene Glycol，PEG）化5 方面來敘述rFSH 在雌性哺乳動(dòng)物輔助生殖中的作用。

1 促卵泡激素的分泌調(diào)控

FSH 的合成包括亞基的轉(zhuǎn)錄、翻譯、組裝、糖基化修飾等復(fù)雜步驟，糖鏈的合成始于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，然后在高爾基體中修飾成為有活性的FSH，最終由腺垂體分泌。垂體FSH 的分泌嚴(yán)格受下丘腦促性腺激素釋放激素（Gonadotropin-Releasing Hormone，GnRH）的脈沖頻率調(diào)節(jié)，較低頻率的GnRH 脈沖主要通過環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白（cAMP-Response Element Binding Protein，CREB）信號(hào)途徑刺激啟動(dòng)子優(yōu)先產(chǎn)生FSH，較高頻率的脈沖主要調(diào)控垂體分泌LH。垂體分泌的FSH 通過血液循環(huán)與性腺上FSH 受體（FSH Receptor，F(xiàn)SHR）結(jié)合，隨后Gs 蛋白解耦連引發(fā)FSHR 脫敏，-抑制蛋白內(nèi)化，觸發(fā)下游細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（Extracellular Signal-Regulated Kinase，ERK）/ 絲裂原活化蛋白激酶（Mitogen-Activated Protein Kinase，MAPK）和磷脂酰肌醇-3-激酶（Phosp hatidylinositol 3-Kinase，PI3K）/蛋白激酶B（Protein Kinase B，AKT）2 條中央調(diào)控通路，刺激靶腺激素（雄激素、雌激素、孕激素）分泌，從而調(diào)控哺乳動(dòng)物的繁殖活動(dòng)，例如雌性卵泡發(fā)育和雄性精子發(fā)生。通路中的重要信息分子PI3K、MAPK 被抑制后，F(xiàn)SH 誘導(dǎo)的卵泡生長(zhǎng)也會(huì)被中斷。在卵巢周期中，性腺類固醇激素、抑制素等也與GnRH 共同參與FSH 的分泌調(diào)控，黃體退化導(dǎo)致血清雌二醇（Estradiol，E）、孕酮、抑制素A 降低，GnRH 的抑制作用解除，隨后GnRH 脈動(dòng)調(diào)控FSH 分泌，當(dāng)FSH 水平穩(wěn)定后，卵泡顆粒細(xì)胞產(chǎn)生的E、抑制素B 再負(fù)反饋調(diào)節(jié)FSH 的分泌，當(dāng)FSH 降低到閾值時(shí)，除優(yōu)勢(shì)卵泡外，其他大部分卵泡都會(huì)發(fā)生閉鎖。添加外源性FSH 可維持血清FSH 高于閾值，讓更多的卵泡有機(jī)會(huì)生長(zhǎng)發(fā)育，也讓更多的顆粒細(xì)胞可以充分發(fā)揮分泌類固醇的功能，以增強(qiáng)對(duì)卵巢的輔助調(diào)控作用。

2 糖基化

蛋白質(zhì)的糖基化主要包括N-糖基化和O-糖基化2種類型。糖基化修飾可以讓一些敏感的氨基酸位點(diǎn)被保護(hù)起來，增加蛋白的穩(wěn)定性和生物活性。FSH 分子表面有多種不同類型的N-糖基化，如巖藻糖、硅鋁酸、唾液酸等，其中唾液酸的含量與類型主要通過影響腎臟的代謝進(jìn)而影響FSH 的半衰期。因此，為獲得長(zhǎng)效穩(wěn)定功能的rFSH，可以通過調(diào)整糖基化的數(shù)量及其類型來實(shí)現(xiàn)。

2.1 N-糖基化 天然的全糖FSH 亞基上存在4 個(gè)N-糖基化位點(diǎn)，亞基上有2 個(gè)，分別在Asn和Asn位，主要調(diào)控FSH 的分泌、亞基穩(wěn)定性及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)；另外2 個(gè)在亞基的Asp和Asp位，主要調(diào)控FSH 的組裝、半衰期與生物活性。通常純化的人類垂體或尿源性FSH（Urine FSH，uFSH）會(huì)存在亞基不同程度的糖基化，以亞基分子量大小來命名，其中同時(shí)含有Asn和Asp位糖基化的是全糖FSH，含量最多；只有Asn或Asp位糖基化的是低糖FSH或FSH，統(tǒng)稱FSH；完全沒有糖基化的是FSH，不能被組裝和分泌，含量最少。隨著年齡增長(zhǎng)，F(xiàn)SH 的糖基化程度越高，即青年階段主要以FSH為主，絕經(jīng)后主要以全糖FSH（uFSH）為主。

然而，并非糖基化程度越高，其生物活性越高，F(xiàn)SH在體內(nèi)至少能產(chǎn)生類似于FSH的生物活性。雖然2 種rFSH 糖型都能誘導(dǎo)體內(nèi)卵泡發(fā)育，但FSH可通過更強(qiáng)的作用激活RTK、PI3K/AKT 和MAPK/ERK 信號(hào)來加強(qiáng)對(duì)優(yōu)勢(shì)卵泡的選擇和對(duì)顆粒細(xì)胞的增殖作用。鑒于人與豬生理上的相似性，有團(tuán)隊(duì)首次在豬原代顆粒細(xì)胞中比較了2 種糖型的生物活性，結(jié)果表明低糖基化rFSH 在刺激cAMP 積累、誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子（CREB、-連環(huán)蛋白）磷酸化、調(diào)控關(guān)鍵靶基因表達(dá)及類固醇合成方面都有更強(qiáng)更顯著的作用。因此，F(xiàn)SH已被證明是最活躍最有效的糖型，這為以后長(zhǎng)效rFSH 分子的設(shè)計(jì)提供了參考。

FSH 根據(jù)N-糖基化糖型及末端唾液酸組成的差異，衍生了4 種rFSH，被西方國家批準(zhǔn)上市的有3 種，分別是Follitropin Alfa（Gonal-F）、Follitropin Bate（Puregon）和Follitropin Delta（Rekovelle,也 叫FE 999049），第4 種Follitropin Epsilop（Glycotope）還在III 期臨床階段。前2 種由中國倉鼠CHO 細(xì)胞系分泌，只含有-2，3-唾液酸，后2 種由人類PER C6 細(xì)胞系分泌，同時(shí)含有-2，3-唾液酸和a-2，6-唾液酸。不同的唾液酸類型可能會(huì)導(dǎo)致不同的體內(nèi)清除率，肝臟去唾液酸糖蛋白受體（Asialoglycoprotein Receptor，ASGPR）對(duì)-2，6-唾液酸有很強(qiáng)的親和力，會(huì)導(dǎo)致含-2,6-唾液酸的rFSH 以較快的速度被肝臟滅活，而-2，3-唾液酸則會(huì)阻滯ASGPR 的識(shí)別作用，2 種唾液酸按合適的比例添加可最大限度地發(fā)揮其作用。在嚙齒動(dòng)物中，肝臟ASGPR 的表達(dá)量顯著高于人類，因此高-2，6-唾液酸含量的rFSH 在大鼠體內(nèi)的效力估計(jì)不能準(zhǔn)確地反映在人體中，這就導(dǎo)致Follitropin Delta 不能像其他3 種rFSH 一樣按生物活力（IU）給藥，而只能按質(zhì)量（μg）給藥。目前還沒有報(bào)道公開指明rFSH、rFSH與這4 種rFSH 確切的關(guān)系，只有相關(guān)研究通過蛋白免疫印跡證明Gonal-F具有類似于FSH的糖型結(jié)構(gòu)。

近30 年來，F(xiàn)ollitropin Alfa 和Follitropin Bate 在臨床上已被反復(fù)證明對(duì)體外受精（In Vitro Fertilization，IVF）/卵泡漿內(nèi)單精子顯微注射（Intracytoplasmic Sperm Injection，ICSI）的控制性促排卵（Controlled Ovarian Stimulation，COS）幾乎有相同的臨床效果。Follitro pin Delta 和Follitropin Epsilop 是最近幾年開發(fā)的新rFSH制劑。在IVF/ICSI 患者中，10 μg/d Follitropin Delta劑量可提供與150 IU/d Follitropin Alfa 相似的卵巢反應(yīng)。最近有研究依據(jù)抗繆勒氏管激素（Anti-Müllerian Hormone，AMH）和年齡的不同進(jìn)行分組，比較個(gè)體化固定Follitropin Delta 給藥方式與常規(guī)的Gonal-F給藥方式是否有一樣的效果，結(jié)果表明接受Follitropin Delta 治療的女性有更顯著的卵母細(xì)胞回收率、陽性HCG 率、臨床妊娠率和活產(chǎn)率，不僅如此，F(xiàn)ollitropin Delta 還可大幅度降低早期卵巢過度刺激綜合征（Ovarian Hyperstimulation Syndrome，OHSS）和預(yù)防性干預(yù)的發(fā)生，并且也不會(huì)引起免疫原性與不良反應(yīng)的增加。鑒于Follitropin Delta 突出的臨床效果與安全性，F(xiàn)ollitropin Delta 已被證明可廣泛用于人類女性的不孕治療中。Follitropin Epsilop 是一種全新的具有唾液酸殘基類型優(yōu)化的rFSH。在I 期臨床試驗(yàn)中，F(xiàn)ollitropin Epsilop 與Glonal-f有相似的安全性和藥代動(dòng)力學(xué)特性，并且在藥效動(dòng)力學(xué)（卵泡生長(zhǎng)、抑制素B、E）方面，無論單劑量還是多劑量給藥，F(xiàn)ollitropin Epsilop 都能表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢(shì)。II 期臨床結(jié)果也表明，在長(zhǎng)效GnRH 方案中，75 IU 的Follitropin Epsilop 可產(chǎn)生類似于150 IU Glonal-f的效果，112.5 IU Follitropin Epsilop 劑量誘導(dǎo)的激素水平（雌激素、抑制素B、孕酮）、優(yōu)勢(shì)卵泡數(shù)量和卵母細(xì)胞回收率等方面也比150 IU Glonal-f的誘導(dǎo)效果更顯著。低劑量能產(chǎn)生更多的優(yōu)勢(shì)卵泡，這可能與高水平抑制素B 的表達(dá)有關(guān)，因?yàn)橐种扑谺 可以通過內(nèi)分泌和旁分泌的方式參與優(yōu)勢(shì)卵泡的選擇。盡管有關(guān)Follitropin Epsilop 的更多評(píng)估還在臨床測(cè)試階段，但依據(jù)目前的這些結(jié)果，仍可大膽推測(cè)Follitropin Epsilop 在婦女的輔助生殖中將是一種非常有前景的FSH 或uFSH 替代品。

2.2 O-糖基化 CG 是一種胎盤GPH，包含馬絨毛膜促性腺激素，也叫孕馬血清促性腺激素（Pregnant Mare Serum Gonadotropin，PMSG），以及人絨毛膜促性腺激素（Human Chorionic Gonadotropin，HCG），分別由馬屬動(dòng)物和人胎盤絨毛膜細(xì)胞分泌，CG羧基末端有不同的延伸肽（Carboxyl-Terminal Peptide，CTP），其中人CTP 含有4 個(gè)O-糖基化，馬屬類CTP 含有12個(gè)O-糖基化。PMSG 是豬繁殖管理的常用產(chǎn)品，單次注射就能滿足母豬發(fā)情排卵的需求。但PMSG 原料來源受限，提取純化難度高且效價(jià)低，存在潛在的病毒傳播風(fēng)險(xiǎn)，加之PMSG 天然含有FSH 和LH 2 種活性成分，且比例固定，無法將2 種活性成分分離，這限制了其應(yīng)用范圍。此外，PMSG 刺激后缺陷胚胎和OHSS 所占比例較高，因此，目前尚未允許PMSG 運(yùn)用于人類，在動(dòng)物中也不宜廣泛運(yùn)用，從而逐漸被rFSH所取代。

CTP 的存在延長(zhǎng)了HCG 的半衰期，被截?cái)嗟腍CG117 不僅半衰期只有HCG-CTP 的三分之一，還喪失了HCG-CTP 獨(dú)特的生物學(xué)活性。Fares 等利用基因重組技術(shù)成功制得FSH-CTP 和FSH-（CTP）2種二聚體，發(fā)現(xiàn)重組的FSH不僅不會(huì)影響FSH 的組裝、分泌、受體親和力、類固醇合成等能力，還能顯著提升FSH 的半衰期（約3 倍）和誘導(dǎo)大鼠顆粒細(xì)胞產(chǎn)生更多雌激素（3～5 倍）。目前，唯一被批準(zhǔn)上市的長(zhǎng)效FSH制劑是Corifollitropin Alfa（CFA，也 叫Elonva），它利用基因重組技術(shù)把HCG-的CTP 融合到FSH的羧基端，然后再與亞基共轉(zhuǎn)染CHO 細(xì)胞所得，這種FSH-CTP 可提供大約68 h 的人體內(nèi)半衰期，能最大程度上增加不孕婦女的容受性。

單次Elonva給藥完全可以替代每日rFSH 給藥方案，甚至還可能產(chǎn)生更好的臨床效果。雖然長(zhǎng)效rFSH 的使用可能也會(huì)導(dǎo)致較高的OHSS 風(fēng)險(xiǎn)，但臨床數(shù)據(jù)顯示，在連續(xù)周期中使用Elonva不會(huì)引起OHSS、免疫原性反應(yīng)、超敏反應(yīng)等不良反應(yīng)比率的增加，同時(shí)也不會(huì)降低患者的妊娠率，并且還具有良好的耐受性。Elonva給藥也存在一定的靈活性，對(duì)于卵巢高反應(yīng)者和正常反應(yīng)者，Elonva推遲2 d 或4 d 給藥不會(huì)影響卵母細(xì)胞的回收率和活產(chǎn)率，但卵巢高反應(yīng)者可能會(huì)有較高的OHSS 風(fēng)險(xiǎn)，而對(duì)于卵巢反應(yīng)不良者，為避免卵巢周期的消失，必須嚴(yán)格按時(shí)給藥。另外，不同的COS 治療方案可能會(huì)產(chǎn)生不同的臨床效果。給予高齡低卵巢反應(yīng)者rFSH 和Elonva治療時(shí)發(fā)現(xiàn)，Elonva的長(zhǎng)激動(dòng)劑方案在所有的臨床參數(shù)中，如卵母細(xì)胞回收率、受精率、胚胎移植率、持續(xù)妊娠率、懷孕率等，均顯示出了最好的效果；與無Elonva拮抗組相比，Elonva短效拮抗劑方案雖有效果，但并不顯著。然而，Elonva并非對(duì)所有的低卵巢反應(yīng)者都有一樣的效果，對(duì)于竇卵泡計(jì)數(shù)（Antral Follicle Count，AFC）>5 的患者，Elonva與每日促性腺激素一樣有效，而對(duì)于AFC ≤5 的患者，其效果可能不如每日促性腺激素。因此，使用促性腺激素治療卵巢反應(yīng)不佳的婦女可能需要根據(jù)患者的即時(shí)身體狀況而定，相同的給藥方案很可能會(huì)導(dǎo)致不同的臨床效果。另一個(gè)值得注意的方面是，患者的體重指數(shù)對(duì)于COS 的治療也是至關(guān)重要，肥胖或高齡的女性可能需要更多的促性腺激素才能達(dá)到理想的臨床效果，這就需要臨床醫(yī)生加強(qiáng)對(duì)OHSS 的監(jiān)控，以避免嚴(yán)重不良反應(yīng)的發(fā)生。

盡管FSH 主要應(yīng)用于女性的輔助生殖，但近年也有針對(duì)男性特發(fā)性不育的報(bào)道。在雄性中，不同的rFSH 也可能導(dǎo)致不同的治療效果。研究者通過體外評(píng)估不同rFSH 與睪酮組合對(duì)青年豬支持細(xì)胞的不同效果，辯證性得出Gonal-F可治療低性腺激素引起的繼發(fā)性生精功能減退，F(xiàn)ollitropin Bate 可用于改善精子質(zhì)量和治療精子細(xì)胞的停滯，uFSH 可用于治療正常性腺激素下的特發(fā)性不育癥。長(zhǎng)效Elonva也能用于人類男性性腺功能減退的治療，相比常規(guī)rFSH 藥物，Elonva不僅能有效維持內(nèi)分泌水平趨于正常范圍，還能顯著增加睪丸體積和精子細(xì)胞數(shù)量，這表明Elonva在男性中也可以安全有效的替代每日rFSH 給藥。

3 可結(jié)晶片段融合

在肝代謝和血液循環(huán)中，功能蛋白主要因脫離受體介質(zhì)而被溶酶體識(shí)別降解，而機(jī)體循環(huán)中就存在一些內(nèi)源性受體，可緩解功能蛋白的降解作用，如FcRn 受體。FcRn 受體普遍存在于內(nèi)皮細(xì)胞、胎盤、腎臟、肝臟、肺等組織中，并通過pH 強(qiáng)依賴性與免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）的Fc 區(qū)結(jié)合，酸性環(huán)境下，F(xiàn)cRn 與Fc 區(qū)具有很強(qiáng)的親和力，生理pH 下，F(xiàn)cRn對(duì)Fc 區(qū)親和力降低，F(xiàn)c 融合蛋白脫離FcRn 的保護(hù)而被免疫細(xì)胞識(shí)別，隨后暴露于酶解系統(tǒng)中失活。在FcRn 的保護(hù)下，人血清IgG1、IgG2、IgG4 的半衰期可長(zhǎng)達(dá)19 d 左右。Fc 融合蛋白就是利用Fc 與FcRn的親和力來延長(zhǎng)功能蛋白的循環(huán)半衰期。迄今為止，已有多種Fc 融合產(chǎn)品被批準(zhǔn)用于人類疾病的臨床治療中。但FSH-Fc 融合蛋白目前主要用在畜牧生產(chǎn)中。

陳鴻雨通過小鼠毒性試驗(yàn)對(duì)廣州威生醫(yī)藥科技有限公司批號(hào)為20160704 的FSH-Fc 融合蛋白的安全性進(jìn)行了評(píng)估，證明了FSH-Fc 蛋白可重復(fù)大劑量給藥且無毒性和致畸作用。KN015 是另一種FSH-Fc 融合蛋白異二聚體，通過基因融合技術(shù)讓FSH與Fc 結(jié)構(gòu)域融合，然后與FSH共轉(zhuǎn)染CHO 細(xì)胞而產(chǎn)生。雖然KN015 體外試驗(yàn)顯示出較差的藥代動(dòng)力學(xué)，但KN015在大鼠和食蟹猴體內(nèi)可被緩慢吸收和降解，它有長(zhǎng)于Glonal-F10～13 倍的體內(nèi)半衰期，并且體內(nèi)對(duì)卵巢增重、E水平、顆粒細(xì)胞增殖等的刺激優(yōu)勢(shì)顯著強(qiáng)于Glonal-F，另外KN015 對(duì)大鼠優(yōu)勢(shì)卵泡的選擇作用也更有優(yōu)勢(shì)。串聯(lián)的Fc-FSH 能克服亞基組裝和解離的局限性，F(xiàn)c-gFSH-CTP-FSH就是一種豬FSH（Porcine FSH，pFSH）重組的高分子串聯(lián)Fc 融合蛋白，包含CTP 和Fc 2 個(gè)半衰期有效延長(zhǎng)的功能域，能被穩(wěn)定分泌和表達(dá)，該rFSH 雖然有較長(zhǎng)的半衰期，但在體外刺激雞顆粒細(xì)胞增殖及其E分泌方面的效果并不及商業(yè)化的綿羊FSH 制劑。

FSH-Fc 融合蛋白目前尚未用于女性的不孕治療，推測(cè)這可能與人類的卵泡周期有關(guān)。Fc 與FcRn 之間強(qiáng)的酸堿依賴性對(duì)于增強(qiáng)Fc 融合蛋白的半衰期和生物活性至關(guān)重要，研究人員已經(jīng)通過合理設(shè)計(jì)和不同組合方法開發(fā)了多種具有增強(qiáng)pH 選擇性的Fc 變體，這些變體對(duì)于治療人類免疫病、病毒性疾病和癌癥有很好的臨床效果。為進(jìn)一步獲得信息量，未來可能需要開發(fā)更強(qiáng)大的體外分析系統(tǒng)來監(jiān)測(cè)融合蛋白在血管循環(huán)中吸收與代謝情況，以便更加精準(zhǔn)調(diào)控Fc 變體在結(jié)構(gòu)上的細(xì)微變化，從而讓Fc 融合蛋白在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮強(qiáng)大治療效果。

4 聚乙二醇化

PEG 與蛋白質(zhì)、肽、寡核苷酸和納米粒子的結(jié)合是一種成熟的技術(shù)，已被廣泛用作生物偶聯(lián)劑，可以保護(hù)功能蛋白免受腎臟的清除。Uchiyama 等首次對(duì)pFSH 進(jìn)行化學(xué)修飾，pFSH 和PEG 的不同比例會(huì)導(dǎo)致不同的FSH-PEG 分子量和生物活性，體外試驗(yàn)表明pFSH 比PEG 以1:30 的比例對(duì)牛卵丘細(xì)胞擴(kuò)張效果最好，但不能有效降低該蛋白的免疫原性。此外，由于PEG 的不可降解性和免疫原性，很可能會(huì)對(duì)腎臟和肝臟造成不同程度的損傷。

最近的一項(xiàng)研究顯示，不可分解PEG 衍生物PEG的分子量增加可減輕甚至消除加速血液清除（Accelera ted Blood Clearance，ABC）現(xiàn)象和機(jī)體免疫反應(yīng)，同時(shí)還可確保長(zhǎng)的半衰期。這為以后FSH-PEG 藥物的開發(fā)提供借鑒，可以通過調(diào)整PEG 的結(jié)構(gòu)和分子量來避免原本PEG 可能會(huì)帶來的種種弊端。因此，了解PEG 的特性對(duì)于研究者和臨床醫(yī)生開發(fā)和運(yùn)用新型藥物載體以確保最佳治療效果是至關(guān)重要的。

5 結(jié)語

近年來，隨著生物技術(shù)的快速發(fā)展與人類的需求，治療性促性腺激素藥物的運(yùn)用已越來越廣泛。然而，由于天然FSH 越來越受動(dòng)物屠宰年齡以及組織材料來源的限制，加之常規(guī)rFSH 或uFSH 的治療效果并不明顯，這往往需要頻繁給藥才能維持卵泡發(fā)育或精子發(fā)生所需的有效閾值，因此開發(fā)新型rFSH 已成為輔助生殖藥物研究的焦點(diǎn)。目前大多數(shù)rFSH 制劑主要用于畜牧業(yè)的育種工作中，如Fc-FSH、PEG-FSH 等，它們通過基因工程在體外重組，然后利用細(xì)胞工藝擴(kuò)大生產(chǎn)，再通過蛋白純化技術(shù)生產(chǎn)高純度的rFSH 制劑，這與傳統(tǒng)uFSH 相比，不僅成分單一、活性高，產(chǎn)品批次穩(wěn)定性也好，而且還不含病毒微生物和內(nèi)毒素，從而避免了疾病的傳播。在歐美國家已有多種rFSH 成功上市，如Follitropin Alfa、Follitropin Bate、Follitropin Delta 和Corifollitropin Alfa，它們各有其特點(diǎn)，并都有顯著的臨床效果。Corifollitropin Alfa 是用于人類臨床中唯一的長(zhǎng)效rFSH 制劑，它可以代替常規(guī)rFSH 制劑7 d 每日1 次給藥，但仍需要與其他促性腺激素配合使用才能維持人類10 d 左右的卵泡周期，并且很可能引發(fā)患者產(chǎn)生不良反應(yīng)。總之，前人對(duì)輔助生殖技術(shù)已經(jīng)做出了很多貢獻(xiàn)，促性腺激素對(duì)整個(gè)生殖生理乃至整個(gè)機(jī)體的調(diào)控仍然是一個(gè)具有挑戰(zhàn)的難題，未來對(duì)rFSH 的探索還有很長(zhǎng)一段路要走。