李郁茹，趙亞芳，陳玉民，常閏然，田雨，張盈，羅娟，孔慧，趙琰，屈會(huì)化

（1.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100029；2.北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，北京 100029；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，北京 100029）

肝臟是許多生理過(guò)程的關(guān)鍵樞紐，具有代謝、解毒和造血等多種重要的功能[1]。當(dāng)發(fā)生損傷時(shí)，為了保障人體功能的正常運(yùn)行，需要快速有效地修復(fù)該器官的損傷。急性肝損傷（acute liver injury，ALI）通常由病毒或細(xì)菌感染、化學(xué)毒物、藥物中毒、給藥不當(dāng)?shù)仍蛞餥2]，臨床表現(xiàn)為急性肝功能障礙[3-4]。若不能及時(shí)清除病因或給予適當(dāng)?shù)乃幬镏委?，可繼而發(fā)展為急性肝性腦病[4]，該病具有預(yù)后差、死亡率高等特點(diǎn)[5]。臨床上用于預(yù)防和治療肝臟疾病的藥物多為化學(xué)合成藥物，如皮質(zhì)類(lèi)固醇、干擾素等。這些藥物存在價(jià)格高、不良反應(yīng)大等問(wèn)題[4,6]。因此，開(kāi)發(fā)一種安全、有效的防治急性肝損傷的藥物具有重大意義。

納米顆粒（nanoparticles）為現(xiàn)今研究的熱點(diǎn)之一。碳點(diǎn)是納米顆粒中一類(lèi)粒徑在1～10 nm之間的類(lèi)球形顆粒，因具有高水溶性、低毒性、良好的生物相容性[7]等特點(diǎn)，其在藥物傳送[8]、熒光探針[9]、生物成像[10]、抗菌[11]和抗病毒[12]等諸多領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用。碳點(diǎn)的制備方法“高溫?zé)峤夥ā迸c炭藥的制備方法“高溫炭化法”有異曲同工之妙?；诖?，本團(tuán)隊(duì)將納米研究技術(shù)和方法引入到中藥炭藥的研究中并從多種炭藥中分離出了類(lèi)似于碳點(diǎn)的物質(zhì)，將其命名為“納米類(lèi)成分（nanocomponents）”。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，不同炭源和制備條件所制備出的納米類(lèi)成分由于粒徑、官能團(tuán)等性質(zhì)的差異而具有不同的生物活性，如石榴皮炭納米類(lèi)成分具有止瀉作用[13]，甘草炭納米類(lèi)成分具有抗應(yīng)激性胃潰瘍作用[14]，牡丹皮炭納米類(lèi)成分具有涼血止血作用[15]，枳實(shí)炭納米類(lèi)成分具有抗痛風(fēng)作用[16]等。這為中藥炭藥的研究提供了一種全新的思路。

射干（Belamcandae Rhizoma，BR），為鳶尾科射干屬植物射干Belamcanda chinensis (L.)DC.的干燥根莖，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[17]。射干的燒制最早載于《金匱要略》鱉甲煎丸方，用以治療癥瘕積聚、久瘧瘧母等疾病[18]。經(jīng)文獻(xiàn)考證，仲景時(shí)期的“燒”實(shí)則為“燒灰存性”[19]。“燒灰存性”為中藥制炭的第一個(gè)炮制質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[20]。鱉甲煎丸條文中記載的射干“燒”實(shí)則為射干炭?，F(xiàn)代研究表明，鱉甲煎丸在臨床上常用于肝炎、肝纖維化、肝癌等肝系疾病的治療[21]。為了探索原方中射干的炮制內(nèi)涵，本研究基于前期的研究基礎(chǔ)，首次利用射干作為前驅(qū)體，采用高溫?zé)峤夥ㄖ苽涑隽艘环N新型的納米類(lèi)成分——射干炭納米類(lèi)成分（Belamcandae Rhizoma Carbonisatum nanocomponents，BRC-NCs），并利用透射電子顯微鏡（transmission electron microscopy，TEM）、紫外-可見(jiàn)分光光度法（ultraviolet-visible spectrophotometer，UV-vis）、傅里葉變換紅外光譜（fourier transform infrared spectroscopy，F(xiàn)T-IR）、熒光光譜和X-射線光電子能譜分析（X-ray photoelectron spectroscopy，XPS）對(duì)其進(jìn)行了表征分析。此外，本研究利用CCl4所致急性肝損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)研究其對(duì)于肝臟的保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 5周齡SPF級(jí)健康雄性昆明小鼠42只，體質(zhì)量（30.0±2.0）g，動(dòng)物質(zhì)量合格證編號(hào)：No.110324201104285675，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均購(gòu)于斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京）2019-0010。實(shí)驗(yàn)期間小鼠均飼養(yǎng)于同一環(huán)境下，保持室溫（24.0±1.0）℃，空氣濕度55%～65%，環(huán)境安靜，小鼠自由進(jìn)食進(jìn)水，明、暗12 h循環(huán)飼養(yǎng)。本實(shí)驗(yàn)中小鼠均為脫頸處死，實(shí)驗(yàn)操作符合一般動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理學(xué)原則，經(jīng)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 藥物與試劑 射干（批號(hào)：190628003），經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)趙琰教授鑒定，為鳶尾科植物射干Belamcanda chinensis（L.）DC.的干燥根莖，采購(gòu)于北京仟草中藥飲片有限公司，生產(chǎn)日期為2019年6月28日；聯(lián)苯雙酯滴丸（規(guī)格：1.5 mg，批號(hào)：H11020980）購(gòu)于北京協(xié)和藥廠；生理鹽水（批號(hào)：SD21022717）購(gòu)于山東華魯制藥有限公司；四氯化碳（CCl4）溶液（批號(hào)：KYGG943）購(gòu)于北京伊諾凱科技有限公司；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）測(cè)定試劑盒（批號(hào)：20210407）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）測(cè)定試劑盒（批號(hào)：20210408）購(gòu)于南京建成生物工程研究所；本實(shí)驗(yàn)用水均為去離子水。

1.3 主要儀器 PXR-9馬弗爐（北京中科奧博科技有限公司）；PFT-100A高速萬(wàn)能粉碎機(jī)（溫嶺市林大機(jī)械有限公司）；HH-1水浴鍋（金壇市華城開(kāi)元實(shí)驗(yàn)儀器廠）；Tecnai G220低分辨透射電子顯微鏡（美國(guó)FEI公司）；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；JEN-1230高分辨透射電子顯微鏡（日本電子株式會(huì)社）；Escalab 250Xi X射線光電子能譜分析儀（美國(guó)Thermo Fisher Scientific 公司）；F-4500熒光分光光度計(jì)（日本Hitachi公司）；CECIL紫外分光光度計(jì)（英國(guó)Cambridge公司）；傅里葉轉(zhuǎn)換紅外光譜儀（美國(guó)Thermo-Nicolet公司）；AU480全自動(dòng)生化分析儀（美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司）；Leica RM 2016石蠟切片機(jī)（美國(guó)萊卡公司）。

1.4 BRC-NCs的制備 稱(chēng)取射干生藥70 g放入坩堝中，用鋁箔紙密封加蓋后放入馬弗爐中燒制。馬弗爐的程序升溫：第一階段通過(guò)5 min升溫至70 ℃，保留30 min；第二階段通過(guò)25 min升溫至400 ℃，保留1 h。待溫度降至100 ℃以下取出坩堝，放置到室溫。將燒制好的射干炭放入粉碎機(jī)中粉碎。稱(chēng)取炭粉50 g，用30倍去離子水煎煮3次，每次1 h。用濾紙粗濾，再用0.22 μm微孔濾膜精濾，合并3次濾液，濃縮，濃縮液用1 000 Da透析膜透析72 h，每4 h換水1次，取透析袋內(nèi)溶液于4 ℃冰箱中留存，待用。

1.5 BRC-NCs的表征 用透射電子顯微鏡對(duì)BRC-NCs的微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。將制備好的BRC-NCs透析液倍比稀釋后，用0.22 μm的微孔濾膜濾過(guò)，超聲分散2 h，滴在銅網(wǎng)上，自然干燥。將銅網(wǎng)放于TEM顯微鏡下，選取合適的視野范圍，觀察其微觀結(jié)構(gòu)。將BRC-NCs透析液稀釋至合適的濃度后，吸取2 mL于石英比色皿中，置紫外分光光度計(jì)內(nèi)，在200～600 nm下對(duì)樣品進(jìn)行掃描。吸取上述樣品2 mL于石英比色皿中，置熒光分光光度計(jì)內(nèi)，以1 200 nm/min掃描。精密稱(chēng)取160 mg溴化鉀粉末后放入瑪瑙研缽中，加入BRC-NCs透析液20 μL，置紅外燈箱中烘干、研勻，壓片，放入傅里葉變換紅外光譜儀中進(jìn)行檢測(cè)。

1.6 BRC-NCs元素分析 吸取50 mL BRC-NCs透析液滴于蒸發(fā)皿中，將蒸發(fā)皿放在水浴鍋上烘干。待其完全干燥后用藥匙輕輕刮取粉末，均勻鋪在鋁箔上，蓋上一片鋁箔，液壓機(jī)壓平后置X射線光電子能譜分析儀中進(jìn)行測(cè)試。

1.7 熒光量子產(chǎn)率的計(jì)算 以硫酸奎寧[22]為參照物，通過(guò)以下公式計(jì)算BRC-NCs的熒光量子產(chǎn)率：

其中，“I”為發(fā)射光譜下的峰下面積，“A”為350 nm下的吸光度值，“η”為溶劑的折射率?！癗Cs”為BRC-NCs，“R”則代表標(biāo)準(zhǔn)品。熒光光譜掃描時(shí)，激發(fā)波長(zhǎng)（λx）的狹縫寬度為10 nm，發(fā)射波長(zhǎng)（λm）的狹縫寬度為5 nm。為了使重吸收效應(yīng)最小化，其中AR和ANCs應(yīng)在0.05以下。

1.8 藥物的配制

1.8.1 BRC-NCs溶液的制備 取上述透析過(guò)后的適量BRCNCs溶液凍干后精密稱(chēng)取BRC-NCs粉末，加入適量去離子水配制成質(zhì)量濃度為1 mg/mL的BRC-NCs備用。

1.8.2 陽(yáng)性藥的配制 取聯(lián)苯雙酯滴丸196粒，規(guī)格為1.5 mg/粒，加入19.6 mL的去離子水，配制成質(zhì)量濃度為15 mg/mL的聯(lián)苯雙酯溶液。

1.8.3 造模藥的配制 四氯化碳溶液與橄欖油溶液按1∶9的體積比例混合均勻，即得。

1.8.4 麻醉劑的配制[23]精密稱(chēng)量8.0 g水合氯醛粉末，倒入具塞三角瓶中，加入200 mL去離子水配制成4%的水合氯醛溶液，震蕩完全溶解，備用。

1.9 動(dòng)物分組及給藥 42只SPF級(jí)健康雄性昆明小鼠隨機(jī)分為6組，分別為正常組、模型組、BRC-NCs高劑量組（5mg/kg）、BRCNCs中劑量組（2.5 mg/kg）、BRC-NCs低劑量組（1.25 mg/kg）、聯(lián)苯雙酯組（150 mg/kg），每組7只。灌胃體積為0.1 mL/10 g[24]。BRCNCs的給藥劑量按照成人用藥劑量[25]換算成小鼠用藥劑量（以BRC的質(zhì)量計(jì)算）后，結(jié)合前期預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選所得。實(shí)驗(yàn)方法如下[26]：BRC-NCs高、中、低劑量組和聯(lián)苯雙酯組小鼠灌胃相應(yīng)藥物，正常組和模型組灌胃給予等體積生理鹽水，1次/d，連續(xù)給藥7 d。末次給藥2 h后，除正常組外，其余各組小鼠分別腹腔注射10%的CCL4橄欖油溶液制備急性肝損傷模型，正常組腹腔注射等體積的橄欖油。

1.10 觀察指標(biāo)

1.10.1 肝組織病理學(xué)觀察 取肝右葉，用體積分?jǐn)?shù)為4%的多聚甲醛溶液固定后，常規(guī)石蠟包埋、切片，HE染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察肝組織切片的病理學(xué)變化。

1.10.2 生化指標(biāo)的測(cè)定 造模后的小鼠禁食不禁水，于16 h后摘眼球取血，常溫靜置4 h后置離心機(jī)中，3 000 r/min離心10 min，取血清，測(cè)定丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine transaminase，ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）、直接膽紅素（direct bilirubin，DBIL）、間接膽紅素（indirect bilirubin，IBIL）的活性。將采血后的小鼠麻醉后脫頸椎處死，取肝組織0.5 g，用生理鹽水漂洗后，用濾紙吸干水分，冰浴勻漿后離心，取上清液測(cè)定SOD、MDA的含量。

1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”（）表示。多組間數(shù)據(jù)的比較當(dāng)方差齊時(shí)，采用單因素方差分析，方差不齊時(shí)采用非參數(shù)檢驗(yàn)。組間比較，采用LSD法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 BRC-NCs表征結(jié)果 在低分辨透射電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，BRC-NCs為類(lèi)球形且分散性良好，分布均勻。其粒徑分布在1～7 nm之間，主要集中在4.0 nm左右。高分辨透射電鏡觀察結(jié)果顯示，BRC-NCs晶格清晰，間距為0.263 nm。

2.2 光學(xué)特征和結(jié)構(gòu)分析 BRC-NCs紫外光譜顯示，在220 nm左右有微弱的紫外吸收峰，這可能是由于π-π*躍遷所引起的。熒光圖譜顯示，BRC-NCs的最大激發(fā)波長(zhǎng)在350 nm左右，最大發(fā)射波長(zhǎng)在446 nm左右。以硫酸奎寧為參照，計(jì)算其量子產(chǎn)率為1.62%。紅外光譜結(jié)果顯示，BRC-NCs的紅外吸收峰分別為3 442.94 cm-1、1 635.93 cm-1、1 384.30 cm-1。分析可知，3 442.94 cm-1峰可能為-O-H鍵，1 635.93 cm-1的吸收峰可能為-C=O鍵，1 384.30 cm-1強(qiáng)吸收表示可能為-C-N鍵。紅外光譜結(jié)果表明BRC-NCs表面含有羰基、羥基等官能基團(tuán)。（見(jiàn)圖1）

圖1 BRC-NCs 的表征結(jié)果

2.3 元素組成和表面官能團(tuán)分析 利用XPS法對(duì)BRC-NCs元素組成和表面官能團(tuán)進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，在284.32 eV、399.22 eV、531.22 eV有3個(gè)峰，表明BRC-NCs主要由C、O和少量N元素組成。樣品中碳的含量為67.46%，氧的含量為28.59%，氮的含量為3.95%。在XPS高分辨率圖譜中，C1s譜帶顯示有284.7 eV、286.3 eV、288.1 eV三個(gè)峰，分別對(duì)應(yīng)于C-N[27]、C-O[28]、C=O[29]。O1s譜帶顯示有531.27 eV、532.66 eV兩個(gè)峰，分別對(duì)應(yīng)于C-O、C=O[23,30]。N1s譜帶顯示有399.5 eV、400.3 eV兩個(gè)峰，分別對(duì)應(yīng)于C-N、（C）3-N[31-32]。（見(jiàn)圖2）

圖2 BRC-NCs 的XPS 分析結(jié)果

2.4 各組小鼠肝組織病理學(xué)改變情況 HE染色結(jié)果顯示，正常組小鼠肝組織結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞無(wú)壞死、排列整齊，大小均勻，以中央靜脈為中心呈放射狀排列，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，圓整、邊界清晰，肝小葉結(jié)構(gòu)完整；模型組小鼠肝組織損傷嚴(yán)重，肝索排列紊亂，肝組織可見(jiàn)廣泛彌漫性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肝細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞，胞質(zhì)空泡化等病變。與模型組比較，聯(lián)苯雙酯組小鼠肝組織結(jié)構(gòu)大致恢復(fù)正常態(tài)，組織結(jié)構(gòu)相對(duì)完整，肝小葉結(jié)構(gòu)大致恢復(fù)正常態(tài)；BRC-NCs高、中、低劑量組小鼠肝組織損傷較輕，結(jié)構(gòu)大致恢復(fù)正常，肝細(xì)胞排列較為整齊，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象減輕，肝細(xì)胞壞死、變性情況明顯降低，肝索逐漸恢復(fù)，肝損傷情況有所改善。（見(jiàn)圖3）

圖3 各組小鼠肝組織病理學(xué)改變情況（HE,×200）

2.5 各組小鼠血清ALT、AST、DBIL、IBIL含量比較 與正常組比較，模型組小鼠血清中ALT、AST、DBIL、IBIL含量均明顯升高（P＜0.01）。與模型組比較，聯(lián)苯雙酯組和BRC-NCs高、中、低劑量組小鼠血清中ALT、AST、DBIL、IBIL含量均明顯降低（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)果表明，BRC-NCs對(duì)CCl4所致的急性肝損傷有明顯的保護(hù)作用。（見(jiàn)圖4）

圖4 各組小鼠血清ALT、AST、DBIL、IBIL 含量比較（，n=7）

2.6 各組小鼠肝勻漿中SOD活力及MDA含量比較 與正常組比較，模型組小鼠肝組織勻漿中的SOD活性明顯降低（P＜0.01），MDA含量明顯升高（P＜0.01）。與模型組比較，聯(lián)苯雙酯組和BRC-NCs高、中、低劑量組小鼠肝組織勻漿中SOD活性明顯升高（P＜0.05或P＜0.01），MDA含量明顯降低（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)果表明，BRC-NCs能夠升高急性肝損傷模型小鼠肝臟組織中SOD的活性，降低MDA的含量。（見(jiàn)圖5）

圖5 各組小鼠肝勻漿SOD 活力及MDA 含量比較（，n=7）

3 討論

多年來(lái)，研究者們往往從小分子化合物的角度去闡述中藥炭藥高溫炭化后藥效改變或增強(qiáng)的機(jī)制[33]，然而結(jié)果并不令人滿意。隨著納米技術(shù)的深入研究，本團(tuán)隊(duì)將注意力轉(zhuǎn)向納米材料學(xué)，以此來(lái)闡述炭藥炮制后物質(zhì)基礎(chǔ)的變化，并在前期研究中已經(jīng)證實(shí)納米類(lèi)成分為炭藥發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)[34]。除傳統(tǒng)認(rèn)為的“炒炭止血”的經(jīng)典活性之外，炭藥還具有鎮(zhèn)靜[35]、降糖[36]、鎮(zhèn)痛[29]、抗寒[37]等生物活性。進(jìn)一步的研究顯示，不同基源獲取的炭藥納米類(lèi)成分、相同基源不同炮制條件獲取的炭藥納米類(lèi)成分由于粒徑、化學(xué)基團(tuán)等性質(zhì)的差異，生物活性呈現(xiàn)多樣性的特點(diǎn)，如黃柏炭納米類(lèi)成分具有止血[38]、改善銀屑病樣炎癥[39]的作用等。本實(shí)驗(yàn)以天然產(chǎn)物射干作為前驅(qū)體，從中制備并分離出了BRC-NCs，并通過(guò)TEM法分析顯示，其粒徑分布在1～7nm之間，晶格間距為0.263 nm。紫外、熒光結(jié)果顯示BRC-NCs具有熒光現(xiàn)象，其熒光量子產(chǎn)率為1.62%。FT-IR、XPS等結(jié)果分析顯示BRC-NCs主要含有由C、N、O三種元素組成且表面含有豐富的官能團(tuán)如羰基、羥基。這種結(jié)構(gòu)使其具有良好的溶解性和生物活性。

CCl4誘導(dǎo)的肝損傷是一種非常經(jīng)典的肝損傷模型，廣泛用于保肝藥物篩選[40]。CCl4引起急性肝損傷的機(jī)制主要是CCl4可通過(guò)激活肝微粒體細(xì)胞色素P450產(chǎn)生CCl3和CCl3O2自由基。這些自由基可以與肝細(xì)胞中的大分子共價(jià)結(jié)合，攻擊細(xì)胞質(zhì)膜下的不飽和脂質(zhì)，從而誘導(dǎo)脂質(zhì)過(guò)氧化[41]。脂質(zhì)過(guò)氧化及其降解產(chǎn)物會(huì)破壞肝細(xì)胞膜的完整性和穩(wěn)定性，增加肝細(xì)胞膜的通透性，導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)中ALT、AST等酶流入血液。因此，ALT、AST水平的高低是判定肝損傷程度的重要指標(biāo)[42]。肝臟功能損傷反映為膽紅素代謝缺陷，例如肝細(xì)胞攝取減少、膽紅素結(jié)合受損和肝細(xì)胞膽紅素分泌減少。肝臟系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)或功能異?？蓪?dǎo)致膽紅素增加。因此，血清膽紅素是檢測(cè)肝臟代謝狀態(tài)最直接的指標(biāo)[43]。本實(shí)驗(yàn)中，模型組小鼠血清中ALT、AST、DBIL、IBIL活性明顯升高。不同濃度的BRC-NCs干預(yù)后，血清中ALT、AST、DBIL、IBIL活性明顯降低，表明BRC-NCs對(duì)CCL4誘導(dǎo)的急性肝損傷有保護(hù)作用。

自由基引發(fā)的促氧化劑和抗氧化劑之間的不平衡可導(dǎo)致氧化應(yīng)激。有效抑制氧化應(yīng)激可以控制肝損傷的進(jìn)展[44]。MDA為脂質(zhì)過(guò)氧化代謝的終產(chǎn)物，可損傷細(xì)胞，同時(shí)MDA不僅可以反映脂質(zhì)過(guò)氧化的敏感性程度，還可以間接反映細(xì)胞損傷的程度[42]。SOD是細(xì)胞內(nèi)主要的防御性抗氧化酶，可以清除自由基，減輕脂質(zhì)過(guò)氧化的連鎖反應(yīng)，保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和功能完整性[3]。研究[45]表明，射干生藥對(duì)DPPH、ABTS自由基有一定的清除能力，顯示出一定的抗氧化活性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，從射干炭中提取分離的BRC-NCs能有效緩解急性肝損傷小鼠肝組織中的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度，降低肝細(xì)胞壞死、變性情況，其機(jī)制可能與降低MDA含量、升高SOD活性有關(guān)。BRC-NCs能夠通過(guò)提高抗氧化能力來(lái)減輕過(guò)度氧化應(yīng)激對(duì)肝組織的損傷作用。但本實(shí)驗(yàn)尚未從相關(guān)信號(hào)通路水平上去深入挖掘BRC-NCs的內(nèi)在藥效機(jī)制，這是課題組今后努力的方向之一。同時(shí)，后期研究也應(yīng)開(kāi)展BRC-NCs的安全性研究工作，探討其在安全范圍內(nèi)發(fā)揮最大的藥效劑量，以便更好地服務(wù)于臨床，為指導(dǎo)臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。

綜上，本研究利用高溫?zé)峤夥ǔ晒纳涓商恐刑崛》蛛x出新型納米類(lèi)成分——BRC-NCs。在CCl4致急性肝損傷模型中，表面攜帶豐富活性基團(tuán)的BRC-NCs表現(xiàn)出較好的保肝作用，其作用機(jī)制與降低血清ALT、AST、DBIL、IBIL含量有關(guān)。此外，BRC-NCs也可以在一定程度上增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力。本實(shí)驗(yàn)為BRC-NCs治療急性肝損傷的新型藥物研發(fā)奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和重要依據(jù)，也為中藥炭藥的物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供了一種全新的思維模式及科研方法。