曾芳芳，李凱風(fēng)，蘇莉莉，林南龍，王奕霏，蘇俊之，劉盛歡

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530000；2.廣西國際壯醫(yī)醫(yī)院，廣西 南寧 530200）

驚厥是小兒常見的急癥之一，是由于大腦神經(jīng)出現(xiàn)一系列電化學(xué)變化導(dǎo)致的全身肌肉或局部肌肉不可控制的抽搐。小兒驚厥是多發(fā)生于6個月～5歲年齡段兒童的危急重癥，其臨床常見表現(xiàn)有意識喪失、雙眼凝視、斜視或上翻、頭后仰、面部和四肢抽搐，嚴(yán)重的會出現(xiàn)呼吸暫停、嘴唇發(fā)青、昏迷等。臨床上小兒驚厥分為熱性驚厥和無熱性驚厥，以熱性驚厥（febrile seizure，F(xiàn)S）為主，并且具有較高的發(fā)病率[1]。其發(fā)病機(jī)制目前為止尚未完全明確，但很多相關(guān)研究者認(rèn)為，熱性驚厥的發(fā)作與發(fā)熱高低程度有密切關(guān)系[2]。研究調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)超過5%的幼兒都曾發(fā)生過一次或者多次熱性驚厥，并且這種疾病發(fā)展進(jìn)程較快，如不及時治療將會嚴(yán)重影響患兒身體健康[3]。由于幼兒大腦皮質(zhì)尚未發(fā)育完全，當(dāng)毒素入侵大腦后會損傷腦組織、影響腦代謝、損傷腦細(xì)胞等，從而引發(fā)驚厥性癲癇持續(xù)狀態(tài)，嚴(yán)重的甚至危及患兒生命[4-5]。

中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，小兒驚厥屬“急驚風(fēng)”范疇，因此歷代醫(yī)家對該病都十分重視。《東醫(yī)寶鑒·小兒》云：“小兒疾之最危者，無越驚風(fēng)之證”?！队卓漆屩i·驚風(fēng)》：“小兒之病，最重惟驚”，由此可知小兒驚厥起病急驟，發(fā)展迅速，變化迅猛，病情兇險。小兒肌膚薄弱，腠理不密，氣血未充，極易感受時邪，邪氣由表入里，梟張而壯熱，熱極化火。而肝常有余、主風(fēng)，病邪由表入里，內(nèi)陷心包，從而引動肝風(fēng)[6]。感受六淫之邪、溫?zé)嵋叨局畾馐羌斌@風(fēng)發(fā)生的重要因素?！饵S帝內(nèi)經(jīng)》中關(guān)于驚風(fēng)的記載，認(rèn)為其機(jī)制在肝，如“諸暴強(qiáng)直，皆屬于風(fēng)”“諸風(fēng)掉眩，皆屬于肝”。清代醫(yī)家夏禹鑄在《幼科鐵鏡·闡明發(fā)驚之由兼詳治驚之法》中明確提出：“療驚必先豁痰，豁痰必先祛風(fēng)，祛風(fēng)必先解熱”的清熱、祛風(fēng)、豁痰的治療方法[7]。現(xiàn)代的研究表明采用針刺、刺血、拔罐等外治療法治療小兒FS，可達(dá)到緩解驚厥、迅速退熱的目的[8]。在民間人們常用燈草灸治療小兒FS，因為燈芯草性涼，桐油有清熱祛風(fēng)之效。較早關(guān)于燈草灸的記載見于元·危亦林之《世醫(yī)得效方·沙癥》，明·李時珍《本草綱目》記載到：“燈火，主治小兒驚風(fēng)、昏迷、抽搐、竄視諸病”[9]。明代龔延賢《小兒推拿秘旨》中也記述了運(yùn)用燈草灸治療小兒驚風(fēng)的治療方法。由此可見燈草灸治療小兒驚厥具有較好的療效。而且燈草灸療法操作簡單，無毒副作用，患兒及家屬較容易接受。

在前期的動物實驗研究中已經(jīng)表明，燈草灸可明顯縮短熱性驚厥的幼年大鼠驚厥持續(xù)時間[10]。今擬通過觀察應(yīng)用燈草灸對誘發(fā)FS大鼠大腦皮質(zhì)Glu、GABA含量的影響并且探討燈草灸對FS作用的可能機(jī)制，為臨床治療提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康SD幼年大鼠40只（湖南斯萊克景達(dá)實驗動物有限公司提供），雌雄各半，28 d齡，體質(zhì)量130～175 g，大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1 d后進(jìn)行實驗。采用隨機(jī)數(shù)字法分為對照組、模型組、安定組、燈草灸組和安定+燈草灸組，每組8只。

1.2 主要試劑及儀器 30 cm×30 cm×50 cm玻璃水槽、玻璃溫度計、數(shù)字式電子體溫計、地西泮注射液（天津金耀藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H12020957）、Glu抗體試劑（MU30844，Bioswamp武漢貝茵萊生物科技有限公司）、GABA 抗體試劑（MU30278，Bioswamp武漢貝茵萊生物科技有限公司）、燈芯草和桐油（由廣西國際壯醫(yī)醫(yī)院提供）、電熱恒溫水浴鍋（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司 HWS-26）、離心管、制冰器等。

1.3 造模方法 參照文獻(xiàn)[11]建模，稍做改變。采用熱水浴誘發(fā)熱性驚厥方法，操作：將幼年大鼠放入45.5℃水溫的水槽中，誘發(fā)驚厥。入水時，先將幼年大鼠按于水槽一角，沿水槽壁站立時僅露出頭部，待水液濕透全身皮毛且大鼠能沿玻璃水槽站立后放其自由活動，如有驚厥發(fā)生則立刻脫離水浴，如5 min后大鼠不驚厥則取出，并且隨時監(jiān)測水溫，保持水溫恒定。大鼠驚厥程度判斷參考Ranice分級標(biāo)準(zhǔn)[12]（見表1）。造模后，大鼠驚厥程度2級以上則為造模成功，不達(dá)者剔除。

表1 Ranice分級標(biāo)準(zhǔn)

1.4 分組與處理

對照組：不予建模，斷頭取腦。

模型組：建模成功后，不做任何處理，30 min后斷頭取腦。

安定組：建模成功后，按大鼠體重予安定2.632 mg/kg（相當(dāng)于兒童0.5 mg/kg）的劑量，腹腔注射安定，其余過程同模型組。

燈草灸組，建模成功后，立即給予燈草灸治療。選穴和操作參照文獻(xiàn)[6]。

安定+燈草灸組，建模成功后，予安定組和燈草灸組的操作，其余過程同模型組。

1.5 觀察指標(biāo)及檢測方法 分別記錄各組大鼠驚厥持續(xù)時間、驚厥程度、肛溫（治療后 1、5、9 min）和死亡例數(shù)。大鼠驚厥30 min后，斷頭取出大腦并剝離，剝離時要保證大腦完整性，最后再分離大腦皮質(zhì)。每只樣本獨(dú)立分裝，并于-80℃冰箱貯存待檢。檢測前將每組大鼠大腦皮質(zhì)組織冰浴勻漿并離心，采用ELISA檢測法（按實驗步驟操作），最后再計算出大鼠大腦皮質(zhì)中Glu和GABA的濃度。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 24.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析處理。檢測各項指標(biāo)均以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）進(jìn)行描述；若計量資料符合正態(tài)分布方差齊，組間比較差用單因素方差分析，兩兩比較差用LSD檢驗，其中P＜0.05表明組間有顯著性差異，P＜0.01表示有極顯著性差異，且均具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 燈草灸對大鼠驚厥持續(xù)時間的影響 與模型組相比，安定組、燈草灸組和安定+燈草灸組大鼠驚厥持續(xù)時間有顯著性差異（P＜0.05）。與安定組相比，模型組、燈草灸組和安定+燈草灸組有顯著性差異（P＜0.05），安定+燈草灸組與燈草灸組之間有極顯著性差異（P＜0.01），見表2。

表2 各組大鼠驚厥治療后驚厥持續(xù)時間（±s）

表2 各組大鼠驚厥治療后驚厥持續(xù)時間（±s）

注：與模型組比較，*P＜0.05；與安定組比較，#P＜0.05；與燈草灸組比較，△P＜0.01。安定組其中1只大鼠在建模過程中死亡，剔除實驗。

組別 n 驚厥持續(xù)時間/s模型組 7 1 7 2.0 0±6.4 5安定組 6 1 6 1.6 7±3.3 9*燈草灸組 7 1 5 4.2 9±3.9 9*#安定+燈草灸組 7 1 4 4.0 0±5.8 9*#△

2.2 燈草灸對驚厥大鼠肛溫的影響 各組實驗大鼠驚厥前肛溫?zé)o差異（P＞0.05）；驚厥治療后1 min模型組與安定組、燈草灸組、安定+燈草灸組相比有顯著性差異（P＜0.05），安定組與燈草灸組、燈草灸+安定組相比無顯著性差異。驚厥治療5 min后，模型組與燈草灸組、安定+燈草灸組相比有顯著性差異（P＜0.05）；驚厥治療9 min后，模型組與燈草灸組相比具有顯著性差異（P＜0.05）。見圖1。

圖1 各組大鼠驚厥前和驚厥治療后1、5、9 m in肛溫（±s）

2.3 燈草灸對驚厥大鼠大腦皮質(zhì)氨基酸GABA、Glu的影響 與對照組相比，模型組大鼠大腦皮質(zhì)Glu含量明顯升高（P＜0.01）。與模型組相比，安定組、安定+燈草灸組大鼠大腦皮質(zhì)Glu含量明顯降低（P＜0.01）。模型組與燈草灸組相比較無顯著性差異（P＞0.05）。安定組、燈草灸組、安定+燈草灸組之間無顯著性差異（P＞0.05）。安定+燈草灸組與安定組相比有顯著性差異（P＜0.05）、與燈草灸組相比有極顯著性差異（P＜0.01）。與對照組相比，模型組大鼠大腦皮質(zhì)GABA含量明顯降低（P＜0.01）。模型組與安定組、燈草灸組、安定+燈草灸組相比有極顯著性差異（P＜0.01）。安定組與燈草灸組之間無顯著差異（P＞0.05）。安定組與安定+燈草灸組之間有顯著性差異（P＜0.05）。燈草灸組與安定+燈草灸組之間有顯著性差異（P＜0.01），見表4。

表4 各組大鼠大腦皮質(zhì)氨基酸GABA、G lu的比較（x± s，μmol/L）

3 討論

小兒高熱會引起大腦中樞神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)，影響正常腦細(xì)胞組織，導(dǎo)致驚厥發(fā)生[13-14]。FS反復(fù)發(fā)作或驚厥持續(xù)時間過長，都會引起大腦缺氧，從而對大腦神經(jīng)系統(tǒng)、腦細(xì)胞造成不可逆的損傷，并且遺留后遺癥[15-18]。因此快速解除驚厥癥狀、縮短驚厥時間及預(yù)防驚厥復(fù)發(fā)尤為重要，對治療疾病也很關(guān)鍵[19]。在臨床上通常會選用地西泮、苯巴比妥等藥物抑制中樞神經(jīng)，緩解患兒驚厥狀態(tài)，達(dá)到止驚目的。地西泮屬于苯二氮類藥物，長期大量使用可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)不同部位的抑制，臨床上可表現(xiàn)為從輕度的鎮(zhèn)靜到催眠、甚至不同程度的昏迷等，還會導(dǎo)致呼吸道分泌物增多，從而引發(fā)呼吸抑制、危及患兒生命[20-21]。而燈草灸屬于祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的外治法之一，簡便、安全、無副作用，療效也倍受患者青睞，有較好的應(yīng)用前景。

熱性驚厥屬中醫(yī)“急驚風(fēng)”范疇。對于燈草灸治療小兒驚風(fēng)的療效，在歷代文獻(xiàn)中有頗多記載，如清代陳復(fù)正《幼幼集成》評價燈草灸為“誠幼科第一捷法，實有起死回生之功”，具有“疏風(fēng)散表，行氣利痰，解郁開胸，醒昏定搐”之效，并且他主張運(yùn)用燈草灸等外治手法治療小兒驚風(fēng)疾病，既豐富了小兒驚風(fēng)的內(nèi)涵，又提供了新思路，對現(xiàn)代兒科臨床上遇到熱性驚厥、癲癇等疾病的治療具有重要的指導(dǎo)意義。從表2可知，安定組、燈草灸組和安定+燈草灸組三組大鼠驚厥持續(xù)時間均縮短，有差異性（P＜0.05）；燈草灸組和安定+燈草灸組兩組大鼠驚厥持續(xù)時間都低于安定組，兩者比較有差異性（P＜0.05）；安定+燈草灸組大鼠驚厥持續(xù)時間低于燈草灸組，兩者有極顯著性差異（P＜0.01），說明安定與燈草灸聯(lián)合使用可以明顯縮短驚厥持續(xù)時間，起到定搐的作用。

相關(guān)研究者認(rèn)為[22]燈草灸是利用火的走竄性和火之熱性達(dá)到祛風(fēng)散邪、疏通經(jīng)脈的作用。由于燈草灸對人體穴位的刺激程度較強(qiáng)持續(xù)作用時間較長，再加上其對小兒熱性驚厥具有較好的療效，因此燈草灸成為了中醫(yī)兒科急救治法之一[23]。小兒發(fā)熱的程度和頻率與驚厥存在密不可分的關(guān)系，人體中大腦神經(jīng)元在高熱的狀態(tài)下會釋放大量異常電量，這會導(dǎo)致人體大腦中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或者多種全身性病癥，從而使得患兒腦細(xì)胞功能紊亂[24]、導(dǎo)致驚厥發(fā)生[25]。從表3可得出，大鼠驚厥后立即予治療，在治療后1min燈草灸組大鼠肛溫下降速度比安定組快且有差異性（P＜0.05），在5、9 min模型組與燈草灸組相比較有差異性（P＜0.05），但與安定組相比較無顯著性差異（P＞0.05），說明燈草灸在短時間內(nèi)降溫速度快，再結(jié)合前期的燈草灸可縮短驚厥大鼠驚厥時間的結(jié)論，可得出燈草灸不僅有定搐的效果，還有快速降溫的作用。所以，古代醫(yī)家認(rèn)為燈草灸屬于急救之法并非夸詞。

熱性驚厥的發(fā)生與人體大腦中興奮性氨基酸和抑制性氨基酸有密切關(guān)系。腦內(nèi)中存在多種氨基酸其中GABA、Glu在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有神經(jīng)遞質(zhì)作用，其中Glu是大腦中主要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，集中分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，以大腦皮質(zhì)為主。Glu對大腦皮層組織有興奮作用，可以參與學(xué)習(xí)記憶、自主運(yùn)動神經(jīng)的活動，還可以維持大腦中樞系統(tǒng)的發(fā)育和保持大腦正常運(yùn)行[26]。大腦內(nèi)的Glu的含量過度增高會產(chǎn)生神經(jīng)毒性，對神經(jīng)元有很強(qiáng)的興奮毒性作用[27]，從而產(chǎn)生神經(jīng)細(xì)胞永久損傷，造成神經(jīng)元變性壞死。其中GABA是乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)最主要的抑制性氨基酸[28-31]，也是腦組織中主要的抑制性氨基酸，在大腦中起到傳遞神經(jīng)元信號的作用。GABA作為初級抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，它可以抵消神經(jīng)傳遞，降低大腦活動性，促使大腦處于放松狀態(tài)。腦內(nèi)GABA的含量較高，大腦中40%的突觸為GABA能突觸，它是通過介導(dǎo)抑制性突觸傳遞，可以阻止大腦神經(jīng)元同步異常放電，當(dāng)GABA含量減少到一定程度時可誘發(fā)驚厥發(fā)作。從表4可知，與對照組相比，模型組大鼠大腦皮質(zhì)Glu含量明顯升高（P＜0.01）；與模型組相比安定組、燈草灸組、安定+燈草灸組大鼠大腦皮質(zhì)Glu含量明顯降低（P＜0.01），安定組、燈草灸組、安定+燈草灸組之間相互比較差異無顯著性（P＞0.05），安定+燈草灸組與安定組比較有顯著性差異（P＜0.05），與燈草灸組相比較有極顯著性差異（P＜0.01）。燈草灸組與安定組相比，兩者并無顯著差異性，由此可見燈草灸可以降低熱性驚厥大鼠大腦皮質(zhì)中Glu的表達(dá)水平。燈草灸+安定組降低大鼠大腦皮質(zhì)內(nèi)Glu含量大于燈草灸組和安定組，兩者聯(lián)用效果大于單一使用效果。與對照組相比，模型組大鼠大腦皮GABA含量明顯降低（P＜0.01），安定組、燈草灸組、安定+燈草灸組與模型組相比有顯著升高（P＜0.01）。由此可知，燈草灸可以升高熱性驚厥大鼠大腦皮質(zhì)中GABA的含量，調(diào)節(jié)抑制性氨基酸表達(dá)水平。實驗研究表明，熱性驚厥的發(fā)生與人體大腦中興奮性氨基酸和抑制性氨基酸有密切關(guān)系，此結(jié)論與燈草灸具有調(diào)節(jié)人體神經(jīng)系統(tǒng)功能作用[32]的研究結(jié)果一致。FS發(fā)作與中樞神經(jīng)系統(tǒng)遞質(zhì)含量的變化有很大關(guān)系，Glu和GABA表達(dá)水平變化可以反映出熱性驚厥的治療效果，其常用作評價中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能興奮和抑制狀態(tài)的客觀指標(biāo)。興奮性神經(jīng)遞質(zhì)Glu含量升高或抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA含量降低是FS發(fā)作機(jī)制之一。

綜上所述，本實驗研究證實了燈草灸不僅可以快速降溫，縮短驚厥持續(xù)時間，還可以降低熱性驚厥大鼠皮質(zhì)中Glu的含量、增加GABA的含量，調(diào)節(jié)失衡的氨基酸神經(jīng)元。此研究證實了燈草灸有退熱、止痙的功效和調(diào)節(jié)人體神經(jīng)功能的作用，可能是通過控制興奮性氨基酸和抑制性氨基酸的釋放來調(diào)節(jié)大腦神經(jīng)細(xì)胞的功能。此療法簡便、快捷，但推廣至臨床需要進(jìn)一步完善研究。

致謝：特別感謝廣西國際壯醫(yī)醫(yī)院壯瑤醫(yī)實驗室為該課題提供技術(shù)支持。