●莊環(huán)瑜 馬成亮 程貫召

（濰坊學(xué)院生物與農(nóng)業(yè)工程學(xué)院 山東 濰坊 261061）

蘡薁（Vitis bryoniifoliaBunge）別名山葡萄、野葡萄，是葡萄科葡萄屬的落葉藤本植物，是我國分布最廣泛的野葡萄種之一[1-3]。蘡薁果實(shí)中含有豐富的葡萄糖、果糖、氨基酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值。蘡薁果實(shí)呈紫紅色，香甜可口，可食用和釀酒。蘡薁的藤、根可入藥，有祛濕、利尿、解毒的功效，主治淋病、痢疾、痹痛、扃癥、噦逆、乳癰、濕疹、臁瘡等癥[4-5]，臨床上蘡薁根可用來治療急性黃疸型肝炎。此外，蘡薁生長于山坡灌木叢中，枝條細(xì)長，葉片寬卵形，果實(shí)黑紫色，小而圓潤，具有觀賞價(jià)值，可作園林觀賞植物。

目前，蘡薁在國內(nèi)的資源并不豐富，數(shù)量少，產(chǎn)量低，常規(guī)繁殖生產(chǎn)遠(yuǎn)遠(yuǎn)無法滿足市場需求。但國內(nèi)外學(xué)者對(duì)蘡薁組織培養(yǎng)的研究較少，多集中于栽培技術(shù)和種質(zhì)資源的收集、保護(hù)等相關(guān)研究[6]。本文通過對(duì)蘡薁的繁殖技術(shù)進(jìn)行研究，以期實(shí)現(xiàn)規(guī)模化栽培。

1 蘡薁的繁殖技術(shù)

多年來，利用組織培養(yǎng)和扦插技術(shù)生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)苗圃品種一直是葡萄選育研究的重點(diǎn)。目前關(guān)于葡萄的研究涉及誘導(dǎo)技術(shù)、增殖培養(yǎng)技術(shù)、扦插技術(shù)、栽培技術(shù)等[7]。但插枝、嫁接等非外源性繁殖方式常受到區(qū)域和季節(jié)變化的限制，且周期較長，容易染病。扦插栽培是人類最早掌握的無性繁殖技術(shù)之一，即插條從母株中攝取養(yǎng)分，在適當(dāng)?shù)臈l件下扎根，形成新的完整的植物，目前也是我國蘡薁栽培的主要方式。

無性繁殖扦插育苗可以保持母本的優(yōu)良基因，變異概率極小，具有繁殖周期短、繁殖速度快等優(yōu)點(diǎn)[6]。常用的植物生長調(diào)節(jié)劑，有ABT生根粉、吲哚丁酸、NAA及吲哚乙酸等[8]，利用其浸泡插條基部，比直接插枝存活率高。與移栽育苗相比，具有生長快、生育期提前的優(yōu)勢。

1.1 組織培養(yǎng)

1.1.1 外植體選擇與消毒 在沂山和彌河濕地等地摘取蘡薁當(dāng)年生新梢，選取生長健壯、代謝旺盛且無病蟲害的嫩枝，去掉大葉片，剪成單芽莖段，無菌水沖洗0.5 h，4℃條件下放置4 h，有利于材料的誘導(dǎo)再生。將處理后的材料用自來水浸泡沖洗，然后用70%酒精浸泡10 s，無菌水沖洗2～3次，再用0.1%的升汞浸泡10 min，最后用無菌水沖洗3～4次，方可接種。

1.1.2 接種培養(yǎng)和觀察 將消毒后的外植體接種于含有NAA+6-BA的MS基本培養(yǎng)基中，設(shè)置NAA濃度為0.1 mg/L，6-BA濃度為1.0 mg/L。將健壯良好的莖段基部剪取后放于培養(yǎng)基內(nèi)，培養(yǎng)基的pH值為6.8，培養(yǎng)溫度為25～28℃，光照時(shí)間16 h/d，光照強(qiáng)度1800 lx。10 d后可見許多小的綠色不定芽長出，一段時(shí)間后就會(huì)長出叢生芽。

1.1.3 繼代和增殖培養(yǎng) 愈傷組織在外植體培養(yǎng)約14 d后出現(xiàn)，需暗培養(yǎng)。叢生芽形成后，切割叢生芽并轉(zhuǎn)移到MS繼代培養(yǎng)基，繼代培養(yǎng)基期間，采用大型三角瓶或罐頭瓶，有利于嫩梢的生長。光照條件為2000～3000 lx，培養(yǎng)溫度為25～28℃，培養(yǎng)20～30 d可獲得大量叢生苗。

1.1.4 生根培養(yǎng) 從繼代培養(yǎng)的瓶苗中選取3～ 4 cm高的壯苗進(jìn)行誘導(dǎo)生根，在無菌濾紙上用解剖刀從瓶苗基部切去3～5 mm，將小苗轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上，每瓶7～8株為宜。培養(yǎng)14 d后可見根原基形成。

1.1.5 再生植株的移栽 當(dāng)試管苗生長至2 cm時(shí)，將三角瓶轉(zhuǎn)至培養(yǎng)室，放到有散射太陽光的地方，但應(yīng)避免太陽直射。閉瓶煉苗7 d，將植株取出，輕輕洗去根部的培養(yǎng)基，用鑷子將苗移到移栽基質(zhì)上，避免傷害根部。

1.2 扦插繁殖

1.2.1 營養(yǎng)土配制 營養(yǎng)土是由農(nóng)田土壤、河沙和有機(jī)肥料按5∶2∶1比例均勻混合制成。

1.2.2 插條剪取 選擇植株健壯、無病蟲害的枝條作為插穗。首先對(duì)插條進(jìn)行保溫、保濕處理。先在清水中浸泡24 h以上，使插條充分吸水，提高扦插成活率。然后剪取插條，注意剪口的上端距離芽1.5～2 cm時(shí)要平剪，以免剪口和芽的距離太近而受損，下剪口在節(jié)部或靠近節(jié)部，斜剪。此外，上面的葉片只留1～2片即可，其余剪除。

1.2.3 整地作床 苗床大小適宜，苗床提前施入腐熟的農(nóng)用肥料混合物作為基本肥料，保證土壤有較好的通透性和肥力，中間保留隔道，便于排水和作業(yè)。

1.2.4 插條處理 為了加快插條愈傷組織的形成，常用不同生根劑浸泡插條基部。常用的藥劑有ABT生根粉，浸泡基部4～8 h，也可將插條基部1～2 cm浸泡在萘乙酸溶液約8～12 h，或取適量吲哚丁酸與乙醇混合溶解，將插條基部浸入速蘸 3 s左右。在生產(chǎn)中，生根劑處理可提高蘡薁硬枝扦插成活率，促進(jìn)不定根的生成，增加根的數(shù)量。

1.2.5 扦插 將枝條插入苗床中，扦插枝條的最適宜長度為10 cm，扦插深度以5～8 cm為宜，插條頂芽要外露，行距20 cm，株距12～15 cm，以利于通風(fēng)透光等，覆土踏實(shí)，澆定根水，扣上地膜。生長期應(yīng)保持土壤濕潤，及時(shí)清除農(nóng)田雜草。一般7～20 d就能生根，撤膜后煉苗移栽。

2 總結(jié)

利用組織培養(yǎng)技術(shù)可以縮短蘡薁成苗時(shí)間，幼苗成活率高，且不易受氣候和季節(jié)的影響，可以在短期內(nèi)提供大量苗木，達(dá)到大量快速繁殖的目的。