吳玉婷,謝超,周卓穎,朱亞猛,史恬恬,王益男
1.浙江海洋大學(xué)食品與藥學(xué)學(xué)院(舟山 316022);2.浙江馳力科技股份有限公司(舟山 316000)
我國曾從美國引進(jìn)早熟毛桃,其中有一品種稱為貴妃紅桃,其果實(shí)圓潤,呈粉色,桃肉硬脆,果香非常濃郁,在毛桃中屬于優(yōu)良品種。紅桃桃肉香甜可口,風(fēng)味十足,含有粗纖維、磷、鐵、鈣、維生素B1等營養(yǎng)素[1-2]。然而紅桃所含水分較高且皮薄,有利于微生物獲得營養(yǎng)和水分,微生物的大量繁殖代謝會(huì)導(dǎo)致桃肉品質(zhì)快速下降,在無特殊手段貯藏條件下,果實(shí)幾天后就可能無法食用或失去加工利用價(jià)值[3-4]。因此,需要對(duì)紅桃保鮮貯藏進(jìn)行深入研究,利用新興保鮮技術(shù)來有效延緩桃肉變質(zhì),為水果保鮮及深加工奠定一定基礎(chǔ)。
低溫貯藏是果蔬貯藏的常用手段,低溫環(huán)境下微生物代謝和繁殖速度變慢,同時(shí),果蔬自身呼吸速率降低[5-6],在這些作用下,果蔬能夠在貯藏過程中較長時(shí)間保持品質(zhì)。該方法操作簡便有效,但在實(shí)際應(yīng)用中常常伴隨著冷害現(xiàn)象[7],而且設(shè)備能耗大,不符合節(jié)能減排要求,尤其應(yīng)用于工廠作業(yè)時(shí)。輻照保鮮就是使用射線對(duì)果蔬進(jìn)行定量定時(shí)的照射,加速微生物死亡來延緩果蔬變質(zhì),但較大量或者長期的輻射會(huì)破壞果肉中的維生素等營養(yǎng)物質(zhì)[8-9],且消費(fèi)者對(duì)輻照食物具有排斥感,故輻照不是最適用的保鮮方法。氣調(diào)貯藏是延長食物貯藏期的常用物理保鮮手段,其原理是改變食物所處環(huán)境中氣體組成成分以抑制腐敗微生物的生長,降低植物自身呼吸速度并減緩C2H4釋放,在一定程度上能夠維持營養(yǎng)量,從而延緩食物變質(zhì)[10-11],但該技術(shù)需要相關(guān)技術(shù)的結(jié)合使用來發(fā)揮最佳的保鮮效果。
低壓靜電場(chǎng)保鮮技術(shù)是一項(xiàng)新興的保鮮技術(shù),低壓靜電場(chǎng)能夠產(chǎn)生離子驅(qū)動(dòng),使水蒸氣發(fā)生一定的遷移和聚集,即水分子在同頻共振后于陽極富集從而轉(zhuǎn)化成液態(tài)水,使得空氣中的水分減少,空氣濕度變低。該項(xiàng)技術(shù)通常與低溫相結(jié)合進(jìn)行保鮮作用[12-13],同時(shí)操控環(huán)境溫度與濕度來抑制細(xì)菌的生長繁殖以達(dá)到更好的保鮮效果。楊亞麗等[14]發(fā)現(xiàn)SO2保鮮劑結(jié)合低壓靜電場(chǎng)處理能有效提高紅梅杏采后貯藏品質(zhì)并降低冷害程度;李海波等[15]通過對(duì)楊梅施加低壓靜電場(chǎng)進(jìn)行保險(xiǎn)處理,結(jié)果發(fā)現(xiàn)果實(shí)硬度得到有效保持,腐爛指數(shù)與失重率得到有效減緩。對(duì)于桃子的保鮮手段主要為低溫保藏[16]、氣調(diào)貯藏[17]及保鮮劑處理[18],關(guān)于低壓靜電場(chǎng)保鮮的相關(guān)研究較少。試驗(yàn)以貴妃紅桃為研究對(duì)象,分析比較低溫貯藏和低壓靜電場(chǎng)協(xié)同低溫冷藏對(duì)貴妃紅桃品質(zhì)和理化性質(zhì)的影響,推動(dòng)低壓靜電場(chǎng)在貴妃紅桃貯藏保鮮中的研究。
貴妃紅桃(采自四川成都,采用七八成熟、大小大致相同、無明顯蟲害的健康桃子)。
鄰苯二甲酸氫鉀、3, 5-二硝基水楊酸(DNS)、乙酸鋅、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品、亞鐵氰化鉀、甲基紅指示劑,均為上海麥克林生化科技有限公司。
設(shè)置試驗(yàn)組和對(duì)照組。將購得的貴妃紅桃置于0~2 ℃冷庫冷藏作為對(duì)照組;另一組對(duì)其施加低壓靜電場(chǎng)(輸入電壓220 V、輸出電流5 mA),并將環(huán)境溫度設(shè)定為0~2 ℃,作為試驗(yàn)組。
BX-2000低壓靜電場(chǎng)發(fā)射器(浙江馳力科技股份有限公司);TGL16G低溫高速離心機(jī)(常州市金壇勒普儀器有限公司);SP 9890氣相色譜儀器(魯南瑞虹化工儀器有限公司);NMI20-15型低場(chǎng)核磁共振儀(上海紐邁電子科技有限公司)。
1.3.1 呼吸強(qiáng)度的檢測(cè)
呼吸強(qiáng)度(以CO2濃度計(jì))由SP9890氣相色譜儀測(cè)定。
1.3.2 丙二醛(MDA)的測(cè)定[18]
用三氯乙酸(TCA)提取后加硫代巴比妥酸(TBA)煮沸測(cè)定。
1.3.3 可溶性糖的測(cè)定
采用一般測(cè)定果蔬中可溶性糖含量的方法,具體參考NY/T 2742—2015水果及制品可溶性糖的測(cè)定35-二硝基水楊酸比色法[19],該方法又稱為3, 5-二硝基水楊酸比色法,是比較公認(rèn)的果蔬類可溶性糖測(cè)定方法。
在測(cè)定前需要繪圖制作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,使用移液管按規(guī)范操作準(zhǔn)確取得0~1.2 mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液于6支10 mL小試管中(每增加0.2 L取1次),滴加純凈水至刻度線2.0 mL,準(zhǔn)確量取4.00 mL 3, 5-二硝基水楊酸,并與葡萄糖溶液混勻完全,將試管放置在水浴鍋中(100 ℃)5 min,水浴加熱結(jié)束后立即冷卻至室溫。用分光光度計(jì)測(cè)定6種濃度溶液的吸光度(540 nm處)并記錄結(jié)果,以葡萄糖溶液濃度和吸光度作為X軸和Y軸,用Excel和Origin軟件繪圖并得出回歸方程。
1.3.4 維生素C的測(cè)定[19]
采用2, 6-二氯靛酚滴定法,參考GB 5009.86—2016食品中抗壞血酸的測(cè)定測(cè)定。
1.3.5 失重率的測(cè)定
采用稱重法并按式(1)計(jì)算。
1.3.6 硬度的測(cè)定
參照NY/T 2009—2011水果硬度的測(cè)定來測(cè)定水果硬度,可直接利用手持硬度儀進(jìn)行測(cè)定。
1.3.7 腐爛率的檢查[20]
檢查腐爛率,當(dāng)貴妃紅桃表面有異常如霉變、褐色圓斑等生理病害時(shí),均列為腐爛果實(shí)。
1.3.8 低場(chǎng)核磁共振樣品制備
選取大小一致的紅桃,將紅桃果肉切成3.0 cm×3.0 cm×3.0 cm的立方體后進(jìn)行橫向弛豫時(shí)間的測(cè)定。在多脈沖回波序列下測(cè)定其衰減信號(hào),其中,測(cè)量溫度(32±0.01)℃,主頻21 MHz,偏移頻率237 853.1 Hz,90°脈沖時(shí)間18 μs,180°脈沖時(shí)間37.04 μs,重復(fù)時(shí)間6 000 ms,累加次數(shù)4,回波時(shí)間0.5 ms,回波個(gè)數(shù)18 000。每個(gè)樣品重復(fù)操作測(cè)定3次。
利用Excel 2010與Origin Pro 9.1整理數(shù)據(jù),同時(shí)繪制各數(shù)據(jù)圖,最后分析各折線圖結(jié)果。
溫度是影響貴妃呼吸速率的重要因素之一,低溫冷藏能夠降低水果呼吸強(qiáng)度[20]。而判斷呼吸強(qiáng)度一般是測(cè)定一定時(shí)間內(nèi)所檢測(cè)到的CO2濃度。由圖1可知,在貯藏試驗(yàn)過程中,2組貴妃紅桃在同溫度下的呼吸速率一致,均呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì),試驗(yàn)組呼吸速率變化較為平緩。每條折線的最高點(diǎn)即是呼吸高峰,對(duì)照組在第18天出現(xiàn)呼吸高峰,而試驗(yàn)組的呼吸高峰相對(duì)對(duì)照組延遲6 d,對(duì)照組和試驗(yàn)組的呼吸最高峰值分別為62.24和44.50 mg CO2/(kg·h),結(jié)果表明低壓靜電場(chǎng)協(xié)同低溫處理能在一定程度上抑制果實(shí)采摘后的呼吸作用,從而減緩營養(yǎng)物質(zhì)的消耗。
圖1 不同貯藏條件下貴妃紅桃呼吸速率的變化趨勢(shì)
MDA是膜脂過氧化的代表性產(chǎn)物,MDA含量越高表明膜脂氧化越嚴(yán)重,而膜的完整性降低和功能性喪失是果實(shí)衰老初期的表現(xiàn)[18],因此可用MDA含量判斷果實(shí)衰老程度。由圖2可知,在低溫貯藏過程中,2組MDA含量都呈現(xiàn)不斷上升趨勢(shì),而試驗(yàn)組MDA上升趨勢(shì)相對(duì)更為平緩。在貯藏第36天時(shí),對(duì)照組和試驗(yàn)組果實(shí)MDA值較初始值分別增長2.54和0.51 μmol/L。結(jié)果表明低壓靜電場(chǎng)的施加抑制果肉膜脂在貯藏過程中的過氧化,從而有效減緩MDA含量的上升。
圖2 不同貯藏條件下貴妃紅桃丙二醛的變化趨勢(shì)
以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和吸光度為X軸和Y軸,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線圖和回歸方程,如圖3所示。吸光度與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度呈線性相關(guān),線性范圍為0~0.12 mg/mL。
圖3 標(biāo)準(zhǔn)糖溶液質(zhì)量濃度與吸光度關(guān)系
可溶性糖含量反映果實(shí)的成熟度與口感風(fēng)味[21],在一定程度上能夠體現(xiàn)果實(shí)的品質(zhì),所以將其作為一項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行研究。如圖4所示,不同貯藏條件下貴妃紅桃果肉的可溶性糖含量并非呈現(xiàn)單一的上升或下降趨勢(shì)。對(duì)圖4進(jìn)行分析可得,2組可溶性糖含量均呈現(xiàn)先下降后上升再下降趨勢(shì),在貯藏期間初期2組果實(shí)可溶性糖含量變化趨勢(shì)相近,由于淀粉等物質(zhì)降解為可溶性糖,糖含量有所上升,貯藏中后期2組果實(shí)可溶性糖含量變化趨勢(shì)表現(xiàn)出較大的差異,因果實(shí)呼吸作用消耗糖分,糖含量有所下降。貯藏36 d時(shí),對(duì)照組和試驗(yàn)組可溶性糖含量分別下降至5.50%和6.70%。結(jié)果表明,低壓靜電場(chǎng)協(xié)同低溫冷藏能夠減緩紅桃呼吸代謝從而減緩可溶性糖含量的下降。
圖4 不同貯藏條件下貴妃紅桃可溶性糖含量的變化趨勢(shì)
維生素C是水果的重要營養(yǎng)物質(zhì)之一,有一定的抗氧化作用[22],即延緩果肉因氧化質(zhì)變,在果實(shí)貯藏過程中,維生素C氧化分解,所以可將其作為一個(gè)評(píng)價(jià)紅桃品質(zhì)變化的關(guān)鍵指標(biāo)。由圖5可得,2組紅桃中維生素C含量都呈下降趨勢(shì)。0~6 d內(nèi)2組維生素C含量變化相差不大,6~36 d內(nèi)試驗(yàn)組維生素C含量下降趨勢(shì)相對(duì)對(duì)照組較為緩和,由此可見,低壓靜電場(chǎng)能夠減緩維生素C的氧化,保持紅桃果實(shí)營養(yǎng)物質(zhì),維持紅桃果實(shí)高品質(zhì)。
圖5 不同貯藏條件下貴妃紅桃VC含量的變化趨勢(shì)
桃肉中含有大量水分,隨著貯藏時(shí)間推移,呼吸和蒸騰作用帶走水分從而影響果實(shí)口感風(fēng)味,當(dāng)水分流失較多時(shí),果皮會(huì)變皺從而影響觀感,因此失重率可以作為評(píng)價(jià)紅桃品質(zhì)變化的一項(xiàng)重要指標(biāo)。由圖6可知,2組紅桃均發(fā)生不同程度的質(zhì)量損失現(xiàn)象,從失重率上升趨勢(shì)可得,試驗(yàn)組水分流失速度較為緩和,貯藏至第36天時(shí),試驗(yàn)組紅桃失重率上升至1.15%,相較對(duì)照組紅桃失重率少0.63%。結(jié)果表明低壓靜電場(chǎng)協(xié)同氣調(diào)貯藏能減少樣品水分和營養(yǎng)物質(zhì)的流失。
圖6 不同貯藏條件下貴妃紅桃失重率的變化
果實(shí)的硬度是判斷果實(shí)品質(zhì)好壞的重要指標(biāo),在貯藏過程中盡量保持桃子的硬度,在出倉庫貨架后可以正常后熟軟化。后熟期間,果膠酶水解纖維素和原果膠使紅桃硬度下降,發(fā)生軟化現(xiàn)象[23-24],其水解產(chǎn)物主要是果膠、果膠酸,兩者皆為可溶性物質(zhì)。軟化過程中細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的改變導(dǎo)致微生物更輕易地侵入繁殖,分解桃肉中的營養(yǎng)物質(zhì)并產(chǎn)生有害代謝物,導(dǎo)致桃子腐爛[25]。由圖7可得:2組果實(shí)硬度在貯藏期間不斷下降,紅桃最初硬度為5.32 kg/cm2,在36 d貯藏期內(nèi)對(duì)照組果實(shí)硬度快速下降,最終達(dá)到2.07 kg/cm2;試驗(yàn)組果實(shí)硬度下降趨勢(shì)緩和,最終降至5.17 kg/cm2。結(jié)果表明低壓靜電場(chǎng)協(xié)同低溫冷藏能夠有效保持桃果實(shí)硬度。
圖7 不同貯藏條件下貴妃紅桃硬度的變化
腐爛率能夠直觀地表明果蔬保鮮效果,貴妃紅桃水分高,成熟的紅桃果實(shí)比較柔軟,容易受到機(jī)械損傷,易感染病菌而導(dǎo)致果實(shí)腐爛變質(zhì)。由圖8可得:對(duì)照組腐爛率不斷上升并在貯藏36 d時(shí)達(dá)到45%;試驗(yàn)組果實(shí)在0~30 d內(nèi)沒有出現(xiàn)明顯腐爛,在貯藏36 d時(shí)腐爛率僅為5%,說明低壓靜電場(chǎng)協(xié)同低溫冷藏能有效延緩紅桃腐敗變質(zhì)速率。
圖8 不同貯藏條件對(duì)貴妃紅桃腐爛率的影響
通過低場(chǎng)核磁共振測(cè)定新鮮紅桃果肉T2弛豫時(shí)間圖譜如圖9所示,不同貯藏時(shí)間下紅桃果肉T2弛豫時(shí)間圖譜如圖10所示,不同貯藏時(shí)間不同組峰面積變化如圖11所示。結(jié)果發(fā)現(xiàn)各組圖譜中均含有3個(gè)特征峰,分別為結(jié)合水、不易流動(dòng)水和自由水。第1個(gè)峰代表結(jié)合水橫向弛豫時(shí)間T21,這部分水通過偶極作用與果肉內(nèi)大分子結(jié)合十分緊密;第2個(gè)峰代表不易流動(dòng)水橫向弛豫時(shí)間T22,這部分水存在于亞顯微結(jié)構(gòu),流動(dòng)性強(qiáng)于T21結(jié)合水;第3個(gè)峰代表自由水橫向弛豫時(shí)間T23,這部分水流動(dòng)性最強(qiáng)。對(duì)于貯藏0 d時(shí)的桃果肉,經(jīng)過歸一化處理后T21、T22、T23峰面積分別為139.840 122 8,1 200.371 039和4 811.180 721,峰占比分別為2.3%,19.5%和78.2%,說明成熟的紅桃果肉中自由水占比最高,其次是不易流動(dòng)水。貯藏前期各組T23弛豫峰信號(hào)幅值相近,而貯藏36 d對(duì)照組T23弛豫峰信號(hào)幅值明顯下降,說明貯藏末期對(duì)照組果肉中水分急劇減少[26];貯藏過程中T23峰面積占比不斷增大,T22和T21峰面積有所減小,說明果肉中的水分發(fā)生遷移[26],結(jié)合水和不易流動(dòng)水向自由水轉(zhuǎn)化,使得自由水占比增加。貯藏18 d時(shí),試驗(yàn)組和對(duì)照組T23峰面積占比分別為81.5%和87.0%,貯藏36 d時(shí)試驗(yàn)組和對(duì)照組T23峰面積占比分別為90.4%和94.4%,結(jié)果表明低壓靜電場(chǎng)協(xié)同低溫冷藏能夠延緩紅桃果肉中的水分遷移和水分流失,且這一作用在長期貯藏過程中較為明顯。
圖9 新鮮貴妃紅桃橫向弛豫時(shí)間(T2)反演圖
圖10 不同貯藏時(shí)間貴妃紅桃橫向弛豫時(shí)間(T2)反演圖
圖11 不同貯藏時(shí)間不同組峰面積變化
試驗(yàn)通過不同的貯藏條件對(duì)貴妃紅桃進(jìn)行保鮮,比較得出在2 ℃環(huán)境中,將紅桃裝箱置于低壓靜電場(chǎng)(輸入電壓220 V、輸出電流5 mA)能有效延長貴妃紅桃貯藏期。結(jié)果表明:貯藏36 d后試驗(yàn)組呼吸速率高峰為第24天,相對(duì)對(duì)照組延遲6 d;可溶性糖、維生素C含量和硬度分別降至6.37%、5.67 mg/100 g和5.17 kg/cm2,均高于對(duì)照組;MDA和腐爛率上升至0.51 μmol/L和5%,均顯著低于對(duì)照組(P<0.05),貯藏過程中貴妃紅桃保持良好的感官性狀。通過低場(chǎng)核磁共振測(cè)定的桃果肉T2弛豫時(shí)間圖譜,發(fā)現(xiàn)低壓靜電場(chǎng)作用能夠延緩紅桃貯藏過程中T23峰面積占比的增大,說明低壓靜電場(chǎng)協(xié)同低溫冷藏能夠延緩紅桃果肉中的水分遷移和水分流失。研究結(jié)果表明,低壓靜電場(chǎng)協(xié)同低溫冷藏能夠有效維持紅桃高品質(zhì),此保鮮貯藏方法簡單易操作,且經(jīng)濟(jì)有效,所以在后續(xù)工廠商業(yè)利用中有較大的潛力。在深入探究最佳低溫氣調(diào)協(xié)同低壓靜電場(chǎng)貯藏條件上具有一定研究價(jià)值。