徐海寧，舒長(zhǎng)泉，顏 聰，符 潮，劉 倩，張洪亮，劉新亮★

（1.江西省林業(yè)科學(xué)院·國(guó)家林業(yè)草原樟樹工程技術(shù)研究中心，江西 南昌330013；2.資溪縣林業(yè)局，江西 撫州335300；3.泰和縣白鷺湖林場(chǎng)，江西 吉安343708）

樟屬（Cinnamomum）樟組植物的葉或果實(shí)中多富含植物天然精油，其化學(xué)成分復(fù)雜多樣，具有多種抗菌、抗氧化功效成分，常作為植物天然香料或化工原料廣泛應(yīng)用于食品、化工、醫(yī)藥等行業(yè)[1-6]。目前，樟組精油產(chǎn)業(yè)原料林栽培營(yíng)建多采用樟樹（Cinnamomum camphora）作為主推品種，并且栽培種植的化學(xué)型多為芳樟醇、龍腦、桉葉油素等，而對(duì)于其他樟組植物的應(yīng)用與推廣較少[7-8]。猴樟（Cinnamomum bodinieri）是樟科（Lauraceae）樟屬常綠喬木植物，在我國(guó)僅分布于湖南、貴州、湖北、四川及云南東部的石灰?guī)r或喀斯特地貌地區(qū)[9-10]。猴樟樹形優(yōu)美，枝葉繁茂、四季常綠，在貴州、四川等地區(qū)常用于替代樟樹作為園林綠化樹種。相較于樟樹，猴樟具有葉片寬大、生長(zhǎng)迅速、抗逆性強(qiáng)的生物學(xué)特征，可作為樟組植物精油工業(yè)原料林選育栽培的候選樹種。目前，對(duì)于猴樟的研究主要集中在生物生態(tài)學(xué)特性[11-12]、種苗繁育[13-14]、組培技術(shù)[15]、抗逆性[16-17]等方面，而關(guān)于猴樟葉精油成分與化學(xué)型的研究鮮有報(bào)道。因此，該研究在猴樟天然資源調(diào)查的基礎(chǔ)上，采用水蒸氣蒸餾法結(jié)合GC-MS 檢測(cè)對(duì)不同化學(xué)型猴樟葉精油的化學(xué)組成進(jìn)行探究，旨在為猴樟資源保護(hù)與天然精油的開發(fā)、利用、引種提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

猴樟葉片材料分別來(lái)源于貴州省貴陽(yáng)市黔靈山、安順市鎮(zhèn)寧布依族苗族自治縣、畢節(jié)市織金縣（表1）。在各地區(qū)共采集到猴樟單株30 株，按單株采集成熟鮮葉200～300 g，稱重后，裝于封口袋中編號(hào)并置于冰箱4℃保存。

表1 樣品采集地信息Tab. 1 Information of sample collection place

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 葉精油提取

樣品采摘后立即稱取猴樟鮮葉質(zhì)量，采用水蒸氣法提取揮發(fā)性精油，提取時(shí)間2 h，將揮發(fā)性精油分離后稱重，在低溫密封條件下儲(chǔ)存，計(jì)算出油率（出油率=出油質(zhì)量/鮮葉質(zhì)量×100%）。

1.2.2 GC-MS 檢測(cè)

GC-MS 檢測(cè)儀器：日本SHIMADAZU GCMSQP2020 型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，色譜柱類型：SHRXI-5SILMS 型色譜柱（規(guī)格：30 m× 0.25 mm×0.25 μm）。GC 條件：進(jìn)樣口溫度250℃，進(jìn)樣量1 μL，進(jìn)樣分流比1∶0，載氣He，流速1.0 mL·min-1。升溫程序：起始溫度80℃，保持2 min；以8℃·min-1升至160℃；以10℃·min-1升至250℃，保持10 min。MS 條件：EI 離子源溫度200℃，連接線溫度230℃，掃描范圍50～600 m·z-1。各分離組分采用Nist 8.0 譜庫(kù)進(jìn)行化合物檢索，采用峰面積歸一化法計(jì)算各組分相對(duì)百分含量。進(jìn)樣時(shí)，采用30 μL 精油溶解在970 μL 無(wú)水乙醇中，配成1 mL 溶液注入進(jìn)樣瓶中。

2 結(jié)果與分析

2.1 猴樟不同化學(xué)型出油率與主成分含量

通過(guò)提取猴樟葉精油并按第一主成分即精油化學(xué)成分組成中相對(duì)百分含量最高的化合物進(jìn)行化學(xué)型劃分。結(jié)果可劃分為5 種化學(xué)型（表2），分別為：檸檬醛型、芳樟醇型、甲基丁香酚型、樟腦型、桉葉油素型，不同化學(xué)型出油率與主成分含量區(qū)間具有明顯差異，檸檬醛型出油率變化幅度較大，為0.34%～0.98%，主成分含量在42.5%～61.26%，精油形態(tài)為淡黃色液體。芳樟醇型和甲基丁香酚型出油率和主成分含量變化幅度較小，其中甲基丁香酚型密度大于水，沉于水底部。樟腦型和桉葉油素型出油率變化幅度均較大，主成分含量變化幅度較小。

表2 5 種不同化學(xué)型猴樟葉精油基本信息Tab. 2 Basic information of five different chemical types of C. bodinieri

2.2 猴樟不同化學(xué)型成分分析

采用GC-MS 對(duì)5 種典型化學(xué)型（主成分含量最高）猴樟單株葉精油化學(xué)成分組成進(jìn)行分析，結(jié)果見表3。檸檬醛型主成分含量為61.26%（包含Z-檸檬醛26.38%與E-檸檬醛34.88%），其余精油中相對(duì)含量大于1%的成分共計(jì)5 種。芳樟醇型主成分含量為90.82%，其余相對(duì)含量大于1%的成分共計(jì)2 種，分別為β-胡椒烯與大牛兒烯B。甲基丁香酚型主成分含量為59.67%，其余相對(duì)含量大于1%的成分共計(jì)7種，其中樟腦與黃樟油素相對(duì)含量較高，分別達(dá)12.85%與10.99%。樟腦型主成分含量為89.55%，其余相對(duì)含量大于1%的成分共計(jì)3 種，分別為α-松油醇、葎草烯、大牛兒烯B。桉葉油素型主成分含量37.46%，其余相對(duì)含量大于1%的成分共計(jì)13 種，其中檜烯、α-松油醇相對(duì)含量較高，分別達(dá)14.07%與13.47%。

表3 5 種典型化學(xué)型猴樟葉精油化學(xué)成分組成Tab. 3 Chemical composition of leaf essential oil of five typical chemical types

2.3 不同化學(xué)型猴樟化學(xué)成分分類與比較

將不同化學(xué)型猴樟葉精油成分按非萜類、單萜類、倍半萜類進(jìn)行分類，如圖1 所示，5 種化學(xué)型精油含有部分非萜類成分，其中桉葉油素型中未檢測(cè)到非萜類成分，甲基丁香酚型非萜類成分最多，為5 種。5種化學(xué)型精油成分?jǐn)?shù)量均以單萜類成分為主，單萜類成分?jǐn)?shù)量排序?yàn)椋鸿袢~油素型＞檸檬醛型＞甲基丁香酚型＞樟腦型＞芳樟醇型；倍半萜成分?jǐn)?shù)量排序?yàn)椋赫聊X型＞甲基丁香酚型=芳樟醇型＞檸檬醛型=桉葉油素型。此外，將各化學(xué)型特有化學(xué)成分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果表明，檸檬醛特有化學(xué)成分?jǐn)?shù)量最多，主要特有成分有β-松油醇、3-酮基-異甜菊醇、廣藿香烷等；桉葉油素次之，主要特有成分有順式-β-萜品醇、檜稀、β-月桂烯等；樟腦特有化學(xué)型成分最少，主要有4-側(cè)柏醇、水合莰烯、綠花白千層醇等。5 種化學(xué)型均含有的化學(xué)成分為5 種，分別為：桉葉油素、芳樟醇、樟腦、4-萜烯醇、α-松油醇。

圖1 5 種化學(xué)型猴樟葉精油化學(xué)成分分類及特有化學(xué)成分?jǐn)?shù)量Fig. 1 Classification of chemical constituents and quantity of specific chemical constituents of five chemical types of C.bodinieri

3 結(jié)論與討論

猴樟葉精油化學(xué)型具備多樣性，本試驗(yàn)所采樣品共具5 種化學(xué)型，即：檸檬醛、芳樟醇、甲基丁香酚、樟腦、桉葉油素，其中以檸檬醛、樟腦兩種化學(xué)型所占比例最高，甲基丁香酚型最少，僅為2 株。目前所報(bào)道的樟樹化學(xué)型以桉葉油素、芳樟醇、異橙花叔醇、樟腦、龍腦為主，檸檬醛型所占比例極小[18-19]。而猴樟中檸檬醛型所占比例較高，并且，猴樟具備生物量大、生長(zhǎng)迅速、抗逆性強(qiáng)的特點(diǎn)，在工業(yè)原料林產(chǎn)業(yè)中能夠發(fā)揮極大優(yōu)勢(shì)，因此，在檸檬醛化學(xué)型植物選育繁育研究過(guò)程中可將猴樟作為重點(diǎn)目標(biāo)樹種。

猴樟葉精油成分種類主要以單萜類成分為主，5種化學(xué)型猴樟化學(xué)成分組成具有較大差異。各化學(xué)型均含有的5 種化學(xué)成分分別為桉葉油素、芳樟醇、樟腦、4-萜烯醇、α-松油醇，此5 種成分在樟樹精油中普遍存在。檸檬醛型特有化學(xué)成分?jǐn)?shù)量13 種，主要特有成分為β-松油醇、3-酮基-異甜菊醇等。桉葉油素型特有化學(xué)成分?jǐn)?shù)量9 種，主要特有成分為順式-β-萜品醇、檜烯等。樟腦型特有化學(xué)型成分最少，主要特有成分為4-側(cè)柏醇、水合莰烯等。甲基丁香酚型猴樟精油化學(xué)成分中常伴隨較高含量的黃樟油素與樟腦。桉葉油素型化學(xué)成分中含有較多的檜烯與α-松油醇。

天然植物精油成分多以萜類為主，甲基丁香酚為苯丙素類化學(xué)成分，在植物精油中作為主成分極少出現(xiàn)。目前，在樟樹化學(xué)型中暫未見相關(guān)報(bào)道。根據(jù)相關(guān)研究表明，甲基丁香酚化學(xué)型主要存在于馬兜鈴科（Aristolochiaceae）細(xì)辛屬（Asarum）植物中，具有消炎鎮(zhèn)痛、緩解神經(jīng)衰弱、抗菌等功效，在醫(yī)藥品制備領(lǐng)域有較多應(yīng)用[20-22]。本研究在猴樟中發(fā)現(xiàn)甲基丁香酚型化學(xué)型主成分相對(duì)含量最高達(dá)59.67%，出油率為0.51%，是不可多得的化學(xué)型試驗(yàn)材料，具有良好的選育與開發(fā)價(jià)值。因此，綜合猴樟化學(xué)型成分分析，猴樟在天然精油開發(fā)與利用等領(lǐng)域具有較大潛力，尤其是在檸檬醛化學(xué)型及特殊新優(yōu)化學(xué)型選育中可發(fā)揮重要作用。