陳少鵬， 李秀芩， 邵偉華， 姚麗霞， 李芳， 李紹冰

(河北省人民醫(yī)院 1.預防保健科，2.老年心血管病內(nèi)二科，河北省石家莊市 050051)

慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)多發(fā)于老年人，CHF會造成患者食欲下降，而長期營養(yǎng)攝入不足將會導致患者代謝紊亂[1]，且對于CHF患者，心力衰竭越嚴重，營養(yǎng)狀態(tài)越差[2]。CHF患者睡眠障礙發(fā)生率高，睡眠障礙導致交感神經(jīng)過度亢奮和體內(nèi)炎癥反應的發(fā)生，將加重心力衰竭進展[3]。研究表明，miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p可通過調(diào)節(jié)心肌重構(gòu)相關基因的表達，參與心力衰竭的病理生理過程[4]。本文選取住院老年CHF患者便于對患者營養(yǎng)及睡眠進行監(jiān)測和控制，避免不同飲食及不同環(huán)境對觀察結(jié)果造成影響，并分析患者血漿miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p的水平與營養(yǎng)狀況和睡眠質(zhì)量間的相關性。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2018年12月—2020年6月確診為CHF的住院患者106例作為研究對象，其中男性62例，女性44例，冠心病61例，房顫34例，擴張型心臟病11例。納入標準：①年齡≥80歲；②CHF的診斷標準符合《慢性心力衰竭診斷治療指南2018》[5]；③患者及其家屬對本研究知情并同意。排除標準：①合并急性大面積心肌梗死、嚴重腦出血及惡性腫瘤；②入院前3個月接受大手術；③合并消化道出血、自身免疫性疾病、感染性疾病等。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準。

1.2 營養(yǎng)狀況和睡眠質(zhì)量的評估

依據(jù)美國心臟病學會(NYHA)提出的心功能分級劃分為Ⅱ級33例，Ⅲ級54例，Ⅳ級19例。采用微型營養(yǎng)評價量表[6](mini nutritional assessment，MNA)對老年CHF患者住院期間的營養(yǎng)狀態(tài)進行評分，總分30分，≤17分為營養(yǎng)狀況不良，18～23分為營養(yǎng)不良危險者，≥24分為營養(yǎng)狀況良好。采用匹茲堡睡眠質(zhì)量指數(shù)量表[7](pittsburgh sleep quality index，PSQI)對老年CHF患者住院期間的睡眠質(zhì)量進行評分，總分21分，得分越高睡眠質(zhì)量越差，≤4分為睡眠質(zhì)量好，4～8分為睡眠質(zhì)量一般，≥8分為睡眠質(zhì)量差(即睡眠障礙)。

1.3 指標檢測

采集患者入院后第2天清晨空腹肘靜脈血4 mL，4 ℃，3 000×g離心10 min。取上清液，4 ℃、16 000×g離心10 min。取上清等量分裝，保存至-80 ℃冰箱備用。qRT-PCR法檢測血漿miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3P水平，以U6作為內(nèi)參，配制5 μL反應體系(5×Prime Script RT Master Mix 2 μL，RNase-free ddH2O 3 μL)，37 ℃、60 min，85 ℃、5 s。配置20 μL PCR反應體系：SYBR Premix Ex TaqⅡ(2×)10 μL，PCR正反向引物(10 μmol/L)各0.8 μL，ROX Reference Dye(50×)0.4 μL，cDNA 2 μL，滅菌蒸餾水6 μL。進行定量PCR反應，條件為95 ℃、5 s，60 ℃、20 s，40個循環(huán)。miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3P的相對表達水平采用2-ΔΔCt方法表示。采用心臟超聲診斷儀檢測心功能指標左心室射血分數(shù)(left ventricular ejection fraction，LVEF)，左室內(nèi)徑(left ventricular diameter,LVD)和左房內(nèi)徑(left atrium diameter,LAD)。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結(jié) 果

2.1 不同心功能分級患者各指標比較

隨著心功能分級的增加，患者LVEF及MNA評分逐漸降低，LAD、LVD、miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p及PSQI評分逐漸升高(P<0.05；表1)。

表1 不同心功能分級的老年CHF患者各指標比較

2.2 miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平的相關性

患者miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平間均呈正相關(P<0.05；表2)。

表2 miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平間的相關性

2.3 不同MNA和PSQI評分時miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平比較

隨著MNA評分增加，miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平逐漸下降(P<0.05)；隨著PSQI評分增加，miR-423-5p、miR-499-5p水平逐漸上升(P<0.05；表3)。

表3 不同MNA和PSQI評分miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平比較

2.4 miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況的關系

CHF患者miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況呈負相關(P<0.05；圖1)。

圖1 老年CHF患者血漿miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況的關系

2.5 miR-423-5p、miR-499-5p水平與睡眠質(zhì)量的關系

CHF患者miR-423-5p及miR-499-5p水平與睡眠質(zhì)量呈正相關(P<0.05；圖2)。

圖2 老年CHF患者血漿miR-423-5p、miR-499-5p水平與睡眠質(zhì)量的關系

3 討 論

miRNA參與調(diào)節(jié)細胞的增殖、分化、免疫及癌變。研究發(fā)現(xiàn)，多種miRNA在CHF中起重要作用[8-9]。miR-423-5p與心肌損傷及心室重構(gòu)中相關基因的表達相關[10]。miR-499-5p可作為CHF患者潛在的預后診斷標志物[11]。而miR-210可抑制心肌細胞的凋亡、促進血管的生成，改善心臟功能[12]。晚期CHF患者miR-210-3p表達明顯上調(diào)，且較其他miRNA差異最大[13]。

睡眠障礙在CHF患者中常見。患者睡眠質(zhì)量差，將導致患者疲乏，無精力，機體代謝混亂，從而易造成患者高血壓、心肌梗塞、中風及夜間心律失常，進而使CHF病情復雜化。除睡眠障礙外，營養(yǎng)不良也是CHF常見并發(fā)癥，且老年CHF患者營養(yǎng)不良發(fā)生率更高[14]。CHF患者由于腸水腫及腸血流量減少，將影響進食及腸道營養(yǎng)吸收，而營養(yǎng)不良可誘發(fā)機體過度炎癥反應，最終加重患者病情，影響患者預后[15]。

研究表明，足夠的睡眠在控制血糖水平方面發(fā)揮重要作用，長期的睡眠障礙對碳水化合物代謝和內(nèi)分泌功能具有不利影響，導致患者營養(yǎng)失衡[16]。本文結(jié)果顯示，老年CHF患者隨著心功能分級的增加，患者血漿miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平逐漸增加，且三者間的水平均呈正相關。老年CHF患者隨著心功能分級的增加，MNA評分逐漸減少，PSQI評分逐漸增加，同時CHF患者miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況具有相關性，miR-423-5p、miR-499-5p水平與睡眠質(zhì)量具有一定相關性。

老年CHF患者心力衰竭程度與血漿miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p水平密切相關。同時，血漿miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p水平與營養(yǎng)狀況和睡眠質(zhì)量具有相關性。但本研究中納入的病例數(shù)較少，需后期擴大樣本和進一步臨床證實。