陳旭華， 徐光臨， 劉 力

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院，上海 200120)

我國(guó)礦物藥藥用歷史悠久，早在《周禮》之中就有丹砂、雄黃、礬石、磁石等的記載，是傳統(tǒng)中藥不可或缺的一部分。我國(guó)藥用礦產(chǎn)資源豐饒，分布廣泛，但由于地質(zhì)條件復(fù)雜，產(chǎn)地不同其共生礦產(chǎn)及伴生礦產(chǎn)往往會(huì)有所不同，這勢(shì)必將影響礦物藥的元素分布、性狀，影響其藥效[1]；同時(shí)不同的開(kāi)采過(guò)程以及開(kāi)采時(shí)間，也可能會(huì)造成不同批次礦物藥的質(zhì)量差異。而礦物藥臨床用量普遍較小，質(zhì)量差異對(duì)臨床療效的影響可能更顯著，故關(guān)注礦物藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其變化對(duì)其臨床應(yīng)用的安全性和有效性意義重大。

對(duì)2020年版《中國(guó)藥典》25種天然礦物藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的變化進(jìn)行分析，并對(duì)礦物藥定性、定量分析方法的最新進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)，以其為礦物藥的應(yīng)用和分析提供參考。

1 來(lái)源

天然礦物藥材種類繁多，礦產(chǎn)資源豐富，分布廣泛。藥用礦物的質(zhì)量受產(chǎn)地因素影響大，規(guī)定各礦物藥的來(lái)源對(duì)保證礦物藥的質(zhì)量穩(wěn)定至關(guān)重要。2020年版《中國(guó)藥典》中，石膏的來(lái)源由“硫酸鹽類礦物硬石膏族石膏”修訂為“硫酸鹽類礦物石膏族石膏”[2-3]；其余藥物來(lái)源無(wú)修訂或新增。

2 性狀

性狀鑒別是通過(guò)水試、火試、眼觀、口嘗等方式，以礦物藥的外形、顏色、表面、光澤、質(zhì)地、氣味、味道、斷口、硬度等特征進(jìn)行鑒別，是鑒定礦物藥最基礎(chǔ)的方法。2020年版《中國(guó)藥典》各礦物藥性狀項(xiàng)下內(nèi)容無(wú)修訂或新增情況。

3 鑒別

3.1 理化鑒別 根據(jù)礦物藥的所含主要化學(xué)成分或物理性質(zhì)不同，利用不同的化學(xué)或物理手段，對(duì)其有效成分、主要成分或特征性成分進(jìn)行分析來(lái)鑒定真?zhèn)巍?020年版《中國(guó)藥典》各礦物藥的理化鑒別內(nèi)容均無(wú)修訂或新增。

3.2 顯微鑒別 通過(guò)顯微鏡觀察礦物藥的顯微特征，適用于大部分礦物藥，尤其常用于礦物藥粉末的鑒別，具有經(jīng)濟(jì)、快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。2020年版《中國(guó)藥典》對(duì)花蕊石、石膏的顯微鑒別內(nèi)容進(jìn)行修訂。

3.2.1 花蕊石 鑒別項(xiàng)下 “取本品細(xì)粉0.2 g，置錐形瓶中，加稀鹽酸5 mL，取上層澄清液1滴，置載玻片上，加硫酸溶液1滴，靜置片刻，顯微鏡下可以觀察到針狀結(jié)晶”修訂為“顯微鏡下可以觀察到簇狀結(jié)晶”[2-3]。

3.2.2 石膏 紅外光譜靈敏度高，檢測(cè)快速，樣品處理簡(jiǎn)單，且操作便利，能夠全面地反映出中藥材的整體特征[4]。2020年版《中國(guó)藥典》針對(duì)石膏主要成分二水硫酸鈣，鑒別項(xiàng)下新增紅外分光光度法試驗(yàn)，采用溴化鉀壓片法制備供試品，規(guī)定其紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與二水硫酸鈣對(duì)照品具有相同的特征吸收峰，這加強(qiáng)石膏鑒定的專屬性與準(zhǔn)確性。值得注意的是，2020年版《中國(guó)藥典》中，青礞石、赤石脂鑒別內(nèi)容與2015 版保持一致，均無(wú)鑒別項(xiàng)內(nèi)容。

4 檢查

對(duì)礦物藥的檢查主要包括藥物的安全性、純度及有效性等，用于檢查礦物藥是否符合藥用要求。2020年版《中國(guó)藥典》中，白帆、芒硝、玄明粉、朱砂、雄黃檢查項(xiàng)內(nèi)容有所變化。

4.1 白礬 檢查項(xiàng)下將原有的銨鹽檢查由“取本品0.1 g，加無(wú)氨蒸餾水100 mL使溶解，取10 mL，置比色管中，加無(wú)氨水40 mL與堿性碘化汞鉀試液2 mL，如顯色，與氯化銨溶液(取氯化銨31.5 mg，加無(wú)氨蒸餾水使成1 000 mL)1 mL、堿性碘化汞鉀試液2 mL及無(wú)氨蒸餾水49 mL的混合液比較，不得更深”，變更為“取本品約0.1 g，精密稱定，照氮測(cè)定法(通則0704第二法或第三法，無(wú)需消解)測(cè)定，含鞍鹽以總氮(N)計(jì)，不得過(guò)0.3%”。

4.2 芒硝 增加氯化物以及酸堿度檢查。氯化物檢查為取芒硝0.20 g，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液7.0 mL制成的對(duì)照液比較，不得更濃(0.035%)。酸堿度檢查為取芒硝1.0 g，加水20 mL使溶解，取10 mL，加甲基紅指示劑2滴，不得顯紅色；另取10 mL，加溴麝香草酚藍(lán)指示液5滴，不得顯藍(lán)色[3]。

4.3 玄明粉 增加酸堿度檢查，檢查方法與芒硝一致。

4.4 朱砂 除原有的鐵鹽檢查外，增加采用液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用儀(HPLC-ICP-MS)測(cè)定價(jià)態(tài)汞：取朱砂粉末(過(guò)五號(hào)篩)約30 mg，精密稱定，置250 mL塑料量瓶中，一式2份，一份加人工胃液約200 mL，另一份加人工腸液約200 mL，搖勻，置37 ℃水浴中超聲處理(功率300 W，頻率45 kHz)2 h(每隔15 min充分搖勻1次)，放冷，分別用相應(yīng)溶液稀釋至刻度，搖勻，取適量至50 mL塑料離心管中，靜置20～24 h，用洗耳球吹去上層表面溶液，吸取中層溶液15 mL(吸取時(shí)應(yīng)避免帶入顆粒)，用微孔濾膜濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2 mL，置10 mL塑料量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。吸取供試品溶液20 uL，注入HPLC-ICP-MS測(cè)定，規(guī)定以二價(jià)汞以汞計(jì)，不得超過(guò)0.1%[3]。朱砂的主要成分為硫化汞(HgS)，Hg2+在胃腸道內(nèi)可以與酶活性中心的巰基結(jié)合形成耦合物，從而抑制酶的生理功能，引起毒性反應(yīng)[5]。因此二價(jià)汞的檢測(cè)對(duì)評(píng)價(jià)朱砂的安全性更有意義。

4.5 雄黃 除原有的三氧化二砷檢查外，增加了采用HPLC-ICP-MS對(duì)三價(jià)砷和五價(jià)砷的含量進(jìn)行檢查：取雄黃粉末(過(guò)五號(hào)篩)約30 mg，精密稱定，置250 mL塑料量瓶中，加人工腸液約200 mL，搖勻，置37 ℃水浴中超聲處理(功率300 W，頻率45 kHz)2 h(每隔15 min充分搖勻1次)，放冷，用人工腸液稀釋至刻度，搖勻，取適量置50 mL塑料離心管中，靜置20～24 h，用洗耳球吹去上層表面溶液，吸取中層溶液約15 mL(吸取時(shí)應(yīng)避免帶入顆粒)，用微孔濾膜(10 mm)濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5 mL，置50 mL塑料量瓶中，加0.02 mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。吸取供試品溶液20 uL。規(guī)定雄黃中含三價(jià)砷和五價(jià)砷的總量以砷(As)計(jì)，不得過(guò)7.0%[3]。對(duì)于雄黃而言，三價(jià)砷和五價(jià)砷是其砷毒性的主要來(lái)源，雄黃的可溶性砷毒性大小依次為亞砷酸鹽(iAs3)>砷酸鹽(iAs5)>一甲基砷(MMA)>二甲基砷(DMA)，砷甜菜堿(AsB)幾乎無(wú)毒[6]。因此對(duì)三價(jià)砷和五價(jià)砷的含量進(jìn)行檢查限定有必要。

5 含量測(cè)定

2020年版《中國(guó)藥典》礦物藥含量測(cè)定新增內(nèi)容為自然銅中鐵的含量測(cè)定。取細(xì)粉約0.25 g，精密稱定，置瓷坩堝中，在650 ℃灼燒約30 min，取出，放冷，將灼燒物轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，加鹽酸15 mL與25%氟化鉀溶液3 mL，蓋上表面皿，加熱至微沸，滴加6%氯化亞錫溶液，不斷振搖，待分解完全，瓶底僅留白色殘?jiān)鼤r(shí)，用少量水洗滌表面皿及瓶?jī)?nèi)壁，趁熱滴加6%氯化亞錫溶液至顯淺黃色(如氯化亞錫過(guò)量，可滴加高錳酸鉀試液至顯淺黃色)，加水100 mL與25%鎢酸鈉溶液15滴，并滴加1%三氯化鈦溶液至顯藍(lán)色，再滴加重鉻酸鉀滴定液(0.016 67 mol/L)至藍(lán)色剛好褪盡，立即加硫酸-磷酸-水(2∶3∶5)10 mL與0.5%二苯胺磺酸鈉溶液10滴，用重鉻酸鉀滴定液滴定至溶液顯穩(wěn)定的藍(lán)紫色，規(guī)定含鐵應(yīng)為40.0%～55.0%[3]。

除自然銅外，2020年版《中國(guó)藥典》其余礦物藥物測(cè)定方法均無(wú)變化，大多采用滴定法測(cè)定。

6 討論

通過(guò)與2015年版《中國(guó)藥典》對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)2020年版《中國(guó)藥典》25種礦物藥中共有8味藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)發(fā)生變化。鑒別項(xiàng)中花蕊石修訂內(nèi)容1項(xiàng)，石膏新增內(nèi)容1項(xiàng)；檢查項(xiàng)中，白礬修訂內(nèi)容1項(xiàng)，朱砂、雄黃、芒硝、玄明粉各新增內(nèi)容1項(xiàng)；含量測(cè)定項(xiàng)目中，自然銅新增內(nèi)容1項(xiàng)。此外，還有12味礦物藥仍無(wú)檢查項(xiàng)內(nèi)容，2味無(wú)鑒別項(xiàng)內(nèi)容，5味無(wú)含量測(cè)定項(xiàng)內(nèi)容，見(jiàn)表1。可見(jiàn)礦物藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚不完善。

表1 2020年版《中國(guó)藥典》礦物藥標(biāo)準(zhǔn)變化

因?yàn)榈V物藥的法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)仍不完善，近年來(lái)對(duì)礦物藥的分析方法的研究越來(lái)越多(表2)，這些分析檢測(cè)方法囊括了礦物藥的形態(tài)鑒定、元素分析、金屬價(jià)態(tài)分析、安全性評(píng)價(jià)等方面的研究。

表2 礦物藥檢測(cè)方法匯總

定性分析檢測(cè)方法包括掃描電鏡法(SEM)、及熱分析法(差示掃描量熱法、差熱分析法及熱重法)。SEM主要用于礦物藥的表面形態(tài)分析，應(yīng)用于白礬、皂礬、滑石粉等6種藥材中；熱分析法用于藥物理化性質(zhì)變化或檢查礦物藥的純度，在白礬、花蕊石、青礞石等7 味礦物藥中應(yīng)用。

定量分析檢測(cè)方法包括X射線熒光光譜法(XRF)、X射線衍射分析法(XRD)、紅外光譜法(IR)、近紅外光譜法(NIRS)、原子吸收分光光度法(AAS)、原子熒光光譜(AFS)、拉曼光譜法(Raman)、電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)及原子發(fā)射光譜(ICP-OES)等。XRF通過(guò)分析礦物藥中每種元素的百分?jǐn)?shù)，進(jìn)行定量分析，在花蕊石、紫石英、石膏及鐘乳石中得到應(yīng)用；XRD用于礦物藥物相組成或晶體結(jié)構(gòu)分析，在白礬、皂礬、朱砂等14味藥中應(yīng)用；IR通過(guò)原圖譜與導(dǎo)數(shù)光譜結(jié)合，來(lái)分辨礦物藥組成的細(xì)小差異，在白礬、青礞石、磁石等7種藥材中得到應(yīng)用；NIRS是一種對(duì)樣品無(wú)損的快速鑒別方法，已有自然銅、赤石脂、金礞石等9種礦物藥建立了NIRS快速分析模型；AAS是一種應(yīng)用廣泛的無(wú)機(jī)元素定量分析方法，紅粉、輕粉以及磁石應(yīng)用了該方法；AFS通過(guò)測(cè)定原子在光輻射能的作用下發(fā)射的熒光強(qiáng)度來(lái)進(jìn)行定量分析，在朱砂、雄黃、磁石的質(zhì)量控制中都有應(yīng)用；Raman圖譜具有較強(qiáng)的指紋性，應(yīng)用在朱砂、輕粉、硫磺等9種礦物藥中；ICP-MS檢測(cè)靈敏度高，可進(jìn)行多元素同時(shí)測(cè)定，用于礦物藥飲片在體內(nèi)外的無(wú)機(jī)元素分析，在白礬、朱砂等藥材的分析中應(yīng)用；HPLC-ICP-MS可以對(duì)無(wú)機(jī)元素進(jìn)行價(jià)態(tài)分析，在雄黃的體內(nèi)外形態(tài)分析中得到應(yīng)用；ICP-OES又稱ICP-AES，可以通過(guò)建立無(wú)機(jī)元素的特征圖譜來(lái)對(duì)礦物藥進(jìn)行分析，應(yīng)用于白礬、禹余糧中。

上述檢測(cè)分析方法在礦物藥中應(yīng)用報(bào)道最多的為XRD(14種)、Raman(9種)、NIRS(9種)。除SEM、AFS外，其余方法均被藥典收錄。其中，XRF為2020年版《中國(guó)藥典》新增方法，具有操作簡(jiǎn)單、可多元素同時(shí)分析、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。SEM、AFS目前研究較多，方法日趨成熟，今后有望納入藥典收載。

7 結(jié)論

相較于傳統(tǒng)植物中藥，礦物藥的種類并不算多，質(zhì)量控制研究也仍有不足，但能收載于藥典的都是歷經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間臨床檢驗(yàn)的，療效獨(dú)特。優(yōu)質(zhì)飲片是保證臨床療效的前提，它的生產(chǎn)離不開(kāi)全程動(dòng)態(tài)質(zhì)量控制，而飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)還是目前衡量飲片質(zhì)量?jī)?yōu)劣及安全性的重要指標(biāo)。因此，對(duì)藥材及飲片的生產(chǎn)及質(zhì)量進(jìn)行不斷的研究，與時(shí)俱進(jìn)地對(duì)生產(chǎn)過(guò)程及質(zhì)量控制方法進(jìn)行完善，使中藥材的評(píng)價(jià)指標(biāo)與療效聯(lián)系更為緊密，鑒別的專屬性更強(qiáng)，中藥及飲片的質(zhì)量才能好。