河南省土壤肥料站 程傳凱

氨基酸水溶肥料作為肥料行業(yè)的新成員，除具有水溶肥料易溶解、易吸收等優(yōu)點(diǎn)外，還具有調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)和土壤酸堿度的特點(diǎn)。近年，河南省針對(duì)氨基酸水溶肥料進(jìn)行了大量作物田間試驗(yàn)，加上水肥一體化技術(shù)的推廣和春季“一噴三防”項(xiàng)目的大力推動(dòng)，使農(nóng)民真正看到良好的效果。但在氨基酸水溶肥料快速發(fā)展的同時(shí)，由于大家對(duì)氨基酸肥料缺乏了解，再加上氨基酸水溶肥料生產(chǎn)對(duì)設(shè)備場(chǎng)地的要求相對(duì)較低，導(dǎo)致氨基酸水溶肥料產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，在一定程度上限制了氨基酸肥料的發(fā)展。河南省土壤肥料站作為肥料質(zhì)量監(jiān)督的重要一環(huán)，有必要引進(jìn)氨基酸水溶肥料檢測(cè)儀器，開(kāi)展氨基酸水溶肥料檢測(cè)工作。

氨基酸水溶肥料檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)——《水溶肥料 游離氨基酸含量的測(cè)定》（NY/T 1975-2010）是氨基酸水溶肥料檢測(cè)的主要依據(jù)，標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)提到使用液相色譜法中的氨基酸自動(dòng)分析儀法（柱后衍生法）和柱前衍生法兩種方法測(cè)定水溶肥料中游離氨基酸的含量。而自動(dòng)分析儀法是最終仲裁法。本文主要以柱后衍生法為基礎(chǔ)，以德國(guó)塞卡姆全自動(dòng)氨基酸分析儀為主要檢測(cè)儀器，分析檢測(cè)過(guò)程中常見(jiàn)的幾種故障和解決方法。

一、儀器內(nèi)進(jìn)入氣泡

（一）原因分析

由于全自動(dòng)氨基酸分析儀在運(yùn)行中主要靠泵推動(dòng)試劑進(jìn)行檢測(cè)，一旦氣泡進(jìn)入泵頭，將造成液體流速不穩(wěn)甚至完全停止，泵壓來(lái)回變化或泵壓降低，圖譜錯(cuò)亂甚至無(wú)峰。分析產(chǎn)生原因主要有以下幾點(diǎn)：首先，試劑更換或者添加試劑時(shí)沒(méi)有及時(shí)排氣泡；其次，全自動(dòng)氨基酸分析儀的自動(dòng)化程度較高，且單針運(yùn)行時(shí)間約為1 h，如果樣品較多，儀器分析的時(shí)間將會(huì)延長(zhǎng)，某一種試劑在運(yùn)行中耗盡并且沒(méi)有得到補(bǔ)充，那么密封氮?dú)鈱?huì)隨管路進(jìn)入儀器。

（二）解決方法

通過(guò)與工程技術(shù)人員溝通、整理操作規(guī)程，檢測(cè)人員在每次運(yùn)行儀器前要檢查各個(gè)試劑余量，確保能夠滿(mǎn)足當(dāng)前批次使用，然后在每次更換或添加試劑后及時(shí)進(jìn)行管路排除氣泡操作，確保管路中沒(méi)有氣泡。

二、茚三酮溶液配置問(wèn)題

（一）原因分析

全自動(dòng)氨基酸分析儀為了降低后期使用成本，除能夠使用原廠(chǎng)茚三酮試劑外，還提供了氨基酸分析所需茚三酮試劑的配比方法。檢測(cè)人員在實(shí)際化驗(yàn)中可以根據(jù)廠(chǎng)家提供的試劑配置方案自行配置，從而大大節(jié)約試劑成本。由于茚三酮容易氧化變質(zhì)，根據(jù)化驗(yàn)需要自行配置茚三酮試劑，可防止剩余試劑因?yàn)榉胖脮r(shí)間過(guò)長(zhǎng)而變質(zhì)。但是，由于精密度高，儀器對(duì)試劑的要求非常高，使用純度達(dá)不到要求的茚三酮試劑極易發(fā)生氧化造成變質(zhì)失效，且由于這種試劑所含雜質(zhì)較多易造成儀器在運(yùn)行時(shí)堵塞毛細(xì)管，使儀器內(nèi)壓力過(guò)大損壞反應(yīng)單元。

（二）解決方法

1.檢測(cè)人員配置茚三酮溶液時(shí)要使用大廠(chǎng)出品的茚三酮，品質(zhì)有保證；使用0.45 mm 孔徑濾膜進(jìn)行過(guò)濾，去除雜質(zhì)，減少堵塞毛細(xì)管的概率。

2.在檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)的反應(yīng)顏色或者壓力異常，很有可能是由于茚三酮溶液變質(zhì)造成的。遇到這種情況應(yīng)立即終止儀器運(yùn)行，檢查管路，運(yùn)行管路清洗程序。如果仍然不能使壓力降低，原因就能夠確定為管路已經(jīng)堵塞，需要把反應(yīng)池兩頭的毛細(xì)管反接，進(jìn)行反沖。

三、鉀鈉緩沖液配置問(wèn)題

（一）原因分析

由于Cys 對(duì)pH 最敏感，所以配置的鉀鈉緩沖液對(duì)pH 的要求非常高。鉀鈉緩沖液的pH 要為5.51±0.03。pH 偏高就會(huì)造成Cys 出峰提前與Ala 粘連或重疊；相反，如果pH 偏低，Cys 則與Val 粘連或重疊，無(wú)法正常積分。而影響pH 最主要的因素是溫度，由于配置鉀納緩沖溶液時(shí)使用乙酸，一旦溫度過(guò)高，乙酸容易揮發(fā)造成pH的變化。

（二）解決方法

通過(guò)實(shí)際驗(yàn)證，配置鉀鈉緩沖液要在低溫條件下使用磁力攪拌，并且使用保鮮膜覆蓋燒杯以免造成乙酸揮發(fā)。溶解試劑應(yīng)避免使用超聲波震蕩儀，因?yàn)槌暡ㄕ鹗巸x在工作時(shí)會(huì)產(chǎn)生一定熱量，容易造成鉀鈉緩沖溶液pH 的變化。

四、管路茚三酮試劑沉淀問(wèn)題

（一）原因分析

實(shí)際操作中會(huì)出現(xiàn)個(gè)別樣品茚三酮試劑濃度較高，常規(guī)清洗程序和洗液不能夠徹底去除管路內(nèi)殘留的茚三酮試劑。儀器如果不連續(xù)使用，容易在管路內(nèi)部殘留茚三酮試劑沉淀，堵塞管路。

（二）解決方法

通過(guò)多次摸索和試驗(yàn)，提高異丙醇洗液濃度至50%，并且把自動(dòng)清洗程序連續(xù)運(yùn)行2 遍，能夠較好地保證儀器正常運(yùn)行。