付 佳

(遼寧省錦州市義縣畜牧獸醫(yī)發(fā)展服務(wù)中心，遼寧 錦州 121100)

基層畜牧養(yǎng)殖對(duì)免疫接種的不夠重視是導(dǎo)致動(dòng)物疫病多發(fā)的主因所在，強(qiáng)化免疫管理的關(guān)鍵性無需多言，為此，首先要做的便是研制出優(yōu)質(zhì)疫苗，其不僅關(guān)乎養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)本身的發(fā)展，更是關(guān)乎人類健康、防控疫病大規(guī)模暴發(fā)的必然手段。

1 動(dòng)物疫苗研發(fā)現(xiàn)狀

動(dòng)物疫苗是具有良好免疫原性的病原微生物，經(jīng)繁殖和處理后制成的，用于針對(duì)性預(yù)防動(dòng)物疫病的生物制品，疫苗主要有以下類型：基因缺失疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、活載體疫苗、多肽疫苗、職務(wù)而疫苗、抗獨(dú)特型抗體疫苗。

1.1 基因缺失疫苗過去依靠致弱方式研制出的常規(guī)疫苗，雖然在毒力上有所降低，然而通常會(huì)使得免疫原性發(fā)生較為明確的變化，亦或在使用時(shí)容易顯露出返祖問題，存在致使疫病大范圍蔓延的潛在風(fēng)險(xiǎn)，而基因缺失疫苗在此方面則有較好的優(yōu)勢(shì)。此疫苗在由于缺失部分基因，發(fā)生突變的可能性很小，因而具備更高的安全性，現(xiàn)階段研發(fā)取得較好成果的基因缺失疫苗主要是豬偽狂犬、布氏桿菌疫苗，由于其感染過程更接近于自然感染，外加抗原組成更多，可以生出的抗體也更多元，免疫原性明顯更好。

1.2 基因工程亞單位疫苗基因工程亞單位疫苗，是當(dāng)前動(dòng)物疫苗重要研究成果，是在基因重組技術(shù)的支撐下，通過導(dǎo)入編碼的病原微生物保護(hù)性抗原的基因，然后表達(dá)于原核或者真核受體細(xì)胞，接著提取保護(hù)性抗原蛋白，然后接入相應(yīng)的佐劑最終制作成為基因工程重組亞單位疫苗。近年來，國(guó)內(nèi)及國(guó)外眾多科研人員加深了對(duì)細(xì)菌、病毒的保護(hù)性基因的研究與分析，同時(shí)分子生物學(xué)方法也得到了進(jìn)一步的完善，通過基因擴(kuò)張技術(shù)和克隆技術(shù)，獲得了更高質(zhì)量的病原微生物保護(hù)性蛋白，這使得基因工程重組亞單位疫苗質(zhì)量得到了進(jìn)一步的提升和保障。目前，常見的基因工程重組亞單位疫苗主要包括：桿狀病毒表達(dá)新城疫亞單位疫苗、狂犬病基因工程亞單位疫苗等等，均在臨床上實(shí)現(xiàn)了廣泛有效的應(yīng)用。和傳統(tǒng)疫苗相比，基因工程亞單位疫苗具備更高的安全性，疫苗當(dāng)中并沒有傳染性的材料，因此在接種疫苗之后并不會(huì)出現(xiàn)急性或者潛伏感染的現(xiàn)象，可用于妊娠期動(dòng)物的免疫接種中。同時(shí)，基因工程重組亞單位疫苗，極大的避免了常規(guī)活疫苗的變應(yīng)原和免疫抑制原，使其具備更高的穩(wěn)定性，無論是保存還是運(yùn)輸，均更加方便，所產(chǎn)生的免疫應(yīng)答能夠和感染產(chǎn)生的免疫應(yīng)答產(chǎn)生較大的區(qū)別，非常適用于動(dòng)物疫病防控工作當(dāng)中。

1.3 核酸疫苗作為新型疫苗的一種，核酸疫苗自身不具備抗原性，可以多次重復(fù)使用，動(dòng)物接種之后也可以在其體內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間存在，促進(jìn)保護(hù)性蛋白的持續(xù)表達(dá)，并以此刺激動(dòng)物機(jī)體生出更為強(qiáng)烈也更為持久的免疫應(yīng)答，給以動(dòng)物更長(zhǎng)效、有效的保護(hù)。從這一層面來看，核酸疫苗值得廣泛推廣開來，然而其缺陷亦不可忽視，其中最為核心的便是安全問題及體液免疫程度，這兩個(gè)缺陷的彌補(bǔ)是當(dāng)務(wù)之急，現(xiàn)階段研發(fā)最為頻繁的核算疫苗主要為豬病疫苗，豬II型圓環(huán)病毒便是其中的代表，接種效果明顯。

1.4 活載體疫苗基于分子生物學(xué)理論把致病微生物的保護(hù)性基因加以重組，將其重組至細(xì)菌基因組當(dāng)中以此研制出活疫苗，在給動(dòng)物接種之后，疫苗在其機(jī)體中可以生成保護(hù)性蛋白，依靠對(duì)免疫器官的刺激促使免疫保護(hù)的形成。一般而言，常見的病毒載體主要為腺病毒、禽痘病毒等，細(xì)菌載體為枯草桿菌、乳酸菌等，研究發(fā)現(xiàn)，活疫苗的免疫誘導(dǎo)過程同自然過程存在諸多相通之處，其不但能誘導(dǎo)細(xì)胞免疫，還能誘導(dǎo)體液免疫，所以可以發(fā)揮更好的免疫作用。

1.5 多肽/表位疫苗合成肽疫苗是在基因技術(shù)、化學(xué)合成技術(shù)的基礎(chǔ)之上，合成病原體的保護(hù)性多肽或表位，然后將其連接到大分子載體，并配合使用佐劑所制作而成的疫苗，目前，常見的有：禽流感疫苗、口蹄疫育苗等。合成肽疫苗是有單一抗原位點(diǎn)的多肽（僅有41個(gè)氨基酸），針對(duì)一些特定的毒株能夠起到非常理想的免疫效果，但是如果毒株出現(xiàn)變異現(xiàn)象，則會(huì)影響免疫效果。合成肽疫苗采用的是單相油佐劑，免疫應(yīng)答速度較慢，同時(shí)不存在異體蛋白，因此接種于動(dòng)物后過敏反應(yīng)發(fā)生幾率并不高，同時(shí)兼?zhèn)漕A(yù)防和增強(qiáng)動(dòng)物免疫功能的效果。合成肽疫苗和傳統(tǒng)疫苗相比，并沒有致病微生物的基因組，因此在和宿主基因整合或重組時(shí)并不會(huì)產(chǎn)生危險(xiǎn)，具備較高的安全性。但是，合成肽疫苗也具有一定的缺點(diǎn)，如：研發(fā)費(fèi)用較高，免疫效果亟待提升等。

1.6 植物疫苗植物疫苗指的是在植物細(xì)胞內(nèi)重組病原微生物保護(hù)性抗原基因，通過瞬時(shí)、穩(wěn)定表達(dá)保護(hù)性蛋白的植物，經(jīng)過加工、提純最終制成具有免疫效果的植物疫苗。植物疫苗主要是通過提純注射、制成植物性飼料進(jìn)行黏膜免疫等兩種方式完成動(dòng)物免疫的，當(dāng)前植物作為抗原表達(dá)和遞送的載體，成為現(xiàn)如今生物技術(shù)領(lǐng)域研究的關(guān)鍵問題，植物食用性免疫疫苗成為眾多國(guó)內(nèi)外科研人員研發(fā)的焦點(diǎn)。植物疫苗和上述幾種疫苗相比，其培養(yǎng)條件更加寬松化，在培養(yǎng)過程中并不需要使用特異培養(yǎng)基，后期也不需要進(jìn)行特定的加工、提純，整個(gè)流程非常簡(jiǎn)化，極大的降低了生產(chǎn)成本，如果需要獲得穩(wěn)定遺傳的植株，只需要大面積種植所需要的植物即可。此外，植物細(xì)胞壁具有一定的緩釋功能，因此在接種于動(dòng)物體內(nèi)后能夠長(zhǎng)期緩慢釋放，最終達(dá)到長(zhǎng)期性免疫預(yù)防的效果，因此植物疫苗成為當(dāng)前安全、綠色、高效的動(dòng)物疫苗。

1.7 抗獨(dú)特型抗體疫苗抗獨(dú)特型抗體疫苗，指的是在免疫網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)原理的基礎(chǔ)之上，利用抗獨(dú)特型抗體代替抗原作為免疫原進(jìn)而所制成的疫苗。動(dòng)物機(jī)體對(duì)某種抗體抗體達(dá)到較高水平的情況下，機(jī)體免疫系統(tǒng)會(huì)將其視作為靶子并產(chǎn)生抗體，兩者結(jié)合后即可產(chǎn)生良好的抑制效果。當(dāng)原抗體達(dá)到一定水平后，會(huì)產(chǎn)生新的抗體，此時(shí)原抗體和新抗體結(jié)合，此時(shí)兩者呈鏡像關(guān)系，由于該抗體分子較為獨(dú)特，因此被稱之為抗獨(dú)特型抗體，該抗體是在雜交瘤技術(shù)制備的基礎(chǔ)之上形成的，將其接種于動(dòng)物機(jī)體內(nèi)，能夠刺激產(chǎn)生抗原抗體。和傳統(tǒng)疫苗相比，抗獨(dú)特型抗體疫苗也具有非常突出的優(yōu)勢(shì)，如：不含病原基因和蛋白，但卻易于出現(xiàn)免疫抑制的現(xiàn)象。免疫原是抗體本身的“模擬物”，因此非常適用于當(dāng)前無法培養(yǎng)、培養(yǎng)困難、操作危險(xiǎn)系數(shù)高的多糖類抗原疫苗的生產(chǎn)制作，如：禽流感病毒抗獨(dú)特型疫苗、雞傳染性法氏囊病抗獨(dú)特型疫苗、牛布魯菌抗獨(dú)特型疫苗、血吸蟲病抗獨(dú)特型疫苗、豬帶絳蟲六鉤蚴抗獨(dú)特型疫苗等等，效果顯著。抗獨(dú)特型疫苗在生產(chǎn)制作過程中，能夠制作成為各類抗原疫苗。但是因?yàn)榭躬?dú)特型抗體屬于弱免疫源，向因此需要加深和LPS等載體的聯(lián)結(jié)，最終達(dá)到更加理想的動(dòng)物免疫效果。

2 動(dòng)物疫苗未來展望

2.1 養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的積極助推伴隨民眾飲食質(zhì)量的優(yōu)化，民眾對(duì)動(dòng)物制品的需求量必然會(huì)逐年攀升，基于行業(yè)視角而言，為及時(shí)適應(yīng)日愈擴(kuò)展的市場(chǎng)需求，以畜禽養(yǎng)殖也為代表的養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)在日后將會(huì)向著集約化、現(xiàn)代化的方向不斷靠攏。而動(dòng)物疫苗作為防范各類動(dòng)物疫病不可缺少的武器，加快研發(fā)步伐的關(guān)鍵性眾目昭彰，我國(guó)本身便是養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)大國(guó)，為進(jìn)一步防范疫病對(duì)畜牧養(yǎng)殖及民眾健康帶來的風(fēng)險(xiǎn)，動(dòng)物疫苗的研發(fā)將繼續(xù)大力推進(jìn)。

2.2 滅活疫苗的加快創(chuàng)新縱觀當(dāng)前的動(dòng)物疫病現(xiàn)狀，舊病難以根除、新病層出疊現(xiàn)的問題仍舊存在，且有愈發(fā)明顯的趨勢(shì)，受此影響，各類疫病病菌的抗藥能力也在持續(xù)強(qiáng)化，舊疫苗的免疫作用不斷下降，致使動(dòng)物疫苗的研發(fā)也需隨之變更方向。然而在現(xiàn)下新病種不斷涌現(xiàn)、病毒基因無法明確的狀況下，要想優(yōu)化免疫成效不達(dá)預(yù)期的疫苗，采取滅活技術(shù)無疑是規(guī)避研發(fā)損失的重要途徑，滅活疫苗在未來依舊是可以長(zhǎng)效發(fā)展、不斷創(chuàng)新的技術(shù)。

2.3 植物疫苗的研發(fā)推廣同另外一些新型疫苗相比較來看，植物疫苗的研發(fā)條件更為寬泛，前期階段無需專門的人員以及特殊的培養(yǎng)基，后期階段又無需規(guī)范嚴(yán)謹(jǐn)?shù)募庸ぜ凹兓幚恚云溲邪l(fā)所需的經(jīng)費(fèi)投入相對(duì)也更少一些。若是可以獲得可以穩(wěn)定性遺傳的植株，則可以大范圍來種植，更方便進(jìn)行推廣，植物細(xì)胞壁也可以凸顯一定的緩釋效果，能令其長(zhǎng)時(shí)間存在，持續(xù)形成刺激，發(fā)揮更為長(zhǎng)效的免疫作用，另外，植物疫苗還具有更好的風(fēng)險(xiǎn)規(guī)避作用，是一種安全環(huán)保、高效穩(wěn)定的疫苗。

2.4 動(dòng)物疫苗的優(yōu)化管理

2.4.1 貯藏管理 動(dòng)物疫苗制成后，要認(rèn)真做好管理貯藏管理工作，要控制好貯藏環(huán)境。一般情況下，滅活苗貯藏時(shí)溫度控制在2～8℃為宜，禁止凍結(jié)。凍干活疫苗貯藏時(shí)溫度控制在-15℃以下為宜。同時(shí)，要控制好濕度，如環(huán)境過于潮濕，則極易導(dǎo)致出現(xiàn)發(fā)霉現(xiàn)象，導(dǎo)致疫苗被污染，同時(shí)會(huì)導(dǎo)致疫苗瓶身的簽字模糊。所以必須要在干燥冷暗的問題貯藏疫苗，并且要結(jié)合動(dòng)物疫苗品種、批號(hào)等方面的因素分類貯藏疫苗，保證疫苗內(nèi)包裝和外包裝完好，避免污染病原微生物，同時(shí)也避免疫苗名稱、批號(hào)等無法辨別。

2.4.2 運(yùn)輸管理 運(yùn)輸動(dòng)物疫苗時(shí)，也應(yīng)控制好運(yùn)輸溫度，使用專用的疫苗運(yùn)輸車輛，凍干苗運(yùn)輸時(shí)溫度控制在-2℃以下為宜，滅活苗運(yùn)輸時(shí)溫度控制在2～8℃為宜，如需要混合運(yùn)輸，則將溫度控制在2～4℃為宜。小規(guī)模運(yùn)輸動(dòng)物疫苗時(shí)，需要使用專用冷藏箱，如條件不允許可使用避光尼龍袋，并設(shè)置冰袋，盡快將疫苗進(jìn)行使用，避免導(dǎo)致疫苗失效。

2.4.3 使用管理 使用疫苗時(shí)，使用人員應(yīng)做好使用管理工作，對(duì)疫苗接種方法進(jìn)行查看，保證接種方法準(zhǔn)確，避免對(duì)免疫效果造成影響。要檢查疫苗有效期，避免接種過期疫苗，檢查疫苗是否有雜質(zhì)，如有雜質(zhì)則禁止接種。要控制好各類疫苗的使用劑量和濃度，選用適宜的稀釋液，并控制好稀釋濃度，確保做到定量、定濃度免疫。稀釋后的疫苗，應(yīng)在2h內(nèi)完成使用，避免疫苗失效。完成免疫接種工作后，需要對(duì)疫苗空瓶等收集并集中消毒處理。

2.4.4 報(bào)廢審批 使用動(dòng)物疫苗時(shí)，要做好規(guī)劃安排工作，避免出現(xiàn)損失及浪費(fèi)等現(xiàn)象。如因?yàn)椴豢煽咕苄砸蛩貙?dǎo)致動(dòng)物疫苗失效、過期，則要進(jìn)行報(bào)廢處理。要認(rèn)真填寫《重大動(dòng)物疫病疫苗報(bào)廢審批表》，然后交由各個(gè)主管部門進(jìn)行審批，獲得批準(zhǔn)后才允許報(bào)廢處理，疫苗報(bào)廢時(shí)應(yīng)做好記錄工作，為后期疫苗查詢工作提供重要參考。

3 結(jié)束語

免疫成效是決定畜牧養(yǎng)殖收益的關(guān)鍵要素，必須得到充分重視，疫苗研發(fā)是確保免疫成效提升的核心手段之一?，F(xiàn)階段，動(dòng)物疫苗的研發(fā)已經(jīng)取得較好成績(jī)，然而依舊會(huì)有這樣那樣的不足。所以，立足于研發(fā)現(xiàn)狀，探尋突破路徑是必然趨勢(shì)。除了在研發(fā)方面的努力之外，相關(guān)部門也需做好宣傳指導(dǎo)，在潛入默轉(zhuǎn)中強(qiáng)化廣大基層養(yǎng)殖戶的免疫觀念，讓他們意識(shí)到接受免疫是搞好畜牧養(yǎng)殖的必然之舉，為免疫接種的執(zhí)行打好群眾基礎(chǔ)，繼而按部就班、行之高效地推進(jìn)各項(xiàng)免疫事宜。