羅成剛，黃小波，袁蓉，王定國

（1.成都市畜禽遺傳資源保護中心 成都 610081；2.四川農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院豬病研究中心 成都 611130；3.成都市動物疫病預防控制中心 成都 610041）

豬瘟（CSFV）和豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是危害我國養(yǎng)豬業(yè)的兩類重大傳染病，常單獨或混合感染，給豬場造成嚴重的經(jīng)濟損失。豬瘟疫苗免疫普遍，目前主要問題在種豬場的垂直傳播造成仔豬帶毒持續(xù)感染等問題。豬繁殖與呼吸綜合征主要表現(xiàn)為呼吸道癥狀和繁殖障礙的傳染病，仔豬和繁殖母豬最為易感，其最為主要的流行病學特點是持續(xù)感染[1]。豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征主要通過免疫預防控制，但疫病存在新的流行性特點，也存在病毒變異情況[2]，增加了豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征的防控難度。加強疫苗免疫和監(jiān)測，是防控這兩種病的有效手段。

四川是我國養(yǎng)豬大省，四川豬場的豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征的總體免疫效果較好，但丁夢蝶等[3]對2017 年四川部分地區(qū)豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征的免疫抗體監(jiān)測結果表明，部分豬場或地區(qū)存在免疫失敗的現(xiàn)象，影響?zhàn)B豬業(yè)的健康發(fā)展。因此，針對豬場開展豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征的免疫與抗體監(jiān)測，不斷提高豬場抗體水平，有助于科學防控這兩種疫病。

本研究采用IDEXX 試劑盒對四川成都、攀枝花、廣元、內江等地的4 個豬場的豬血清樣品進行了CSFV 和PRRSV 免疫抗體檢測與分析，為豬場評估免疫效果和指導改進免疫程序提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗場所

四川農(nóng)業(yè)大學成都校區(qū)豬病研究中心實驗室。

1.2 主要設備和試劑

酶標分析儀、普通離心機、EP 管、微量移液器、恒溫箱等。豬瘟病毒（CSFV）抗體檢測試驗盒（IDEXX）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）抗體檢測試驗盒（IDEXX），由四川農(nóng)大豬病研究中心提供。

1.3 血清樣本收集與處理

2021 年四川成都、攀枝花、廣元、內江四個地區(qū)4 個豬場，均進行過CSFV 和PRRSV 疫苗免疫。每個豬場分別對仔豬、保育豬、母豬三種豬群采樣，一個豬場采集了公豬血液樣本，成都、攀枝花、廣元、內江四個豬場分別采樣73、30、61、49 份，共計213 份豬血液樣品，送到四川農(nóng)業(yè)大學豬病研究中心實驗室。按不同豬場、不同豬群進行分類編號。未加抗凝劑的血樣在室溫下傾斜放置1h，再放入冰箱中4℃保存24h 后取出，經(jīng)過5,000r/min 離心5min 后，取黃色透明的上清液即為血清；若采血時在血里加了抗凝劑，直接3,000r/min 離心5min 取上清。用移液槍將符合要求的血清收集于EP 管內后置于-20℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 抗體檢測

參照IDEXX 試劑盒說明書，對送檢來的213 份血清用間接ELISA 法分別進行豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征的免疫抗體檢測。CSFV 抗體結果判定所需數(shù)據(jù)有樣品孔吸光度值ODTEST、陽性對照的平均值ODPOS、陰性對照平均值ODNBC。阻斷率=（ODNBC-ODTEST）/ODNBC。豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測結果判定所需數(shù)據(jù)有陰性對照平均值NCx、陽性對照平均值PCx、樣本/陽性對照比率（S/P）。S/P=（樣品孔吸光度值-NCx）/（PCx-NCx）。CSFV 抗體成立前提：陰性對照平均OD450應大于0.5，陽性對照的阻斷率應大于50%。PRRSV 抗體實驗成立前提：陽性對照的平均值（PCx）和陰性對照的平均值（NCx）差值大于或等于0.150?？贵w判定標準：CSFV抗體的有無（陽性/陰性）：若被檢樣本的阻斷率大于或等于40%，則為CSFV 抗體陽性，反之，則為抗體陰性；PRRSV 抗體的有無（陽性/陰性）：若S/P 值大于或等于0.4，樣品應判為PRRSV 陽性，反之則為抗體陰性。

1.5 抗體結果分析

統(tǒng)計匯總豬場抗體檢測結果，分析豬場抗體免疫效果。

2 結果

2.1 豬瘟的抗體結果

1）四個豬場CSFV 抗體的總體檢測結果2021 年5—11 月四川省成都、廣元、攀枝花、內江4 個地區(qū)四個豬場共送檢213 份豬血清，用IDEXX 試劑盒檢測免疫抗體，共168 份豬瘟抗體陽性血清，平均陽性率為78.87%。四個豬場中豬瘟抗體陽性率最高為89.80%，最低為63.93%（結果見表1）。

表1 四個豬場的豬瘟免疫抗體檢測結果

2）四個豬場不同豬群CSFV抗體結果表2 的統(tǒng)計結果顯示：在不同豬場的不同豬群階段中，仔豬的豬瘟免疫抗體陽性率最高為100.00%，最低為60.00%；母豬的豬瘟免疫抗體陽性率最高為100.00%，最低為80.00%；保育豬的豬瘟免疫抗體陽性率最高為84.31%，最低為40.00%（結果見表2）。不同豬場的豬瘟免疫抗體整體情況有所不同。成都豬場豬瘟的總體免疫抗體陽性率相對較高，而廣元豬場豬瘟的總體免疫抗體陽性率相對偏低。

表2 不同豬群階段的豬瘟免疫抗體檢測結果

2.2 豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測結果

1）四個豬場PRRSV 抗體總體結果2021 年5—11 月四川成都、廣元、攀枝花、內江地區(qū)四個豬場共送檢213 份豬血清做免疫抗體檢測，共162 份豬PRRSV 免疫抗體陽性血清，陽性率為76.06%，四個豬場中豬PRRSV 免疫陽性率最高為93.15%，最低為57.38%，具體結果見表3。

表3 四個豬場的豬PRRSV免疫抗體檢測結果

2）四個豬場PRRSV 不同豬群抗體結果表4 的結果顯示：在不同豬場的不同豬群階段中，仔豬的PRRSV 免疫抗體陽性率最高為100.00%，最低為50.00%；母豬的PRRSV 免疫抗體陽性率最高為100.00%，最低為61.54%；保育豬的PRRSV 免疫抗體陽性率最高為100.00%，最低為87.50%。不同豬場的PRRSV 免疫抗體整體情況有所不同。成都豬場除了母豬外，仔豬和保育豬的PRRSV 免疫抗體總體陽性率高；而攀枝花、廣元、內江豬場的仔豬PRRSV 免疫抗體陽性率較低，其余豬群的PRRSV 免疫抗體陽性率總體相對較高。

表4 不同豬群階段的豬繁殖與呼吸綜合征免疫抗體檢測結果

3 討論

豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征是目前豬場普遍感染和引起持續(xù)損失、危害現(xiàn)代養(yǎng)豬業(yè)兩種最主要的疾病，是規(guī)模化養(yǎng)豬場需要進行基礎性免疫的兩類重要疫病，因此這兩類疾病免疫程序的科學制定非常重要。由于兩類疾病疫苗的生產(chǎn)廠家眾多，同時豬繁殖與呼吸綜合征疫苗存在毒株性的差異，從而導致規(guī)?；i場的免疫程序及免疫效果存在很大差異，因此針對不同的豬場，開展免疫效果評估，根據(jù)評估結果及時改進免疫方案，為達到更高效地防控疫病提供技術支撐是非常有必要的。

本研究檢測了四川部分地區(qū)4 個規(guī)?；B(yǎng)豬場的免疫抗體檢測，從表1 和表3 可看出四個豬場豬瘟和豬PRRSV 的免疫抗體平均陽性率分別為78.87%和76.06%。表2 和表4 可看出豬瘟母豬及公豬群體免疫效果較好，仔豬母源抗體整體效果比較理想，而保育豬免疫效果較差，存在感染風險。豬PRRSV 母豬群體免疫效果差異較大，仔豬群體免疫抗體普遍不高，提示部分養(yǎng)殖場的免疫程序及免疫劑量需要進一步的優(yōu)化。

從表1 和表3 可看出攀枝花和廣元地區(qū)的兩個豬場豬瘟和豬PRRSV 的免疫抗體陽性率整體較低，其中豬瘟抗體陽性率分別為66.67%和63.93%，豬PRRSV 抗體陽性率分別為70.00%和57.38%。初步分析造成的原因：①在采樣時就發(fā)現(xiàn)這兩個豬場的環(huán)境衛(wèi)生狀況不良；②飼養(yǎng)管理不規(guī)范，免疫程序執(zhí)行不嚴格。因此對于這兩個豬群應加強免疫抗體監(jiān)測，及時進行補免工作。

分階段統(tǒng)計顯示，從表2 可以看出仔豬和母豬的豬瘟免疫效果較好，而保育豬的免疫效果相對較差，從表4 可以看出保育豬和母豬的豬繁殖與呼吸綜合征免疫效果好，而仔豬的免疫效果較差，表明不同的豬群對于疫苗的免疫反應存在差異。跟沒有獲得母源抗體的仔豬相比，獲得了母源抗體的仔豬受疾病感染的程度要輕很多。母源抗體的持續(xù)時間對于仔豬的首次免疫有很大影響。保育豬極易發(fā)生應激，出現(xiàn)免疫效果的差異變化可能與動物機體的免疫系統(tǒng)不完善、飼養(yǎng)管理條件以及母源抗體干擾有關。

因此，在規(guī)模化養(yǎng)豬場內開展持續(xù)的抗體監(jiān)測，根據(jù)免疫抗體消長規(guī)律制定科學的針對性強的免疫計劃是保證豬場健康養(yǎng)殖的關鍵。免疫效果不理想的豬群，應分析免疫失敗原因并及時進行補免。同時，豬場要重視環(huán)境衛(wèi)生，做好消毒工作，搞好飼養(yǎng)管理，增

強機體抗病力，提高免疫效果。還要注意消除其它疾病對疫苗免疫的影響。有條件的豬場盡量開展種豬的豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征凈化。