楊 悅

(黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院牡丹江分院，黑龍江 牡丹江 157020)

土壤是果園生態(tài)系統(tǒng)建立的基礎(chǔ)，為果樹生長(zhǎng)繁殖提供了所需的營(yíng)養(yǎng)。土壤微生物是土壤中最活躍的成分，其在土壤生態(tài)系統(tǒng)中扮演了重要的角色，特點(diǎn)表現(xiàn)在數(shù)量龐大、種類繁多、功能多樣。土壤中的微生物以群落的形式存在，即對(duì)土壤養(yǎng)分含量及有機(jī)質(zhì)循環(huán)、轉(zhuǎn)化起推動(dòng)作用[1]，又對(duì)土壤結(jié)構(gòu)形成[2]、毒素去除[3]、土壤肥力[4]及植物健康[5]等產(chǎn)生影響，因此，受到越來(lái)越多國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注，在果園生態(tài)系統(tǒng)研究中，土壤微生物也日漸成為研究的重點(diǎn)。研究土壤微生物多樣性，不僅能夠?qū)ν寥鲤B(yǎng)分和環(huán)境質(zhì)量變化進(jìn)行預(yù)測(cè)，還能夠?qū)ζ鋬?yōu)勢(shì)種群及其功能進(jìn)行進(jìn)一步探索，為穩(wěn)定生態(tài)系統(tǒng)、開發(fā)生物資源以及促進(jìn)土壤可持續(xù)發(fā)展提供理論依據(jù)[6-7]。

1 土壤微生物多樣性

土壤中的微生物時(shí)刻處于活躍狀態(tài)，在土壤分解系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用，同時(shí)，其在土壤生態(tài)系統(tǒng)中推動(dòng)了物質(zhì)循環(huán)，促進(jìn)了能量流動(dòng)，也為生物地化循環(huán)做出了重要貢獻(xiàn)[3，8]。土壤微生物擁有極其豐富的物種資源，包括分布于土壤中的細(xì)菌、真菌、古菌及病毒等。目前，對(duì)土壤微生物多樣性的研究主要集中于土壤環(huán)境中的微生物種類和豐度，但也有關(guān)于分布均勻性和結(jié)構(gòu)變化的研究，關(guān)于微生物群落的功能多樣性等的研究也成為學(xué)者們研究的熱點(diǎn)[6]。研究方向主要在物種、遺傳、功能及生態(tài)等方面，對(duì)維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性具有重要意義[9]。

1.1 物種多樣性

土壤微生物的物種多樣性是指土壤生態(tài)系統(tǒng)中微生物的物種豐富度和均一度，其最直接的表現(xiàn)了土壤微生物的多樣性，也是研究土壤微生物多樣性內(nèi)容的基礎(chǔ)[10-11]。據(jù)文獻(xiàn)記載，1 g農(nóng)田土壤中含有幾百萬(wàn)細(xì)菌、數(shù)十萬(wàn)真菌孢子和數(shù)萬(wàn)個(gè)原生動(dòng)物和藻類[12]。有資料顯示，根據(jù)在原位的、不經(jīng)培養(yǎng)的微生物系統(tǒng)發(fā)育學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，自然界中仍有95%～99%的微生物種群尚未被分離培養(yǎng)和描述，以此推算地球上僅細(xì)菌就有10～50萬(wàn)種[13]，目前，分別應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、生活等的各個(gè)領(lǐng)域。傳統(tǒng)生態(tài)學(xué)研究方法的弊端是導(dǎo)致大多數(shù)的微生物不能分離培養(yǎng)的重要原因，但伴隨著相關(guān)學(xué)科的發(fā)展、技術(shù)的進(jìn)步，分子生物學(xué)理論和高通量測(cè)序技術(shù)等得到了迅猛推進(jìn)，致使土壤微生物多樣性的研究開啟了嶄新的篇章，為更加快速、準(zhǔn)確、深入地認(rèn)知微生物新物種及其新功能提供了支撐。

1.2 遺傳多樣性

土壤微生物的遺傳多樣性是指土壤微生物在基因水平上所攜帶的各類遺傳物質(zhì)和遺傳信息的總和，這是微生物多樣性的本質(zhì)和最終反映[14]。高等生物在遺傳多樣性上較為豐富，但在分子水平上卻不如微生物突出，其原因主要在于遺傳物質(zhì)的差別不僅通過(guò)堿基排列順序體現(xiàn)，也與組成核酸分子的堿基數(shù)量有關(guān)，二者分別具有多樣性和巨大型的特點(diǎn)[15]。微生物通過(guò)后代不同的遺傳信息，進(jìn)化為不同種類的微生物，各種微生物發(fā)揮著各自不同的功能，形成了多種多樣的群落結(jié)構(gòu)，最終形成了土壤微生物的多樣性。從本質(zhì)上看，遺傳多樣性是土壤微生物多樣性的來(lái)源。研究遺傳多樣性對(duì)于了解復(fù)雜多變的土壤生態(tài)系統(tǒng)具有不可忽視的作用，同時(shí)，也能夠?yàn)槿祟惐Ｗo(hù)遺傳資源基因，挽救瀕危物種等發(fā)揮了重要作用。目前，現(xiàn)代分子生物學(xué)中的群落水平總DNA分析方法和克隆文庫(kù)方法等多種方法，為微生物遺傳多樣性的研究提供了更加快捷有效的手段，在未來(lái)的研究中，將會(huì)得到更加全面詳細(xì)的解析[16]。

1.3 功能多樣性

土壤微生物的功能多樣性是在植物生長(zhǎng)過(guò)程中，土壤微生物執(zhí)行其作用的功能，包括代謝類型和功能活性等的多樣性。土壤微生物直接參與土壤中物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng)[8]，對(duì)土壤肥力的提高有重要作用，近年來(lái)，微生物肥料的生產(chǎn)和應(yīng)用給人們帶來(lái)了巨大的收益，其在維持土壤肥力、保護(hù)環(huán)境與平衡土壤生態(tài)系統(tǒng)等方面發(fā)揮了巨大作用。土壤微生物具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)，防治土傳病害[17]的功能，另外，寄主植物能夠通過(guò)土壤微生物促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)的吸收，植物也能夠通過(guò)土壤微生物提高抗鹽堿能力[18]，分解土壤礦物質(zhì)也是土壤微生物的功能之一。例如土壤中促生菌和共生菌產(chǎn)生的抗生素、植物激素等對(duì)植物的作用；豆科植物的根瘤菌和某些非豆科植物的放線菌的固氮作用[19]；磷細(xì)菌分解土壤磷礦石中的磷的作用等。人類對(duì)微生物的開發(fā)和利用，已經(jīng)在生產(chǎn)、科研、環(huán)保等方面得到廣泛應(yīng)用。其研究已經(jīng)成為人類解決生產(chǎn)生活中的各種問(wèn)題不可或缺的課題。

1.4 生態(tài)多樣性

土壤微生物的生態(tài)多樣性指微生物與其他生物和非生物環(huán)境間的關(guān)系。在地球上的不同區(qū)域，即使在相似的自然條件下，生態(tài)系統(tǒng)也是多種多樣的。中國(guó)幅員遼闊，自然資源豐富，生態(tài)系統(tǒng)類型也極其多樣化，有森林、草甸、農(nóng)田、濕地等陸地生態(tài)系統(tǒng)，以及江河湖海等水生生態(tài)系統(tǒng)。土壤微生物生態(tài)多樣性受經(jīng)緯度、海拔等地理因素影響的同時(shí)，也受溫度、水分等氣候條件，以及土壤質(zhì)地、土壤養(yǎng)分等土壤條件的影響，其不同的特征隨這些因素的變化而表現(xiàn)出來(lái)。研究表明，森林生態(tài)系統(tǒng)中，低緯度地區(qū)土壤微生物群落中細(xì)菌數(shù)量比例和微生物活性高于高緯度地區(qū)[20]；對(duì)高黎貢山土壤微生物的研究顯示，土壤微生物多樣性在海拔2000 m左右時(shí)最高，海拔升高或降低都會(huì)降低土壤微生物多樣性[21]；對(duì)塔克拉瑪干沙漠腹地土壤微生物的研究結(jié)果表明：流沙上微生物數(shù)量很少，而人工綠地的微生物數(shù)量顯著增加[22]。

2 土壤微生物多樣性的影響因素

2.1 自然因素

2.1.1 土壤狀況。土壤是土壤微生物生存的基礎(chǔ)環(huán)境，為其生長(zhǎng)繁殖提供了所需的營(yíng)養(yǎng)，土壤環(huán)境的變化會(huì)導(dǎo)致微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，其多樣性及功能也會(huì)隨之發(fā)生相應(yīng)變化。微生物影響因素多樣，包括重金屬、有機(jī)污染物等污染因子，土壤質(zhì)地、礦質(zhì)組成、土壤養(yǎng)分等土壤性質(zhì)。有研究表明，外源重金屬銅處理蘋果樹對(duì)土壤微生物活性和多樣性均產(chǎn)生影響，低濃度促進(jìn)微生物生長(zhǎng)，提高微生物多樣性，高濃度抑制土壤微生物活性，降低微生物多樣性[23]。王晨霞等[24]研究顯示，含石油污染的土壤中栽植的沙棘、刺槐、紫穗槐均能有效提高土壤微生物的多樣性，但不同濃度的石油脅迫水平不同程度的提高或降低土壤微生物多樣性。徐龍曉等[25]研究發(fā)現(xiàn)，蘋果園不同質(zhì)地土壤微生物功能多樣性呈現(xiàn)出黏壤土>壤土>砂壤土，土壤黏粒越多、孔隙度越大，其土壤微生物多樣性水平越高。黃晶淼等[26]對(duì)蘋果園根際土壤養(yǎng)分、pH及微生物相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)，三者間存在顯著相關(guān)性，土壤養(yǎng)分和pH均會(huì)影響土壤微生物。

2.1.2 植物群落。植物扎根于土壤中，必然對(duì)土壤環(huán)境產(chǎn)生影響，植物在不同生長(zhǎng)時(shí)期產(chǎn)生的分泌物以及植物枝條、落葉等凋落物進(jìn)入土壤，轉(zhuǎn)化成養(yǎng)分提供給微生物生長(zhǎng)繁殖，植物與微生物之間這樣協(xié)同進(jìn)化，使土壤微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，也促進(jìn)了土壤微生物多樣性[27]。不同植物對(duì)土壤微生物數(shù)量和多樣性的影響并不相同。有研究表明，不同的蘋果砧木其根系分泌物不同，影響了根際元素，從而對(duì)土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和數(shù)量等產(chǎn)生影響，陳汝等[28]對(duì)5種蘋果砧木土壤微生物進(jìn)行研究結(jié)果表明，不同蘋果砧木土壤微生物多樣性不同，其多樣性與數(shù)量變化趨勢(shì)也不同。錢進(jìn)芳等[29]研究生草栽培對(duì)山核桃林土壤微生物多樣性的影響發(fā)現(xiàn)，因植物種類、根系分泌物等的不同，致使不同生草品種之間土壤微生物代謝活性和多樣性指數(shù)均存在一定的差異。

2.1.3 氣候條件。土壤微生物多樣性不僅受土壤狀況、植物群落影響，也與溫度、水分等氣候條件有關(guān)。地球上復(fù)雜多變的氣候條件為我們的生存創(chuàng)造了各種各樣的自然環(huán)境，也對(duì)土壤微生物的生態(tài)分布產(chǎn)生了影響。土壤溫度即影響土壤水分蒸發(fā)速率，同時(shí)也影響微生物對(duì)底物的利用率，過(guò)高或過(guò)低的溫度均會(huì)使土壤微生物活性受到限制[30]。有研究表明，隨著季節(jié)的變化，土壤的理化性質(zhì)發(fā)生改變，繼而引起土壤菌群結(jié)構(gòu)的改變，其中土壤含水率是影響菌群結(jié)構(gòu)的重要因素之一[31]。徐雄[32]研究表明，李園土壤中纖維分解菌、硅酸鹽細(xì)菌的數(shù)量受土壤溫度、土壤水分含量影響，隨季節(jié)變化呈規(guī)律性變化，表現(xiàn)為夏季>秋季>春季>冬季。孫馨宇等[33]研究顯示，溫度和水分均能夠影響蘋果園土壤微生物多樣性，且培養(yǎng)90 d溫度對(duì)土壤微生物多樣性的影響大于水分。

2.2 人為因素

2.2.1 種植制度。土壤微生物多樣性除了受土壤狀況、植物群落、氣候條件等自然因素影響外，還受種植制度、施肥等人為因素的影響。種植制度是在同一地塊上各種作物按照不同的時(shí)間或是空間進(jìn)行多種組合。研究顯示，不同的種植制度對(duì)土壤微生物多樣性的影響并不相同，因此，開展對(duì)種植制度的研究對(duì)于改善土壤生態(tài)系統(tǒng)狀況，提高土壤質(zhì)量大有幫助。一般研究表明，果園覆蓋模式比清耕更有利于降低水分蒸發(fā)，穩(wěn)定土壤溫度，提高土壤肥力，增加土壤微生物活性，如龍妍[34]研究發(fā)現(xiàn)，葡萄園行間生草較清耕增加了土壤微生物的數(shù)量；沈鵬飛[35]研究發(fā)現(xiàn)，與清耕相比，秸稈、鋸末和森林土覆蓋處理有效提高了蘋果園土壤微生物群落多樣性。也有研究表明，板栗林不同除草方式中翻耕能夠增加土壤微生物量碳，除草劑降低微生物量碳，不割雜草土壤微生物功能多樣性最好[36]。

不同栽培模式的果園能夠影響土壤微生物種群，許姍姍等[37]研究結(jié)果表明，普通果園、精品果園與粗放果園三個(gè)不同栽培模式的蘋果園根際土壤微生物屬菌群各不相同，其中，精品果園與普通果園之間細(xì)菌群落親緣關(guān)系更近，而其真菌屬種群與另兩種果園親緣關(guān)系更遠(yuǎn)，表明精品果園栽培模式對(duì)于提高根際土壤微生物多樣性更有益。

2.2.2 施肥。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，人類為了提高土壤肥力，達(dá)到農(nóng)作物高產(chǎn)的效果，施肥成了解決問(wèn)題的常用手段。肥料中含有多種成分作用于土壤，使土壤理化性質(zhì)發(fā)生了變化，土壤微生物多樣性也因此而改變。目前，人們常用的肥料包括化學(xué)肥料、微生物肥料、有機(jī)肥等，而施肥影響土壤微生物的因素有很多，包括肥料的種類、施用方式等?？茖W(xué)研究表明，肥料可以促進(jìn)或抑制土壤中不同微生物的生長(zhǎng)，調(diào)節(jié)微生物種群結(jié)構(gòu)，改良土壤質(zhì)量。陳哲[38]研究表明，施用有機(jī)肥和微生物菌肥均能提高細(xì)菌的多樣性，降低真菌的多樣性。姬延偉[39]研究發(fā)現(xiàn)，生物菌肥枯草芽孢桿菌、菌酵抗重茬菌劑及VT-100能夠不同程度增加梨園土壤微生物的數(shù)量，其中細(xì)菌增加最多。范潔群等[40]研究得出，GEM 10 mL和BIO 250 mL+GEM 10 mL這兩種微生物菌肥能夠提高桃園土壤細(xì)菌、真菌數(shù)量，降低放線菌的數(shù)量。鄭丹[41]研究結(jié)果顯示，外施不同肥料的梨園均不同程度的提高了土壤細(xì)菌群落豐富度和多樣性指數(shù)，而群落均勻度均無(wú)顯著變化。土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)在相似的施肥種類下也具有較高相似度，不同的施肥種類和施肥量在不同程度上改變了土壤細(xì)菌群落多樣性。

3 結(jié)語(yǔ)

土壤微生物存在于土壤中，受土壤生態(tài)系統(tǒng)的影響，同時(shí)也影響著土壤生態(tài)系統(tǒng)，不同生態(tài)系統(tǒng)中的各種微生物各司其職，協(xié)同合作，共同維護(hù)了土壤生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定，同時(shí)也形成了土壤微生物的多樣性[16]。其研究即能夠?qū)ι鷳B(tài)系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)價(jià)，又能夠維護(hù)生態(tài)平衡，其作用舉足輕重[17]，但目前人們對(duì)自然的過(guò)度開發(fā)和利用，使得土壤生態(tài)環(huán)境遭到了嚴(yán)重的破壞，了解土壤微生物多樣性及其影響因素對(duì)于維護(hù)土壤生態(tài)環(huán)境穩(wěn)定及指導(dǎo)人們的生產(chǎn)實(shí)踐起到重要作用。隨著土壤生態(tài)學(xué)等相關(guān)學(xué)科的發(fā)展，土壤微生物多樣性的研究也隨之得到了快速發(fā)展，在未來(lái)其蘊(yùn)含的巨大潛力，必將為人類帶來(lái)巨大的收益。