胡振永，林偉俊，陳永培

（謝志輝生物醫(yī)藥研究院（廣州）有限公司，廣東 廣州 511431）

引言

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展，生活壓力與日俱增，現(xiàn)代都市人群進(jìn)入快節(jié)奏且飲食作息不規(guī)律的生活，如長期熬夜、睡眠不足等，加上目前空氣污染，城市霧霾，紫外線照射，以及長期面對手機(jī)電腦等電子屏幕的輻射的現(xiàn)狀，容易導(dǎo)致現(xiàn)代女性皮膚變得坑坑洼洼、黯淡無光，由此皮膚暗黃、色素沉著、色斑云集等不良癥狀越來越多見，改善膚色成為現(xiàn)代人類越來越重視的領(lǐng)域，美白功效的護(hù)膚品研發(fā)也備受關(guān)注[1-3]。

市售美白產(chǎn)品，美白劑較為單一，美白效果不強(qiáng)，還存在吸收效率不高因而美白效果不明顯的問題。此外，市售美白產(chǎn)品中一般采用尼泊金酯類的防腐劑作為美白化妝品的防腐劑，其成分復(fù)雜容易引發(fā)過敏等皮膚不良反應(yīng)[4-5]。對此，本文研制一款美白組合物，該組合物可促進(jìn)美白劑進(jìn)入真皮層發(fā)揮作用，大大提升美白效果，其美白效果優(yōu)于市售單品，且組合物的配方溫和不致敏。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與材料

本實(shí)驗(yàn)用到的主要儀器設(shè)備與主要材料見表1和表2。

表1 主要儀器設(shè)備

表2 主要材料

1.2 美白祛斑護(hù)膚品的制備

1.2.1 美白組合物的制備

美白組合物的配方如表3 所示，其制備工藝流程如下：

表3 美白組合物配方

1）將各組分按配比準(zhǔn)確稱量，各組分依次加入主鍋中，攪拌速度為200 r/min，攪拌至無團(tuán)塊。

2）開啟均質(zhì)，均質(zhì)速度為3 000 r/min，均質(zhì)時(shí)間為10 min，直至料體均勻。

美白組合物中還加入了α-熊果苷作為美白成分之一。熊果苷屬氫醌苷化合物，化學(xué)名為4-羥基苯基-D-吡喃葡萄糖苷，存在于熊果、越橘等植物中，是一種新興的無刺激、無過敏、配伍性強(qiáng)的天然美白活性物質(zhì)。α-熊果苷對紫外線灼傷導(dǎo)致的瘢痕有較好的治療功效，有較好的抗炎、修復(fù)和美白的作用，能夠抑制黑色素的產(chǎn)生和沉積，祛除色斑和雀斑。

1.2.2 美白祛斑護(hù)膚品的制備

美白祛斑護(hù)膚品包括美白爽膚水以及美白精華套裝，其配方見表4 和表5。

表4 美白爽膚水配方

表5 美白精華配方

美白爽膚水的制備工藝步驟如下：

1）把1，3-丙二醇、卡波姆、煙酰胺和乙酰殼糖胺依次加入低于45 ℃的水中分散均勻，在反應(yīng)釜中加熱至85 ℃，攪拌均勻；

2）降溫至45 ℃，加入美白組合物、氫化磷脂攪拌均勻；

3）將用水預(yù)溶的精氨酸、泛醇加入攪拌鍋攪拌均勻，再將加熱溶解的PEG-80 氫化蓖麻油加入攪拌鍋中攪拌均勻，出料。

美白精華的制備工藝步驟如下：

1）將1，3-丙二醇、甘油、甘油聚醚-26、透明質(zhì)酸鈉、丙烯酰二甲基?；撬徜@/VP 共聚物、丙烯酸酯類/C10-30 烷醇丙烯酸酯交聯(lián)聚合物和1，2-戊二醇加入反應(yīng)釜加熱至85 ℃混合攪拌均勻；

2）降溫至45 ℃，加入美白組合物、新戊二醇二庚酸酯、植物甾醇酯和VE 脂質(zhì)體，攪拌均勻；

3）將精氨酸、羥乙基哌嗪乙烷磺酸、聚乙二醇90 M分別用水預(yù)溶好，加入反應(yīng)釜攪拌均勻，將加熱溶解后的PEG-60 氫化蓖麻油加入反應(yīng)釜攪拌均勻，出料。

2 測試與表征

2.1 美白效果測試

對上述制得的美白祛斑護(hù)膚品和市售普通護(hù)膚品進(jìn)行進(jìn)行測試，共選取90 名受試者，隨機(jī)分為9 組，每組10 名分別使用美白產(chǎn)品，受試者的平均年齡為31（25-35）歲，受試部位為下頜部，所有受試者的受試部位皮膚均無任何異常，排除敏感肌受試者。

受試者在8 周內(nèi)每天涂抹美白產(chǎn)品，早晚各一次，每次0.3 g～0.5 g，使用14、28、56 d 后對受試者的下頜部分別采用Colorimeter 儀和黑色素皮膚檢測儀對皮膚的亮澤度（L）和黑色素系數(shù)（b）進(jìn)行測定，每次測定3 次后取平均值，接著再把整組內(nèi)每名受試者得到的數(shù)據(jù)取平均值，得到皮膚光澤度及黑色素系數(shù)變化的數(shù)據(jù)。

整個(gè)測定過程均在良好的非創(chuàng)傷檢測實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，溫度為20 ℃±2 ℃，相對濕度為40%～60%，實(shí)驗(yàn)前，受試者先采用潔凈水清洗測試部位并擦干，暴露測試部位，并靜止30 min。

2.2 酪氨酸酶活性抑制率測試

目前公認(rèn)的黑色素形成的路徑為：酪氨酸作為黑色素的主要原料，受酪氨酸酶的催化，使酪氨酸轉(zhuǎn)化為多巴，并催化多巴轉(zhuǎn)化為多巴醌，進(jìn)而轉(zhuǎn)化為多巴色素，再轉(zhuǎn)化為二羥基吲哚、酮式吲哚，最終轉(zhuǎn)化為黑色素。研究表明，抑制酪氨酸酶的活性是阻止或緩解黑色素形成的關(guān)鍵。

測量多巴醌的含量可以得出使用美白護(hù)膚品對酪氨酸酶的抑制作用，而多巴醌的含量可以通過紫外線光譜儀來測定。

測定時(shí)反應(yīng)在試管中進(jìn)行，將1mL濃度為30mmol/L的左旋多巴及質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL 磷酸鹽緩沖液分別與本文制得的美白祛斑護(hù)膚品和市售普通護(hù)膚品進(jìn)行混合均勻，再放置于26 ℃的水浴中反應(yīng)15min，隨后加入酪氨酸酶溶液，使總反應(yīng)體積為10 mL，再于26 ℃保溫15 min，最后于分光光度計(jì)475 nm 處測定OD 值，并進(jìn)行樣品管OD 值和對照管OD 值的比較。計(jì)算出酪氨酸酶活力的抑制率。計(jì)算公式為：抑制率＝（抑制前酪氨酸酶總活性-植物提取物抑制后剩余酪氨酸酶活性）/抑制前酪氨酸酶總活性。

2.3 安全性測試

對上述制得的美白祛斑護(hù)膚品和市售普通護(hù)膚品進(jìn)行測試，共選取270 名受試者，隨機(jī)分為9 組，每組30 名，所有受試者的受試部位皮膚在測試前均無任何異常，對受試者根據(jù)2015 版《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》人體皮膚斑貼試驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行斑貼實(shí)驗(yàn)，通過肉眼觀察，24 h 后觀察皮膚反應(yīng)程度，其等級(jí)評分標(biāo)準(zhǔn)如下頁表6 所示。

表6 人體皮膚斑貼試驗(yàn)等級(jí)評分標(biāo)準(zhǔn)

2.4 皮膚亮度和皮膚亮白度實(shí)驗(yàn)

采用色彩色差計(jì)CR-400 分析使用美白祛斑護(hù)膚品的志愿者皮膚亮度L* 值、皮膚亮白度ITA°值的變化情況，試用面積200 cm2～250 cm2，試用量0.3 mL～0.5 mL，試用部位：臉部，實(shí)驗(yàn)組為涂抹精華液的志愿者皮膚，對照組為市售普通護(hù)膚品的志愿者皮膚。

3 結(jié)果與討論

美白效果測試、酪氨酸酶活性測試以及安全性測試結(jié)果見表7 和表8。從表7 中可以明顯看出受試者使用了本實(shí)驗(yàn)制備的美白祛斑護(hù)膚品在14 d～56 d內(nèi)，皮膚亮度明顯提升，黑色素明顯下降，美白效果明顯優(yōu)于市售普通護(hù)膚品。從表8 可以可以看出，本實(shí)驗(yàn)制備的美白祛斑護(hù)膚品對酪氨酸酶活性抑制率、安全性測試明顯高于市售普通護(hù)膚品，說明其阻止或緩解黑色素形成的效果更優(yōu)，其配方更溫和不致敏。

表7 美白效果測試結(jié)果

表8 護(hù)膚品性能測試

皮膚亮度和皮膚亮白度實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖1 和圖2。從圖1 和圖2 對比可以明顯看出，本文制備的美白祛斑護(hù)膚品其皮膚亮度和亮白度明顯優(yōu)于市售普通護(hù)膚品。

圖1 皮膚亮度實(shí)驗(yàn)對比

圖2 皮膚亮白度實(shí)驗(yàn)對比

本實(shí)驗(yàn)制備的美白祛斑護(hù)膚品具有良好的美白祛斑效果，這是由于護(hù)膚品加入了肌肽、九肽-1，二甲砜和α-熊果苷等化合物。肌肽是具有強(qiáng)效抗氧化能力的多肽，可清除細(xì)胞中的自由基，在酪氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏氐亩嗖椒磻?yīng)中，存在氧化還原反應(yīng)，肌肽可阻斷其中的氧化進(jìn)程從而減少黑色素的生成。九肽-1是促黑素細(xì)胞激素（α-MSH）的競爭性拮抗抑制劑，通過與黑素細(xì)胞表面黑皮質(zhì)素受體-1（MC1-R）競爭性結(jié)合，從而在源頭上抑制黑色素的合成。二甲砜具有平滑肌膚，增強(qiáng)對霉菌、毒素、細(xì)菌及過敏物質(zhì)抵抗力，對糖類的代謝起促進(jìn)作用，能促進(jìn)傷口愈合，亦能提升細(xì)胞滲透效率，提高人體細(xì)胞對功效物質(zhì)的吸收效率。α-熊果苷有較好的抗炎、修復(fù)和美白的作用，能夠抑制黑色素的產(chǎn)生和沉積，祛除色斑和雀斑。產(chǎn)品中還添加了煙酰胺等酪氨酸酶活性抑制劑，其中煙酰胺還能減緩黑色素向角質(zhì)層傳遞，對黑素細(xì)胞無毒，安全高效[6-8]。

4 結(jié)論

本文使用肌肽、九肽-1、酵母精華素、α-熊果苷、甘草酸二鉀、二甲砜和植物天然防腐劑協(xié)同配合，制備得到一種具有美白效果的組合物和美白祛斑護(hù)膚品，美白祛斑護(hù)膚品包括美白爽膚水和美白精華套裝。測試結(jié)果表明，美白祛斑護(hù)膚品具有優(yōu)異的美白祛斑效果，可促進(jìn)美白劑進(jìn)入真皮層，不僅可大大提升美白效果，而且配方溫和不致敏。