唐瀟瀟， 汪 源， 李婷婷

（南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院病理科，廣東 廣州 510510）

結(jié)直腸癌（colorectal cancer）是當(dāng)今世界威脅人類健康的一大癌癥，轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致結(jié)直腸癌患者死亡的主要原因［1-2］。上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition， EMT）在結(jié)直腸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的過程中扮演了重要的角色。EMT是細(xì)胞失去上皮特性而獲得間充質(zhì)細(xì)胞特性的過程，這一過程在正常機(jī)體中通常發(fā)生于發(fā)育和傷口愈合中，但在腫瘤中則與腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展、遷移、血管內(nèi)滲入和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等各重要過程密切相關(guān)，它減弱細(xì)胞間黏附作用，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲力［3-4］。同源盒蛋白B7（homeobox protein 7， HOXB7）屬于同源異型盒家族。同源盒基因首先在果蠅體內(nèi)被發(fā)現(xiàn)，是在包括人在內(nèi)的動(dòng)物的胚胎發(fā)育和細(xì)胞分化中發(fā)揮重要作用的一類基因。許多證據(jù)顯示，HOX基因表達(dá)紊亂可能在腫瘤等疾病中發(fā)揮重要作用；目前已知其在黑色素瘤、卵巢癌、乳腺癌、口腔癌、前列腺癌等腫瘤中有異常表達(dá)［5］，且與腫瘤的分級(jí)和分化有關(guān)。近年來，多個(gè)研究對(duì)HOXB7在腫瘤中的作用進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)HOXB7在腫瘤細(xì)胞的增殖、運(yùn)動(dòng)和侵襲中起到重要作用。本研究探討HOXB7對(duì)結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的影響。

材料和方法

1 細(xì)胞

SW480和SW620結(jié)腸腺癌細(xì)胞株為南方醫(yī)科大學(xué)病理教研室自存。

2 主要試劑

胰蛋白酶購自Gibco；瓊脂糖購自Biowest；胎牛血清和RPMI-1640培養(yǎng)基購自HyClone；EDTA抗原修復(fù)液（pH 6.0）、PBS和通用型SP試劑盒（SP-9000）購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司；pSUPER.puro質(zhì)粒購自O(shè)ligoengine；Dual-Luciferase Reporter Assay System （Promega）。

3 主要方法

3.1 細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞用含10%胎牛血清和1%雙抗（含1×105U/L青霉素和100 mg/L鏈霉素）的RPMI-1640培養(yǎng)基，在37 ℃、5% CO2相對(duì)濕度飽和的培養(yǎng)箱內(nèi)常規(guī)培養(yǎng)。

3.2 過表達(dá)HOXB7的SW480細(xì)胞株的構(gòu)建 根據(jù)GenBank中已登錄的目的基因HOXB7序列，使用Primer Premier 5軟件輔助自行設(shè)計(jì)引物，上游引物5＇-CCCAAGCTTATCAAGGAATCTCGTAAAACCGA-3＇，下 游 引 物 5＇-ATTGCGGCCGCCCATCCTTTAGATACACACAGA-3＇。使用該引物在提取的RNA中反轉(zhuǎn)錄得到cDNA，與pSin質(zhì)粒連接。最終將HOXB7/pSin質(zhì)粒轉(zhuǎn)入SW480細(xì)胞。

3.3HOXB7特異性shRNA的合成 利用Invitrogen網(wǎng)站（http：//rnaidesigner.invitrogen.com/rnaiexpress/）提供的免費(fèi)軟件設(shè)計(jì)合成HOXB7基因的特異性干擾片段，shRNA正義鏈5'-CGGAGCCTTCCCAGAACAAACTTCT-3'，反 義 鏈 5'-GGAGCCTTCCCAGAACAAACTTCTT-3'。用Hind III和BglII對(duì) shHOXB7重組質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切鑒定。選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞制備SW480細(xì)胞和SW620細(xì)胞懸液及shRNA-Lipofectamine? 2000 Reagent復(fù)合物的實(shí)驗(yàn)組（HBOX7干擾組）和陰性對(duì)照組，將shRNA連接到pSUPER.puro質(zhì)粒然后轉(zhuǎn)染SW480細(xì)胞和SW620細(xì)胞。

3.4 Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HOXB7對(duì)SW480和SW620細(xì)胞遷移和侵襲的影響 用PBS洗去細(xì)胞完全培養(yǎng)基殘液后，換成RPMI-1640培養(yǎng)基進(jìn)行饑餓培養(yǎng)過夜，將胰酶消化的SW480和SW620細(xì)胞經(jīng)無血清的RPMI-1640培養(yǎng)基重懸，調(diào)整細(xì)胞密度為1×106mL-1，并將其 200 μL 混懸液接種至 Transwell上室。遷移實(shí)驗(yàn)和侵襲實(shí)驗(yàn)中，下室都加入800 μL含有10%胎牛血清培養(yǎng)基，在侵襲實(shí)驗(yàn)中Transwell上室還預(yù)鋪有基質(zhì)膠。在37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，去除小室中培養(yǎng)液，用棉球輕擦去小室上室的細(xì)胞。使用4%多聚甲醛固定小室和下室15 min，PBS潤(rùn)洗3次，每次5 min；Giemsa染色30 min，PBS潤(rùn)洗3次，每次3 min，在倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)，并采集倒置的小室下室的細(xì)胞圖像。

3.5 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HOXB7對(duì)SW480和SW620細(xì)胞遷移的影響 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞接種到6孔板中，在恒溫孵箱中培養(yǎng)，等細(xì)胞長(zhǎng)滿視野時(shí)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。使用黑色馬克筆于6孔板背后劃線。使用高溫滅菌的20 μL槍頭在孔板上垂直于線劃痕，保證槍頭劃痕時(shí)垂直。劃好后充分沖洗，將殘余懸浮細(xì)胞沖洗掉。然后向孔內(nèi)加入不含胎牛血清的細(xì)胞培養(yǎng)基，置于恒溫孵箱孵育。分別于24和48 h后在顯微鏡下取點(diǎn)，觀察，拍照。與0 h的初始距離（D0h）作對(duì)比，分別測(cè)量細(xì)胞遷移的距離，計(jì)算細(xì)胞的遷移率。遷移率（%）=（D48h-D0h）/D0h×100%。

3.6 Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá) 用放射免疫沉淀測(cè)定裂解液提取各組細(xì)胞的總蛋白，測(cè)定蛋白濃度后，取等量蛋白樣品進(jìn)行SDS-PAGE、轉(zhuǎn)膜，5%脫脂奶粉室溫下封閉膜2 h后，分別加入兔抗人HOXB7、E-cadherin、α-catenin、vimentin、N-cadherin、Snail和α-tubulin抗體4 ℃孵育過夜。加入HRP標(biāo)記的抗兔、抗鼠Ⅱ抗室溫孵育1 h后加入化學(xué)發(fā)光試劑孵育1 min，迅速用保鮮膜包好后置于暗盒內(nèi)曝光1 min左右。X膠片經(jīng)顯影、定影后掃描記錄。

3.7 免疫熒光染色 將經(jīng)泡酸，洗滌，高壓后的蓋玻片放入24孔板內(nèi)消化細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度調(diào)整1×105mL-1，按每孔1 mL細(xì)胞懸液加入預(yù)先鋪好蓋玻片的24孔板中，入37 ℃、5% CO2濕化培養(yǎng)箱內(nèi)孵育，待細(xì)胞生長(zhǎng)至約90%，取出，洗滌，4%多聚甲醛固定過夜。每孔按實(shí)驗(yàn)計(jì)劃加入E-cadherin、α-catenin、vimentin、N-cadherin、Snail和α-tubulin抗體，搖床上室溫過夜。加入相應(yīng)的熒光Ⅱ抗，室溫，搖床上1 h。洗滌，吸掉液體，吹風(fēng)機(jī)吹干，滴加2 μL 50%甘油與載玻片上，將蓋玻片的細(xì)胞面朝下，倒扣在載玻片的甘油上，標(biāo)記，置于共聚焦顯微鏡下觀察拍照。

3.8 裸鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn) 將SW480/vector細(xì)胞、SW480/HOXB7細(xì)胞、SW620/scrambled細(xì)胞和SW620/shHOXB7#1細(xì)胞的皮下瘤組織進(jìn)行結(jié)直腸癌原位手術(shù)移植，每組6只裸鼠，每只裸鼠接種100 μL細(xì)胞懸液，其中含有1×107個(gè)細(xì)胞。于6周后處死裸鼠，對(duì)原發(fā)灶及各臟器進(jìn)行取材，測(cè)量原發(fā)腫瘤大小，計(jì)數(shù)各臟器轉(zhuǎn)移瘤個(gè)數(shù)，連續(xù)切片，HE染色觀察轉(zhuǎn)移情況。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

各獨(dú)立實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次。采用GraphPad Prism 8.0軟件統(tǒng)計(jì)分析處理數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。兩實(shí)驗(yàn)組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，均為雙側(cè)檢驗(yàn)；多實(shí)驗(yàn)組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，選用Dunnett檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 生存分析顯示HOXB7高表達(dá)的結(jié)直腸癌患者預(yù)后不良

使用 UALCAN 網(wǎng)站（http：//ualcan.path.uab.edu/）對(duì) TCGA（The Cancer Genome Atlas； https：//portal.gdc.cancer.gov/）數(shù)據(jù)進(jìn)行生存分析［6-7］，如圖1所示，在279名結(jié)直腸癌患者中，高表達(dá)HOXB7組的患者長(zhǎng)期生存率更低（P=0.034）。

Figure 1. Kaplan-Meier curve showed that colorectal cancer patients with high HOXB7 expression had poor prognosis.圖1 HOXB7高表達(dá)的結(jié)直腸癌患者預(yù)后不良

2 HOXB7靶向Wnt/β-catenin通路

在過表達(dá)HOXB7的SW480細(xì)胞系和對(duì)照組之間進(jìn)行差異基因表達(dá)（differential gene expression，DGE）分析和過代表分析（over-representation analy-sis， ORA）。結(jié)果顯示，Wnt/β-catenin 通路基因在HOXB7過表達(dá)樣本中顯著過表達(dá)（P＜0.01），見圖1A。此外，基因集富集分析（gene set enrichment analysis， GSEA）同樣顯示W(wǎng)nt/β-catenin通路相關(guān)基因集表達(dá)水平與HOXB7表達(dá)水平正相關(guān)（P＜0.01），見圖2B。這些結(jié)果顯示，HOXB7靶向Wnt/β-catenin通路。

Figure 2. HOXB7 targets Wnt/β -catenin pathway. A： Wnt/β -catenin pathway-related genes were significantly overexpressed in HOXB7 overexpression samples； B： gene set enrichment analysis showed that the expression level of Wnt/β-catenin pathway-related gene set was positively correlated with that of HOXB7. ES： enrichment score.圖2 HOXB7靶向Wnt/β-catenin通路

3 Western blot驗(yàn)證SW480和SW620細(xì)胞中HOXB7過表達(dá)或敲減

如圖3所示，HOXB7在SW480細(xì)胞中過表達(dá)，在SW620中被敲減。

Figure 3. HOXB7 was overexpressed in SW480 cells and knocked down in SW620 cells.圖3 HOXB7在SW480細(xì)胞中過表達(dá)，在SW620細(xì)胞中被敲減

4 HOXB7過表達(dá)增強(qiáng)SW480細(xì)胞的遷移和侵襲能力

Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在遷移實(shí)驗(yàn)中，過表達(dá)HOXB7組進(jìn)入下室的細(xì)胞數(shù)量明顯多于陰性對(duì)照組，侵襲實(shí)驗(yàn)中過表達(dá)HOXB7組穿透基質(zhì)膠進(jìn)入下室的細(xì)胞數(shù)量同樣明顯多于陰性對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見圖4。這一結(jié)果表明，HOXB7過表達(dá)可以增強(qiáng)SW480細(xì)胞的侵襲能力。

5 敲減HOXB7減弱SW620細(xì)胞的遷徙和侵襲能力

Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在遷移實(shí)驗(yàn)中，敲減HOXB7組進(jìn)入下室的細(xì)胞數(shù)量明顯少于對(duì)照組，侵襲實(shí)驗(yàn)中敲減HOXB7組穿透基質(zhì)膠進(jìn)入下室的細(xì)胞數(shù)量同樣明顯少于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見圖5。這一結(jié)果表明，敲減HOXB7可以減弱SW620細(xì)胞的侵襲能力。

6 相差顯微鏡觀察HOXB7過表達(dá)或敲減后細(xì)胞形態(tài)的變化

相差顯微鏡觀察（圖6）可見，HOXB7過表達(dá)的SW480細(xì)胞伸出偽足，而HOXB7被敲減的SW620細(xì)胞偽足消失，提示HOXB7上調(diào)可增強(qiáng)結(jié)直腸癌細(xì)胞的侵襲能力。

7 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證HOXB7過表達(dá)或敲減對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移的影響

48 h細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)（圖7）中，過表達(dá)HOXB7組愈合率顯著高于空載體組，敲減HOXB7組愈合率顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

8 Western blot測(cè)定HOXB7過表達(dá)或敲減對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞中EMT相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

Figure.4. The effect of HOXB7 overexpression on the migration and invasion ability of SW480 cells detected by Transwell assays（scale bar=20 μm）. Mean±SD. n=3. **P＜0.01 vs vector.圖4 Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HOXB7過表達(dá)對(duì)SW480細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響

Figure.5. The effect of HOXB7 knockdown on the migration and invasion ability of SW620 cells detected by Transwell assays（scale bar=20 μm）. Mean±SD. n=3. **P＜0.01 vs scrambled.圖5 Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HOXB7敲減對(duì)SW620細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響

Figure.6. Morphological changes of colorectal cancer cells after overexpression or knockdown of HOXB7 were observed under phasecontrast microscope （scale bar=8 μm）. Mean±SD. n=3. **P＜0.01 vs vector； ##P＜0.01 vs scrambled.圖6 相差顯微鏡觀察HOXB7過表達(dá)或敲減后結(jié)直腸癌細(xì)胞形態(tài)的變化

Figure.7. The effects of overexpression or knockdown of HOXB7 on the migration of SW480 and SW620 cells were detected by scratch test （scale bar=200 μm）. Mean±SD. n=3. **P＜0.01 vs vector； ##P＜0.01 vs scrambled.圖7 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HOXB7過表達(dá)或敲減對(duì)SW480和SW620細(xì)胞遷移的影響

E-cadherin可通過調(diào)節(jié)各種信號(hào)通路以維持細(xì)胞的上皮特征［8-9］；α-catenin在細(xì)胞-細(xì)胞黏附中發(fā)揮關(guān)鍵作用［10］。如圖8所示，兩者在HOXB7過表達(dá)時(shí)下調(diào)，在HOXB7敲減時(shí)上調(diào)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與之相反，與細(xì)胞的間充質(zhì)特性高度相關(guān)的 vimentin［11］和 N-cadherin［9］以及可抑制 E-cadherin基因表達(dá)的Snail蛋白［12-13］的表達(dá)在HOXB7過表達(dá)時(shí)顯著上升，在HOXB7被敲減時(shí)下調(diào)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。以上結(jié)果表明，HOXB7過表達(dá)可促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的EMT，敲減HOXB7則正好相反。

9 免疫熒光染色檢測(cè)HOXB7過表達(dá)或敲減對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞中EMT相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

如圖9所示，與細(xì)胞上皮特性相關(guān)的E-cadherin和α-catenin的表達(dá)在HOXB7過表達(dá)時(shí)下調(diào)，在HOXB7敲減時(shí)上調(diào)。而與細(xì)胞間充質(zhì)特性相關(guān)的vimentin、N-cadherin及Snail蛋白的表達(dá)在HOXB7過表達(dá)時(shí)顯著上升，在HOXB7被敲減時(shí)下調(diào)。這一結(jié)果同樣表明，HOXB7過表達(dá)可促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的EMT，而敲減HOXB7則抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的EMT。

10 裸鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明HOXB7過表達(dá)或敲減對(duì)結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的影響

如圖10所示，使用皮下瘤組織進(jìn)行結(jié)直腸癌原位手術(shù)移植，在6周后處死裸鼠，對(duì)各臟器進(jìn)行取材，連續(xù)切片觀察，可見移植了HOXB7過表達(dá)的SW480細(xì)胞的裸鼠腸的原位瘤數(shù)量和肝肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)量均較對(duì)照組顯著增加（P＜0.01）。

討 論

結(jié)直腸癌是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一，并且仍然是全球癌癥相關(guān)發(fā)病率和死亡率的第三大原因。遠(yuǎn)處侵襲和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致高達(dá)90%的結(jié)直腸癌相關(guān)死亡率的重要原因之一。盡管臨床診斷和綜合治療的巨大進(jìn)步在一定程度上延長(zhǎng)了生存期，但轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者的預(yù)后仍然很差［14-16］。因此，研究如何抑制結(jié)直腸癌的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、如何改善其預(yù)后，迫在眉睫。

Figure 9. Expression of EMT-related proteins in SW480 cells with HOXB7 overexpression and in SW620 cells with HOXB7 knockdown was determined by immunofluorescence staining （scale bar=20 μm）.圖9 免疫熒光染色檢測(cè)HOXB7過表達(dá)或敲減對(duì)EMT相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

EMT是指上皮細(xì)胞獲得間充質(zhì)表型的細(xì)胞重編程過程。EMT在發(fā)育、傷口愈合和惡性腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮著非常重要的作用，癌細(xì)胞通過這些進(jìn)展獲得與更具侵襲性表型相關(guān)的特性［17］。在EMT被激活后，腫瘤細(xì)胞會(huì)發(fā)生一系列物理變化，包括緊密連接溶解、頂端-基底畸形的破壞和細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的重組，所有這些都促進(jìn)細(xì)胞從其原發(fā)部位擴(kuò)散、侵入周圍組織，在循環(huán)中存活，最后導(dǎo)致遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移。此外，有研究將對(duì)化療和免疫治療的耐藥性增加歸因于EMT，因?yàn)樗龠M(jìn)與腫瘤相關(guān)基質(zhì)細(xì)胞的相互作用，以其促腫瘤特性而聞名［18-20］?，F(xiàn)已有使用二甲雙胍（metformin）、齊多夫定（zidovudine）等藥物通過Akt-GSK3β通路和Wnt通路靶向該過程對(duì)抗腫瘤化療耐藥的基礎(chǔ)研究［21-23］。

HOXB7屬于同源盒基因，它在癌癥的發(fā)生與進(jìn)展過程中被認(rèn)為是一種主調(diào)控基因，可以協(xié)調(diào)多種靶分子以激活各種致癌途徑，并與人們熟知的與癌癥進(jìn)展關(guān)系密切的TGFβ、EGFR、MAPK、p53等通路都相關(guān)［23-24］?，F(xiàn)有研究表明，HOXB7在結(jié)直腸癌中，可通過磷脂酰肌醇3-激酶/Akt通路和MAPK通路介導(dǎo)其發(fā)生、增殖和抗凋亡作用［25］。此前，有學(xué)者報(bào)道過HOXB7可以靶向Wnt/β-catenin通路促進(jìn)膠質(zhì)瘤、食管癌的增殖和轉(zhuǎn)移［26-27］，敲減HOXB7則可導(dǎo)致皮膚鱗狀細(xì)胞癌的侵襲力下降［6］。Wnt/β-catenin通路是結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵通路，但是在結(jié)直腸癌中，HOXB7與Wnt/β-catenin通路的作用機(jī)制尚不很明確［28-30］。本文首先通過DGE、ORA、GSEA等方法證明HOXB7可以靶向Wnt/β-catenin通路，然后使用結(jié)直腸癌的代表性細(xì)胞株SW480和SW620，在體內(nèi)外研究了HOXB7在結(jié)直腸癌中的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，過表達(dá)HOXB7導(dǎo)致結(jié)直腸癌細(xì)胞的侵襲、遷移和EMT均較對(duì)照組顯著增強(qiáng)，而敲減HOXB7則導(dǎo)致結(jié)直腸癌的侵襲、遷移和EMT較對(duì)照組顯著下降。

Figure.10. The effect of overexpression of HOXB7 on colorectal cancer metastasis was demonstrated in nude mice. The gross specimens， representative microscopic images （HE staining） and the number of metastatic tumors in the intestine （A）， liver（B） and lung （C） of nude mice after 6 weeks of orthotopic transplantation of colorectal cancer. In the photos of the intestine， liver and lung gross specimens， the red arrows indicate the metastasis of the tumors. Scale bar=50 μm in A； scale bar=20 μm in B and C. Mean±SD. n=3. **P＜0.01 vs vector.圖10 裸鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明HOXB7過表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的影響

綜上所述，本研究揭示了HOXB7對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞的侵襲、遷移的影響，其機(jī)制可能是靶向Wnt/β-catenin通路調(diào)控腫瘤細(xì)胞EMT從而介導(dǎo)結(jié)直腸癌的進(jìn)展，揭示出HOXB7作為結(jié)直腸癌治療靶點(diǎn)的潛力。靶向HOXB7以抑制結(jié)直腸癌的發(fā)生、增殖、侵襲和EMT過程、對(duì)抗結(jié)直腸癌的化療耐藥或可成為治療結(jié)直腸癌的新思路。基于此，后續(xù)我們可以開展有關(guān)HOXB7通過干擾EMT從而控制結(jié)直腸癌的遷移、侵襲以及其聯(lián)合用藥的研究，尋找對(duì)抗結(jié)直腸癌耐藥機(jī)制的新途徑。