張馨丹，鄭春美，隋 璐，馬志強(qiáng)

1.延吉市依蘭鎮(zhèn)綜合服務(wù)中心，吉林延吉 133000；2.延吉市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊(duì)，吉林延吉133000；3.延吉市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，吉林延吉 133000；4.延吉市畜牧站，吉林延吉 133000

動(dòng)物安樂(lè)死的方法分為兩大類，化學(xué)性方法與物理性方法，其中化學(xué)方法又分為吸入性藥劑方法和非吸入性藥劑方法。安樂(lè)死時(shí)最好先抑制動(dòng)物的中樞神經(jīng)而使其失去知覺(jué)，解除疼痛感。因此，首選為食用過(guò)量的化學(xué)性麻醉藥劑。動(dòng)物一旦被施予深度麻醉，之后使用的安樂(lè)死方法選擇性較多，也較人道。如因科學(xué)研究所需無(wú)法使用麻醉劑，則使用物理性安樂(lè)死方法。

吸入性藥劑：常見(jiàn)藥物如一氧化碳、二氧化碳、乙醚、氮?dú)獾嚷樽硭巹?，通常借助氣麻機(jī)或可透視的密閉容器對(duì)體重低于7 kg 的小型哺乳動(dòng)物與鳥類實(shí)施安樂(lè)死。大部分的吸入性藥劑對(duì)人體有害，因此需在通風(fēng)良好場(chǎng)所執(zhí)行。

非吸入性藥劑：非吸入性藥劑多數(shù)為注射性藥物，此類藥劑有多種投藥方法，但靜脈注射是最佳選擇。巴比妥鹽及其衍生物戊巴比妥鈉目前廣泛應(yīng)用于大部分動(dòng)物的安樂(lè)死。

物理性方法：包括頸椎脫臼、斷頭、放血、槍擊、電擊等方法。

本次試驗(yàn)通過(guò)采用非吸入性藥劑方法，觀察動(dòng)物使用不同藥劑進(jìn)行安樂(lè)死后的表現(xiàn)，選擇相對(duì)較好的藥物方法，從而為基層工作者提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

由農(nóng)學(xué)院基礎(chǔ)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室提供的試驗(yàn)小鼠15只，延吉市興安大集購(gòu)買的2 月齡仔兔6 只。

1.1.2 試驗(yàn)藥品

鹽酸氯氨酮注射液、10%KCl 注射液、3%戊巴比妥鈉注射液、飽和硫酸鎂注射液、生理鹽水、75%酒精棉球。

1.1.3 試驗(yàn)器材

1 mL 注射器20 個(gè)、5 mL 注射器10 個(gè)、動(dòng)物保定架、打毛剪、鑷子。

1.2 試驗(yàn)方法

將實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為3 組,每組5 只，實(shí)驗(yàn)仔兔隨機(jī)分為3 組,每組2 只。

1.2.1 KCl-氯氨酮法

1.2.1.1 小鼠試驗(yàn)。由于注射KCl 注射液會(huì)使鉀離子濃度突然升高而使動(dòng)物感到不適，出現(xiàn)抽搐、掙扎等現(xiàn)象，因而需將試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行預(yù)麻醉：保定好小鼠，用酒精棉球擦拭小鼠尾部，使用1 mL 注射器抽取1%鹽酸氯氨酮注射液以5 mL/kg 對(duì)試驗(yàn)小鼠進(jìn)行尾靜脈注射。待充分麻醉后再用1 mL 注射液抽取10%的KCl 注射液以150 mg/kg 快速尾靜脈注射，藥品注入后，立即將小鼠從保定架內(nèi)取出，對(duì)小鼠進(jìn)行觀察記錄。

1.2.1.2 仔兔試驗(yàn)。同樣先將試驗(yàn)仔兔進(jìn)行預(yù)麻醉：保定好試驗(yàn)仔兔，對(duì)仔兔的耳緣靜脈處進(jìn)行剪毛，再用酒精棉球擦拭試驗(yàn)仔兔耳緣靜脈處，使用1 mL注射器抽取鹽酸氯氨酮注射液5 mL/kg 對(duì)試驗(yàn)仔兔進(jìn)行耳緣靜脈注射。充分麻醉后再用5 mL 注射液抽取10%的KCl 注射液以150 mg/kg 快速對(duì)試驗(yàn)仔兔進(jìn)行耳緣靜脈注射，藥品注入后，立即將試驗(yàn)仔兔從保定架內(nèi)取出，對(duì)試驗(yàn)仔兔進(jìn)行觀察并記錄。

1.2.2 戊巴比妥鈉法

1.2.2.1 小鼠試驗(yàn)。保定好小鼠，用酒精棉球擦拭小鼠尾部，使用1 mL 注射器抽取以100 mg/kg 戊巴比妥鈉配制成的3%戊巴比妥鈉藥液，對(duì)試驗(yàn)小鼠進(jìn)行尾靜脈注射（戊巴比妥鈉藥液配比為1%～3%，為使試驗(yàn)效果明顯，本試驗(yàn)使用3%戊巴比妥鈉藥液），藥品注入后，立即將小鼠從保定架中取出，對(duì)小鼠進(jìn)行觀察并記錄。

1.2.2.2 仔兔試驗(yàn)。使用保定架對(duì)試驗(yàn)用仔兔進(jìn)行保定，對(duì)仔兔的耳緣靜脈處進(jìn)行剪毛，再用酒精棉球擦拭試驗(yàn)仔兔耳緣靜脈處，使用5 mL 注射器抽取以100 mg/kg 戊巴比妥鈉配制成的3%戊巴比妥鈉藥液對(duì)試驗(yàn)仔兔進(jìn)行耳緣靜脈注射（戊巴比妥鈉藥液配比為1%～3%，為使試驗(yàn)效果明顯，本試驗(yàn)使用3%戊巴比妥鈉藥液），藥品注入后，立即將試驗(yàn)仔兔從保定架中取出，進(jìn)行觀察并記錄。

1.2.3 飽和硫酸鎂法

1.2.3.1 小鼠試驗(yàn)。保定好小鼠，用酒精棉球擦拭小鼠尾部，使用1 mL 注射器抽取飽和硫酸鎂注射液以150 mg/kg 快速尾靜脈注射，藥品注入后，立即將 小鼠從保定架中取出，對(duì)小鼠進(jìn)行觀察并記錄。

1.2.3.2 仔兔試驗(yàn)。保定好仔兔，對(duì)仔兔的耳緣靜脈處進(jìn)行剪毛，再用酒精棉球擦拭仔兔的耳緣靜脈，使用5 mL 注射器抽取飽和硫酸鎂注射液150 mg/kg快速耳緣靜脈注射，藥品注入后，立即將小鼠從保定架中放開(kāi)，對(duì)仔兔進(jìn)行觀察并記錄。

2 結(jié)果

2.1 KCl-氯氨酮方法

注射鹽酸氯氨酮注射液30 s 后，試驗(yàn)小鼠進(jìn)入外科麻醉期，此時(shí)小鼠由興奮轉(zhuǎn)為安靜，意識(shí)消失，痛覺(jué)消失，呼吸變慢，瞳孔縮小，注射KCl 注射液10 min 后，小鼠抽搐并停止呼吸但仍有心跳。11 min 后小鼠心跳停止，小鼠死亡。

而仔兔注射鹽酸氯氨酮注射液50 s 后，試驗(yàn)仔兔進(jìn)入外科麻醉期，此時(shí)仔兔變得安靜，進(jìn)入麻醉期，意識(shí)消失，痛覺(jué)消失，呼吸由不規(guī)則變?yōu)橐?guī)則，角膜充血，注射KCl 注射液15 min 后，仔兔抽搐并停止呼吸但仍有心跳，18 min 后心跳停止，死亡。

2.2 戊巴比妥鈉法

向小鼠尾靜脈注入3%戊巴比妥鈉藥液，3 s 后小鼠在睡眠中停止呼吸與心跳，小鼠死亡。過(guò)程中沒(méi)有出現(xiàn)抽搐、歪頭、掙扎等不適癥狀。

而向仔兔耳緣靜脈正確注入3%戊巴比妥鈉藥液，10 s 后仔兔在睡眠中停止呼吸與心跳，死亡。藥品注射后沒(méi)有出現(xiàn)抽搐、歪頭、掙扎、鳴叫等不適癥狀。

2.3 飽和硫酸鎂法

向小鼠尾靜脈注入飽和硫酸鎂注射液，5 s 后小鼠呼吸和心跳停止并死亡。注射藥品后出現(xiàn)輕微的抽搐、掙扎、歪頭等癥狀。

向仔兔耳緣靜脈正確注入飽和硫酸鎂注射液，20 s 后仔兔呼吸和心跳停止、死亡。過(guò)程中伴隨著輕微的抽搐、歪頭、掙扎現(xiàn)象，無(wú)明顯不適。

3 討論

3.1 對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的分析

試驗(yàn)中試驗(yàn)小鼠與仔兔的快速死亡可能與試驗(yàn)動(dòng)物的種類與給藥途徑有關(guān)。本試驗(yàn)所選試驗(yàn)動(dòng)物的體積相對(duì)較小，較于其它動(dòng)物藥物的作用時(shí)間較短。試驗(yàn)中對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物均采取靜脈注射，藥物直接進(jìn)入血液循環(huán)，且試驗(yàn)所使用的藥品劑量均為大劑量，因而導(dǎo)致試驗(yàn)動(dòng)物的快速死亡。

試驗(yàn)中戊巴比妥鈉方法使動(dòng)物的死亡最平穩(wěn)且時(shí)間最短，這可能是與試驗(yàn)材料的選取有關(guān)。本試驗(yàn)只選用了小鼠與仔兔，一定程度上影響試驗(yàn)結(jié)果。也可能與戊巴比妥鈉常用于處死鼠和兔、不同動(dòng)物的麻醉特點(diǎn)不同有關(guān)。試驗(yàn)中KCl 注射液對(duì)動(dòng)物刺激較大，可能是KCl 直接作用于動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)，造成動(dòng)物呼吸抑制(暫停)后才失去意識(shí),因此動(dòng)物在無(wú)法轉(zhuǎn)動(dòng)后亦遭受一段時(shí)間的痛苦和壓迫，預(yù)先麻醉能減緩動(dòng)物的痛苦。

3.2 本試驗(yàn)的臨床意義

通過(guò)本次試驗(yàn)研究，可以清楚地比較出多種安樂(lè)死方法中效果相對(duì)較好的一種。為避免動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死時(shí)產(chǎn)生痛苦做出貢獻(xiàn)，本次試驗(yàn)中各種藥劑作用試驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生的效果可以為相關(guān)研究提供數(shù)據(jù)，對(duì)動(dòng)物安樂(lè)死方法的研究具有重要意義。

3.3 試驗(yàn)動(dòng)物的死亡時(shí)期

動(dòng)物因麻醉而死亡的時(shí)期分為四期：鎮(zhèn)痛期、興奮期、外科麻醉期、延髓麻痹期。臨床一般在外科麻醉期進(jìn)行手術(shù)。第一期-鎮(zhèn)痛期（隨意運(yùn)動(dòng)期）：動(dòng)物靜臥，定向力消失，意識(shí)模糊，痛覺(jué)遲鈍，呼吸正常，眼球位置不固定，瞳孔無(wú)變化，角膜反射存在，骨骼肌張力正常，此期大約持續(xù)7 min；第二期-興奮期（不隨意運(yùn)動(dòng)期）：動(dòng)物不隨意運(yùn)動(dòng)性興奮，意識(shí)模糊，幾乎全部消失，痛覺(jué)幾乎全部消失，呼吸加深，極不規(guī)則，眼球震顫，瞳孔散大，角膜反射仍然存在，骨骼肌張力收縮，有明顯的吞咽動(dòng)作隨后嘔吐，此期大約持續(xù)5 min；第三期-外科麻醉期：動(dòng)物由興奮轉(zhuǎn)為安靜，意識(shí)消失，痛覺(jué)消失，呼吸變慢，由不規(guī)則變?yōu)橐?guī)則，眼球由震顫到固定，瞳孔縮小，角膜反射仍然存在，骨骼肌張力松弛，舌頭伸出口外，此期大約持續(xù)8 min；第四期-死亡時(shí)期：在這一期動(dòng)物因深度麻醉而死亡。對(duì)動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死時(shí)，預(yù)先對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉應(yīng)在第三期進(jìn)行，在第四期進(jìn)行動(dòng)物的安樂(lè)死。

3.4 試驗(yàn)中使用的方法

本試驗(yàn)只對(duì)非吸入性藥劑方法進(jìn)行研究比較，物理方法（頸椎脫臼,斷頭,放血,槍擊,電擊等）與吸入性藥劑法（常見(jiàn)藥物如乙醚、氮?dú)?、一氧化碳、二氧化碳等麻醉藥劑）這里未做研究，有待進(jìn)一步探討解決。

該方法要求操作人員須具有熟練的動(dòng)物靜脈注射技術(shù)，這樣會(huì)將動(dòng)物死亡的痛苦減少到最低，因而動(dòng)物安樂(lè)死需要由專業(yè)人員進(jìn)行。

3.5 試驗(yàn)人員及環(huán)境

通過(guò)試驗(yàn)感受到在對(duì)動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死的過(guò)程中，人員需溫柔穩(wěn)固的保定動(dòng)物,這樣能安撫即將實(shí)施安樂(lè)死的動(dòng)物。在每次實(shí)施安樂(lè)死后若未徹底清洗殘留的血跡和氣味，會(huì)使等待實(shí)施安樂(lè)死的動(dòng)物精神緊張，焦躁不安，沒(méi)有殘留氣味的設(shè)備和清新的空氣會(huì)給即將實(shí)施安樂(lè)死的動(dòng)物帶來(lái)積極地影響。