姚俊秀 郭進(jìn)春 郝小丹 李龍心 楊雪 王璋

CHD是威脅全球人民健康的重要疾病之一?！吨袊难芙】蹬c疾病報(bào)告2020》[1]提示,CHD患病率及死亡率呈上升趨勢。因此,研究CHD的診斷標(biāo)志物有利于預(yù)測CHD的發(fā)生及早期干預(yù)，更有利于動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病的防治。

根據(jù)《2019 ESC慢性冠狀動(dòng)脈綜合征的診斷和管理指南》[2]診斷標(biāo)準(zhǔn)將CHD分為急性冠脈綜合征(acute coronary syndrome，ACS)和慢性冠狀動(dòng)脈綜合征(chronic coronary syndromes,CCS)[2]。CCS可表現(xiàn)為ACS之外CHD的各種臨床表現(xiàn)，且與ACS之間存在相互轉(zhuǎn)變，一旦CCS病人進(jìn)展為ACS病人，將帶來急性心血管事件發(fā)生，甚至危及生命。在臨床工作中存在部分CCS病人冠脈造影檢查結(jié)果陰性的情況，為了減少不必要的有創(chuàng)檢查，尋找CCS的有效診斷指標(biāo)，達(dá)到早期識(shí)別CCS，顯得尤為重要。肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)是一種來源于間質(zhì)細(xì)胞衍生的多功能細(xì)胞因子，廣泛存在于心血管系統(tǒng)中，具有抗炎、保護(hù)血管內(nèi)皮功能、促進(jìn)血管新生、抑制細(xì)胞凋亡和抑制心室重構(gòu)等多種生物學(xué)作用[3]。HGF與CCS的相關(guān)性目前臨床研究相對(duì)較少，本研究擬探討HGF與CCS的相關(guān)性，以期為CCS的診治提供新的思路。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 根據(jù)《2019 ESC慢性冠狀動(dòng)脈綜合征的診斷和管理指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)，收集2020年3～10月在西部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院心內(nèi)科住院臨床診斷或者懷疑為CCS并擬行冠脈造影的病人89例，年齡60～70歲，平均(65.66±3.49)歲，其中男54例，女35例。根據(jù)冠脈造影檢查結(jié)果，明確診斷為CCS病人56例，非CHD病人33例。冠狀動(dòng)脈造影的結(jié)果由 2 名有經(jīng)驗(yàn)的心內(nèi)科介入醫(yī)師判讀，以任何一支冠狀動(dòng)脈狹窄程度≥50%作為CHD的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床診斷或者懷疑CCS病人；年齡≥60歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：ACS和腦卒中急性期；各類肝炎病毒攜帶者及肝功能異常者；急性腸炎及感染性疾病者；慢性腎功能不全，或者合并嚴(yán)重疾病，預(yù)期壽命不足1年；不易配合(智力、聽力、肢體活動(dòng)明顯障礙)。本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(批件號(hào)：2020ky028)，所有研究對(duì)象均知情同意。

1.2 資料收集和HGF檢測 收集所有研究對(duì)象的身高、體質(zhì)量、血壓、一般信息(包括年齡、性別、職業(yè)、吸煙史、飲酒史)、高血壓史、糖尿病史、慢性腎病史、肝病史、脂代謝紊亂病史及目前治療用藥情況等。

采集所有對(duì)象入院后空腹靜脈血，采用Merck Millipore液相蛋白芯片分析檢測HGF血清濃度，試劑盒購自Merck Millipore公司，檢測儀器為Luminex液相芯片儀MAGPX12157001，按照儀器和試劑說明書進(jìn)行操作。使用貝克曼AU5821全自動(dòng)生化分析儀檢測FPG、血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)、腎功能[BUN、肌酐(Cr)、預(yù)估腎小球?yàn)V過率(eGFR)]及BNP水平。同時(shí)，心臟彩超檢測LVEF。

2 結(jié)果

2.1 2組臨床基本資料及HGF比較 CCS組與非CHD組間年齡、BMI、SBP、DBP、TG、FPG、BUN、LVEF、BNP、性別、煙酒嗜好、血脂異常、血壓不達(dá)標(biāo)人數(shù)占比比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；CCS組的糖尿病和服用降脂藥物占比及HGF水平顯著高于非CHD組(P<0.05)；TC、LDL-C、HDL-C水平均低于非CHD組(P<0.05)。見表1。

表1 PSM前后2組臨床基本資料及HGF比較[M(Q1，Q3)]

2.2 PSM后2組臨床基本資料及HGF比較 將所有研究人群進(jìn)行PSM，得到CCS及非CHD病人各32例。PSM后2組年齡、BMI、血壓、血糖、血脂、腎功能、性別、基礎(chǔ)疾病占比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；CCS組的HGF水平顯著高于非CHD組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3 PSM前CCS影響因素二元Logistic回歸分析 由于TC、LDL-C之間存在顯著相關(guān)性，故將二者進(jìn)行降維處理后再進(jìn)行回歸分析。共線性診斷提示Durbin-Watson值2.212，VIF值均<2，說明本研究的89個(gè)樣本相互獨(dú)立，且不存在共線性問題。將TC和LDL-C降維后指標(biāo)、HDL-C、HGF、糖尿病、使用降脂藥物納入二元Logistic回歸模型，經(jīng)Hosmer-Lemeshow檢驗(yàn)P>0.05，說明觀察數(shù)據(jù)與回歸模型擬合狀況良好，結(jié)果可以真實(shí)反映原始變量間的真實(shí)關(guān)系。未校正混雜因素下，HGF水平越高和使用降脂藥物是CCS的危險(xiǎn)因素。校正年齡、性別、BMI后，HGF(OR=1.004，95%CI：1.001～1.007，P<0.05)、使用降脂藥物(OR=5.298，95%CI：1.361～20.623，P<0.05)、糖尿病(OR=13.247，95%CI：1.153～152.251，P<0.05)是CCS的危險(xiǎn)因素。見表2。

表2 PSM前CCS患病影響因素的Logistic回歸分析

2.4 PSM后CCS影響因素二元Logistic回歸分析 PSM后將HGF納入二元Logistic回歸模型分析，校正年齡、性別、BMI混雜因素前后均顯示，HGF越大，患CCS風(fēng)險(xiǎn)越高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=1.004，95%CI：1.001～1.007，P<0.05)。

2.5 CCS預(yù)測因子分析 PSM前后HGF與CCS均存在相關(guān)性，繪制PSM前HGF預(yù)測CCS的ROC曲線，結(jié)果提示：AUC為0.677(95%CI：0.567～0.788，P<0.05), 敏感度為48.2%，特異度為87.9%,最佳截?cái)嘀禐?05 pg/mL。

3 討論

CHD是威脅全球人民健康的重要疾病之一。目前許多生物標(biāo)志物已被證明與CHD的發(fā)展和臨床結(jié)局相關(guān)。然而，只有少數(shù)生物標(biāo)志物在CHD的診治指南中被推薦，并在臨床中常規(guī)使用。除了潛在代謝性疾病的指標(biāo)(血糖、HbA1c和LDL-C)外，目前普遍用于心血管系統(tǒng)預(yù)后的生物標(biāo)志物有N末端B型利鈉肽素(NT-proBNP)、BNP、心臟特異性高敏肌鈣蛋白T(hs-cTnT)、高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)[5-9]。但這些標(biāo)志物多用于預(yù)示急性心血管事件，而在CCS中，上述標(biāo)志物卻無明顯變化或者其變化不能準(zhǔn)確預(yù)測該病的發(fā)生。我們的研究主要尋找CCS的相關(guān)標(biāo)志物并探討其診斷價(jià)值。

HGF最開始是在肝切除術(shù)后的殘余肝組織中被發(fā)現(xiàn)的，后來對(duì)其來源及特性進(jìn)行深入研究發(fā)現(xiàn)，人類HGF基因位于染色體7q21.1上，編碼一種由間充質(zhì)細(xì)胞分泌的蛋白，該蛋白是一種來源于間質(zhì)細(xì)胞衍生的多功能細(xì)胞因子，廣泛存在于心血管系統(tǒng)中，它可以與原癌基因 C-met 編碼的特異性受體結(jié)合后發(fā)揮抗炎、保護(hù)血管內(nèi)皮功能、促進(jìn)血管新生、抑制細(xì)胞凋亡和抑制心室重構(gòu)等多種生物學(xué)作用[3，10]。有臨床研究發(fā)現(xiàn)，HGF與CHD病人心血管死亡率獨(dú)立相關(guān)[12]。前期有研究表明，在正常人心腦血管組織中HGF的表達(dá)處于相對(duì)較低的水平，但是當(dāng)心血管發(fā)生病變時(shí)，比如心臟壓力負(fù)荷增加、缺血再灌注損傷或心力衰竭，心肌細(xì)胞則會(huì)根據(jù)上述病變的發(fā)生引起HGF的表達(dá)明顯上調(diào)，當(dāng)病情逐漸穩(wěn)定后，HGF的表達(dá)趨于正常[13]。另外，HGF還參與調(diào)節(jié)因血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙引起的動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病過程，當(dāng)慢性心力衰竭急性加重發(fā)生時(shí)，HGF表達(dá)上調(diào)，當(dāng)疾病穩(wěn)定后其濃度又會(huì)顯著降低[14]。有臨床研究亦發(fā)現(xiàn)，年齡較大的CHD病人血清HGF可出現(xiàn)異常表達(dá)，且表達(dá)水平與病情嚴(yán)重程度相關(guān)；HGF可與c-2met受體特異性結(jié)合，刺激新生血管生成。隨著疾病嚴(yán)重程度的加重，血管損傷程度亦相應(yīng)加重，機(jī)體因此代償性誘導(dǎo)HGF生成，以促進(jìn)內(nèi)皮功能恢復(fù)和穩(wěn)定粥樣硬化斑塊[15]。我們的研究發(fā)現(xiàn)，HGF與CCS相關(guān)，經(jīng)PSM控制混雜因素前后兩種方法分析均得出，CCS組HGF血清水平顯著高于非CHD組(P<0.05)。PSM前后二元Logistic 回歸分析均得出，HGF為CCS的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，HGF水平越高，患CCS風(fēng)險(xiǎn)越高(OR均為1.003，1.004，P<0.05)。Decker等[11]在多種族研究中發(fā)現(xiàn)HGF的變化是CHD事件的獨(dú)立預(yù)測因子。我們的研究與上述多項(xiàng)研究的結(jié)論一致。

大鼠、犬和豬心肌缺血模型證實(shí)，通過腺病毒-肝細(xì)胞生長因子(Ad-HGF)轉(zhuǎn)染原代心肌細(xì)胞可導(dǎo)致HGF蛋白過表達(dá)，從而刺激內(nèi)皮細(xì)胞的生長和遷移，誘導(dǎo)血管生成[16-17]。一項(xiàng)基因工程研究亦發(fā)現(xiàn)，HGF有促進(jìn)血管再生、恢復(fù)心肌梗死后心功能的作用[18]。上述研究說明HGF具有保護(hù)心臟及冠脈血管的潛力。根據(jù)以上HGF的特性，推測其有望作為早期診斷冠脈粥樣硬化的生化指標(biāo)。我們的研究結(jié)果提示：HGF預(yù)測CCS的AUC為0.677(95%CI：0.567～0.788，P<0.05), 敏感度為48.2%，特異度為87.9%，其對(duì)CCS診斷有一定的價(jià)值，有望納入CCS預(yù)測模型的構(gòu)建指標(biāo)，達(dá)到早期識(shí)別CCS病人的目的。目前臨床上運(yùn)用冠狀動(dòng)脈CT造影來早期發(fā)現(xiàn)CHD病人，但該項(xiàng)檢查費(fèi)用較高，且存在經(jīng)靜脈使用造影劑情況，存在造影劑過敏、腎毒性等不良反應(yīng)，這對(duì)于老年病人，尤其肝腎功能不全的高齡病人來說存在一定的風(fēng)險(xiǎn)。HGF具有更簡便、經(jīng)濟(jì)、安全等優(yōu)勢。

綜上所述，本研究結(jié)果提示HGF與CCS密切相關(guān)，血清HGF水平越高，CCS風(fēng)險(xiǎn)越高，其對(duì)CCS病人有一定的預(yù)測價(jià)值。但本研究也存在不足之處：研究對(duì)象僅局限于本中心，樣本量較小，缺乏多區(qū)域、多種族及高齡病人的數(shù)據(jù)分析，而且缺少ACS病人的數(shù)據(jù)，下一步將擴(kuò)大樣本量，納入ACS病例，分析HGF與不同狀態(tài)CHD以及不同程度冠脈狹窄的關(guān)系，為CHD的防治提供新思路。