馬志茹 趙盼月 翟少偉

(集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院鰻鱺現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)教育部工程研究中心, 廈門 361021)

膽汁酸(Bile acids, BA)由動物肝臟中合成, 貯存在膽囊中, 攝食后排入腸道中發(fā)揮作用; 其具有親水性的羥基及羧基, 又含有親油性烷基的特殊的兩性分子結(jié)構(gòu), 決定了其具有較強表面活性, 在促進腸道對飼料中脂類物質(zhì)的消化吸收中發(fā)揮重要作用[1,2], 還可通過激活法尼酯X受體(Farnesoid X receptor, FXR)調(diào)節(jié)脂類代謝[2,3]。BA除了在脂類消化吸收代謝方面的基本作用外, 還具有提高動物免疫力, 減少細菌內(nèi)毒素吸收、抑制有害菌增殖及利膽的生理功能[1]。因此, 膽汁酸作為魚類飼料添加劑的報道逐漸增多, 且大多研究表明適量添加BA可促進魚類生長, 提高飼料利用效率[4,5]。近來的研究表明, BA可降低投喂高脂飼料的草魚(Ctenopharyngodon idellus)[6]、大黃魚(Larimichthy scrocea)[7]、黑鯛(Acanthopagrus schlegelii)[8]、紅鰭東方鲀(Takifugu rubripes)[9]和虹鱒(Oncorhynchus mykiss)[10]等魚類肝脂過度蓄積, 緩解肝脂過量蓄積產(chǎn)生的肝功能損傷; 還能減輕投喂低蛋白質(zhì)飼料草魚[11]、高淀粉飼料大口黑鱸(Micropterus salmoides)[12,13]、豆油替代魚油飼料大黃魚[14]、高非淀粉多糖飼料虹鱒[15]及高植物性原料比例飼料的大菱鲆(Scophthalmus maximus)、羅非魚(Oreochromis niloticus)和虹鱒等體內(nèi)脂肪代謝紊亂[16—18]。上述研究結(jié)果顯示了BA在維持魚類肝臟脂類代謝穩(wěn)態(tài)方面具有重要作用, 還鮮見其在鰻鱺(Anguillaspp.)飼料中的報道。

鰻鱺營養(yǎng)豐富, 素有“水中人參”的美譽, 作為我國重要的經(jīng)濟魚類, 連續(xù)多年在出口創(chuàng)匯的單一水產(chǎn)品中排名第一。歐洲鰻鱺(Anguilla anguilla)曾是我國主要鰻鱺養(yǎng)殖品種, 但該品種屬于《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》CITES附錄Ⅱ的瀕危保護物種, 目前國內(nèi)進口量較少, 仍有一定養(yǎng)殖規(guī)模[19]。歐洲鰻鱺全魚脂肪含量在可養(yǎng)殖的主要鰻鱺品種中最高, 且肝臟功能易受脂肪代謝紊亂帶來的負面影響[20,21], 開展BA添加在歐洲鰻鱺飼料中的應(yīng)用研究具有重要的實踐和理論意義。因此, 本實驗旨在研究歐洲鰻鱺幼魚飼料中添加不同水平BA對肝臟脂肪代謝的影響, 為揭示BA調(diào)節(jié)魚類脂肪代謝機制提供參考。

1 材料與方法

1.1 實驗設(shè)計及實驗飼料

將養(yǎng)殖歐洲鰻鱺幼魚的9口水泥池[初始規(guī)格(141.5±1.9) g/尾; 初始魚重(682±23) kg/池]隨機分為3個組, 分別投喂幼鰻商業(yè)飼料(對照組)及在其基礎(chǔ)上添加500 mg/kgBA(BA1組)、基礎(chǔ)飼料添加1000 mg/kg BA(BA2組)的飼料; 每個組3個重復(fù), 養(yǎng)殖實驗持續(xù)15 周。在本實驗中膽汁酸添加水平根據(jù)以往膽汁酸在不同魚類飼料中適宜添加水平及膽汁酸的推薦水平在500 mg/kg左右而綜合考慮確定。

所用幼鰻商業(yè)飼料由浙江科盛飼料股份有限公司生產(chǎn)且未添加BA, 主要原料為白魚粉、α-糊化淀粉、酵母粉、膨化大豆及復(fù)合預(yù)混料, 其主要營養(yǎng)指標(測定值): 水分6.08%、粗蛋白質(zhì)47.43%、粗脂肪4.81%、灰分16.87%、鈣4.16%和總磷2.85%。將BA(豬源膽汁酸產(chǎn)品, 有效含量50%, 廈門興牧威動物保健品有限公司生產(chǎn))按照500和1000 mg/kg水平添加在上述商業(yè)基礎(chǔ)飼料中, 采用逐級混合均勻的方法制作實驗組飼料。

1.2 飼養(yǎng)管理

本實驗在福建錦江之曼水產(chǎn)科技有限公司5號養(yǎng)殖車間進行, 選用具有循環(huán)水設(shè)施的六邊形水泥池(面積30 m2, 高1.5 m, 有效水體體積27 m3, 水體流速為0.39 m3/min, 采用液氧充氣)開展實驗研究,所有歐洲鰻鱺幼魚養(yǎng)殖水泥池實行統(tǒng)一管理。在實驗開始前, 每日用攪拌機(YE2132M-6, 上海皓天電機有限公司)將粉狀基礎(chǔ)飼料與水混合均勻(重量比為1∶1.2), 和成面團狀飼料, 再切成2 kg左右的小塊進行投喂。實驗魚日投喂2次(每天06:00和18:00), 每餐根據(jù)攝食活力、水質(zhì)變化和天氣變化等狀況確定具體投喂量; 采用自然光照, 另在投喂時開日光燈1h。由于在實際生產(chǎn)中規(guī)格相近的鰻鱺經(jīng)過一段時間養(yǎng)殖, 魚體重因個體生長速度的不同而出現(xiàn)較大差異, 所以一般每隔2—3個月進行一次規(guī)格大小的分群操作, 即將規(guī)格接近的鰻鱺挑選出來再置于同一池中養(yǎng)殖。在公司5號養(yǎng)殖車間的歐洲鰻鱺幼魚重新分群后, 挑選出規(guī)格和總重接近的9口水泥池用于本實驗。正式實驗開始后每日記錄攝食和死魚狀況(實驗期間鰻鱺成活率平均為99.8%); 實驗期內(nèi)控制水溫26—30℃, 溶解氧10—15 mg/L, pH 6.0—6.5, 氨氮濃度8.0—8.5 mg/L,亞硝酸鹽濃度0.15—0.22 mg/L; 鰻鱺其他飼養(yǎng)管理、水質(zhì)指標等與同養(yǎng)殖車間內(nèi)其他養(yǎng)鰻池保持一致。

1.3 樣品采集與處理

在實驗結(jié)束后, 實驗魚禁食24h, 每口池隨機撈取12尾魚, 被無水乙醇配制成2 g/L丁香酚麻醉后再無菌解剖魚體后分離肝臟取樣, 其中3尾魚肝臟同一部位的肝小葉重要靜脈周圍取樣, 再置于Bouin氏液中至少固定24h后再制作切片; 剩余肝臟樣品按照趙盼月[21]的方法采集及預(yù)處理樣品待測脂肪代謝酶水平或活性。6尾魚肝臟樣品冷凍保存待測常規(guī)營養(yǎng)成分。3尾魚肝臟樣品放到無菌凍存管中液氮速凍, -80℃保存后將對照組和BA1組各6個肝臟樣品送至上海敏心生物科技有限公司進行脂質(zhì)組學(xué)分析。在本課題組之前的研究中, BA1組與BA2組歐洲鰻鱺幼魚生長、腸道消化酶活性和血清生化主要指標等接近[5], 兩組肝臟脂肪代謝變化可能相似, 只將BA1組與對照組進行脂質(zhì)組學(xué)分析。

1.4 測定指標

肝臟組織切片制備及觀察肝臟組織樣品在4%甲醛固定液中固定24h后于75%的酒精中浸泡, 更換數(shù)次以去除樣品中苦味酸的黃色, 按照常規(guī)方法進行脫水、透明、包埋、切片及HE染色,石蠟封片, 在100倍觀察肝臟組織形態(tài)和結(jié)構(gòu)[21]。

肝臟常規(guī)營養(yǎng)成分肝臟常規(guī)營養(yǎng)成分測定使用常規(guī)方法, 其中采用凱氏定氮法測定粗蛋白水平; 采用乙醚索氏抽提法測定粗脂肪水平; 采用常規(guī)馬弗爐高溫灼燒法測定灰分水平。

肝臟脂肪代謝酶采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定肝臟脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase, FAS)和乙酰輔酶A羧化酶(Acetyl CoA carboxylase, ACC)水平, 肝脂酶(Hepatic lipase,HL)和脂蛋白酯酶(Lipoprotein lipase, LPL)活性。具體操作步驟詳見說明書。此外, 總脂酶(Total lipase, TL)活性為HL和LPL兩種酶活性之和。

肝臟脂質(zhì)組學(xué)分析肝臟樣本于冰上緩慢解凍后取50 mg樣本, 加入1.5 mL氯仿/甲醇(2/1,v/v)溶液, 加入0.5 mL純水, 10 μL內(nèi)標[200 μg/mL,PC(11∶0/11∶0)], 渦旋1min; 3000 r/min離心10min,取盡有機相于干凈的試管中, 氮氣吹干。用400 μL異丙醇/甲醇(1/1,v/v)復(fù)溶; 12000 r/min, 4℃離心10min后取上清于進樣瓶待進行脂質(zhì)組學(xué)分析。脂質(zhì)組學(xué)分析委托上海敏心生物科技有限公司采用LC- MS (Thermo, Ultimate 3000LC, Q Exactive) 儀器平臺進行, 所用色譜柱及其分離條件、質(zhì)譜檢測參數(shù)、掃描模式、碰撞模式、數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析方法等均與Wang等[22]相同。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

歐洲鰻鱺幼魚體成分及肝臟脂肪代謝酶等指標采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件中One-way ANOVA法進行單因素方差分析。P＜0.05表示差異顯著。脂質(zhì)組學(xué)分析使用Lipid Search軟件(Thermo Fisher Scientific, USA)、SIMCA-P 13.0 (Umetrics AB, Umea,Sweden)軟件及OPLS-DA模型鑒定差異顯著的代謝物(VIP＞1,t檢驗P＜0.05), 用MetaboAnalyst4.0數(shù)據(jù)庫尋找差異脂質(zhì)代謝產(chǎn)物富集的代謝通路。

2 結(jié)果

2.1 歐洲鰻鱺幼魚肝臟組織形態(tài)

如圖 1所示, 不同組歐洲鰻鱺幼魚肝臟組織中脂肪空泡數(shù)量方面存在較大差異; 對照組肝臟中脂肪空泡較多, BA組肝臟中脂肪空泡數(shù)量均較少。

圖1 飼料中添加膽汁酸對歐洲鰻鱺幼魚肝臟組織結(jié)構(gòu)的影響Fig. 1 Effects of dietary bile acid supplementation onliver histology of European eel juveniles

2.2 歐洲鰻鱺幼魚肝臟常規(guī)營養(yǎng)成分

由表 1可知, 與對照組相比, 添加BA顯著增加了歐洲鰻鱺幼魚肝臟粗蛋白水平(P＜0.05), 顯著降低粗脂肪水平(P＜0.05), BA組間粗脂肪和粗蛋白水平無顯著差異(P＞0.05); 不同組間灰分水平接近(P＞0.05)。

表1 飼料中添加膽汁酸對歐洲鰻鱺幼魚肝臟常規(guī)營養(yǎng)成分的影響Tab. 1 Effects of dietary bile acid supplementation on proximate composition in liver of European eel juveniles (wet sample; %)

2.3 歐洲鰻鱺幼魚肝臟脂肪代謝酶

由表 2可知, 與對照組相比, BA組肝臟FAS水平顯著降低(P＜0.05), 僅BA1組ACC水平顯著降低(P＜0.05), LPL、HL和TL活性均顯著升高(P＜0.05);BA1組和BA2組間均無顯著差異(P＞0.05), BA2組ACC水平與對照組無顯著差異(P＞0.05)。

表2 飼料中添加膽汁酸對歐洲鰻鱺幼魚肝臟脂肪代謝酶活性或水平的影響Tab. 2 Effects of dietary bile acid supplementation on lipid metabolism enzymes activities or levels in liver of European eel juveniles

2.4 歐洲鰻鱺幼魚肝臟脂質(zhì)組學(xué)分析

正交偏最小二乘法(OPLS－DA)判別分析融合了正交信號校正的干擾信息剔除能力及偏最小二乘判別的相關(guān)信息提取能力, 是脂質(zhì)代謝組學(xué)中最常用的建模方法。本實驗OPLS-DA法建模得分圖見圖 2?？梢? 本模型具有較好的穩(wěn)定性和預(yù)測性,不存在過擬合現(xiàn)象; 對照組和BA1組代謝組產(chǎn)物有較好分離效果, 兩組之間存在明顯差異。

圖2 正、負離子模式下對照組和BA1組OPLS-DA分析得分圖Fig. 2 The OPLS-DA scores plot of control group and BA 1 group under ESI+ and ESI- mode

如圖 3所示, 與對照組相比, BA1組歐洲鰻鱺幼魚肝臟中差異脂質(zhì)代謝產(chǎn)物富集的代謝通路按照重要程度由大到小分別是甘油磷脂代謝、甘油酯代謝、亞油酸代謝、α-亞油酸代謝及花生四烯酸代謝。

圖3 BA1組與對照組相比歐洲鰻鱺幼魚肝臟差異脂質(zhì)代謝途徑富集通路氣泡圖Fig. 3 The scatter plot of the enriched metabolic pathway for all matching significant metabolites in liver of European eel juveniles of BA1 group in comparison with control group.

由表 3可知, 兩組歐洲鰻鱺幼魚肝臟中存在顯著差異的主要是甘油磷脂代謝和甘油酯代謝。從所匹配的脂質(zhì)產(chǎn)物變化情況可以看出BA1組這兩條通路的代謝增強, 涉及的脂質(zhì)產(chǎn)物主要是磷脂酰膽堿和溶血磷脂酰膽堿。此外, 磷脂酰膽堿參與的亞油酸代謝、α-亞麻酸代謝、花生四烯酸代謝在兩組中也存在一定差異, 代謝強度也有增加的趨勢。

表3 BA1組與對照組相比歐洲鰻鱺幼魚肝臟中差異代謝通路匹配的脂質(zhì)代謝產(chǎn)物Tab. 3 The most relevant metabolic pathways and corresponding differential lipid metabolites in the liver of European eel juveniles of the BA1 group in comparison with the control group

3 討論

3.1 肝臟脂肪蓄積

研究表明, BA除了參與食物中脂類和脂溶性維生素溶解、消化和吸收之外, 還可通過激活FXR調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)生成和分泌、血漿脂質(zhì)清除及腸道膽固醇吸收來影響脂質(zhì)代謝及自身代謝[2,3]。

在我們以往研究中發(fā)現(xiàn), 在飼料中添加500 mg/kg BA可降低歐洲鰻鱺血清中甘油三酯、總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇水平[5]。在本實驗中, BA組歐洲鰻鱺幼魚肝臟切片的結(jié)果顯示脂肪空泡數(shù)量減少, 這與在黑鯛[8]、大口黑鱸[12,13]、羅非魚[17]、烏鱧(Channa argus)[23]、雜交石斑魚(Epinephelus fuscoguttatus♀× E. lanceolatus♂)[24]、鱖(Siniperca chuatsi)[25]和鯉(Cyprinus carpioL.)[26]飼料中添加BA后肝臟組織切片中脂肪空泡變化的結(jié)果一致;BA組歐洲鰻鱺幼魚肝臟脂肪水平顯著降低, BA這種降低肝臟脂肪水平的效應(yīng)在大黃魚[7]、紅鰭東方鲀[9]、大口黑鱸[12]、羅非魚[17]、雜交石斑魚[24]、鱖[25]、鯉[26]、草魚[27,28]、大菱鲆[29]和軍曹魚(Rachycentron canadum)[30]也有類似的報道, 說明添加BA具有明顯降低魚類肝臟脂肪蓄積的作用。研究表明, 添加BA未顯著提高羅非魚[17]、鱖[25]、草魚[27,28]和軍曹魚[30]肝臟中粗蛋白質(zhì)水平, 這與本研究結(jié)果有所差異, 但在低脂肪水平下添加BA可顯著提高大菱鲆肝臟脂肪水平[29], 具體原因有待查明。

3.2 肝臟脂肪代謝酶活性或水平

肝臟是魚體脂質(zhì)代謝最為活躍器官, 其相關(guān)代謝酶的變化可以反映出體內(nèi)脂肪代謝狀況。FAS是脂肪酸合成的關(guān)鍵酶之一, 催化乙酰輔酶A和丙二酸單酰輔酶A轉(zhuǎn)變成脂肪酸, 可被膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(Sterol regulatory element-binding protein, SREBP-1)調(diào)控長鏈脂肪酸的合成[7]。ACC是脂肪酸合成限速酶, 可催化乙酰輔酶A形成丙二酰輔酶A, 控制體內(nèi)脂肪合成代謝的強弱[31]。在本實驗中, 飼料中添加BA后, 歐洲鰻鱺幼魚肝臟中的FAS和ACC水平顯著降低, 表明脂肪的合成代謝受到抑制。LPL和HL是魚類肝臟脂肪分解代謝過程中的兩個關(guān)鍵酶, TL為二者之和。LPL可脂解血漿脂蛋白-甘油三酯而釋放游離脂肪酸和單酸甘油酯,以供組織氧化供能和貯存, 間接決定從飼料中的脂類以體脂形式貯備起來或作為能源底物消耗掉[14,23,32]。HL存在于肝內(nèi)皮細胞表面, 可促進低密度脂蛋白膽固醇和乳糜微粒殘粒進入肝細胞, 參與高密度脂蛋白膽固醇逆轉(zhuǎn)運及其殘粒分解[22,23,32]。在本研究中, 歐洲鰻鱺幼魚飼料中添加BA后, LPL、HL和TL活性均顯著上升, 說明肝臟脂肪的分解代謝增強。因此, 歐洲鰻鱺幼魚飼料中添加BA可通過抑制肝臟脂肪合成代謝, 促進脂肪分解代謝來調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝, 從而減少脂肪蓄積。此外, 與陸生動物的研究結(jié)果類似, 在魚類中的研究也證實FXR的激活是BA調(diào)節(jié)脂質(zhì)生成的關(guān)鍵途徑。在生理條件下,參與脂肪生成的ACC酶和脂肪酸合成的FAS酶均受小異源二聚體伴侶受體(Small heterodimer partner, SHP)調(diào)控[33], 推測BA可通過激活魚類肝臟中FXR可通過介導(dǎo) SHP來調(diào)控元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1C(SREBP-1C)的表達[9,14,34]; 還可能誘導(dǎo)過氧化物酶體增殖物激活受體α高表達, 上調(diào)脂肪酸β氧化相關(guān)酶, 促進脂肪酸氧化[7,23,24], 從而減少脂質(zhì)沉積。

3.3 肝臟脂質(zhì)代謝產(chǎn)物

在本實驗中, BA1組歐洲鰻鱺幼魚肝臟中差異脂質(zhì)代謝產(chǎn)物富集的代謝通路主要是甘油磷脂代謝、甘油酯代謝、亞油酸代謝、α-亞油酸代謝及花生四烯酸代謝等, 涉及的主要差異脂質(zhì)代謝產(chǎn)物是磷脂酰膽堿和甘油三酯, 且呈上調(diào)趨勢。磷脂酰膽堿是魚體內(nèi)主要的甘油磷脂, 也是脂蛋白的主要成分[35,36]; 與蛋白質(zhì)、維生素并列的“第三營養(yǎng)素”,能夠保持肝臟正常功能, 保護肝臟, 預(yù)防脂肪蓄積[37]。磷脂酰膽堿在磷脂酶A2的作用下水解為溶血磷脂酰膽堿, 同其他脂肪降解產(chǎn)物一起與膽汁鹽混合,最終被腸粘膜細胞吸收[38]。溶血磷脂酰膽堿還可作為磷脂酰膽堿的瞬時中間體, 發(fā)揮第二信使作用[39]。此外, 甘油磷脂代謝相關(guān)的差異代謝產(chǎn)物, 還是膽汁的重要成分之一[40]。本實驗肝臟靶向脂質(zhì)代謝組學(xué)結(jié)果顯示, BA1組歐洲鰻鱺幼魚肝臟磷脂酰膽堿和溶血磷脂酰膽堿水平上調(diào), 表明添加BA可增強使肝臟甘油磷脂代謝。甘油磷脂主要包括磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇氨和磷脂酰肌醇等, 是細胞膜主要的脂質(zhì)成分, 在細胞增殖、分化和凋亡中發(fā)揮關(guān)鍵作用[35,41]。研究表明, 添加外源膽汁酸未降低紅鰭東方鲀膽囊中大部分種類膽汁酸水平[9], 也未降低歐洲鰻鱺幼魚肝臟不同種類膽汁酸水平[21]。因此, 肝臟中甘油磷脂類物質(zhì)水平的升高, 可能用于膽汁酸的合成。

此外, 肝臟中磷脂酰膽堿水平上調(diào)還與亞油酸、α-亞麻酸和花生四烯酸代謝有關(guān)。亞油酸和α-亞麻酸作為鰻鱺等淡水魚類主要的必需脂肪酸, 能夠維持生物膜的正常結(jié)構(gòu)和功能, 對膽固醇等類脂代謝具有重要作用[42]; 花生四烯酸在機體的營養(yǎng)物質(zhì)代謝、白細胞功能調(diào)控和血小板激活中發(fā)揮著重要的作用[43], 還具有調(diào)節(jié)魚體抗氧化能力、機體炎癥反應(yīng)及免疫功能[44]。甘油三酯是甘油酯類中最主要的中性脂質(zhì), 也是脂肪儲存能量的主要形式,還可作為甘油磷脂生成的底物[45,46]。在本實驗中,肝臟甘油三酯水平上調(diào), 說明肝臟中儲存的能量水平增加, 也可能用于與甘油磷脂代謝增強有關(guān)的代謝產(chǎn)物生成。在本實驗中, 甘油磷脂代謝、甘油酯代謝、亞油酸代謝、α-亞油酸代謝及花生四烯酸代謝等分解代謝增強與BA組肝臟主要脂肪分解酶活性升高, 脂肪合成酶活性降低的結(jié)果相對應(yīng), 而生成的磷脂酰膽堿、甘油三酯等脂類物質(zhì)含量上調(diào), 可能是對肝臟保護作用及維持高強度代謝水平的能量需要的一種適應(yīng)[46,47]。綜上, 在飼料中添加BA對歐洲鰻鱺幼魚肝臟中脂質(zhì)代謝的影響可能主要通過調(diào)控甘油磷脂及甘油酯類, 詳細作用機制還有待于進一步研究。

目前, 還未見其他水產(chǎn)動物的研究中使用靶向代謝組的方法, 分析BA對肝臟脂質(zhì)代謝通路的影響, 本實驗中顯著變化的這些代謝通路仍需在轉(zhuǎn)錄水平、蛋白質(zhì)翻譯水平進一步驗證。此外, 本實驗中僅對對照組和BA1組開展了脂質(zhì)組學(xué)分析, 主要根據(jù)本課題組以往BA添加在歐洲鰻鱺幼魚中的實驗結(jié)果[5], 推測2個BA添加水平組肝臟脂肪代謝的情況可能相近, 結(jié)合本實驗中肝臟切片、肝組脂肪水平及脂肪代謝酶變化的結(jié)果可以證明原來的假設(shè)。而BA2組及更高BA添加水平對歐洲鰻鱺幼魚肝臟脂質(zhì)代謝通路影響的情況及作用機制還有待于在將來的研究中查明。

4 結(jié)論

在飼料中添加膽汁酸可通過降低歐洲鰻鱺幼魚肝臟中脂肪合酶水平和增加脂肪分解酶活性, 上調(diào)肝臟磷脂酰膽堿和溶血磷脂酰膽堿含量, 主要增強甘油磷脂代謝和甘油酯代謝, 從而減少脂肪蓄積。本研究率先利用脂質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析膽汁酸對歐洲鰻鱺幼魚肝臟脂肪代謝主要通路的影響, 研究結(jié)果可豐富膽汁酸調(diào)控魚類脂肪代謝理論, 但顯著變化的相關(guān)脂質(zhì)代謝通路有待進一步驗證, 詳細的調(diào)控機制也需要在將來的研究查明。