信珊珊,丁 浩,楊 陽,陳伊靈,朱小燕,2,3*,李相前,2,3,劉 培,2
(1.淮陰工學院生命科學與食品工程學院,江蘇淮安 223003;2.江蘇省益生制劑重點建設(shè)實驗室,江蘇淮安 223003;3.江蘇省生物質(zhì)轉(zhuǎn)化與過程集成工程實驗室,江蘇淮安 223003)
經(jīng)濟和社會的迅速發(fā)展刺激了人們對肉禽蛋奶等畜產(chǎn)品的消費,進而增加了對飼料原料的需求(肖長峰等,2020)。當前我國面臨著嚴重的蛋白飼料資源缺口(楊婧芳,2020),動物蛋白飼料源如魚粉、羽毛粉等價格昂貴,主要依賴進口,豆粕、菜籽粕、棕櫚粕等粕類植物蛋白飼料在我國產(chǎn)量豐富且分布廣泛(鄧露芳等,2011),具有極大的開發(fā)價值。但是植物粕類飼料資源中含有抗營養(yǎng)因子,影響了其在動物養(yǎng)殖中的應用。通過微生物發(fā)酵進行處理,既可以降解抗營養(yǎng)因子,又能分解蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì),從而提高消化吸收率,還能夠產(chǎn)生有益成分,改善品質(zhì),提升飼用價值。酵母菌是粕類飼料發(fā)酵過程中常用的微生物(王永偉等,2019)。酵母菌在發(fā)酵粕類飼料的過程中,能夠?qū)暳现械牡崔D(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)儲存在體內(nèi),從而增加粗飼料中的蛋白含量(張博,2018);同時,酵母菌能分泌降解各類抗營養(yǎng)成分和大分子物質(zhì)的酶系;并且酵母菌在機體的腸道中大量繁殖,可以相對抑制有害菌群的生長(馬惠茹等,2021)。酵母菌可以單獨發(fā)酵粕類飼料,也可以與其他菌種協(xié)同發(fā)酵,通?;炀l(fā)酵的效果會比單菌發(fā)酵更加顯著(Smid等,2013)。在我國全面禁用抗生素的大環(huán)境下,利用酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)新型飼料越發(fā)成為研究熱點。
粕類飼料的主要成分是植物種皮(鄧露芳等,2011),這就導致該類飼料的粗纖維含量較高,非反芻類動物難以消化利用這部分營養(yǎng),而且高含量的粗纖維會影響動物對其他營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。除此之外,粕類飼料中還含有其他不可忽視的抗營養(yǎng)因子(宋立立等,2020)。胰蛋白酶抑制因子、抗原蛋白是豆粕中主要的抗營養(yǎng)因子(Dai等,2017)。胰蛋白酶抑制因子會在動物體內(nèi)優(yōu)先與胰蛋白酶結(jié)合,使其失去消化吸收飼料中蛋白質(zhì)的能力,減緩動物生長發(fā)育的同時,還會造成胰腺的病變;抗原蛋白是一種具有致敏性的大分子蛋白,主要存在于豆粕中,會引發(fā)機體過敏,情況嚴重的會導致死亡(李旺等,2020;王耀等,2019)。植酸主要存在于豆粕、菜籽粕和花生粕中(鄧露芳等,2011),可以螯合腸道中的金屬離子,生成動物無法降解的金屬螯合物,還會抑制淀粉酶和蛋白酶的活性。單寧廣泛存在于豆粕、菜籽粕中,棉籽粕中也含有少量的單寧(崔龍等,2017)。單寧進入動物體后,與蛋白質(zhì)、金屬離子等結(jié)合,從而影響機體對蛋白質(zhì)和金屬離子的消化吸收,還會降低腸道中消化酶的活性,阻礙腸道吸收營養(yǎng)物質(zhì)。另外,單寧還是粕類具有辛辣刺激口感的原因,極大降低了粕類飼料的適口性(Khajali等,2012)。硫苷主要存在于十字花科植物中,是菜籽粕中最主要的抗營養(yǎng)因子(Wang等,2019)。硫苷在適宜的水和溫度條件下分解,生成異硫氰酸酯、噁唑烷硫酮、硫氰酸鹽和腈類(孫佩佩,2019),這四種物質(zhì)都具有毒性,會損傷動物的甲狀腺、肝臟、腸道和腎臟。芥子堿是菜籽粕中另一種抗營養(yǎng)因子,味道苦澀,是菜籽粕味道發(fā)苦的主要原因。茶皂素是油茶粕中的主要抗營養(yǎng)因子,味道苦澀辛辣,還會溶解血液中的紅細胞(黃浦等,2015)。棉酚主要存在于棉籽粕中,多以游離態(tài)存在,棉酚被吸收到體內(nèi)后,會在消化器官、血液或生殖細胞中形成鐵和棉酚化合物,危害人和動物的生長和生殖(亓秀曄等,2017)。
2.1 酵母菌發(fā)酵豆粕 豆粕是大豆榨油后的副產(chǎn)物,產(chǎn)量在粕類飼料中居于首位。豆粕的粗蛋白質(zhì)含量都在45%左右(李陽,2020),粗脂肪含量約為1.9%,氨基酸含量豐富,賴氨酸和精氨酸含量分別為3.38%和2.68%(熊海本等,2021),是較為理想的蛋白飼料源。但是豆粕中蛋白質(zhì)的分子量較高,還有胰蛋白酶抑制因子、植酸和粗纖維等抗營養(yǎng)因子的存在(張亞輝,2018),限制了豆粕在日糧中的添加。通過酵母菌發(fā)酵可以顯著降低豆粕中抗營養(yǎng)因子的含量,對大分子蛋白也有明顯的降解作用。謝鵬等(2019)用熱帶假絲酵母發(fā)酵豆粕,對植酸的降解率達到55.3%。李杰等(2021)用釀酒酵母發(fā)酵豆粕,對胰蛋白酶抑制因子的去除率達到97%;對抗原蛋白也有顯著的降解效果。Lin等(2017)用酵母菌、芽孢桿菌和乳酸桿菌混合發(fā)酵豆粕后,胰蛋白酶抑制因子的降解率達到72.39%;小肽含量由2.16%提升到14.36%,提高了5.64倍。將發(fā)酵后豆粕添加進仔豬、肉雞的日糧中,可以提高動物的采食量和日增重(Wu等,2021;Lin等,2017)。說明在日糧中添加發(fā)酵豆粕有益于動物腸道健康,能促進養(yǎng)分的吸收和利用。
2.2 酵母菌發(fā)酵菜籽粕 菜籽粕是油菜籽提煉榨油后的產(chǎn)物,我國每年可以產(chǎn)700萬t左右的菜籽粕(朱小燕等,2021)。菜籽粕的粗蛋白質(zhì)含量在30%~45%(Chmielewska等,2020),氨基酸組成合理,賴氨酸和精氨酸含量分別為1.3%和1.83%(熊海本等,2021),是一種優(yōu)質(zhì)植物蛋白資源。研究表明,酵母菌發(fā)酵可以有效降解菜籽粕中的抗營養(yǎng)因子,提高菜籽粕的營養(yǎng)價值,屬于有較大開發(fā)價值的粕類飼料(Ashayerizadeh等,2018)。方潔等(2016)利用啤酒酵母發(fā)酵菜籽粕,發(fā)酵結(jié)束后測得硫苷和植酸的降解率分別為63.27%和71.39%;用啤酒酵母與曲霉、芽孢桿菌和乳酸菌聯(lián)合發(fā)酵菜籽粕,硫苷、植酸和芥子堿的降解率分別為75.12%、87.56%和56.00%。吳正可等(2019)用釀酒酵母協(xié)同乳桿菌混菌發(fā)酵菜籽粕,對硫苷的降解率達到48.79%,總酸和多肽增加率分別為499.65%和148.37%。產(chǎn)朊假絲酵母、乳桿菌和地衣芽孢桿菌協(xié)同發(fā)酵菜籽粕,硫苷的降解率達到85.02%,多肽含量提升了4.55倍,在日糧中添加適量的發(fā)酵菜籽粕提高了肉雞的生長速率和采食積極性,還有利于肉鴨和仔豬的健康生長(Wang等,2019;胡永娜等,2012;丁小玲等,2011;許甲平等,2010)??梢姲l(fā)酵后的菜籽粕中產(chǎn)生了可以提高動物免疫力和生長性能的物質(zhì)。
2.3 酵母菌發(fā)酵棉籽粕 棉籽粕是棉花籽榨油后的剩余產(chǎn)物,我國的年產(chǎn)量約為600萬t,但是使用量僅有1/3(亓秀曄等,2019)。棉籽粕中的粗蛋白質(zhì)含量可以達到40%~50%,氨基酸種類豐富,精氨酸含量高達3.6%~3.8%,還有豐富的B族和E族維生素(周金影,2021),這些營養(yǎng)特性使得棉籽粕可以作為飼料中的植物蛋白源。但是,游離棉酚、粗纖維等抗營養(yǎng)因子的存在限制了棉籽粕在動物生產(chǎn)方面大量使用。通過微生物發(fā)酵既可以降解游離棉酚,又能提升棉籽粕中蛋白質(zhì)和脂肪等含量。亓秀曄等(2019)用酵母菌單菌發(fā)酵棉籽粕時,對游離棉酚的降解率達到了81.83%,酸溶蛋白質(zhì)量分數(shù)由6.63%提升到8.31%。采用酵母菌一號、富邦酵母菌和拉曼酵母菌分別對棉籽粕進行單菌發(fā)酵,最終測得對棉酚的降解率分別為73.69%、69.79%和70.19%;另外,發(fā)酵后蛋白質(zhì)和脂肪含量均有明顯提升(周金影等,2021)。羅遠琴等(2020)用釀酒酵母和枯草芽孢桿菌混合發(fā)酵棉籽粕后,極大的提高了粗蛋白質(zhì)、游離氨基酸和棉籽肽含量,降低了棉籽粕中的粗纖維含量。李金輝等(2022)用瘤胃體外發(fā)酵的方式,研究了發(fā)酵棉籽粕代替豆粕的影響,結(jié)果表明發(fā)酵棉籽粕最高可以替代33%的豆粕,對瘤胃正常消化吸收無不良影響。申佳佳等(2021)研究了在馬岡鵝日糧中添加發(fā)酵棉籽粕對其生長性能等指標的影響,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵棉籽粕的添加量在20%以下無顯著影響。
2.4 酵母菌發(fā)酵棕櫚粕 棕櫚果仁榨取棕櫚油后的剩余產(chǎn)物就是棕櫚粕,其價格低廉,資源豐富。棕櫚粕粗蛋白質(zhì)含量為16%~18%,粗脂肪含量為8%~10%,粗纖維含量為16%~18%,反芻動物可以接受,但是不能用作水產(chǎn)及家禽、豬飼料等(丁翠英,2020;胡貴麗等,2018;張恒,2013)。棕櫚粕60%以上的成分都是細胞壁,主要成分是不溶性甘露聚糖(張恒,2013)。多糖的濃度過高會抑制動物對腸道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收(易文根,2017),這極大的限制了棕櫚粕在動物飼料方面的應用。通過微生物發(fā)酵降低棕櫚粕的粗纖維含量,是提高其飼用價值的有效手段。張恒等(2013)用釀酒酵母和黑曲霉協(xié)同發(fā)酵棕櫚粕,使半纖維素含量減少了25%,粗蛋白質(zhì)含量增加了58%。于長青等(2019)發(fā)現(xiàn),棕櫚粕發(fā)酵飼料替代30%的玉米秸稈不影響肉牛的健康生長,并且能使肉牛達到同樣的增肥效果。這說明棕櫚粕經(jīng)過發(fā)酵后,在飼料中的添加量有極大提高,從而降低養(yǎng)殖成本,提高經(jīng)濟效益。
2.5 酵母菌發(fā)酵花生粕 花生粕是花生榨油后的產(chǎn)物,含有豐富的蛋白質(zhì),是我國蛋白質(zhì)飼料原料市場的重要組成部分(孫東偉等,2019)?;ㄉ芍写值鞍踪|(zhì)含量高達38.0%~47.0%,粗纖維含量為4.0%~7.0%,粗脂肪含量為0.5%~2.0%(Zhao等,2012),其代謝能在所有粕類飼料中居于首位。精氨酸含量超過5%,但是蛋氨酸和賴氨酸比較缺乏?;ㄉ煽範I養(yǎng)因子較少,主要存在的問題是容易感染黃曲霉毒素(許欣等,2020)。魯氏接合酵母固態(tài)發(fā)酵花生粕最高可以降解花生粕中97%的黃曲霉(Zhou等,2017)。酵母菌發(fā)酵還可以提高花生粕中粗蛋白質(zhì)和氨基酸含量,徐會茹等(2015)將酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌等多種菌種接入花生粕中進行混菌發(fā)酵,將蛋白質(zhì)含量由54.22%提高到58.45%,并且發(fā)酵后花生粕中缺少的蘇氨酸、蛋氨酸、賴氨酸含量都有明顯提高。王增元等(2017)用植物乳桿菌、釀酒酵母和枯草芽孢桿菌混合發(fā)酵花生粕,將多肽含量提高到18.89%,比發(fā)酵前提高了33.78%。李紅琴等(2020)證實了發(fā)酵花生粕替代花生粕能改善凡納濱對蝦的生長性能,提高機體免疫力。李百安等(2016)發(fā)現(xiàn),發(fā)酵花生粕代替65%左右的魚粉,對羅非魚的健康生長無任何不良影響。
2.6 酵母菌發(fā)酵芝麻粕 芝麻粕是芝麻籽榨取芝麻油后留下的產(chǎn)物。芝麻粕中含有39%~48%的粗蛋白質(zhì),10.4%~12.6%的粗灰分(徐文俊等,2014)。芝麻粕中氨基酸的種類較多,含量豐富,但是賴氨酸的含量較低,為0.56%~1.02%(楊榮等,2020)。芝麻粕中的抗營養(yǎng)因子主要是草酸、植酸和單寧(Fayemi等,2011)。彭惠惠等(2012)用酵母菌發(fā)酵芝麻粕,對植酸的降解率達到了53.14%;加入枯草芽孢桿菌混菌發(fā)酵后,降解率提升到84.98%,并且發(fā)酵后芝麻粕中的多肽等營養(yǎng)物質(zhì)的含量也有相應的提升。錢森和等(2013)發(fā)現(xiàn),將啤酒酵母和黑曲霉按照1:1的比例接種到芝麻粕中進行發(fā)酵,發(fā)酵結(jié)束芝麻多肽的含量由初始時的1.24%提升到7.12%,提高了5.74倍。Hajimohammadi等(2020)用釀酒酵母和嗜酸乳桿菌發(fā)酵芝麻粕后發(fā)現(xiàn),草酸和植酸的含量分別降低了50.8%和43.9%,粗蛋白質(zhì)的含量提升了12.7%;進一步將發(fā)酵后的芝麻粕代替豆粕添加到肉雞日糧中發(fā)現(xiàn),肉雞在正常生長的同時,食用發(fā)酵芝麻粕的肉雞體內(nèi)乳酸菌含量增加,大腸桿菌數(shù)量降低,肉雞的腸道環(huán)境得到了極大的改善。宋鵬等(2019)用發(fā)酵芝麻粕等氮代替菜籽粕發(fā)現(xiàn),發(fā)酵芝麻粕替代11%~23%的菜籽粕,有利于草魚的健康生長,能夠提高飼料利用效率。
2.7 酵母菌發(fā)酵油茶粕 油茶籽榨油后的滓渣經(jīng)過粉碎處理得到的就是油茶粕,目前我國油茶粕的年產(chǎn)量約50萬t(劉楚岑等,2020)。油茶粕中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪含量分別是15%、5%左右,糖類占30%~40%(刁歡等,2015)。此外,油茶粕中還有豐富的鎂、鐵、鋅等元素,被視為一種有較大發(fā)展?jié)摿Φ娘暳显?。在用作飼料之前,油茶粕需要去除茶皂素、酚類和粗纖維等抗營養(yǎng)因子。周浩宇等(2010)利用產(chǎn)朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌和黑曲霉混合發(fā)酵油茶粕后,降低了茶皂素、總酚、粗纖維等抗營養(yǎng)物質(zhì)的含量,粗蛋白質(zhì)含量提高了55.56%。熱帶假絲酵母和枯草芽孢桿菌、黑曲霉混菌發(fā)酵油茶粕,使粗蛋白質(zhì)含量提升了2.11倍,粗纖維含量降低了約50%(任仙娥等,2012)。周玥等(2012)用假絲酵母發(fā)酵油茶粕,對茶皂素降解率達到了66%以上。刁歡等(2015)用酵母菌和黑曲霉協(xié)同發(fā)酵油茶粕,使得單寧含量由2.32%下降到0.46%。通過酵母菌等微生物發(fā)酵可以降解油茶粕中的茶皂素、酚類和粗纖維等抗營養(yǎng)因子,還能提升粗蛋白質(zhì)含量。
動物養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展使得飼料缺口越來越大,飼料的成本更加成為影響畜牧養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟效益的關(guān)鍵因素。相比于大量進口魚粉等蛋白質(zhì)飼料源,成本高昂的同時無法保證穩(wěn)定的貨源,不如加快我國的粕類蛋白飼料的開發(fā)利用。我國粕類蛋白飼料資源豐富,除上述提到的豆粕七種以外,還有葵花籽粕、亞麻籽粕和紅花籽粕等,都含有豐富的植物蛋白,是潛在的優(yōu)質(zhì)蛋白飼料源。微生物發(fā)酵飼料具有綠色、高效、成本低等優(yōu)點,必將是提升粕類飼料利用率的重要推動力。當前的工作重點還是要篩選優(yōu)質(zhì)高效的菌株,尋求科學的原料配比,建立起完善的菌株與原料匹配體系,提升發(fā)酵能力,改進發(fā)酵工藝,進一步提升餅粕類飼料的營養(yǎng)價值,使畜牧業(yè)在提供更多優(yōu)質(zhì)健康畜產(chǎn)品的同時,提高經(jīng)濟效益,促進自身的長遠發(fā)展。