朱弘毅

一、研究背景

一天傍晚，剛踢完足球的我饑渴難耐，一到家就打開(kāi)了一瓶礦泉水，“咕嘟”喝了起來(lái)。那時(shí)的我，感覺(jué)能把整瓶水倒進(jìn)肚子里！結(jié)果，還剩了一半沒(méi)喝完。

第二天上午，我拿起剩下的礦泉水正準(zhǔn)備喝，立即被媽媽制止了，她說(shuō)：“隔夜水有細(xì)菌，不能喝！”我不以為然，嫌她“瞎講究”。不過(guò)，這件事引起了我的好奇，沒(méi)喝完的礦泉水第二天到底能不能喝？

二、研究?jī)?nèi)容

我國(guó)食品標(biāo)準(zhǔn)《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB 5749-2022）對(duì)飲用水的食用安全作了詳細(xì)規(guī)定，要求飲用水中菌落總數(shù)≤100 CFU/mL。同時(shí)，重金屬、硝酸鹽等有害物質(zhì)須符合相關(guān)限值。

我通過(guò)檢索文獻(xiàn)、查看新聞報(bào)道得知，“隔夜水”中的亞硝酸鹽含量遠(yuǎn)低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)值下限，正常飲用不會(huì)引起亞硝酸鹽中毒，細(xì)菌等微生物數(shù)量增加才是導(dǎo)致隔夜水變質(zhì)的主要原因。

因此，我以菌落總數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別考察不同放置時(shí)長(zhǎng)、不同飲用方式、不同貯存方式對(duì)礦泉水飲用安全性的影響，以期對(duì)人們健康飲水提供參考。

三、研究過(guò)程

1.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

（1）實(shí)驗(yàn)材料：礦泉水（380 mL/瓶）、菌落總數(shù)測(cè)試片。

（2）實(shí)驗(yàn)設(shè)備：SPM型智能生化培養(yǎng)箱、XK97-A型威茲力菌落計(jì)數(shù)器。

2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程

（1）比較飲用后不同放置時(shí)長(zhǎng)對(duì)礦泉水菌落總數(shù)的影響。

第一步：打開(kāi)瓶蓋，立即檢測(cè)礦泉水的菌落總數(shù)。第二步：采用小口喝水的方式，將礦泉水喝掉1/2后，立即檢測(cè)礦泉水的菌落總數(shù)。第三步：將剩下的礦泉水?dāng)Q緊蓋子后，靜置于常溫下，分別在第12 h、24 h，檢測(cè)礦泉水的菌落總數(shù)。

每個(gè)樣品測(cè)定3次，取平均值，結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的方式表達(dá)。

（2）比較不同飲用方式對(duì)礦泉水菌落總數(shù)的影響，見(jiàn)圖1。

第一步：打開(kāi)3瓶礦泉水，采用小口喝水的方式，分別喝掉1/3、1/2、2/3。第二步：打開(kāi)1瓶礦泉水，倒出一半到杯中。第三步：將4瓶礦泉水?dāng)Q緊蓋子后，靜置于常溫下，24 h后檢測(cè)礦泉水的菌落總數(shù)。

（3）比較不同貯存方式對(duì)礦泉水菌落總數(shù)的影響，見(jiàn)圖2。

第一步：打開(kāi)4瓶礦泉水，采用小口喝水的方式，分別喝掉礦泉水的1/2。第二步：選擇1瓶上蓋和1瓶敞口的礦泉水，靜置于常溫下。第三步：另選1瓶上蓋和1瓶敞口的礦泉水，靜置于冰箱上層。第四步：24 h后檢測(cè)礦泉水的菌落總數(shù)。

（4）檢測(cè)瓶中礦泉水的菌落總數(shù)。

第一步：將菌落總數(shù)測(cè)試片平鋪在無(wú)菌操作臺(tái)上，使用移液槍將1 mL樣液滴在測(cè)試片中央。操作過(guò)程見(jiàn)圖3。

第二步：用圓形模具將測(cè)試片按壓5～10 s后，寫(xiě)上處理代號(hào)，置于37 ℃智能生化培養(yǎng)箱中。操作過(guò)程見(jiàn)圖4。

第三步：培養(yǎng)24 h后，采用菌落計(jì)數(shù)器計(jì)算菌落數(shù)，單位為CFU/mL。操作過(guò)程見(jiàn)圖5。

（5）處理數(shù)據(jù)。

采用Excel錄入數(shù)據(jù)并進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)差分析，菌落總數(shù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的方式表達(dá)，用Origin 2021b軟件制圖。

四、結(jié)果與分析

1.檢測(cè)剛開(kāi)瓶和喝掉1/2的礦泉水在不同時(shí)間的菌落總數(shù)，結(jié)果見(jiàn)圖6。

從圖6可以看出，剛開(kāi)瓶的礦泉水基本無(wú)菌；喝掉1/2后，菌落總數(shù)立即上升；放置12 h、24 h后，菌落總數(shù)遠(yuǎn)超《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定的限值100 CFU/mL。

由此得出，以口腔接觸水瓶的方式直接飲用，會(huì)大幅增加瓶中礦泉水的菌落總數(shù)，隔夜后不宜飲用；放置時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)菌越多。

2.檢測(cè)以口腔接觸水瓶的方式直接飲用（分別喝掉1/3、1/2、2/3），以及倒入杯中飲用后礦泉水的菌落總數(shù)，結(jié)果見(jiàn)圖7。

從圖7可以看出，喝掉的水越多，口腔與水瓶接觸的時(shí)間越長(zhǎng)，放置24 h后的礦泉水的菌落總數(shù)越多，且超過(guò)限值100 CFU/mL，不宜飲用；而倒入杯中飲用，余下的礦泉水放置24 h后，菌落總數(shù)依然很低，符合標(biāo)準(zhǔn)，可以飲用。

3.檢測(cè)直接飲用后的礦泉水在上蓋與敞口、常溫與低溫四種方式下，放置24 h后的菌落總數(shù)，結(jié)果見(jiàn)圖8。

從圖8可以看出，在常溫下，上蓋與敞口放置對(duì)礦泉水的菌落總數(shù)影響不顯著；在冰箱的低溫條件下，上蓋放置可以減緩細(xì)菌繁殖，但敞口放置會(huì)加速細(xì)菌繁殖，這可能是冰箱中細(xì)菌較多等原因造成的。

五、結(jié)論

剛開(kāi)瓶的礦泉水基本無(wú)菌，但以口腔接觸水瓶的方式直接飲用礦泉水后，水中菌落總數(shù)急劇上升，放置12 h后，菌落總數(shù)遠(yuǎn)超《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定的限值100 CFU/mL。因此，直接飲用后的礦泉水隔夜后不建議飲用。

在生活中，建議將礦泉水倒入小杯中飲用，這樣可以減少細(xì)菌滋生，延長(zhǎng)保質(zhì)期。飲用后的礦泉水建議上蓋后存放于低溫環(huán)境中。

指導(dǎo)老師 姚珂? ?詹蕾蕾