陸莉莉，喻達輝，覃綏杰，陳 健，趙 森，白麗蓉

（北部灣大學(xué)海洋學(xué)院/廣西北部灣海洋生物多樣性養(yǎng)護重點實驗室，廣西 欽州 535011）

織錦巴非蛤(Paphia textile)俗稱花甲王，隸屬于軟體動物門(Mollusca)、瓣鰓綱(Lamellibranchia)、簾蛤 目(Veneroida)、簾 蛤 科(Veneridae)、巴 非 蛤 屬(Paphia)，是一種灘涂貝類，在國內(nèi)主要分布于廣東、海南、臺灣和福建沿海，國外印度尼西亞、菲律賓和印度洋也有分布[1]，由于其肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)豐富深受大眾喜愛，除此之外，織錦巴非蛤還具有生長周期短、產(chǎn)量高等優(yōu)點，近年逐漸成為我國南方沿海灘涂養(yǎng)殖的重要品種之一。呼吸與排泄是貝類能量代謝的基本生理活動，它既反映了貝類的生理狀態(tài)，也反映了溫度、鹽度、pH、光照、餌料等外界環(huán)境因子對貝類生理活動的影響[2]。溫度和鹽度是影響貝類呼吸和排泄的重要環(huán)境因素。目前溫度和鹽度對貝類的耗氧率和排氨率的研究報道很多，如焦海峰等[3]研究了不同溫度和鹽度對泥蚶(Tegillarca granosa)耗氧率和排氨率的影響，王沖等[4]測定了溫度和鹽度對毛蚶(Scapharca subcrenata)呼吸和排泄的影響，聶鴻濤等[5]揭示了不同溫度和鹽度條件下加州鳥扁蛤(Clinocardium californiense)的代謝和排泄特征。有關(guān)織錦巴非蛤的研究主要集中于生態(tài)[6]、人工育苗養(yǎng)殖[7-8]、形態(tài)差異研究[9]及食品應(yīng)用[10]等方面，但關(guān)于溫度和鹽度對織錦巴非蛤耗氧率和排氨率影響的研究尚未見報道。因大部分海洋經(jīng)濟貝類分布或養(yǎng)殖于潮間帶、灘涂或河口地區(qū)，這些地區(qū)易受氣候的影響，從而引起溫度和鹽度的大幅度變化，可能會對貝類造成不同程度的脅迫[11]，因此通過探究溫度和鹽度對織錦巴非蛤耗氧率和排氨率的影響，對了解其呼吸、排泄的特點和最適生存條件及對環(huán)境的適應(yīng)情況等具有重要的指導(dǎo)意義，可為人工繁育和規(guī)模化養(yǎng)殖管理提供參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

1.5 齡織錦巴非蛤購于北海市海城區(qū)水產(chǎn)品市場，取回后清除貝殼表面的附著物，挑選無損傷、規(guī)格整齊的個體用于試驗。個體規(guī)格：殼高（29.89±0.78）mm，殼寬（30.06±0.82）mm，濕重（35.95±0.48）g，軟體干重（2.06±0.04）g。將織錦巴非蛤放入40 cm×26 cm×25 cm 的塑料箱中暫養(yǎng)3 d，暫養(yǎng)密度為30只/箱，暫養(yǎng)期間水溫為（24±2） ℃，pH 值為7.8±0.3，鹽度為29，連續(xù)充氧，不投餌，采用虹吸法換水，日換水量為1/3，試驗用水均為經(jīng)脫脂棉過濾的海水。

1.2 試驗方法

溫度試驗 根據(jù)織錦巴非蛤生長溫度范圍(10～28 ℃)，試驗溫度設(shè)置10、15、20、25、30 ℃ 5 個溫度梯度，用加熱棒和冰袋及空調(diào)控制溫度，從24 ℃開始，每日升高或降低1～3 ℃，到達預(yù)設(shè)溫度穩(wěn)定24 h后開始試驗，試驗期間，各梯度鹽度為29，pH 為7.8±0.3。

鹽度試驗 根據(jù)織錦巴非蛤生長鹽度范圍(22～36)，試驗鹽度設(shè)置15、20、25、30共4個鹽度梯度，自然海水（鹽度為29）加充分曝氣后的淡水或海水晶調(diào)配成不同鹽度海水，從29 開始，每日升高或降低1.0～3.0，到達預(yù)設(shè)鹽度穩(wěn)定24 h 后開始試驗，試驗期間，各梯度溫度為（24±2） ℃，pH為7.8±0.3。

以2 L 玻璃魚缸為呼吸瓶，每個瓶中放3 個貝，加入過濾海水后用保鮮膜密封，每個試驗組均設(shè)3 個平行組和一個空白對照組，持續(xù)4 h，測定試驗前后呼吸瓶中水樣的溶解氧（DO）和氨氮濃度。采用HQ30d 溶氧儀測定DO，采用次溴酸鈉氧化法測定氨氮濃度，在試驗結(jié)束后用游標卡尺測量織錦巴非蛤的生物學(xué)參數(shù)（即殼高、殼長、殼寬），然后解剖取出軟體部在65 ℃下烘干至恒重，用電子分析天平稱量干重。

試驗結(jié)束后，根據(jù)測定呼吸瓶水體內(nèi)的DO 和氨氮的濃度，計算織錦巴非蛤的耗氧率和排氨率，計算公式如下

式中，RO為單位體重耗氧率[mg/(g·h)]；RN為單位體重排氨率[mg/(g·h)]；DO0為初始時水體中的溶解氧濃度(mg/L)；DOt為t時刻水體中的溶解氧濃度(mg/L)；Nt為t時刻水體中的NH4+-N 濃度(mg/L)；N0為初始時水體中的NH4+-N 濃度(mg/L)；V為呼吸瓶中水的體積(L)；W為織錦巴非蛤軟體部干重(g)；t為試驗持續(xù)時間(h)；O∶N為織錦巴非蛤耗氧率和排氨率之間的比值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)先利用Excel 2016 進行預(yù)處理，數(shù)據(jù)用平均值±標準誤（Mean±SE）表示，使用SPSS 24.0軟件進行方差分析，組間顯著差異采用LSD多重比較，以P＜0.05 作為顯著差異標準，P＜0.01 為極顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對織錦巴非蛤耗氧率和排氨率的影響

從表1可見，在溫度10～30 ℃范圍內(nèi)，織錦巴非蛤的耗氧率隨溫度的升高而增大。耗氧率與溫度的擬合方程：y=0.027 7x+0.130 1，R2=0.985 2。方差分析結(jié)果顯示，溫度對織錦巴非蛤的耗氧率有極顯著影響(P＜0.01)。10、20、25和30 ℃之間耗氧率差異性顯著(P＜0.05），15 ℃和20 ℃之間的耗氧率差異性不顯著(P＞0.05)。

5 個溫度梯度中，溫度為10～20 ℃時織錦巴非蛤的排氨率隨溫度升高而升高，溫度為20～30 ℃時則隨溫度升高而下降，在溫度20 ℃時排氨率達到最高，為0.036 mg/(g·h)。排氨率與溫度的擬合方程：y=-0.000 2x2+0.007 8x-0.045 4，R2=0.808 4。方差分析表明，鹽度對織錦巴非蛤的排氨率有極顯著影響(P＜0.01)。溫度20 ℃和溫度25 ℃與其他處理間有顯著差異性(P＜0.05)，其他處理組間差異性不顯著(P＞0.05)。

從表1還可知，織錦巴非蛤在溫度10～30 ℃時O∶N值的范圍是16.320～71.046，其平均值為31.692。O∶N值與溫度的擬合方程：y=0.296 5x2-9.89 8x+96.218，R2=0.874 1。溫度10～20 ℃時O∶N 值先升高后下降，溫度20 ℃時達到最低值16.320，溫度20～30 ℃又逐漸呈升高趨勢，溫度30 ℃時達到最高值71.046。

表1 織錦巴非蛤在不同溫度下的耗氧率、排氨率及O∶N值Table 1 Oxygen consumption rate, ammonia-N excretion rate and O∶N ratio of P. textile at different temperatures

2.2 鹽度對織錦巴非蛤耗氧率和排氨率的影響

從表2 可見，在鹽度15～30 內(nèi)，織錦巴非蛤的耗氧率變化趨勢與溫度變化趨勢相同，耗氧率隨鹽度升高而增大。耗氧率與鹽度的擬合方程：y=0.047 2x-0.637 4，R2=0.922。方差分析表明，鹽度對織錦巴非蛤的耗氧率有極顯著影響（P＜0.01）。鹽度15與鹽度20間耗氧率顯著不差異(P＞0.05)，鹽度20、25和30之間耗氧率顯著性差異(P＜0.05)。

表2 織錦巴非蛤在不同鹽度下的耗氧率、排氨率及O∶N值Table 2 Oxygen consumption rate, ammonia-N excretion rate and O∶N ratio of P. textile at different salinities

鹽度在15～25間織錦巴非蛤排氨率隨鹽度升高而升高，之后隨鹽度升高而下降，在鹽度25 時排氨率達到最高值，為0.051 mg/(g·h)。排氨率與鹽度的擬合方程：y=-0.000 2x2+0.010 2x-0.117 9，R2=0.767 3。方差分析表明，鹽度對織錦巴非蛤的排氨率有極顯著影響(P＜0.01)，鹽度15與鹽度20間排氨率顯著不差異(P＞0.05)，鹽度20、25 和30 之間排氨率顯著性差異(P＜0.05)。

從表2 還可知，在15～30 鹽度范圍內(nèi)織錦巴非蛤的O∶N 值的范圍是10.459～32.974，其平均值為19.060。O∶N 值與鹽度的擬合方程：y=0.233 4x2-11.581x+154.21，R2=1。O∶N 值隨鹽度升高先下降再升高，在鹽度25時O∶N比值最低，為10.459。

3 討論與結(jié)論

3.1 溫度對織錦巴非蛤耗氧率和排氨率的影響

多數(shù)貝類是生活在水中的變溫動物，因此水溫的波動對貝類呼吸代謝的影響尤為重要。當(dāng)適當(dāng)提高水溫時，會增加體內(nèi)氧化酶的活性，促進氧化反應(yīng)，進而消耗更多氧氣，耗氧量增加，但當(dāng)水溫過高時也會降低氧化酶的活性，對氧氣的消耗減低，耗氧量下降[12]。許多研究表明，在適宜的溫度范圍內(nèi)，隨溫度的升高貝類的代謝率隨之增加，超出這個范圍，貝類的代謝就會發(fā)生紊亂[13]。本研究中，在10～30 ℃范圍內(nèi)隨水溫上升織錦巴非蛤耗氧率增加，在20～25 ℃增加最明顯，之后增加速率減慢，因此25 ℃可能是織錦巴非蛤的最適溫度。該結(jié)果是水生生物界常見的變化趨勢。與鈍吻黃蓋鰈幼魚(Pleuronectes yokohama)[14]、紅螯螯蝦(Cherax quadricarinatus)[15]、櫛江珧(Atrina pectinate)[16]、美國硬殼蛤(Mercenaria mercenaria)[17]、里 氏 擬 石 磺(Paraoncidium reevesii)[18]、中華原鉤蝦(Eogammarus sinensis)[19]、菲律賓蛤仔(Ruditapes philippinarum)[20]等的研究結(jié)果一致。當(dāng)水溫升高時，織錦巴非蛤體內(nèi)組織器官活動性能提高，生理生化反應(yīng)速率加快，對氧氣的需求量增加，導(dǎo)致貝類的耗氧率增大。

許多研究表明，隨著溫度的升高，貝類體內(nèi)組織器官活動性能和酶活性隨之增強，加快了機體理化反應(yīng)，組織代謝相應(yīng)提高，產(chǎn)生的氨和尿素也隨之增多，當(dāng)超過貝類適宜生存的溫度范圍后，就會引起貝類的生理功能發(fā)生紊亂，排氨率下降[21]。在試驗溫度10～20 ℃時，織錦巴非蛤的排氨率隨溫度的升高而升高，在溫度20～30 ℃時，織錦巴非蛤排氨率隨溫度的升高而下降，在溫度20～25 ℃時，排氨率下降相對緩慢，無顯著差異，25～30 ℃時急劇下降，這與香螺(Naptunea cumingii)幼螺[21]、大竹蟶(Solen grandis)[22]、毛蚶[4]的研究結(jié)果相一致。出現(xiàn)這樣的結(jié)果，可能是由于溫度過高，超出貝類適宜生存的環(huán)境，生理代謝發(fā)生紊亂，致使排氨率下降。

3.2 鹽度對織錦巴非蛤耗氧率和排氨率的影響

海水鹽度是養(yǎng)殖中重要的生態(tài)因子之一，對灘涂貝類的分布、繁殖、生長及其生理代謝有重要影響，鹽度的增加或降低均會對其產(chǎn)生影響，其呼吸和排泄會出現(xiàn)規(guī)律性變化[23]。如：聶鴻濤等[22]對大竹蟶耗氧率和排氨率的研究發(fā)現(xiàn)，隨鹽度增加耗氧率先升高后下降，而排氨率先降低再升高。曹善茂等[24]對巖扇貝(Crassadoma gigantea)幼貝的研究發(fā)現(xiàn)，在鹽度24～36 時其耗氧率和排氨率隨鹽度的升高先升高后降低，在鹽度30 時達到最大值；丁天揚等[25]對文蛤(Meretrix meretrix)研究發(fā)現(xiàn)，隨著鹽度升高，耗氧率下降，排氨率升高。王剛等[26]對近江牡蠣(Crassostrea ariakensis)的研究表明，隨鹽度的升高，耗氧率和排氨率先下降后升高，在鹽度20 降到最低。在本實驗中，在鹽度15～30范圍內(nèi)，織錦巴非蛤耗氧率隨鹽度的升高而增大，表明對高鹽度的適應(yīng)能力強，但可適應(yīng)的最高鹽度尚需進一步研究。排氨率在鹽度15～25 時隨鹽度的升高而增大，超過鹽度25后，排氨率略有下降，表明鹽度過高，超出適宜鹽度范圍，其代謝活動下降。因此，結(jié)合耗氧率和排氨率，鹽度25 可能是織錦巴非蛤生長的最佳鹽度，與栗志民得出的織錦巴非蛤最適生長鹽度為26結(jié)果較相近[27]。

3.3 織錦巴非蛤的能源物質(zhì)代謝分析

氧氮比（O∶N）表示生物體內(nèi)蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物分解代謝之間的關(guān)系，可作為生物對環(huán)境壓力適應(yīng)的一個指標[28]。P. Mayzaud[29]發(fā)現(xiàn)，若生物體完全由蛋白質(zhì)提供能量，O∶N值約為7；T. Ikeda[30]認為，若生物體由蛋白質(zhì)和脂肪提供所需能量，O∶N值約為24；R. J. Conover 等[31]指出，如果生物體完全由脂肪或碳水化合供能，O∶N 值將變得無窮大。王剛等[26]、董蘭芳等[32]對近江牡蠣和中國幼鱟(Limulus)的研究結(jié)果也符合同樣的規(guī)律，在5～35鹽度下，近江牡蠣平均O∶N 值為12.61，說明近江牡蠣由脂肪和碳水化合物提供能量。在鹽度5～40，溫度25～37 ℃，幼鱟的O∶N 值為6.71～11.64，表明幼鱟能量來源于蛋白質(zhì)分解。本研究中，在10～30 ℃，隨溫度升高，織錦巴非蛤的O∶N 值基本呈升高趨勢，O∶N值為16.320～71.046，平均值為31.692，說明織錦巴非蛤主要依靠蛋白質(zhì)和脂肪提供能量。在30 ℃，織錦巴非蛤的O∶N值遠超過24，此時織錦巴非蛤排氨率過低，可能的原因是，高溫環(huán)境使織錦巴非蛤酶活性降低，影響了正常的排氨能力，此時能量依靠脂肪和碳水化合物的分解。在鹽度15～30 內(nèi)，隨鹽度升高，其O∶N值先下降后升高，O∶N值為10.459～32.974，平均值為19.060，表明織錦巴非蛤?qū)Φ鞍踪|(zhì)和脂肪的利用率較高，當(dāng)鹽度為15時，O∶N值最大，說明此時主要由脂肪和碳水化合物供能。