朱露丹 宋昊霖 孫凡
(森林生態(tài)系統(tǒng)可持續(xù)經(jīng)營(yíng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(東北林業(yè)大學(xué)),哈爾濱,150040)
菊花(Chrysanthemummorifolium)中國(guó)十大名花之一,是菊科(Compositae)菊屬(Dendranthema)的多年宿根草本植物。不僅具有觀賞價(jià)值,還具有藥用和食用價(jià)值,是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食同源花卉[1]。菊小長(zhǎng)管蚜(MacrosiphoniellasanborniGillette)屬同翅目(Homoptera)蚜科(Aphididae),又稱菊姬長(zhǎng)管蚜,是一種主要危害菊科植物的寡食性昆蟲,分布于我國(guó)河北、山東、浙江、遼寧廣東等地[2]。菊小長(zhǎng)管蚜繁殖力強(qiáng),當(dāng)條件適宜時(shí),可在短期內(nèi)發(fā)生數(shù)代,在溫室中常年發(fā)生。主要危害寄主植物的嫩莖、葉片和花梗,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致植物萎縮、生長(zhǎng)不良、花朵品質(zhì)下降,分泌蜜露產(chǎn)生霉污病,傳播病毒等[3],不僅影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育和開花,還會(huì)影響植物的觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
防治菊小長(zhǎng)管蚜的防治措施有培育抗蚜品種、天敵防治、藥劑防治等[4-6],其中藥劑防治見效快,在害蟲爆發(fā)時(shí)是生產(chǎn)中主要的防治措施。高毒、高殘留的化學(xué)農(nóng)藥會(huì)導(dǎo)致環(huán)境污染和安全問題,故篩選高效低毒的藥劑對(duì)其防治具有指導(dǎo)作用。印楝素、除蟲菊素和苦參堿都是植物源藥劑,田間試驗(yàn)研究表明除蟲菊素、印楝素和苦參堿對(duì)胡蘿卜微管蚜(Semiaphisheraclei)均有較好的防治效果,且易降解,對(duì)環(huán)境無(wú)污染[7];阿維菌素是一種高效、廣譜的抗生素類殺蟲劑,對(duì)瓜蚜(AphisgossypiiGlover)具有很好的防治效果[8];氯蟲苯甲酰胺是通過(guò)高效激活昆蟲魚尼汀受體(RyR),使其過(guò)度釋放細(xì)胞內(nèi)的鈣離子,破壞昆蟲細(xì)胞器內(nèi)外鈣離子平衡,從而導(dǎo)致昆蟲癱瘓死亡,而昆蟲RyR與哺乳動(dòng)物RyR僅有47%的同源性,因此氯蟲苯甲酰胺對(duì)哺乳動(dòng)物的毒性較低[9];氯蟲苯甲酰胺與煙堿類藥劑噻蟲嗪復(fù)配,對(duì)小地老虎(Agrotisypsilon)的毒力明顯增強(qiáng)[10];新煙堿類藥劑吡蟲啉是防治蚜蟲的主要藥劑之一,研究發(fā)現(xiàn)吡蟲啉與氰戊菊酯復(fù)配時(shí),對(duì)馬鈴薯桃蚜(Myzuspersicae)防治增效作用顯著[11]。因此,本研究選用6種低毒、低污染殺蟲劑及復(fù)配對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定,并依據(jù)毒力測(cè)定結(jié)果進(jìn)行盆栽防治試驗(yàn),為菊小長(zhǎng)管蚜的綠色防控提供科學(xué)依據(jù)。
菊小長(zhǎng)管蚜采自東北林業(yè)大學(xué)溫室盆栽菊花,將采后的菊小長(zhǎng)管蚜放入試驗(yàn)袋,帶回實(shí)驗(yàn)室,用菊花苗繼續(xù)飼養(yǎng)。
供試藥劑選用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油(成都綠金生物科技有限責(zé)任公司生產(chǎn))、質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.6%苦參堿水劑(內(nèi)蒙古清源保生物科技有限公司生產(chǎn))、質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%除蟲菊素水乳劑(內(nèi)蒙古清源保生物科技有限公司生產(chǎn))、質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.8%阿維菌素乳油(山東金農(nóng)華藥業(yè)有限公司生產(chǎn))、質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑(美國(guó)富美實(shí)公司生產(chǎn))、質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡蟲啉可濕性粉劑(河北凱斯特農(nóng)化有限公司生產(chǎn))等6種低毒、低污染殺蟲劑。
采用玻片浸漬法進(jìn)行毒力測(cè)定。將供試藥劑用蒸餾水稀釋成5個(gè)質(zhì)量濃度梯度。質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油質(zhì)量濃度梯度為0.15、0.30、0.60、1.20、2.40 mg/L;質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.6%苦參堿水劑質(zhì)量濃度梯度為1.65、3.30、6.60、13.20、26.40 mg/L;質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%除蟲菊素水乳劑的質(zhì)量濃度梯度為0.23、0.45、0.90、1.80、3.60 mg/L;質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.8%阿維菌素乳油的質(zhì)量濃度梯度為0.90、1.80、3.60、7.20、14.40 mg/L;質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑的質(zhì)量濃度梯度為60.00、120.00、240.00、480.00、960.00 mg/L,質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡蟲啉可濕性粉劑的質(zhì)量濃度梯度為6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 mg/L。并設(shè)蒸餾水處理為對(duì)照,每個(gè)處理重復(fù)4次。將2 cm寬雙面膠,剪截4 cm貼于載玻片的一端,揭去膠帶上的紙片,用毛筆挑選大小一致的健康菊小長(zhǎng)管蚜成蟲,將其背部粘在雙面膠上,每片5行,每行8頭,共40頭。將帶蟲體的玻片一端浸入藥液中輕搖5 s后取出,用吸水紙吸去周圍多余藥液,置于墊有濕海綿和濾紙的培養(yǎng)皿(直徑9 cm)中,用紗布包裹后放在溫度(25±1)℃,相對(duì)濕度75%,光周期為光照16 h、避光8 h的人工氣候箱內(nèi)。在24 h和48 h后,用顯微鏡觀察菊小長(zhǎng)管蚜的死亡情況,判定標(biāo)準(zhǔn)為用毛筆輕輕撥動(dòng)蟲體,足和觸角不動(dòng)計(jì)為死亡。觀察記錄死蟲數(shù)和活蟲數(shù),計(jì)算死亡率、校正死亡率。
死亡率=(死亡蟲數(shù)/處理總蟲數(shù))×100%;
校正死亡率=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(100-對(duì)照組死亡率)×100%。
選擇藥劑氯蟲苯甲酰胺與吡蟲啉,采用交互測(cè)定法進(jìn)行篩選復(fù)配比例[12],分別配制兩單劑的LC50藥液,按V(氯蟲苯甲酰胺)∶V(吡蟲啉)為10∶0、9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7、2∶8、1∶9和0∶10的比例進(jìn)行復(fù)配,并設(shè)置空白對(duì)照。測(cè)定施藥后24 h對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的毒力,觀察記錄每組死蟲數(shù)和活蟲數(shù),計(jì)算各組合的毒效比。
預(yù)期死亡率=(A藥劑致死中濃度(LC50)實(shí)測(cè)校正死亡率×A藥劑質(zhì)量分?jǐn)?shù))+(B藥劑致死中濃度(LC50)實(shí)測(cè)校正死亡率×B藥劑質(zhì)量分?jǐn)?shù));
毒效比=校正死亡率/預(yù)期死亡率;
有效成分比=(A藥劑致死中濃度(LC50)×VA):(B藥劑致死中濃度(LC50)×VB)。
毒效比小于0.75,表明對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜具有拮抗作用;毒效比大于1.25,則為增效作用;毒效比為0.75~1.25,則表示為相加作用。
選擇長(zhǎng)勢(shì)相同,生長(zhǎng)狀態(tài)良好的盆栽菊花苗,每株接30~40頭左右的菊小長(zhǎng)管蚜,在溫度25 ℃左右,濕度70%~80%的條件下進(jìn)行培養(yǎng)繁殖,待種群穩(wěn)定后,觀察記錄蟲口基數(shù)。根據(jù)室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果,將質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油、質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%除蟲菊素水乳劑分別設(shè)置3個(gè)質(zhì)量濃度(1、3、9 mg/L);最佳配比藥劑、質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑和質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡蟲啉可濕性粉劑分別設(shè)置3個(gè)質(zhì)量濃度(20、60、180 mg/L),并以清水作為對(duì)照(CK),用手提噴壺均勻噴灑在含有菊小長(zhǎng)管蚜的盆栽菊花苗上。每個(gè)處理設(shè)4次重復(fù),每個(gè)重復(fù)選取10株菊花苗進(jìn)行標(biāo)記,在施藥前和施藥后1、3、7、14 d調(diào)查記錄蟲口數(shù)量,計(jì)算蟲口退減率和防治效果。
蟲口減退率=[(施藥前蟲口數(shù)-施藥后蟲口數(shù))/施藥前蟲口數(shù)]×100%;
防治效果=[(處理區(qū)蟲口減退率-對(duì)照區(qū)蟲口減退率)/(1-對(duì)照區(qū)蟲口減退率)]×100%。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)運(yùn)用Excel 2016進(jìn)行整理,采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析。
由表1可知,6種藥劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜24、48 h的毒力測(cè)定結(jié)果,在6種藥劑中,菊小長(zhǎng)管蚜對(duì)印楝素乳油和除蟲菊素水乳劑的敏感性較高。24 h毒力測(cè)定,各藥劑中以質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的毒力最高,LC50為0.634 mg/L;質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的毒力最低,LC50為1 143.776 mg/L。6種藥劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜24 h的毒力從高到低依次為:質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.5%除蟲菊素水乳劑、質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.8%阿維菌素乳油、質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.6%苦參堿水劑、質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡蟲啉可濕性粉劑、質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑。6種藥劑48 h的毒力測(cè)定,依然是質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的毒力最高,LC50為0.266 mg/L;質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的毒力最低,LC50為130.887 mg/L。6種藥劑的毒力測(cè)定結(jié)果較24 h均有不同程度的提高,48 h后苦參堿對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的毒力超過(guò)了阿維菌素。對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜48 h的毒力從高到低依次為:質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油、質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%除蟲菊素水乳劑、質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.6%苦參堿水劑、質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.8%阿維菌素乳油、質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡蟲啉可濕性粉劑、質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑。
表1 不同藥劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜24 h、48 h的毒力
由表2可知,V(氯蟲苯甲酰胺)∶V(吡蟲啉)為9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7時(shí),毒效比分別為1.68、1.59、1.70、1.62、1.58、1.57、1.35,毒效比大于1.25,表示具有增效作用。其中,V(氯蟲苯甲酰胺)∶V(吡蟲啉)為7∶3的配比組合,即有效成分比為44.07∶1時(shí),毒效比為1.70,增效作用最大,為氯蟲苯甲酰胺與吡蟲啉最佳復(fù)配比例,可用于盆栽防治試驗(yàn)。
表2 氯蟲苯甲酰胺與吡蟲啉混配對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的毒效比
由表3可知,5種藥劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜均有不同程度的防治效果,隨著藥劑質(zhì)量濃度的增加防治效果逐漸增高。質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡蟲啉可濕性粉劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的防治效果最高,且持效性最好,3個(gè)劑量濃度藥后14 d的防治效果為98.09%~99.78%;復(fù)配藥劑的最高劑量濃度在藥后3 d的防治效果為93.11%,藥后7 d的防治效果為97.68%,藥后14 d的防治效果為99.00%,在同劑量濃度下,與質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡蟲啉可濕性粉劑沒有顯著差異,但其余2個(gè)劑量濃度在藥后14 d的防治效果有所下降。質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%除蟲菊素水乳劑和質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油防治效果和速效性低于復(fù)配藥劑和吡蟲啉;質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%除蟲菊素水乳劑和質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油,最高劑量濃度在藥后7 d防治效果分別達(dá)到94.26%和86.95%,藥后14 d的防治效果下降為89.42%和81.38%;質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑的防治效果最低,藥后14 d的防治效果為51.73%~59.89%。
表3 不同藥劑處理對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的防治效果
通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定試驗(yàn),6種殺蟲劑劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜具有不同程度的毒殺效果,其中質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油和質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%除蟲菊素水乳劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的毒力較高,而質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡蟲啉可濕性粉劑和質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑的毒力較低;盆栽防治試驗(yàn)結(jié)果,質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡蟲啉可濕性粉劑對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的防治效果更高并且藥效期更長(zhǎng)。室內(nèi)毒力測(cè)定與防治的結(jié)果不一致,說(shuō)明玻片浸漬法的室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果主要反映藥劑的觸殺作用,而吡蟲啉內(nèi)吸性的作用在測(cè)定中不能體現(xiàn)。在防治試驗(yàn)中,印楝素和除蟲菊素因觸殺作用,藥后7 d達(dá)到防治效果最高值,藥后14 d后防治效果有所下降;而吡蟲啉觸殺和內(nèi)吸作用在防治試驗(yàn)中都得到了體現(xiàn),藥后14 d后防治效果不降還有所增加。
陸玉榮等[13]和陳金翠等[8]通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定發(fā)現(xiàn),印楝素和吡蟲啉對(duì)瓜蚜48 h的LC50值分別為19.36、453.65 mg/L,顯著高于與本試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果(印楝素和吡蟲啉對(duì)瓜蚜48 h的LC50值分別為0.266、5.185 mg/L)。表明印楝素和吡蟲啉對(duì)不同蚜蟲的毒力有所不同;試驗(yàn)用菊小長(zhǎng)管蚜種群來(lái)自于教學(xué)用菊花,所在溫室用藥少,抗藥性低。
長(zhǎng)期的單一使用吡蟲啉很容易使蚜蟲對(duì)其產(chǎn)生抗藥性,研究表明大部分地區(qū)的麥長(zhǎng)管蚜(Sitobionavenae)對(duì)吡蟲啉產(chǎn)生了不同程度的抗性[14-15]。對(duì)吡蟲啉復(fù)配是延緩害蟲產(chǎn)生抗藥性的手段之一,常靜等[11]研究發(fā)現(xiàn)吡蟲啉與氰戊菊酯體積比以2∶3進(jìn)行復(fù)配時(shí),對(duì)馬鈴薯桃蚜增效作用顯著,延緩桃蚜對(duì)藥劑的抗藥性。本研究首次將氯蟲苯甲酰胺與吡蟲啉進(jìn)行復(fù)配,篩選出氯蟲苯甲酰胺與吡蟲啉有效成分質(zhì)量比為44.07∶1時(shí),對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜增效作用最大,即復(fù)配后氯蟲苯甲酰胺的占比較大,對(duì)哺乳動(dòng)物的毒性會(huì)明顯降低。防治試驗(yàn)中,復(fù)配的防治效果顯著高于氯蟲苯甲酰胺單劑的防治效果,并且達(dá)到吡蟲啉單劑的防治效果和持效期。
質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%印楝素乳油和質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%除蟲菊素水乳劑在質(zhì)量濃度9 mg/L時(shí),藥后7 d對(duì)菊小長(zhǎng)管蚜的防治效果最好,但在藥后14 d,防治效果和減退率均有所下降。因此,生產(chǎn)實(shí)踐使用時(shí),可在7 d后進(jìn)行二次噴施。在菊小長(zhǎng)管蚜大量爆發(fā)時(shí),推薦氯蟲苯甲酰胺與吡蟲啉復(fù)配藥劑與除蟲菊素或印楝素輪換使用,達(dá)到快速殺蟲,控制害蟲蔓延的效果,減緩害蟲產(chǎn)生抗藥性,減少化學(xué)農(nóng)藥的施用量,延長(zhǎng)農(nóng)藥的使用壽命。