李珊珊 黃永芳 董斌 李榮喜 趙平麗 張暉

摘要 ［目的］篩選黎蒴扦插繁殖最優(yōu)組合。［方法］以生長(zhǎng)健壯的2年生黎蒴苗為試材，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分析不同激素、不同基質(zhì)組分對(duì)扦插成活率、愈傷組織生長(zhǎng)、芽生長(zhǎng)率的影響，并篩選出最優(yōu)組合。［結(jié)果］砂壤土利于插穗苗的扦插生長(zhǎng)，插穗成活率為86.30％，2種激素處理對(duì)插穗苗扦插生長(zhǎng)差異不大，NAA處理成活率為72.59％，IBA處理成活率為65.19％；砂壤土對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)的影響最大，插穗愈傷組織生長(zhǎng)率為65.56％，2種激素處理對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)的影響無(wú)明顯差異，NAA處理為50.74％，IBA處理為48.89％；黃心土為基質(zhì)的芽生長(zhǎng)率最高，為28.89％，2種激素處理對(duì)芽生長(zhǎng)率無(wú)明顯差異，NAA處理為25.56％，IBA處理為21.11％。［結(jié)論］扦插基質(zhì)最優(yōu)處理為砂壤土與CK的組合。

關(guān)鍵詞 黎蒴；扦插繁殖；成活率；愈傷組織；NAA；IBA

中圖分類號(hào) S723.1? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2023）10-0085-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.10.018

Abstract ［Objective］To select the optimal combination of cutting propagation of local tree Castanopsis fissa. ［Method］The effects of different hormones and substrate components on the survival rate， callus growth and bud growth rate of cuttings were analyzed by orthogonal experiment. ［Result］The results showed that sand loam was the best for cutting growth of cuttings， and the cuttings survival rate was 86.30%. There was little difference between the two hormone treatments on cutting growth of cuttings， the survival rate of NAA treatment was 72.59%， IBA treatment was 65.19%.? The callus growth rate of cuttings was 65.56% in sandy loam soil. The callus growth rate of cuttings was 65.56% in sandy loam soil. The callus growth rate of cuttings was 50.74% in NAA treatment and 48.89% in IBA treatment.? The shoot growth rate was the highest in yellow heart soil， which was 28.89%. There was no significant difference in the shoot growth rate between NAA and IBA treatments， which was 25.56% and 21.11% respectively. ［Conclusion］The optimal cutting matrix combination was sandy loam and CK.

Key words Castanopsis fissa;Cutting propagation;The survival rate;Callus;NAA;IBA

黎蒴［Castanopsis fissa（Champ.） Rehd. et Wils］為殼斗科常綠喬木，又稱大葉錐、閩粵栲等。黎蒴主要分布于廣東、廣西以及周圍省份的丘陵山地，是一種種源豐富的優(yōu)良鄉(xiāng)土樹種［1-2］。由于其生長(zhǎng)快速且材質(zhì)優(yōu)良的優(yōu)點(diǎn)，常被用作造紙及家具制造。目前，關(guān)于黎蒴的研究主要集中在富營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的添加對(duì)于黎蒴葉片或根系土壤的影響或是優(yōu)良家系的選取等方面［3-6］，對(duì)于利用激素對(duì)黎蒴扦插繁殖的預(yù)處理研究較少。

黎蒴的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值均較高，研究適合的快速繁殖方法對(duì)于促進(jìn)其開發(fā)利用是非常有必要的。外源激素對(duì)插條生根有一定的促進(jìn)作用。扦插繁殖也是一種簡(jiǎn)易的育苗操作，利于苗木批量化生產(chǎn)的進(jìn)行，在苗木培養(yǎng)中被廣泛利用。扦插基質(zhì)也是能否成功扦插的關(guān)鍵因素。筆者通過(guò)利用不同種類激素以及基質(zhì)種類對(duì)黎蒴插穗進(jìn)行預(yù)處理，觀察其生長(zhǎng)過(guò)程，研究其成活率、愈傷組織生長(zhǎng)率、芽生長(zhǎng)率等生長(zhǎng)指標(biāo)，以期篩選出一套較優(yōu)的扦插方案，為黎蒴的扦插繁殖提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院苗圃（113°28′E，23°10′N），屬于亞熱帶季風(fēng)氣候，溫暖多雨，夏長(zhǎng)冬短。年均溫、最冷月和最熱月均溫分別為21.8、13.3和28.1 ℃。年降雨量1 714.4 mm，4—9月降雨量占年降雨量的82％，年平均相對(duì)濕度79％。

1.2 試驗(yàn)材料

1.2.1 工具和材料。

枝剪、剪刀、河沙、砂壤土、黃心土、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）等。

1.2.2 插穗來(lái)源。

插穗來(lái)源于廣東增城林場(chǎng)的2年生藜蒴苗，苗木高 1.0～1.3 m，地徑2.5～3.0 m。采穗時(shí)選用外圍枝條。外圍枝條生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲害、葉色正常、莖干粗細(xì)較為一致。

1.2.3 插穗處理。

選取黎蒴的半木質(zhì)化枝條，剪成10 cm左右長(zhǎng)，每枝留芽2～4個(gè)，頂端可留葉1～2片，且葉片只保留20%或者不留葉片，稍尖幼嫩部分剪去；插條的下端，在緊靠節(jié)下修剪為約45°的斜面。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)考慮基質(zhì)、激素種類2個(gè)因素。基質(zhì)分為河沙（A1）、黃心土與河沙（3∶1）的混合土（砂壤土）（A2）、黃心土（A3）3種，在每種基質(zhì)上扦插3種不同處理的插穗［3］。采用NAA、IBA 2種激素對(duì)穗條進(jìn)行處理，濃度設(shè)置為1 500 mg/L，清水處理為對(duì)照組（CK）。穗條在進(jìn)行扦插試驗(yàn)前均使用生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行浸泡，時(shí)間為5 s。采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，每處理30株穗條，重復(fù)3次。插床為長(zhǎng)方形水泥池，床高40 cm，底部設(shè)有滲水孔。床內(nèi)分2層，底層由碎石與塘泥鋪成，上層為試驗(yàn)基質(zhì)，厚約30 cm。試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

1.4 試驗(yàn)方法

插穗處理后，按株行距3 cm左右，用扎孔法斜插插穗的2/3于已消毒的基質(zhì)中，淋透水，用標(biāo)簽標(biāo)記。用遮陰網(wǎng)距扦插苗30 cm高處進(jìn)行遮蓋，遮陰網(wǎng)應(yīng)蓋住整個(gè)苗床，以保證苗床內(nèi)濕度、溫度相對(duì)穩(wěn)定［4］。

1.5 扦插時(shí)間 于2021年10月下旬進(jìn)行扦插，60 d后進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

1.6 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.6.1 成活率測(cè)定。

觀察根部，如根部長(zhǎng)根長(zhǎng)出愈傷組織或者根部的切口已經(jīng)愈合，根部保持活力，根莖呈綠色，為成活的表現(xiàn)；如根部變黑，根部切口無(wú)愈合組織，根莖干癟或者霉?fàn)€，為枯死現(xiàn)象。通過(guò)觀察黎蒴插穗苗的根部情況獲得成活的株數(shù)，做好記錄并計(jì)算成活率。成活率為黎蒴插穗苗成活的株數(shù)占總株數(shù)的比例。

1.6.2 愈傷組織生長(zhǎng)率測(cè)定。

觀察黎蒴插穗苗的根部切口及傷口是否長(zhǎng)出愈傷組織，做好記錄，并計(jì)算愈傷組織生長(zhǎng)率。愈傷組織生長(zhǎng)率為黎蒴插穗苗長(zhǎng)出愈傷組織的株數(shù)占總株數(shù)的比例。

1.6.3 芽生長(zhǎng)率測(cè)定。

觀察黎蒴插穗苗是否長(zhǎng)出新芽，做好記錄并計(jì)算芽生長(zhǎng)率。芽生長(zhǎng)率為黎蒴插穗苗長(zhǎng)芽的株數(shù)占總株數(shù)的比例。

1.7 分析方法及數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)整理和計(jì)算采用 Excel 2021軟件進(jìn)行，采用 SPSS 26.0對(duì)不同因素對(duì)扦插生根的影響相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，采用Sigmaplot 14.0繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同基質(zhì)對(duì)黎蒴扦插繁殖的影響

2.1.1 對(duì)扦插成活率的影響。從圖1可以看出，不同基質(zhì)處理間成活率差異較大。方差分析表明，A2、A3處理的成活率均顯著高于A1（P<0.05），A2與A3處理間差異不顯著（P>0.05）。A1處理成活率僅為43.70％，A2處理最高，達(dá)86.30％，A3處理為81.85％。基質(zhì)的影響與根系作用息息相關(guān)，吸水能力較強(qiáng)的基質(zhì)能夠吸收多余水分，減少積水對(duì)植物扦插生根的影響。黃心土與砂壤土的孔隙可保存多余水分，因此A2、A3處理的成活率較高。其次，該類孔隙較大的基質(zhì)還可預(yù)防土壤板結(jié)，使土壤水分和氣體保持正常交換。同時(shí)，其孔隙較大的特點(diǎn)還有助于植物根系的生長(zhǎng)，避免植株生長(zhǎng)初期幼苗倒伏，具備良好的固定作用［5］。

2.1.2 對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)的影響。從圖2可以看出，不同處理的愈傷組織生長(zhǎng)率差異較大。A1處理插穗愈傷組織生長(zhǎng)率為27.78％，低于A2、A3處理。而A2處理插穗愈傷組織生長(zhǎng)率為65.56％，A3處理為61.85％。方差分析表明，A2和A3處理間差異不顯著（P>0.05），A1處理與A2、A3處理間差異顯著（P<0.05）。結(jié)果表明，用砂壤土基質(zhì)進(jìn)行扦插獲得的平均愈傷組織生長(zhǎng)率最高，其次是黃心土。

2.1.3 對(duì)芽生長(zhǎng)率的影響。

由圖3可以看出，不同處理芽生長(zhǎng)率差異較大。A1處理的芽生長(zhǎng)率僅為14.81％，而A2處理為27.69％，A3處理為28.89％。3種基質(zhì)中，黃心土的芽生長(zhǎng)率最高，而砂壤土的變異程度最大。結(jié)果表明，黃心土基質(zhì)最利于芽生長(zhǎng)率，其次是砂壤土。

2.2 不同激素處理對(duì)黎蒴扦插繁殖的影響

2.2.1 對(duì)扦插成活率的影響。從圖4可以看出，三者的成活率均在60%以上。其中，CK的平均成活率達(dá)74.07％，為三者中最高，而NAA處理的插穗成活率為72.59％，IBA處理的插穗成活率為65.19％。方差分析表明，使用激素浸泡處理后的插穗成活率均與CK差異不顯著（P>0.05），不同激素處理間差異不顯著（P>0.05），CK與2種激素處理均能提高黎蒴扦插成活率。CK和NAA處理的插穗苗成活情況優(yōu)于IBA處理。

2.2.2 對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)的影響。從圖5可以看出，不同激素處理的愈傷組織生長(zhǎng)率差異不大，CK為55.56％，NAA處理為50.74％，IBA處理為48.89％。方差分析結(jié)果顯示，不同激素處理間的黎蒴愈傷組織生長(zhǎng)率差異不顯著（P>0.05）。

2.2.3 對(duì)芽生長(zhǎng)率的影響。從圖6可以看出，不同處理芽生長(zhǎng)率差異不大。 CK為25.93％，NAA處理為25.56％，IBA處理為21.11％。方差分析結(jié)果顯示，不同激素處理間的黎蒴芽生長(zhǎng)率差異不顯著（P>0.05）。

3 討論與結(jié)論

植物扦插繁殖是最主要的植物無(wú)性繁殖手段之一，也是許多結(jié)實(shí)率低、種子繁殖困難的樹種進(jìn)行人工繁殖的首選方法［7］。植物扦插繁殖成功的因素有很多，根系的良好生長(zhǎng)則是關(guān)鍵。植物扦插生根是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，除了與自身的遺傳因素有關(guān)之外，還與扦插繁殖所使用的基質(zhì)、激素種類及濃度梯度和樹齡等因素有密切聯(lián)系［8］。

在該試驗(yàn)中的3種基質(zhì)中，不同基質(zhì)對(duì)黎蒴扦插的影響有差異。砂壤土最適合黎蒴插穗苗的扦插生長(zhǎng)，黃心土其次，且二者相差不大。這主要是由于二者有較好的保水和保溫性能，而砂壤土有較好的透氣性，更能促進(jìn)插穗生根和新根生長(zhǎng)。與兩者相比較，河沙的扦插結(jié)果最差，這是由于河沙雖然通氣性較好，有利于生根，但缺乏肥力，保水性較差，相反，砂壤土和黃心土有一定的通氣性，且有一定的肥力。

基質(zhì)配比也是一種互補(bǔ)基質(zhì)不足，凸顯基質(zhì)優(yōu)點(diǎn)，提高扦插效果的方法。其中，有2種基質(zhì)的配比，如2/3河沙+1/3紅心土，珍珠巖∶腐殖土＝1∶2［9］；也有多種的基質(zhì)進(jìn)行配比，如腐殖質(zhì)∶珍珠巖∶蛭石＝7∶3∶1充分?jǐn)嚢杈鶆蚨傻幕旌贤粒问邸谜渲閹r∶草炭＝2∶1∶1［10-11］。試驗(yàn)證明，通過(guò)基質(zhì)配比而獲得的新基質(zhì)比原來(lái)的單質(zhì)基質(zhì)對(duì)扦插有更好的效果。而且，多種基質(zhì)的配比獲得的效果比2種基質(zhì)的配比更明顯。

該試驗(yàn)中2種激素處理得出的結(jié)果差異不大。其中，以清水作為對(duì)照最適合黎蒴插穗苗的扦插生長(zhǎng)，優(yōu)于其他2種激素處理。該試驗(yàn)2種激素的濃度均為1 500 mg/L，屬于高濃度。在處理時(shí)僅將穗條浸泡5 s，以防止高濃度的生長(zhǎng)素引起抑制作用。試驗(yàn)結(jié)果表明，高濃度的生長(zhǎng)素對(duì)穗條生長(zhǎng)有抑制作用。生根促進(jìn)劑的作用與濃度密切相關(guān)，濃度過(guò)低時(shí)作用效果有限，濃度過(guò)高時(shí)促進(jìn)作用就會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)橐种谱饔?，破壞插穗?nèi)的生理過(guò)程，從而抑制插穗生根。該試驗(yàn)的激素濃度是參考有關(guān)學(xué)者［12-15］提到低濃度生長(zhǎng)素對(duì)黎蒴扦插沒有顯著影響，為了分析高濃度激素對(duì)黎蒴扦插的影響而采用的。另外，還有學(xué)者［16-18］提出生根促進(jìn)劑對(duì)黎蒴生根率的提高并沒有顯著影響。因此，可在后續(xù)試驗(yàn)中探究黎蒴扦插的最適濃度。

激素和扦插基質(zhì)是影響扦插生根的重要因素，直接影響著扦插效果［17］。

插穗成活率方面，3種基質(zhì)中砂壤土和黃心土的成活率較高，而激素處理中CK成活率最高，且各處理間差異不大。其中，砂壤土和CK的標(biāo)準(zhǔn)差略大于其他水平效應(yīng)值，分別為5.96、7.76，兩者的水平處理的成活率為92.22％，明顯高于其他處理，變異程度大，為提高插穗成活率的最佳組合。

插穗愈傷組織生長(zhǎng)率方面，3種基質(zhì)中砂壤土和黃心土的愈傷組織生長(zhǎng)率較高；CK的愈傷組織生長(zhǎng)率最高，且各處理間差異不大。其中，黃心土和CK的標(biāo)準(zhǔn)差明顯大于其他水平效應(yīng)值，分別為7.07、7.81，兩者的水平處理的愈傷組織生長(zhǎng)率為68.69％，明顯高于其他處理，變異程度大，為提高插穗愈傷組織生長(zhǎng)率的最佳組合。雖然長(zhǎng)出愈傷組織與長(zhǎng)根沒有必然的聯(lián)系，但是可以對(duì)生根率提供參考，也可以為該試驗(yàn)的進(jìn)一步探討打下基礎(chǔ)。

插穗芽生長(zhǎng)率方面，3種基質(zhì)中砂壤土和黃心土的芽生長(zhǎng)率較高，而3種激素中CK處理和NAA處理的芽生長(zhǎng)率較高，且各處理間差異不大。其中，砂壤土和CK的標(biāo)準(zhǔn)差稍大于其他水平效應(yīng)值，分別為4.63、1.85，兩者水平處理的芽生長(zhǎng)率為28.89％，變異程度較其他組合稍大，為提高插穗芽生長(zhǎng)率的較佳組合。

穗條類型是影響植物扦插成活的關(guān)鍵因素，不同穗條類型具備的營(yíng)養(yǎng)成分、水分和萌發(fā)生根的潛力等特質(zhì)均不同，開展不同穗條類型對(duì)植物扦插影響的研究可以為植物扦插繁殖材料的篩選提供更多的理論基礎(chǔ)［19-21］。該試驗(yàn)的插穗主要采自母株莖部的伸長(zhǎng)區(qū)和成熟區(qū)，插穗為半木質(zhì)化。插穗離開母體后，插穗的頂端部分成為新植株的分生區(qū)，長(zhǎng)出新芽。插穗所長(zhǎng)出的新芽皆為側(cè)芽，而且均臨近分生區(qū)。

該試驗(yàn)結(jié)果表明，砂壤土與CK為最佳組合。該試驗(yàn)僅考慮了激素種類及扦插基質(zhì)對(duì)黎蒴扦插成活的影響，激素對(duì)黎蒴扦插成活率的影響還需要不同濃度梯度激素試驗(yàn)的結(jié)果作為佐證。因此，下一步將繼續(xù)研究激素不同濃度梯度以及基質(zhì)配比對(duì)黎蒴扦插、生根成活率的影響，為黎蒴扦插繁殖提供更多理論依據(jù)，使技術(shù)體系得到進(jìn)一步完善。

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