于 蕾，趙目聰，董 琳，黃茲寶，姬 敏，曹明玉，劉辰鵬*，張小坡, 3*

? 化學(xué)成分 ?

盤龍參化學(xué)成分研究

于 蕾1，趙目聰1，董 琳2，黃茲寶2，姬 敏2，曹明玉2，劉辰鵬2*，張小坡2, 3*

1. 哈爾濱商業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150076 2. 海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，海南 ?？?571199 3. 海南省藥物研究與開發(fā)科技園，海南 海口 571157

研究盤龍參根的化學(xué)成分。采用95%乙醇回流提取，石油醚萃取獲得萃取物，運用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜和半制備高效液相色譜等方法進(jìn)行分離制備，采用波譜學(xué)方法鑒定化合物結(jié)構(gòu)。采用計算電子圓二色譜法（ECD）判定新化合物的絕對構(gòu)型。體外考察化合物對棕櫚酸誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷后的細(xì)胞活力影響。從盤龍參根乙醇提取物石油醚萃取部位中分離得到11個化合物，分別鑒定為()-2-(2,4-二甲氧基-8-{4-羥基-5,6-二甲基-四氫呋喃[7,8]}-9,10-二氫菲)（1）、紅門蘭酚（2）、spiranthesphenanthrene A（3）、2-methoxy-4,7-dihydroxy-6-isopentenyl-9,10- dihydrophenanthrene（4）、3,5-二羥基-4,7-二甲氧基黃酮（5）、櫻花素（6）、5-羥基-3,7,3,4-四甲氧基黃酮（7）、5-hydroxy- 4-[(2-isopentenyl)oxy]-3,7,3-trimeoxyflavone（8）、hydroxydihydro-bovolide（9）、原兒茶醛（10）、β-谷甾醇（11）。活性測試結(jié)果顯示化合物1（0.39～25 μmol/L）或11（12.5～50 μmol/L）與棕櫚酸共同處理后的各組細(xì)胞增殖活力均明顯增強。化合物1為新的二氫菲類化合物，命名為盤龍參醇A；化合物6～7、9～10為首次從綬草屬中分離得到；化合物1和11能夠拮抗棕櫚酸對MIN6細(xì)胞的損傷作用，促進(jìn)細(xì)胞的生長和增殖。

盤龍參；二氫菲類；MIN6細(xì)胞活力；盤龍參醇A；櫻花素；5-羥基-3,7,3,4-四甲氧基黃酮

盤龍參為蘭科（Orchidaceae）綬草屬Rich.植物盤龍參(Pers.) Ames，別名豬遼參、龍抱柱、龍纏柱、豬牙參等。盤龍參以根或全草入藥，具有滋陰益氣、涼血解毒、潤肺止咳的功效[1]。盤龍參廣泛分布于全國各地，主產(chǎn)于海南、貴州、云南、四川等地，常見于海拔200～3400 m的山坡林下、灌從下、草地或河灘沼澤草甸中[2-3]。盤龍參最早記載于《詩經(jīng)·陳風(fēng)》，作為藥材最早記載于《滇南本草》稱其：味甘，性溫。入肺、肝、腎三經(jīng)?！短鞂毐静荨酚涊d盤龍參“添精壯陽、治頭暈、腰痛酸軟”?！逗纤幬镏尽酚涊d盤龍參“止虛熱口渴，肺瘤咳血”[4]。在我國藏醫(yī)、蒙醫(yī)中也有使用[5]。盤龍參化學(xué)成分類型豐富，包括二氫菲類、黃酮類、苯丙素類等[6-9]。其中，二氫菲類成分是其特征性成分，目前，已分離得到20余個二氫菲類化合物。此類化合物具有多種生物活性，如抗糖尿病、抗氧化、抗腫瘤等[10-16]。本研究采用乙醇回流提取盤龍參，富集石油醚萃取部位中的化學(xué)成分，進(jìn)一步運用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜和半制備高效液相色譜等多種色譜方法從中分離得到11個化合物，利用核磁共振波譜和高分辨質(zhì)譜等技術(shù)，分別鑒定為()-2-(2,4-二甲氧基-8-{4′-羥基- 5′,6′-二甲基-四氫呋喃[7,8]}-9,10-二氫菲) [()-2′- (2,4-dimethoxy-8-{4′-hydroxy-5′,6′-dimethyl-tetra- hydrofuran [7,8]}-9,10-dihydrophenanthrene)，1]、紅門蘭酚（orchinol，2）、spiranthesphenanthrene A（3）、2-methoxy-4,7-dihydroxy-6-isopentenyl-9,10-dihydro phenanthrene（4）、3,5-二羥基-4,7-二甲氧基黃酮（3,5-dihydroxy-4,7-dimethoxyflavone，5）、櫻花素（sakuranetin，6）、5-羥基-3,7,3,4-四甲氧基黃酮（5- hydroxy-3,7,3,4-tetramethoxyflavone，7）、5-hydroxy- 4-[(2-isopentenyl)oxy]-3,7,3-trimeoxyflavone（8）、hydroxydihydro-bovolide（9）、原兒茶醛（protocatechuic aldehyde，10）、β-谷甾醇（β-sitosterol，11），結(jié)構(gòu)見圖1。其中，化合物1為1個新的9,10-二氫菲類化合物，命名為盤龍參醇A；化合物6～7、9～10首次綬草屬分離得到。采用棕櫚酸誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷后，評價待測化合物對MIN6細(xì)胞增殖活力的影響，結(jié)果表明，化合物1和11可顯著增強MIN6細(xì)胞的活力，產(chǎn)生對MIN6細(xì)胞的保護(hù)作用。

圖1 化合物1～11的結(jié)構(gòu)

1 儀器與材料

SB-1100型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海愛朗儀器有限公司），BRUKERAV Ⅲ600型核磁共振儀（德國布魯克公司），四孔水浴鍋（江蘇中大儀器科技有限公司），ZF-20D暗箱式紫外分析儀（上海寶山顧村電光儀器廠），KQ5200DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），柱色譜硅膠（200～300目，青島海洋化工有限公司），SephadexLH-20（GE Healthcare），硅膠GF254預(yù)制板（青島海洋化工有限公司），半制備型高效液相色譜用島津液相色譜LC-16系統(tǒng)、配SPD-16檢測器和YMC柱（ODS，250 mm×2.5 mm，5 μm，日本島津公司），電子天平（杭州萬特衡器有限公司），精密天平（日本島津公司），賽默飛LTQ液質(zhì)離子阱質(zhì)譜儀液質(zhì)聯(lián)用儀（賽默飛公司），Model 680型酶標(biāo)儀（美國Bio-Rad公司），甲醇、正丁醇、二氯甲烷、醋酸乙酯、石油醚（分析純，佛山西隴化工有限公司），甲醇（色譜級）（天津康科德科技有限公司），RPMI Medium 1640培養(yǎng)基、胎牛血清、胰酶溶液、PBS均購自Gibco公司，CCK8（碧云天生物技術(shù)有限公司），棕櫚酸（海南泓科生物科技有限公司），小鼠胰島細(xì)胞MIN6（安徽微分基因科技有限公司）。

盤龍參產(chǎn)于貴州省畢節(jié)市赫章縣，于2021年8月采摘，經(jīng)海南醫(yī)學(xué)院曾念開教授鑒定為蘭科綬草屬植物盤龍參(Pers.) Ames的干燥根。植物標(biāo)本（SS202108）保存于海南醫(yī)學(xué)院天然藥物化學(xué)實驗室。

2 提取與分離

干燥的盤龍參藥材（20 kg）粉碎，經(jīng)95%乙醇回流提取，每次2 h，提取2次，過濾濃縮得總浸膏1 203.1 g。將總浸膏加水分散均勻后，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取3次，濃縮得石油醚部位（169.4 g）、醋酸乙酯部位（80.2 g）、正丁醇部位（168.3 g）。盤龍參石油醚萃取部位上硅膠柱進(jìn)行分離，選用石油醚-醋酸乙酯體系的流動相進(jìn)行洗脫，共得到14個組分A～N。D4組分通過重結(jié)晶得到化合物11（15.0 mg）。根據(jù)薄層及液相初步分析，選取E6，E9組分，分別用Sephadex LH-20柱色譜（甲醇）進(jìn)行分離，分別得到E6-1～E6-6；E9-1～E9-6組分。E6-6、E9-6、E9-3、E9-4組分經(jīng)HPLC（甲醇-水85∶15～75∶25），檢測波長（254、210 nm），體積流量2 mL/min，得到化合物2（3.0 mg）、3（5.0 mg）、4（3.5 mg）、5（2.8 mg）、8（3.2 mg）。F～G組分經(jīng)TLC檢識后合并，通過硅膠柱色譜（石油醚-醋酸乙酯100∶0～0∶100、甲醇）分離得到FG1～FG12。FG5流分經(jīng)TLC檢識合并得到FG5-11～FG5-16，通過HPLC（甲醇-水85∶15），檢測波長（254 nm，210 nm），體積流量2 mL/min，得到化合物1（2.7 mg）、6（3.5 mg）、7（3.4 mg）、9（1.0 mg）。I組分經(jīng)硅膠柱色譜（石油醚-醋酸乙酯100∶0～0∶100、甲醇）分離得到I1～I(xiàn)9。其中I5各流分經(jīng)TLC合并得到I5-6～I(xiàn)5-8，再將上述組分在酸性條件下通過薄層色譜（石油醚-二氯甲烷-醋酸乙酯7∶1∶1）制備得到化合物10（4.5 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

1H-1H COSY顯示H7.89 (H-5) 與H6.59 (H-6) 相關(guān)，H3.67 (H-2′) 與H2.88 (H-3′) 相關(guān)，H2.57 (H-9) 與H2.65 (H-10) 相關(guān), 說明存在3個結(jié)構(gòu)片段 (C-5-C-6, C-2′-C-3′, C-9-C-10)（圖2）。HMBC譜中顯示，H-3與C-1, C-2和C-4相關(guān)；2-OCH3，4-OCH3與C-2和C-4相關(guān)。因此，確定了2個甲氧基的連接位置；同時，2個甲基氫H1.30 (-CH3), 1.14 (-CH3) 與69.1 (C-2′), 76.5 (C-4′) 存在相關(guān)，確證結(jié)構(gòu)中的異戊烯基片段環(huán)合成為呋喃環(huán)，且環(huán)合位置在C-7和C-8。同時，H-3(H2.88, 2.06) 與C-7 (151.2)、C-8 (117.7) 和C-8a (137.3) 存在相關(guān)，證實了以上推測。通過實測和計算的ECD光譜（圖3）分析，推斷出化合物1的絕對構(gòu)型為。綜上，化合物1鑒定為()-2'-(2,4-二甲氧基-8- {4'-羥基-5',6'-二甲基-四氫呋喃[7,8]}-9,10-二氫菲)，經(jīng)檢索，該化合物為新化合物，命名為盤龍參醇A。1H-和13C-NMR數(shù)據(jù)見表1。

化合物2：黃色粉末狀固體，ESI-MS/: 279.1[M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 7.95 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5), 6.63 (1H, d,= 2.6 Hz, H-6), 6.61 (1H, dd,= 2.8, 8.5 Hz, H-8), 6.51 (1H, d,= 2.6 Hz, H-3), 6.48 (1H, d,= 2.6 Hz, H-1), 3.82 (3H, s, 4-OCH3), 3.78 (3H, s, 2-OCH3), 2.65 (2H, m, H-9), 2.60 (2H, m, H-10)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 158.6 (C-2), 157.6 (C-4), 155.8 (C-7), 140.3 (C-10a), 139.3 (C-8a), 129.1 (C-5), 123.9 (C-4b), 116.4 (C-4a), 114.7 (C-8), 113.2 (C-6), 105.7 (C-1), 98.0 (C-3), 56.0 (2-OCH3), 55.6 (4-OCH3), 30.6 (C-10), 29.9 (C-9)。以上核磁數(shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)基本一致[17]，故鑒定化合物2為紅門蘭酚。

圖2 化合物1的主要1H-1H COSY () 和HMBC ()相關(guān)

圖3 化合物1的實測和計算ECD譜圖

表1 化合物1的1H- 和13C-NMR數(shù)據(jù) (600/150 MHz, DMSO-d6)

化合物3：紅色粉末，ESI-MS/: 333.1 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 7.80 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.77 (1H, d,= 8.2 Hz, H-6), 6.48 (1H, d,= 2.4 Hz, H-1), 6.35 (1H, d,= 2.4 Hz, H-3), 3.78 (3H, s, 2-OCH3), 2.78 (2H, t,= 6.8 Hz, H-4′), 2.73 (2H, m, H-10), 2.66 (2H, m, H-9), 1.86 (2H, t,= 6.8 Hz, H-3′), 1.37 (6H, s, H-7′, 8′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 158.2 (C-2), 153.5 (C-4), 152.5 (C-7/6′), 140.7 (C-10a), 137.9 (C-8a), 124.5 (C-5), 124.3 (C-4b), 118.6 (C-8, 5′), 115.3 (C-4a), 106.1 (C-1), 100.6 (C-3), 73.2 (C-2′), 55.6 (2-OCH3), 33.0 (C-3′), 26.5 (C-7′, 8′), 24.5 (C-9), 20.6 (C-4′)。以上數(shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)基本一致[14]，故鑒定化合物3為spiranthesphenanthrene A。

化合物4：無色粉末，ESI-MS/: 333.1 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 7.80 (1H, s, H-5), 6.74 (1H, s, H-8), 6.45 (1H, d,= 2.1 Hz, H-1), 6.35 (1H, d,= 2.1 Hz, H-3), 5.35 (1H, t,= 7.2 Hz, H-2′), 5.16 (2H, brs, -OH), 3.80 (3H, s, -OCH3), 3.42 (2H, d,= 7.2 Hz, H-1′), 2.67 (4H, m, H-9, 10), 1.83 (3H, s, H-5′), 1.80 (3H, s, H-4′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 159.0 (C-2), 153.7 (C-4), 152.9 (C-7), 141.5 (C-10a), 138.6 (C-8a), 135.3 (C-3′), 127.8 (C-5), 125.7 (C-4b), 124.5 (C-6), 122.2 (C-2′), 116.0 (C-8), 115.4 (C-4a), 109.9 (C-3), 107.0 (C-1), 55.6 (-OCH3), 30.8 (C-10), 30.2 (C-1′), 30.0 (C-9), 25.8 (C-4′), 18.0 (C-5′)。以上數(shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)基本一致[13]，故鑒定化合物4為2-methoxy-4,7-dihydroxy-6-isopentenyl- 9,10-dihydrophenanthrene。

化合物5：黃色粉末，ESI-MS/: 337.1 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 11.74 (1H, s, 5-OH), 8.16 (2H, d,= 8.8 Hz, H-2′, 6′), 7.00 (2H, d,= 8.8 Hz, H-3′, 5′), 6.57 (1H, s, 3-OH), 6.44 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 6.38 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 3.85 (3H, s, 3-OCH3), 3.83 (3H, s, 4′-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 175.0 (C-4), 165.5 (C-7), 161.0 (C-4′), 160.5 (C-5) 156.6 (C-9), 145.8 (C-2), 135.5 (C-3), 129.5 (C-2′, 6′), 123.0 (C-1′), 114.4 (C-3′, 5′), 103.8 (C-10), 97.8 (C-6), 92.0 (C-8), 55.6 (7-OCH3), 55.2 (4′-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)基本一致[18]，故鑒定化合物5為3,5-二羥基-4,7-二甲氧基黃酮。

化合物6：白色粉末狀固體，ESI-MS/: 307.1 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 12.12 (1H, s, 5-OH), 9.88 (1H, s, 4-OH), 7.33 (2H, d,= 8.6 Hz, H-2, 6), 6.80 (2H, d,= 8.5 Hz, H-3, 5), 6.10 (1H, d,= 2.3 Hz, H-8), 6.08 (1H, d,= 2.3 Hz, H-6), 5.50 (1H, dd,= 13.0, 2.9 Hz, H-2), 3.79 (3H, m, 7-OCH3), 3.36～3.31 (1H, m, H-3α), 2.71 (1H, dd,= 17.2, 3.1 Hz, H-3β)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 197.5 (C-4), 167.9 (C-7), 163.7 (C-5), 163.4 (C-9), 158.3 (C-4), 129.1 (C-1), 128.9 (C-2, 6), 115.7 (C-3, 5), 103.1 (C-10), 95.1 (C-6), 94.2 (C-8), 79.1 (C-2), 56.4 (7-OCH3), 42.5 (C-3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[19]，故鑒定化合物6為櫻花素。

化合物7：黃色粉末，ESI-MS/: 381.1 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 12.64 (1H, s, 5-OH), 7.74 (1H, dd,= 8.5, 2.1 Hz, H-6), 7.67 (1H, d,= 2.2 Hz, H-2), 7.18 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5), 6.79 (1H, s, H-8), 6.38 (1H, s, H-6), 3.88, 3.87, 3.87, 3.83 (12H, s, 3, 7, 3, 4-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 178.5 (C-4), 165.7 (C-7), 161.7 (C-5), 156.9 (C-9), 155.9 (C-2), 151.8 (C-4′), 149.0 (C-3′), 138.8 (C-3), 122.6 (C-6′), 122.5 (C-1′), 112.1 (C-5′), 111.7 (C-2′), 105.9 (C-10), 98.4 (C-6), 92.8 (C-8), 60.3, 56.6, 56.1, 55.3 (3, 7, 3, 4-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)對照基本一致[20-21]，故鑒定化合物7為5-羥基-3,7,3,4-四甲氧基黃酮。

化合物8：黃色粉末狀固體，ESI-MS/: 435.1 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 12.6 (1H, s, 5-OH), 7.72 (1H, dd,= 8.6, 2.2 Hz, H-6′), 7.67 (1H, d,= 2.2 Hz, H-2′), 7.19 (1H, d,= 8.7 Hz, H-5′), 6.79 (1H, s, H-8), 6.38 (1H, s, H-6), 5.47 (1H, t,= 6.8 Hz, H-2′′), 4.65 (2H, d,= 6.9 Hz, H-1′′), 3.88 (3H, s, 4′-OCH3), 3.86 (3H, s, 7-OCH3), 3.83 (3H, s, 3-OCH3), 1.77 (3H, s, H-5′′), 1.74 (3H, s, H-4′′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 178.5 (C-4), 165.7 (C-7), 161.7 (C-5), 156.9 (C-9), 155.9 (C-2), 151.0 (C-4′), 149.2 (C-3′), 138.8 (C-3), 138.2 (C-3′′), 122.5 (C-1′), 122.4 (C-6′), 120.0 (C-2′′), 111.8 (C-2′), 113.2 (C-5′), 105.8 (C-10), 98.4 (C-6), 92.8 (C-8), 65.5 (C-1′′), 60.3 (3-OCH3), 56.5 (7-OCH3), 56.1 (4′-OCH3), 25.9 (C-5′′), 18.5 (C-4′′)。以上數(shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)基本一致[22]，故鑒定化合物8為5-hydroxy-4- [(2-isopentenyl)oxy]-3,7,3-trimeoxyflavone。

化合物9：淡黃色油狀物，ESI-MS/: 199.1 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 1.86 (3H, s, H-11), 1.81 (2H, m, H-6a, 6b), 1.71 (3H, s, H-12), 1.24 (6H, m, H-7a, 7b, H-8, 9), 0.85 (3H, t,= 6.8 Hz, H-10)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 173.0 (C-2), 158.4 (C-4), 125.0 (C-3), 107.6 (C-5), 35.8 (C-6), 31.5 (C-7), 22.7 (C-8), 22.4 (C-9), 14.3 (C-10), 11.1 (C-11), 8.6 (C-12)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[23]，故鑒定化合物9為hydroxydihydro-bovolide。

化合物10：棕紅色粉末，ESI-MS/: 161.0 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 9.60 (1H, s, H-1), 7.25～7.28 (2H, m, H-3, 8), 6.84 (1H, d,= 8.0 Hz, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 190.6 (C-1), 150.7 (C-6), 144.2 (C-4), 127.8 (C-2), 123.5 (C-9), 113.2 (C-3), 112.3 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[24]，故鑒定化合物10為原兒茶醛。

化合物11：白色針晶（甲醇），ESI-MS/: 437.4 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.34 (1H, m, H-6), 3.51 (1H, m, H-3), 0.99 (3H, s, H-19), 0.91 (3H, d,= 6.5 Hz, H-21), 0.84 (3H, d,= 7.6 Hz, H-29), 0.80 (3H, d,= 2.0 Hz, H-26), 0.78 (3H, s, H-27), 0.66 (3H, s, H-18)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 140.8 (C-5), 121.8 (C-6), 71.9 (C-3), 56.8 (C-14), 56.1 (C-17), 50.2 (C-9), 45.9 (C-8), 42.4 (C-4), 42.3 (C-13), 39.8 (C-12), 37.3 (C-1), 36.6 (C-10), 36.2 (C-20), 34.0 (C-24), 32.0 (C-7), 31.7 (C-2), 29.8 (C-28), 29.2 (C-25), 28.3 (C-16), 26.1 (C-22), 24.4 (C-15), 23.1 (C-23), 21.2 (C-11), 19.9 (C-26), 19.5 (C-27), 19.1 (C-19), 18.9 (C-21), 12.1 (C-29), 11.9 (C-18)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[25]，故鑒定化合物11為β-谷甾醇。

4 化合物對棕櫚酸誘導(dǎo)的MIN6細(xì)胞損傷的影響

待測化合物和棕櫚酸共同干預(yù)細(xì)胞24 h后，采用CCK8法[26]檢測MIN6細(xì)胞的增殖活力。結(jié)果表明，在棕櫚酸誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞損傷后，給予化合物干預(yù)，化合物1（0.39～25 μmol/L）或11（12.5～50 μmol/L）與棕櫚酸共同處理后的各組細(xì)胞增殖活力均明顯增強（＜0.05、0.01、0.001）；其余測試化合物與棕櫚酸組相比，各組細(xì)胞增殖活性沒有顯著差異（＞0.05）。說明化合物1和11能夠拮抗棕櫚酸對MIN6細(xì)胞的損傷作用，促進(jìn)細(xì)胞的生長和增殖，如圖4所示。

與對照組比較，***P＜0.001；與棕櫚酸組比較，#P＜0.05 ##P＜0.01 ###P＜0.001

5 結(jié)論

本研究運用多種色譜手段，從盤龍參干燥根的95%乙醇提取物石油醚萃取部位中分離得到11個化合物，其中化合物1為新化合物，化合物6～7、9～10首次從綬草屬中分離得到。所得的11個化合物中，4個屬于9,10-二氫菲類，4個屬于黃酮類。化合物1和11在一定濃度顯示出增強棕櫚酸誘導(dǎo)損傷后的MIN6細(xì)胞的活力，拮抗棕櫚酸對MIN6細(xì)胞的損傷作用，產(chǎn)生對MIN6細(xì)胞的保護(hù)作用。綜上，本研究進(jìn)一步豐富了盤龍參化學(xué)成分，也為盤龍參胰島保護(hù)研究提供了參考和依據(jù)。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Chemical constituents from

YU Lei1, ZHAO Mu-cong1, DONG Lin2, HUANG Zi-bao2, JI Min2, CAO Ming-yu2, LIU Chen-peng2, ZHANG Xiao-po2, 3

1. College of Pharmacy, Harbin University of Commerce, Harbin 150076, China 2. School of Pharmaceutical Science, Hainan Medical University, Haikou 571199, China 3. Hainan Pharmaceutical Research and Development Science Park, Haikou 571157, China

To study the chemical constituents from.The extracts were extracted by 95% ethanol reflux and petroleum ether. The extracts were separated and prepared by silica gel column chromatography, gel column chromatography and semi-preparative high performance liquid chromatography. The structures of the compounds were identified by spectroscopic methods. The absolute configuration of the new compounds was determined by computational electron circular dichroism (ECD). The effect of the compounds on the cell viability after palmitic acid (PA)-induced MIN6 cell injury was investigated.Eleven compounds were isolated fromand identified as ()-2'-(2,4-dimethoxy-8- {4'-hydroxy-5',6'-dimethyl-tetrahydrofuran [7,8]}-9,10-dihydrophenanthrene) (1), orchinol (2), spiranthesphenanthrene A (3), 2-methoxy-4,7-dihydroxy-6-isopentenyl-9,10-dihydrophenanthrene (4), 3,5-dihydroxy-4,7-dimethoxyflavone (5), sakuranetin (6), 5-hydroxy-3,7,3,4-tetramethoxy-flavone (7), 5-hydroxy-4-[(2-isopentenyl)oxy]-3,7,3-trimeoxyflavone (8), hydroxydihydro- bovolide (9), protocatechuic aldehyde (10), β-sitosterol (11). The results showed that the cell proliferation viability was significantly enhanced in each group after being treated by compound 1 (0.39—25 μmol/L) or 11 (12.5—50 μmol/L) with PA.Compound 1 was a new dihydrophenanthrene compound, named ()-2'-(2,4-dimethoxy-8-{4'-hydroxy-5',6'-dimethyl-tetrahydrofuran [7,8]}-9,10-dihydrophenanthrene), and compounds 6—7 and 9—10 were isolated fromfor the first time. Compounds 1 and 11 could antagonize the damage effect of PA on MIN6 cells and promote the growth and proliferation of MIN6 cells.

(Pers.) Ames; dihydrophenanthrene; MIN6 cell activity; spiranthol A; sakuranetin; 5-hydroxy-3,7,3′,4′- tetramethoxy-flavone

R284.1

A

0253 - 2670(2023)13 - 4089 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.13.001

2023-03-05

國家自然科學(xué)基金項目（82060778）；黑龍江省自然科學(xué)基金項目聯(lián)合引導(dǎo)項目（LH2020H070）；哈爾濱商業(yè)大學(xué)2021教師創(chuàng)新項目支持計劃（LH2020H070）

于 蕾，女，博士，副研究員，主要從事抗腫瘤民族藥研究。E-mail: yulei912@163.com

通信作者：劉辰鵬，男，碩士，主要從事南藥黎藥的研究。E-mail: 313638944@qq.com

張小坡，男，博士，教授，主要從事南藥黎藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機制研究。E-mail: z_xp1412@163.com

[責(zé)任編輯 王文倩]