孫曉慧，馬晶，柳杰

哈爾濱市第一醫(yī)院內(nèi)分泌科一病房，黑龍江哈爾濱 150001

痛風(fēng)病變?yōu)閱吴c尿酸鹽沉積造成的晶體相關(guān)性關(guān)節(jié)病變，典型誘因為大量食用嘌呤高食物[1]。痛風(fēng)病變在典型癥狀表現(xiàn)，一般是可見突然性關(guān)節(jié)疼痛不適，且關(guān)節(jié)部位見疼痛、水腫以及炎癥，而若是關(guān)節(jié)腔間尿酸鹽大量沉積則造成急性關(guān)節(jié)疼痛不適，正常生活及工作因此受到巨大影響，所以也強(qiáng)調(diào)及早做對應(yīng)性干預(yù)。常規(guī)抗痛風(fēng)藥是一類通過抑制尿酸的合成、抑制尿酸在腎小管的重吸收或促進(jìn)尿酸排泄而產(chǎn)生治療作用的藥物，且在臨床應(yīng)用中存在一定的藥物依賴性[2]。急性痛風(fēng)屬于中醫(yī)學(xué)之痹證；其病因病機(jī)為腎虛，濕邪阻滯，熱毒攻于手足；以濕熱蘊(yùn)結(jié)為主要證型；治療以清熱利濕為主，方多為四妙散加減；針灸治療以循經(jīng)取穴針刺和局部圍刺放血為主；中藥外敷多以大黃、黃柏等清熱瀉火解毒藥敷于關(guān)節(jié)痛處；中醫(yī)藥治療急性痛風(fēng)不良反應(yīng)少。因而中藥作為改善患者預(yù)后的方法，以痛風(fēng)舒片為代表的藥物，在臨床實踐中凸顯了明顯的優(yōu)勢[3]。本文為研究痛風(fēng)舒片治療痛風(fēng)的作用機(jī)制和療效，特選擇2022年1—6 月正常成年SD 雄性大鼠40 只進(jìn)行處理，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源

選取正常成年SD 雄性大鼠，清潔級，共40 只，體質(zhì)量180～265 g，平均（220±20）g。均給予普通的飼料喂養(yǎng)，自由飲水。本研究經(jīng)動物倫理委員會的批準(zhǔn)（倫理號：HJ28415365）。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑 痛風(fēng)舒片（國藥準(zhǔn)字Z20080410；規(guī)格：0.3 g×12 片×2 板）；雙氯芬酸鈉腸溶片（國藥準(zhǔn)字H11021640；規(guī)格：25 mg×30 片）；5-羥色胺（5-HT）、鉀離子（K+）、多巴胺（DA）、去甲腎上腺素標(biāo)準(zhǔn)品及尿酸鈉結(jié)晶均購自Sigma 公司。

1.2.2 尿酸溶液制備 194 mL 蒸餾時加6 mL NaOH（1 mol∕L），在煮沸后加入1 g 的尿酸，使用1 mol∕L HCL，調(diào)節(jié)pH 值為7.2，充分?jǐn)嚢韬罄鋮s，之后貯藏到4℃冰箱中保存24 h，獲取上清液借助濾紙吸干沉淀物的水分，充分干燥后獲得尿酸鈉結(jié)晶。取1 250 mg 尿酸鈉結(jié)晶加45 mL 生理鹽水，加熱攪拌配制成50 mL 尿酸鈉溶液。

1.2.3 動物分組 實驗小鼠分成正常組（不做任何處理）、模型組（用6 號注射針在受試大鼠右側(cè)踝關(guān)節(jié)背側(cè)從45°方向插入脛骨肌肌腱內(nèi)側(cè)，將0.2 mL尿酸鈉溶液，濃度為2.5 g∕100 mL，注入踝關(guān)節(jié)腔）、雙氯芬酸組（用6 號注射針在受試大鼠右側(cè)踝關(guān)節(jié)背側(cè)從45°方向插入脛骨肌肌腱內(nèi)側(cè)，將0.2 mL 雙氯芬酸溶液注入踝關(guān)節(jié)腔）、痛風(fēng)舒片組（用6 號注射針在受試大鼠右側(cè)踝關(guān)節(jié)背側(cè)從45°方向插入脛骨肌肌腱內(nèi)側(cè)，將0.2 mL 痛風(fēng)舒片同1 mL 生理鹽水混合液注入踝關(guān)節(jié)腔），每組10 只。選取模型動物，主要是在關(guān)節(jié)周圍，見軟組織的明顯充血∕水腫表現(xiàn)，關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞，見線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞器腫脹表現(xiàn)，將其判定順利完成造模工作。尿酸鈉（Sodium urate， MSU）可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞高表達(dá)MRP8；MRP8 siRNA 轉(zhuǎn)染能有效干擾巨噬細(xì)胞中髓樣相關(guān)蛋白8（MRP8）的表達(dá)。

1.2.4 尿酸水平、大鼠步態(tài)測定 通過體外細(xì)胞模型篩選中藥提取物及標(biāo)準(zhǔn)品對MSU 刺激的體外急性痛風(fēng)模型的抗炎作用；通過超高效液相色譜-質(zhì)譜∕質(zhì)譜（UPLC-MS∕MS）的方法監(jiān)測黃嘌呤氧化生成尿酸的含量，反應(yīng)中藥提取物及標(biāo)準(zhǔn)品對XOD 的抑制作用。以痛風(fēng)舒片的有效成分為測定指標(biāo)，采用體外擴(kuò)散池法，利用新鮮大鼠離體皮膚，分別于透皮的1、2、3、4 h 采取5 mL 接受液。用TLC 定性法及薄層掃描定量法測定內(nèi)含的桂皮醛是可以透過大鼠皮膚的，其量隨給藥時間延長而增多。

1.3 觀察指標(biāo)

①借助分光光度儀分析法，分析巨噬細(xì)胞中髓樣相關(guān)蛋白8（myeloid associated protein 8 in macrophages, MRP8）對核因子κB（nuclear factor kappa-B,NF-κB）的影響，以圖示予以對比。②關(guān)節(jié)腫脹測量。干預(yù)前及干預(yù)后5 d，借助無彈性軟尺測定關(guān)節(jié)周徑，觀察治療前后各組大鼠受試關(guān)節(jié)周徑變化。③止痛物質(zhì)含量測定。大鼠處死后選擇受試關(guān)節(jié)周圍軟組織，比色法測定鉀離子（K+）含量，熒光光度法測定多巴胺（dopamine, DA）、5-羥色胺（5-hydroxytryptamine， 5-HT）含量。

1.4 統(tǒng)計方法

使用SPSS 21.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，計量資料經(jīng)檢驗符合正態(tài)分布，以（±s）表示，組間差異比較采用t檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MPR8 對NF-κB 等的影響

MPR8 沉默后巨噬細(xì)胞中IL-1β 的分泌降低，NF-κB 表達(dá)下調(diào)，I-κB 表達(dá)上調(diào)。見圖1。

圖1 MPR8 對NF-κB 等的影響

2.2 4 組大鼠受試關(guān)節(jié)周徑比較

正常組用藥前后受試關(guān)節(jié)周徑比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），模型組、雙氯芬酸組、痛風(fēng)舒片組在用藥后5 d 的受試關(guān)節(jié)周徑較用藥前增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 4 組大鼠受試關(guān)節(jié)周徑變化對比[(±s)，cm]

表1 4 組大鼠受試關(guān)節(jié)周徑變化對比[(±s)，cm]

組別正常組（n=10）模型組（n=10）雙氯芬酸組（n=10）痛風(fēng)舒片組（n=10）干預(yù)前2.366±0.125 2.665±0.142 2.671±0.138 2.669±0.141干預(yù)后5 d 2.341±0.136 2.802±0.149 2.956±0.142 3.115±0.134 t 值0.581 3.119 6.346 10.525 P 值0.568 0.005＜0.001＜0.001

2.3 4 組大鼠受試關(guān)節(jié)周圍止痛物質(zhì)含量比較

正常組受試關(guān)節(jié)周圍K+、DA、5-HT 水平高于其他3 組，痛風(fēng)舒片組、雙氯芬酸組低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 4 組大鼠受試關(guān)節(jié)周圍止痛物質(zhì)含量比較(±s)

表2 4 組大鼠受試關(guān)節(jié)周圍止痛物質(zhì)含量比較(±s)

注：與正常組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

組別正常組（n=10）模型組（n=10）雙氯芬酸組（n=10）痛風(fēng)舒片組（n=10）F 值P 值K+（mmol∕mg）7.415±0.562（6.021±1.254）a（5.213±0.715）ab（4.562±0.625）ab 21.667＜0.001 DA（μg∕mL）9.154±0.826（7.895±1.415）a（5.562±0.802）b（5.246±0.786）b 36.623＜0.001 5-HT（μg∕mg）14.425±1.152（11.625±2.415）a（9.336±1.562）ab（8.614±1.284）b 24.400＜0.001

3 討論

中醫(yī)認(rèn)為痛風(fēng)可分為“濕熱蘊(yùn)結(jié)”“瘀熱阻滯”“痰濁阻滯”“肝腎陰虛”幾種證型，辨證治療可收到顯著的效果[4-6]。痛風(fēng)舒片作為治療濕熱蘊(yùn)結(jié)患者的可行性方法，已在本研究中得到了充分的證實。痛風(fēng)舒片的主要成分為大黃、車前子、澤瀉、川牛膝、防己等。方中大黃有攻積導(dǎo)滯、瀉火涼血、逐瘀通經(jīng)的功效[7]，能夠更好地抑制MSU 誘導(dǎo)的炎癥和抑制XOD 活性，這與其含有的主要活性成分多糖類、鞣質(zhì)類與蒽醌類相關(guān)。雖然大黃攻下較猛，奏效迅速，但易傷正氣。在治療濕熱痰阻所致的痛風(fēng)病患者時，大黃瀉下攻積、瀉火解毒、活血祛瘀、清泄?jié)駸?；車前子主治小便不利，淋濁帶下，水腫脹滿，暑濕瀉痢，目赤障翳，痰熱咳喘；澤瀉長于利水滲濕，泄熱，用于小便不利，水腫脹滿；諸藥合用，發(fā)揮出藥物典型性優(yōu)勢[8]。

本次研究中，模型組、雙氯芬酸組、痛風(fēng)舒片組在用藥后5 d 的受試關(guān)節(jié)周徑為（2.802±0.149）、（2.956±0.142）、（3.115±0.134）cm，較用藥前增加（P＜0.05），此外在關(guān)節(jié)周圍止痛物質(zhì)含量低于正常組與模型組，表明痛風(fēng)舒片對于大鼠痛風(fēng)的關(guān)節(jié)腫脹改善好，并且對疼痛緩解有良好效果。這與曾祥永等[9]的研究保持一致，其研究中顯示：用藥后痛風(fēng)舒浸膏粉組、雙氯芬酸組受試關(guān)節(jié)周徑為（2.432±0.140）、（2.478±0.140）cm，均比用藥前增加（P＜0.05）。說明其具有一定的鎮(zhèn)痛和抗炎作用。總之，痛風(fēng)舒片具有清熱、利濕、解毒的作用[10]。

痛風(fēng)舒片清熱解毒效用突出，對于濕熱所致疼痛不適具備良好的緩解效果。痛風(fēng)舒片可有效解決高尿酸血癥，有效改善痛風(fēng)石，糾正嘌呤代謝紊亂，分解尿酸，恢復(fù)肝腎尿酸代謝功能，使血尿酸濃度降至正常值，痛風(fēng)石逐漸軟化、溶解、排出，使關(guān)節(jié)逐漸靈活自由，全身舒適[11]。然而，單靠該藥根治痛風(fēng)并不容易，因為痛風(fēng)比較頑固，而且持續(xù)時間比較長[12]，治療時可以結(jié)合針灸療法，還有飲食療法。疼痛嚴(yán)重時可以加上止疼藥緩解。

痛風(fēng)患者服用痛風(fēng)舒片后，能夠抑制近端腎小管對尿酸鹽的重吸收，從而增加尿酸排泄，降低尿酸水平，適合腎功能良好者[13]。建議痛風(fēng)舒片劑量為0.96 g，3次∕d，飯后口服。用藥期間少吃海鮮、動物內(nèi)臟等食品；忌啤酒和白酒。每日還要大量飲水，量約2 000～3 000 mL，加速排尿，也能降低尿酸濃度[14]。痛風(fēng)舒可用于痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎的消炎、消腫、止痛，但是不能從根本上控制痛風(fēng)病變的進(jìn)展[11]。治療痛風(fēng)最根本的還是控制血尿酸在相對正常的水平，降低血尿酸主要包括抑制尿酸合成，促進(jìn)尿酸排泄和加呋塞米酸分解，痛風(fēng)患者最好要在?？漆t(yī)生的指導(dǎo)下應(yīng)用藥物治療，在臨床上常用的西藥包括別嘌醇、非布司他、苯溴馬隆等。非布司他，是目前比較新的能治療痛風(fēng)的藥物，效果比較好，具有抑制尿酸生成的作用，又能夠促進(jìn)尿酸排泄，不良反應(yīng)比別嘌醇、苯溴馬隆等傳統(tǒng)的藥物要小；因而治療痛風(fēng)病可以綜合療法來達(dá)到很好的疾病控制效果[15]。

綜上所述，痛風(fēng)舒片應(yīng)用于動物試驗的治療實踐中，對強(qiáng)化藥物療效，促進(jìn)藥物吸收，加速控酸具有顯著的效果，在因痛風(fēng)引起的濕熱性疾病的治療中具有極高的療效，抗炎和鎮(zhèn)痛效果突出，值得臨床應(yīng)用實施。