馬玲，鐘利國(guó)，崔裕如，劉彬

骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）屬于慢性退行性關(guān)節(jié)疾病，是導(dǎo)致殘疾的主要原因，而炎性細(xì)胞因子與OA 發(fā)病關(guān)系密切［1-2］。白細(xì)胞介素（IL）-1β 可誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞釋放蛋白水解酶和其他炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生，促進(jìn)OA 發(fā)生［3］。梓醇是一種中藥提取物，具有減輕IL-1β 誘導(dǎo)的大鼠軟骨細(xì)胞炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡以及細(xì)胞外基質(zhì)降解的作用，是治療OA的潛在藥物［4-5］，但其作用機(jī)制尚不明確。miR-140-5p 為調(diào)節(jié)軟骨穩(wěn)態(tài)的特異性miRNA，其表達(dá)失調(diào)與OA 嚴(yán)重程度有關(guān)［6］。研究顯示，miR-140-5p 水平在OA和IL-1β 誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞損傷中表達(dá)下調(diào)，其過表達(dá)可抑制IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡［7］。新近研究發(fā)現(xiàn)，梓醇可通過上調(diào)miR-140-5p表達(dá)抑制肝癌細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡［8］。本研究旨在探討梓醇對(duì)OA 的改善作用與miR-140-5p 的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 主要材料

選取2019 年7 月—2020 年7 月于荊州市第一人民醫(yī)院接受治療的20例膝關(guān)節(jié)炎患者為研究對(duì)象，所有患者均行膝關(guān)節(jié)置換術(shù)，術(shù)中切除軟骨組織。其中男12例，女8例，年齡43～56歲，平均（48.63±3.26）歲。梓醇購(gòu)自成都瑞芬思生物科技有限公司（純度90%）；IL-1β 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；IL-6、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、γ 干擾素（IFN-γ）ELISA 試劑盒購(gòu)自英國(guó)Abcam 公司；RNA提取試劑盒、miRNA 提取試劑盒、SYBR Green 試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒購(gòu)自北京天根生化科技有限公司；DMEM 培養(yǎng)基、胰蛋白酶、胎牛血清、凋亡試劑盒購(gòu)自碧云天生物；Lipofectamine2000 購(gòu)自美國(guó)Invitrogen；miR-NC、miR-140-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-140-5p 購(gòu)自廣州銳博生物科技有限公司；兔抗人活化的胱天蛋白酶3（Cleavedcaspase 3）、活化的胱天蛋白酶9（Cleaved-caspase 9）抗體購(gòu)自武漢艾美捷公司；內(nèi)參甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）抗體與辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）標(biāo)記的山羊抗兔IgG 二抗購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz 公司。MIR-162-PC/MIR-262-PC 型培養(yǎng)箱購(gòu)自日本松下公司；BD FACSCanto Ⅱ型流式細(xì)胞儀購(gòu)自美國(guó)BD 公司；ABI StepOnePlus 熒光定量PCR儀購(gòu)自美國(guó)Applied Biosystems 公司；MODEL550型酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)Bio-Rad公司。

1.2 研究方法

1.2.1 人膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分離和培養(yǎng)

取出軟骨組織標(biāo)本后剪碎，加入胰蛋白酶、Ⅱ型膠原酶后置于培養(yǎng)箱內(nèi)消化細(xì)胞，接種于含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，取第3代細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)［9］。

1.2.2 CCK-8法檢測(cè)梓醇的細(xì)胞毒性

將軟骨細(xì)胞以2 000個(gè)/孔接種于96孔板中。在37 ℃和5%CO2條件下孵育24 h后，用不同濃度的梓醇（0、0.1、1、10、20、50和100 ng/L）處理細(xì)胞24 h。每孔加入10 μL的CCK-8溶液。在37 ℃下孵育2 h，使用酶標(biāo)儀測(cè)量各孔在450 nm波長(zhǎng)處的吸光度（A450），計(jì)算細(xì)胞活力（%）=（經(jīng)藥物處理的細(xì)胞A450/對(duì)照細(xì)胞A450）×100%。

1.2.3 分組及處理

軟骨細(xì)胞接種于6 孔板，加入含有10 μg/L IL-1β 的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)48 h［10］，記為IL-1β組，不含IL-1β的正常完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞為對(duì)照（Con）組。分別加入含有不同濃度（10、20及50 ng/L）的梓醇［4］與IL-1β（10μg/L）培養(yǎng)24 h，分別記為IL-1β+梓醇-低組、IL-1β+梓醇-中組、IL-1β+梓醇-高組。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將miR-NC、miR-140-5p mimics分別轉(zhuǎn)染至軟骨細(xì)胞，轉(zhuǎn)染成功后加入IL-1β（10μg/L）培養(yǎng)24 h，分別記為IL-1β+miR-NC 組、IL-1β+miR-140-5p組。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將anti-miR-NC、anti-miR-140-5p分別轉(zhuǎn)染至軟骨細(xì)胞，轉(zhuǎn)染成功后加入梓醇（50 ng/L）、IL-1β（10μg/L）培養(yǎng)24 h，分別記為IL-1β+梓醇+anti-miR-NC 組、IL-1β+梓醇+anti-miR-140-5p組。

1.2.4 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活力

將各組軟骨細(xì)胞接種到96孔板（2 000個(gè)/孔）中，按1.2.3進(jìn)行分組與處理。培養(yǎng)24 h 后，每孔加入10 μL CCK-8 溶液。酶標(biāo)儀檢測(cè)每個(gè)孔中的A450值。

1.2.5 ELISA檢測(cè)IL-6、TNF-α、IFN-γ水平

收集各組軟骨細(xì)胞培養(yǎng)液，4 ℃下12 000×g離心10 min后吸取上清液，參照試劑盒說(shuō)明書，檢測(cè)各組IL-6、TNF-α、IFN-γ水平。

1.2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡

各組軟骨細(xì)胞胰蛋白酶消化后，重懸于500μL結(jié)合緩沖液中。隨后，加入5μL Annexin-V-FITC 和5μL PI 染色液，混合后避光孵育30 min。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。

1.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量（qPCR）檢測(cè)miR-140-5p表達(dá)水平

用RNA 提取試劑盒提取各組軟骨細(xì)胞總RNA，反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，在熒光定量PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增。miR-140-5p引物：上游5'-CGCATGGCAGTGGTTTTACCCTA-3'，下游5'-ATCCAGTGCAGGGTCCGAGG-3'；U6引物：上游5'-CTCGCT TCGGCAGCACATATACT-3'，下游5'-ACGCTTCACGAATTT GCGTGTC-3'。反應(yīng)體系（20μL）：SYBR mix 9.0μL、上下游引物各0.5μL、cDNA 模板2.0μL、RNase dH2O 8.0μL。反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性10 min；95 ℃變性15 s，60 ℃退火1 min，共40個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸1 min。以U6為內(nèi)參，2-ΔΔCt法計(jì)算miR-140-5p的相對(duì)表達(dá)量。

1.2.8 Western blot 法檢測(cè)Cleaved-caspase 3、Cleavedcaspase 9蛋白相對(duì)表達(dá)水平

提取各組軟骨細(xì)胞總蛋白，十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)（30μg）并轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯膜上。將膜封閉2 h，與一抗Cleaved-caspase 3（1∶1 000）、Cleavedcaspase 9（1∶1 000）、GAPDH 抗體（1∶2 000）在4 ℃孵育24 h，加二抗（1∶3 000）室溫孵育1 h，用增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光試劑顯影，Image J軟件分析各條帶灰度值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，2組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，組間多重比較用LSD-t法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 梓醇對(duì)軟骨細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用

0、0.1、1、10、20、50 和100 ng/L 梓醇處理后，軟骨細(xì)胞活性（%）分別為100.12±13.46、99.47±12.58、 98.56±13.11、 96.70±12.65、 95.82±12.39、96.35±12.42、93.47±12.51，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（n=9，F(xiàn)=0.299，P＞0.05），梓醇濃度在0～100 ng/L 之間對(duì)軟骨細(xì)胞沒有細(xì)胞毒性作用。

2.2 梓醇對(duì)IL-1β誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞的影響

2.2.1 細(xì)胞活力和炎癥反應(yīng)

與Con組比較，IL-1β組細(xì)胞活力降低，而IL-6、TNF-α、IFN-γ 水平升高（P＜0.05）；與IL-1β 組比較，IL-1β+梓醇-低組、IL-1β+梓醇-中組、IL-1β+梓醇-高組細(xì)胞活力升高，而IL-6、TNF-α、IFN-γ水平依次降低（P＜0.05），見表1。

Tab.1 Comparison of chondrocyte viability and expression levels of inflammatory cytokines between the five groups表1 各組軟骨細(xì)胞活力和炎性因子表達(dá)水平比較（n=9，±s）

Tab.1 Comparison of chondrocyte viability and expression levels of inflammatory cytokines between the five groups表1 各組軟骨細(xì)胞活力和炎性因子表達(dá)水平比較（n=9，±s）

＊＊P＜0.01；a與Con組比較，b與IL-1β組比較，c與IL-1β+梓醇-低組比較，d與IL-1β+梓醇-中組比較，P＜0.05。

組別Con組IL-1β組IL-1β+梓醇-低組IL-1β+梓醇-中組IL-1β+梓醇-高組F細(xì)胞活力/A450 0.78±0.08 0.31±0.04a 0.42±0.05ab 0.52±0.06abc 0.64±0.07abcd 80.005＊＊IL-6/（ng/L）9.97±0.93 86.55±7.18a 64.19±5.47ab 43.40±4.87abc 16.67±1.39abcd 429.566＊＊組別Con組IL-1β組IL-1β+梓醇-低組IL-1β+梓醇-中組IL-1β+梓醇-高組F TNF-α/（ng/L）5.78±0.56 74.05±7.01a 55.88±4.56ab 30.88±3.44abc 9.89±0.85bcd 471.325＊＊IFN-γ/（ng/L）31.71±3.11 163.14±11.33a 115.22±10.34ab 79.56±7.38abc 44.61±4.17abcd 408.467＊＊

2.2.2 細(xì)胞凋亡和miR-140-5p表達(dá)

與Con組比較，IL-1β組細(xì)胞凋亡率和Cleavedcaspase 3、Cleaved-caspase 9 蛋白表達(dá)水平升高，miR-140-5p表達(dá)水平降低（P＜0.05）；與IL-1β組比較，IL-1β+梓醇-低組、IL-1β+梓醇-中組、IL-1β+梓醇-高組細(xì)胞凋亡率和Cleaved-caspase 3、Cleavedcaspase 9蛋白表達(dá)水平依次降低，miR-140-5p表達(dá)水平依次升高（P＜0.05），見圖1、2，表2。

Fig.1 Apoptosis of chondrocytes in each group圖1 各組軟骨細(xì)胞凋亡水平

Fig.2 Expression levels of apoptosis-related proteins in each group圖2 各組軟骨細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)

Tab.2 Comparison of apoptosis rate,Cleaved-caspase 3,Cleaved-caspase 9 protein expression and miR-140-5p expression levels between the five groups表2 各組軟骨細(xì)胞凋亡率、Cleaved-caspase 3、Cleavedcaspase 9蛋白表達(dá)和miR-140-5p表達(dá)水平比較（n=9，±s）

Tab.2 Comparison of apoptosis rate,Cleaved-caspase 3,Cleaved-caspase 9 protein expression and miR-140-5p expression levels between the five groups表2 各組軟骨細(xì)胞凋亡率、Cleaved-caspase 3、Cleavedcaspase 9蛋白表達(dá)和miR-140-5p表達(dá)水平比較（n=9，±s）

＊＊P＜0.01；a與Con組比較，b與IL-1β組比較，c與IL-1β+梓醇-低組比較，d與IL-1β+梓醇-中組比較，P＜0.05。

組別Con組IL-1β組IL-1β+梓醇-低組IL-1β+梓醇-中組IL-1β+梓醇-高組F凋亡率/%6.31±0.52 32.63±3.16a 22.90±2.13ab 15.71±1.41abc 9.04±0.73abcd 297.530＊＊Cleaved-caspase 3 0.13±0.02 0.58±0.04a 0.45±0.04ab 0.31±0.03abc 0.19±0.02abcd 314.265＊＊組別Con組IL-1β組IL-1β+梓醇-低組IL-1β+梓醇-中組IL-1β+梓醇-高組F Cleaved-caspase 9 0.28±0.03 0.77±0.06a 0.64±0.05ab 0.51±0.04abc 0.35±0.03abcd 193.026＊＊miR-140-5p 1.00±0.00 0.26±0.03a 0.46±0.03ab 0.69±0.06abc 0.96±0.07bcd 442.922＊＊

2.3 miR-140-5p 過表達(dá)對(duì)IL-1β 誘導(dǎo)后軟骨細(xì)胞的影響

2.3.1 細(xì)胞活力和炎癥反應(yīng)

與IL-1β+miR-NC 組比較，IL-1β+miR-140-5p組細(xì)胞活力升高，而IL-6、TNF-α、IFN-γ 水平降低（P＜0.05），見表3。

Tab.3 Comparison of cell viability and inflammatory cytokines in chondrocytes between the two groups表3 各組軟骨細(xì)胞活力A值和炎性因子表達(dá)水平比較（n=9，±s）

Tab.3 Comparison of cell viability and inflammatory cytokines in chondrocytes between the two groups表3 各組軟骨細(xì)胞活力A值和炎性因子表達(dá)水平比較（n=9，±s）

＊＊P＜0.01。

組別IL-1β+miR-NC組IL-1β+miR-140-5p組t細(xì)胞活力/A450 0.33±0.04 0.56±0.06 9.569＊＊IL-6/（ng/L）87.72±7.93 23.21±2.18 23.532＊＊組別IL-1β+miR-NC組IL-1β+miR-140-5p組t TNF-α/（ng/L）77.31±6.24 13.61±1.19 30.083＊＊IFN-γ/（ng/L）165.82±14.54 55.09±4.99 21.830＊＊

2.3.2 細(xì)胞凋亡和Cleaved-caspase 3、Cleavedcaspase 9蛋白水平以及miR-140-5p表達(dá)

與IL-1β+miR-NC 組比較，IL-1β+miR-140-5p組細(xì)胞凋亡率、Cleaved-caspase 3、Cleaved-caspase 9蛋白水平降低，miR-140-5p 表達(dá)水平升高（P＜0.01），見圖3、表4。

Fig.3 Apoptosis levels of chondrocytes in each group圖3 過表達(dá)miR-140-5p后各組軟骨細(xì)胞凋亡水平

Tab.4 Comparison of apoptosis rate,Cleaved-caspase 3,Cleaved-caspase 9 protein expression and miR-140-5p expression levels between the two groups表4 miR-140-5p過表達(dá)后各組軟骨細(xì)胞凋亡率，Cleavedcaspase 3、Cleaved-caspase 9蛋白表達(dá)和miR-140-5p表達(dá)水平比較（n=9，±s）

Tab.4 Comparison of apoptosis rate,Cleaved-caspase 3,Cleaved-caspase 9 protein expression and miR-140-5p expression levels between the two groups表4 miR-140-5p過表達(dá)后各組軟骨細(xì)胞凋亡率，Cleavedcaspase 3、Cleaved-caspase 9蛋白表達(dá)和miR-140-5p表達(dá)水平比較（n=9，±s）

＊＊P＜0.01。

組別IL-1β+miR-NC組IL-1β+miR-140-5p組t凋亡率/%31.73±2.96 12.12±1.16 18.505＊＊Cleaved-caspase 3 0.59±0.05 0.25±0.02 18.941＊＊組別IL-1β+miR-NC組IL-1β+miR-140-5p組t Cleaved-caspase 9 0.79±0.06 0.40±0.04 16.225＊＊miR-140-5p 1.00±0.12 2.88±0.24 21.019＊＊

2.4 下調(diào)miR-140-5p 表達(dá)逆轉(zhuǎn)了梓醇對(duì)IL-1β 誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞損傷

2.4.1 細(xì)胞活力和炎癥反應(yīng)

與IL-1β+梓醇+anti-miR-NC組比較，IL-1β+梓醇+anti-miR-140-5p 組細(xì)胞活力降低，而IL-6、TNF-α、IFN-γ水平升高（P＜0.01），見表5。

Tab.5 Comparison of cell viability and inflammatory cytokines in chondrocytes between the two groups表5 下調(diào)miR-140-5p后各組軟骨細(xì)胞活力和炎性因子表達(dá)水平比較（n=9，±s）

＊＊P＜0.01。

組別IL-1β+梓醇+anti-miR-NC組IL-1β+梓醇+anti-miR-140-5p組t細(xì)胞活力/A450 0.65±0.06 0.39±0.04 10.817＊＊IL-6/（ng/L）15.96±1.29 73.17±6.54 25.747＊＊組別IL-1β+梓醇+anti-miR-NC組IL-1β+梓醇+anti-miR-140-5p組t TNF-α/（ng/L）9.07±0.75 61.39±5.07 30.625＊＊IFN-γ/（ng/L）42.37±4.29 123.94±10.94 20.824＊＊

2.4.2 細(xì)胞凋亡、Cleaved-caspase 3、Cleavedcaspase 9蛋白水平以及miR-140-5p表達(dá)

與IL-1β+梓醇+anti-miR-NC組比較，IL-1β+梓醇+anti-miR-140-5p 組細(xì)胞凋亡率，Cleavedcaspase 3、Cleaved-caspase 9 蛋白水平升高，miR-140-5p表達(dá)水平降低（P＜0.01），見圖4、表6。

Fig.4 Apoptosis levels of chondrocytes in each group圖4 下調(diào)miR-140-5p后各組軟骨細(xì)胞凋亡水平

Tab.6 Comparison of apoptosis rate,Cleaved-caspase 3,Cleaved-caspase 9 protein expression and miR-140-5p expression levels between the two groups表6 下調(diào)miR-140-5p后各組軟骨細(xì)胞凋亡率，Cleavedcaspase 3、Cleaved-caspase 9蛋白表達(dá)和miR-140-5p表達(dá)水平比較（n=9，±s）

Tab.6 Comparison of apoptosis rate,Cleaved-caspase 3,Cleaved-caspase 9 protein expression and miR-140-5p expression levels between the two groups表6 下調(diào)miR-140-5p后各組軟骨細(xì)胞凋亡率，Cleavedcaspase 3、Cleaved-caspase 9蛋白表達(dá)和miR-140-5p表達(dá)水平比較（n=9，±s）

＊＊P＜0.01。

組別IL-1β+梓醇+anti-miR-NC組IL-1β+梓醇+anti-miR-140-5p組t凋亡率/%9.16±0.65 25.21±2.19 21.078＊＊Cleaved-caspase 3 0.17±0.02 0.49±0.05 17.827＊＊組別IL-1β+梓醇+anti-miR-NC組IL-1β+梓醇+anti-miR-140-5p組t Cleaved-caspase 9 0.33±0.03 0.66±0.04 19.800＊＊miR-140-5p 1.00±0.00 0.32±0.04 51.000＊＊

3 討論

OA 的主要治療藥物是非甾體抗炎藥，可緩解OA癥狀［11］。然而，長(zhǎng)期使用非甾體抗炎藥可能導(dǎo)致胃腸道和心血管疾?。?2］。因此，尋找新的潛在治療藥物對(duì)改善OA 有重要意義。軟骨細(xì)胞的過度凋亡和細(xì)胞炎癥反應(yīng)是OA 的主要病理特征?；贠A的發(fā)病機(jī)制，已有研究表明部分中藥及其活性成分（如白藜蘆醇、燈盞花乙素）可用于治療OA，減輕軟骨細(xì)胞損傷［13］。梓醇是一種從地黃根中分離出來(lái)的環(huán)烯醚萜苷，有抗炎作用［4-5，14］。IL-1β 可觸發(fā)炎性細(xì)胞因子的釋放以及軟骨細(xì)胞凋亡，被廣泛應(yīng)用于OA 的病理生理學(xué)研究［5，10］。本研究結(jié)果顯示，IL-1β 誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞中IL-6、TNF-α、IFN-γ 水平升高，軟骨細(xì)胞凋亡率和Cleaved-caspase 3、Cleavedcaspase 9 蛋白水平均升高，表明IL-1β 可誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞凋亡。曾允富等［4］研究顯示，梓醇可抑制IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡。本研究亦顯示，梓醇可降低促炎細(xì)胞因子水平和細(xì)胞凋亡率以及Cleavedcaspase 3、Cleaved-caspase 9 蛋白表達(dá)，提示梓醇可抑制IL-1β 誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎性損傷和細(xì)胞凋亡，再次證實(shí)了梓醇可能是改善OA的潛在藥物。

miRNA 在骨關(guān)節(jié)炎中表達(dá)異常，并可參與OA發(fā)生、發(fā)展［15-16］。miR-140-5p 是一種在OA 中特異性表達(dá)的新型非編碼miRNA。研究顯示，miR-140-5p 在人OA 軟骨中表達(dá)降低［17］。過表達(dá)miR-140-5p對(duì)IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎癥和細(xì)胞凋亡具有抑制作用［7］。本研究顯示，在IL-1β 誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞中，miR-140-5p 表達(dá)量較正常培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞降低，過表達(dá)miR-140-5p 后，IL-1β 誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡和炎性損傷均減輕，表明miR-140-5p 在OA 中可能發(fā)揮保護(hù)作用。梓醇可增加IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞中miR-140-5p 的表達(dá)量，表明梓醇可促進(jìn)miR-140-5p 表達(dá)。此外，下調(diào)miR-140-5p 表達(dá)可拮抗梓醇對(duì)IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎癥及細(xì)胞凋亡的抑制作用，提示梓醇可能通過上調(diào)miR-140-5p減緩IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎癥反應(yīng)及凋亡。

綜上所述，梓醇可通過上調(diào)miR-140-5p表達(dá)來(lái)減輕IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎性因子的釋放以及凋亡，且miR-140-5p 可能是梓醇改善OA 的潛在靶點(diǎn)。在未來(lái)的研究中將對(duì)miR-140-5p 的下游靶標(biāo)進(jìn)行分析，并結(jié)合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證梓醇對(duì)OA發(fā)揮保護(hù)作用的分子機(jī)制。