楊迪 杜嬋娟 張晉 潘連富 葉云峰 付崗

摘要：【目的】從不同作物的根圍土壤中分離篩選香蕉枯萎病菌拮抗菌，對拮抗菌進行鑒定并測定其防病效果，以期為香蕉枯萎病的生物防治提供新的菌種資源?！痉椒ā恳约怄哏牭毒虐蛯；?號生理小種（Fusarium oxysporum f. sp. cubense 4，F(xiàn)oc4）Foc 1402菌株為對象，采用稀釋涂布法對不同作物根圍土壤中的細菌進行分離，并使用平板對峙法和牛津杯法篩選其中的香蕉枯萎病拮抗菌。根據(jù)細菌菌落形態(tài)、生理生化特征結合16S rDNA序列分析對拮抗菌進行分類鑒定。使用威廉斯B6香蕉杯苗測定拮抗菌對香蕉枯萎病的盆栽防治效果?！窘Y果】從不同作物根圍分離獲得345株細菌，從中篩選獲得7株對香蕉枯萎病菌具有較強拮抗活性的菌株，抑菌率最高可達72.65%。依據(jù)形態(tài)學觀察、生理生化反應和16S rDNA序列分析結果，菌株Ba02、Ba310、Ba48、Ba62和Ba63被鑒定為解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens），菌株Bc11被鑒定為洋蔥伯克霍爾德氏菌（Burkholderia cepacia），菌株Pt05被鑒定為土地類芽孢桿菌（Paenibacillus terrae）。盆栽試驗結果顯示，7株拮抗細菌對香蕉枯萎病的防治效果在20.00%～68.89%，其中以菌株Bc11的防治效果最好，為68.89%?！窘Y論】從不同作物的根圍土壤中篩選獲得7株對Foc具有較強拮抗活性的細菌，其中，土地類芽孢桿菌為香蕉枯萎病生防菌家族的新成員。篩選獲得的不同種類拮抗菌可作為研制香蕉枯萎病生防菌劑的候選菌株資源，在后續(xù)開發(fā)抗病復合菌劑方面具有良好的應用前景。

關鍵詞：香蕉枯萎??；生物防治；解淀粉芽孢桿菌；洋蔥伯克霍爾德氏菌；土地類芽孢桿菌

中圖分類號：S476? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標志碼： A 文章編號：2095-1191（2023）02-0414-10

Abstract：【Objective】This study was conducted to isolate and screen the antagonists against banana fusarium wilt from the rhizosphere soil of different crops， and then identify them and evaluate their control effects，to provide new bacteria resources forthe biological control of banana fusarium wilt. 【Method】Targeting the Foc 1402 strain of Fusarium oxysporum f. sp. cubense 4，F(xiàn)oc 4， the bacteria in rhizosphere soil of different crops were isolated by gradient dilution coating method， and the antagonistic bacteria of banana fusarium wilt were screened by the plate confrontation method and the Oxford cup assay. The isolates were identified by morphological， physiological， biochemical features and the analysis of 16S rDNA sequences. And the control effects of antagonistic bacteria on banana fusarium wilt were evaluated through pot experiments using banana seedlings of Williams B6. 【Result】A total of 345 bacterial strains were isolated from rhizosphere soil of different crops. Of these， 7 strains with strong antagonistic activity against banana fusarium wilt were screened， and the highest inhibition rate was 72.65%. According to the results of morphological， physiological and biochemical characteristics and 16s rDNA sequence analysis， strains Ba02， Ba310， Ba48， Ba62 and Ba63 were identified as Bacillus amyloliquefaciens， the strain Bc11 was identified as Burkholderia cepacia， and the strain Pt05 was identified as Paenibacillus terrae. Pot experiments revealed that the control effects of 7 antagonistic bacteria on banana fusarium wilt were 20.00%-68.89%， and the strain Bc11 was the most effective against banana fusarium wilt （68.89%）. 【Conclusion】In this study， 7 biocontrol bacteria withstrong control effects on banana fusarium wilt were screened from the rhizosphere soil of different crops. Among them， P. terrae is a new member of the biocontrol bacteria family of banana fusarium wilt. At the same time， the different kinds of antagonistic bacteria obtained can serve as candidate strain resources for the development of biocontrol agents against banana fusarium wilt， and have good application prospects in the subsequent development of disease resistant composite bacterial agents.

Key words： banana fusarium wilt； biological control； Bacillus amyloliquefaciens； Burkholderia cepacia； Paenibacillus terrae

Foundation items：National Natural Science Foundation of China （31960520）； Central Government-guided Local Science and Technology Development Fund （Guike ZY21195015）；Guangdong and Guangxi Joint Fund Project （2020B1515420006）； Project of Guangxi Key Laboratory of Biology for Crop Diseases and Insect Pests （22-035-31-22ST03）

0 引言

【研究意義】由尖孢鐮刀菌古巴專化型［Fusa-rium oxysporum f. sp. cubense （Foc）］侵染引起的香蕉枯萎病是目前世界香蕉產業(yè)中發(fā)生最嚴重的毀滅性土傳病害（Ghag et al.，2015）。長期以來，多種方法已被嘗試用于香蕉枯萎病的防治，如土壤熏蒸、輪作、土壤有機改良等，但該病仍未能得到有效控制（Saravanan et al.，2003；Ploetz，2015a；Dita et al.， 2018；李朝生等，2021；Ismaila et al.，2022）。利用生防微生物防治土傳病害可改善土壤微生態(tài)環(huán)境，豐富土壤微生物區(qū)系，避免病菌產生抗性，同時還可促進植物生長，誘導植物的系統(tǒng)防御反應，有助于持續(xù)抑制病害（Shen et al.，2015；Wan et al.，2018；常淑嫻等，2022；彭雯杰等，2022；Li et al.，2022）。因此，選擇拮抗微生物防治香蕉枯萎病是一條值得探究的有效防控途徑，而篩選獲得具有生防潛能的拮抗微生物是開展生物防治工作的重要基礎?！厩叭搜芯窟M展】近年來，多種對香蕉枯萎病具有拮抗作用的生防菌被報道。木霉屬（Trichoderma spp.）、假單胞菌屬（Pseudomonas spp.）、芽孢桿菌屬（Bacillus spp.）、鏈霉菌屬（Streptomyces spp.）和叢枝菌根真菌是研究較多的香蕉枯萎病生防菌，其中鏈霉菌屬更多僅針對Foc的離體研究，較少進行活體或大田試驗（覃柳燕等，2017；Bubici et al.，2019；賴寶春等，2020；李樞妍等，2021；楊迪等，2021）。Napitupulu等（2019）通過對峙培養(yǎng)和揮發(fā)性有機物測試，評估了10株哈茨木霉（T. harzianum）對Foc的生防潛力，結果表明所有菌株對Foc均具有拮抗活性，并可產生抑制Foc菌絲生長的揮發(fā)性有機物；Lin和Ho（2021）在平板試驗中發(fā)現(xiàn)蕈狀芽孢桿菌（B. mycoides）NP02和解淀粉芽孢桿菌（B. amyloliquefaciens）BaPD1均對Foc TR4具有拮抗作用，將2株菌株用于處理感染枯萎病的香蕉苗，通過比較植株生長狀況和葉片養(yǎng)分發(fā)現(xiàn)，2株菌株處理均可減輕枯萎病的田間癥狀，還可增加染病植株葉片中氮含量以及鋅、鐵、鎳等金屬離子水平；Raja和Ebenezar（2021）采用平板對峙法測試了分離自14個香蕉種植區(qū)的綠色木霉（T. viride）、熒光假單胞菌（P. flourescens）和枯草芽孢桿菌（B. subtilis）對Foc的抑制率，結果顯示綠色木霉對Foc的菌絲生長抑制率在57.52%～72.55%；熒光假單胞菌表現(xiàn)出的菌絲生長抑制率為67.17%～82.64%；枯草芽孢桿菌表現(xiàn)出的菌絲生長抑制率為59.69%。Cheng等（2022）以中蕉3號和中蕉4號香蕉苗為材料，研究了叢枝菌根真菌印度梨形孢（Serendipita indica）定殖對香蕉生長和枯萎病抗性的影響，結果表明該菌的定殖顯著促進了香蕉苗的生長，還可提高香蕉苗中葉綠素和氮的含量，同時減輕香蕉幼苗上枯萎病癥狀。Shen等（2022）從香蕉根圍土壤中篩選出60株鐵載體菌株，以Foc TR4為病原體，篩選出3株拮抗菌，其中菌株Gxun-6的拮抗活性最高，為68.8%，經菌落形態(tài)、生理生化分析和16S rRNA進化分析將該菌株鑒定為暹羅芽孢桿菌（B. siamensis）；在盆栽條件下，該菌株對香蕉枯萎病的防治效果可達88.26%，同時可增加香蕉植株的鮮重。然而，由于生防菌本身的特性以及環(huán)境條件等因素的影響，能在田間擁有穩(wěn)定防治效果的生防菌株還較少（Hesran et al.，2019）?！颈狙芯壳腥朦c】生物防治是香蕉枯萎病防治的研究熱點之一，然而單一的拮抗菌在復雜的田間環(huán)境中很難發(fā)揮出理想的防治效果。篩選更多種類的生防菌資源，有助于后續(xù)抗病復合菌劑的開發(fā)，以利于生防菌劑在田間更好地發(fā)揮作用?！緮M解決的關鍵問題】采用平板對峙法和牛津杯法從不同作物的根圍土壤中分離篩選香蕉枯萎病拮抗菌，通過形態(tài)學觀察、生理生化測定及16S rDNA序列分析對拮抗菌進行鑒定，并通過盆栽試驗測定拮抗菌的防病效果，以期為香蕉枯萎病的生物防治提供新的菌種資源。

1 材料與方法

1. 1 試驗材料

供試菌株：尖孢鐮刀菌古巴?；?號生理小種（F. oxysporum f. sp. cubense 4，F(xiàn)oc4）Foc 1402菌株，由廣西農業(yè)科學院植物保護研究所香蕉病害研究團隊分離保存。

PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂15 g、水1 L、pH自然。NA培養(yǎng)基：蛋白胨10 g、牛肉膏3 g、氯化鈉5 g、瓊脂15 g、水1 L、pH 7.0；不加瓊脂為NA液體培養(yǎng)基（方中達，2001）。

供試香蕉苗：長勢一致的5葉齡威廉斯B6健康香蕉杯苗，購自南寧香潔農業(yè)科技有限公司。

1. 2 拮抗細菌分離篩選

1. 2. 1 土壤微生物分離 采用五點取樣法采集不同作物根圍距離地表3～10 cm處土壤，參照付崗等（2007）的方法制備土壤懸浮液，并進行10倍梯度稀釋。分別取100 ?L稀釋倍數(shù)為10-4、10-5和10-6的土壤懸浮液在NA培養(yǎng)基上進行涂布，28 ℃恒溫培養(yǎng)，24 h后挑取形態(tài)不同的單菌落進行純化后4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1. 2. 2 Foc拮抗菌初篩 將Foc 1402在PDA培養(yǎng)基上28 ℃培養(yǎng)3 d后，用直徑為5 mm的滅菌打孔器沿菌落邊緣打取菌餅。將菌餅置于PDA培養(yǎng)基中央，28 ℃下培養(yǎng)24 h后，將待測細菌在距菌餅2 cm處劃線，繼續(xù)置于28 ℃培養(yǎng)，4 d后選取有3 mm以上抑菌帶的菌株進行下一步篩選。

1. 2. 3 Foc拮抗菌復篩 參照楊迪等（2021）的方法，制備拮抗菌發(fā)酵液和病原菌分生孢子懸浮液，采用牛津杯法測定各拮抗菌株發(fā)酵上清液的抑菌圈直徑，并計算抑菌率。以無菌水為對照，每處理3次重復。選取抑菌率高的菌株進行后續(xù)試驗。

抑菌率（%）＝（處理抑菌圈直徑－對照抑菌圈直徑）/處理抑菌圈直徑×100

1. 3 拮抗菌株鑒定

1. 3. 1 形態(tài)學觀察 將篩選獲得的拮抗菌株在NA培養(yǎng)基上28 ℃培養(yǎng)48 h，定期觀察記錄菌落形狀、透明度及菌落顏色等菌落特征，并在光學顯微鏡下觀察細菌形態(tài)。

1. 3. 2 生理生化反應測試 參照杭州微生物試劑有限公司葡萄球菌生化鑒定管和腸桿菌科細菌生化鑒定管說明書進行生理生化反應測試。反應結果判定參照《伯杰細菌鑒定手冊》（Bergey，2001）。

1. 3. 3 分子鑒定 將拮抗菌株接種于NA液體培養(yǎng)基，28 ℃下120 r/min振蕩培養(yǎng)16 h，取1 mL菌液，12000 r/min離心1 min收集菌體。使用細菌基因組DNA提取試劑盒（天根生化科技有限公司）提取菌株基因組DNA。使用通用引物27F/1492R（5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'/5'-GGTTACC TTGTACGACTT-3'）擴增拮抗菌株的16S rDNA序列。PCR擴增產物測序結果在NCBI網站進行BLAST比對，使用MEGA X采用鄰接法構建系統(tǒng)發(fā)育進化樹。

1. 4 拮抗菌盆栽防治效果測定

參照1.2.3方法制備拮抗菌發(fā)酵液和病原菌分生孢子懸浮液。將長勢一致的5葉齡香蕉苗移栽至以蛭石為基質的塑料盆內，室溫定植10 d后，用小刀沿香蕉根圍進行傷根處理。每株蕉苗接種孢子濃度為1×106個/mL的病原菌分生孢子懸浮液40 mL，同時淋入100 mL濃度為1×108 CFU/mL的拮抗菌發(fā)酵懸浮液，7 d后再次淋入等量相同濃度的拮抗菌發(fā)酵懸浮液，以無菌水為對照。每處理3次重復，每重復6株蕉苗。接種21 d后，參照杜嬋娟等（2020）的分級標準，依據(jù)蕉苗球莖縱剖面褐變面積占比確定病級，調查發(fā)病情況，并計算各處理病情指數(shù)和防治效果。

病情指數(shù)=∑（各級發(fā)病株數(shù)×該級代表值）/（總株數(shù)×最高級代表值）×100

防治效果（%）=（對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù)）/對照病情指數(shù)×100

1. 5 統(tǒng)計分析

利用Excel 2016對試驗數(shù)據(jù)進行計算處理，并使用SPSS 18.0的Duncans新復極差法分析各處理間的差異顯著性。

2 結果與分析

2. 1 微生物分離與拮抗菌篩選結果

采用梯度稀釋涂布法從采自不同作物的根圍土壤樣品中分離得到345株細菌，經平板對峙法初篩，從中篩選得到48株對香蕉枯萎病菌具有拮抗活性的細菌，其中以香蕉根圍土壤的拮抗菌分離率最高，為27.3%（表1）。

采用牛津杯法復篩后，得到7株抑菌率較高的拮抗菌（圖1），其中抑菌率最高的為菌株Ba63，抑菌圈直徑為33.35 mm，抑菌率高達72.65%；抑菌能力較弱的是Pt05，抑菌率為37.27%（表2）。

2. 2 拮抗菌鑒定結果

2. 2. 1 拮抗菌形態(tài)學鑒定 28 ℃條件下，菌株Ba02、Ba310、Ba48、Ba62和Ba63在NA培養(yǎng)基上培養(yǎng)24 h后形成稍透明的乳白色圓形菌落，表面光滑濕潤，邊緣整齊，易挑起，在顯微鏡下可觀察到菌體呈桿狀（圖2-A～圖2-J）；在NA培養(yǎng)基上培養(yǎng)48 h后，菌株Bc11形成白色圓形單菌落，中間隆起，邊緣光滑，易挑起，顯微鏡下菌體呈桿狀（圖2-K和圖2-L）；菌株Pt05形成圓形米白色單菌落，中部低凸，表面粗糙不透明、難挑起，顯微鏡下菌體呈桿狀（圖2-M和圖2-N）。

2. 2. 2 拮抗菌生理生化測定 對拮抗菌株的生理生化測定結果（表3）顯示，菌株Ba02、Ba310、Ba48、Ba62和Ba63可水解淀粉，能利用葡萄糖、蔗糖、果糖、木糖和甘露糖，不能分解麥芽糖、乳糖和甘露醇；革蘭氏染色、鳥氨酸、尿素、V-P試驗和硝酸鹽還原反應為陽性；硫化氫和甲基紅反應呈陰性。該5株菌株的生理生化特征與解淀粉芽孢桿菌（Wang et al.， 2012）基本一致。

菌株Bc11能利用葡萄糖、蔗糖、果糖和木糖，不能利用麥芽糖、乳糖、甘露糖和甘露醇，不能水解淀粉；鳥氨酸、尿素試驗和硝酸鹽還原反應為陽性；革蘭氏染色、硫化氫、甲基紅和V-P試驗呈陰性。該菌株的主要生理生化特征與洋蔥伯克霍爾德氏菌（Burkholderia cepacian）（Zhao et al.，2014）基本一致。

菌株Pt05可分解葡萄糖、蔗糖、果糖、麥芽糖、乳糖和甘露糖，能水解淀粉，不能分解木糖和甘露醇；革蘭氏染色、硫化氫、硝酸鹽還原反應、鳥氨酸、尿素和V-P試驗為陰性；甲基紅反應呈陽性。該菌株的主要生理生化特征與土地類芽孢桿菌（Paenibacillus terrae）（Yoon et al.，2003）基本一致。

2. 2. 3 拮抗菌株分子鑒定 分別將7株拮抗菌株的16S rDNA序列在GenBank中進行BLAST對比，結果顯示，菌株Ba02、Ba310、Ba48、Ba62和Ba63與解淀粉芽孢桿菌的同源性最高，最高均達100%；菌株Bc11與洋蔥伯克霍爾德氏菌的同源性最高，最高達99.85%。菌株Pt05與土地類芽孢桿菌的同源性最高，最高達99.61%。

基于菌株的16S rDNA，采用鄰接法分別構建系統(tǒng)發(fā)育進化樹。結果顯示，菌株Ba02、Ba310、Ba48、Ba62和Ba63與3株解淀粉芽孢桿菌（MK182997、MG264882和KU363819）以95%的自展支持率聚于同一分支，與芽孢桿菌屬（Bacillus spp.）其他種可明顯區(qū)分（圖3-A）；菌株Bc11以90%的自展支持率與2株洋蔥伯克霍爾德氏菌（AB051408和JX081590）聚于同一分支，與其他15株伯克霍爾德氏菌屬（Burkholderia spp.）參比種可明顯區(qū)分（圖3-B）；拮抗菌Pt05與2株土地類芽孢桿菌（MT634584和LC127093）聚于同一分支，自展支持率為100%，與其他類芽孢桿菌屬（Paenibacillus spp.）可明顯區(qū)分（圖3-C）。結合菌株形態(tài)特征及生理生化特征，將拮抗菌Ba02、Ba310、Ba48、Ba62和Ba63鑒定為解淀粉芽孢桿菌；菌株Bc11鑒定為洋蔥伯克霍爾德氏菌；菌株Pt05鑒定為土地類芽孢桿菌。

2. 3 拮抗菌的盆栽防治效果

蕉苗處理21 d后，接種病原菌的對照組葉片變黃，而拮抗菌發(fā)酵懸浮液處理的蕉苗大多仍保持綠色（圖4-B）。對照組病情指數(shù)為71.43，各拮抗菌發(fā)酵懸浮液處理的病情指數(shù)在22.22～57.14，顯著低于對照組（P<0.05），表明7株拮抗菌對香蕉枯萎病均有顯著的抑制作用。從防治效果看，各菌株的防效在20.00%～68.89%，其中，菌株Bc11、Ba62和Ba02對香蕉枯萎病的防治效果較好，防效均在60.00%以上（圖4-A）。

3 討論

香蕉枯萎病是一種典型的土傳病害，在世界多數(shù)香蕉主產國均有發(fā)生，目前尚無有效的單一防治方法（Ploetz，2015b）。近年來，以生物防治為主的綜合防控措施受到越來越多學者的關注（Thangavelu and Mustaffa，2012）。而篩選出具有良好生防潛能和不同種類的拮抗菌是香蕉枯萎病生物防治成功的前提，對后續(xù)田間應用的防治效果具有決定性作用。本研究在篩選香蕉枯萎病生防菌的過程中發(fā)現(xiàn)，盡管在不同作物的根圍土壤中均能分離出Foc拮抗菌，但拮抗菌分離率存在差異，其中以香蕉園土壤的Foc拮抗菌分離率最高。其原因可能是在發(fā)生枯萎病的香蕉園內，在病原菌的選擇壓力下，健康植株的根圍由于募集有更多的Foc生防菌從而表現(xiàn)相對抗?。℉aas and Defago， 2005）。因此，在香蕉根圍更容易分離到Foc的拮抗菌。另外，在香蕉根圍分離出的拮抗菌也勢必更適應香蕉根圍環(huán)境，將更容易在蕉園生態(tài)系統(tǒng)定殖和發(fā)揮作用（Pliego et al.， 2011）。這意味著在生防菌的篩選策略上，用于分離生防菌的樣品最好來源于發(fā)生目標病害種植園中的健康植株周圍。

本研究從不同作物的根圍土壤中分離出7株對Foc具有較強拮抗活性的細菌，通過形態(tài)學鑒定、生理生化測定及16S rDNA序列分析，將分離得到的7株拮抗菌鑒定為3個種，其中菌株Ba02、Ba310、Ba48、Ba62和Ba63被鑒定為解淀粉芽孢桿菌，菌株Bc11被鑒定為洋蔥伯克霍爾德氏菌，菌株Pt05被鑒定為土地類芽孢桿菌。解淀粉芽孢桿菌具有產生抗真菌脂肽、誘導植物抗性、促進作物生長等功能，已有較多用于防治香蕉枯萎病的報道（Xue et al.，2015； Wang et al.，2016）。洋蔥伯克霍爾德氏菌用于防治香蕉枯萎病的報道較少見。Pan等（1997）曾探討過洋蔥伯克霍爾德氏菌在香蕉根圍的定殖情況，認為該菌具有防治香蕉枯萎病的潛力，但并未明確其防病效果。漆艷香等（2017）在溫室條件下測試了洋蔥伯克霍爾德氏菌菌株TY對香蕉枯萎病的防治效果，結果表明該菌株的防治效果低于20%。而本研究篩選出的洋蔥伯克霍爾德氏菌菌株Bc11對Foc 1402具有明顯的拮抗作用，盆栽防治效果達68.89%。有研究表明，土地類芽孢桿菌作為生防菌，在盆栽條件下可降低番茄灰霉病的發(fā)生率，并有促生作用（Kim et al.，2017），對稻瘟病也有良好的防治效果（Yu et al.，2019），但尚未見用于防治香蕉枯萎病的報道。本研究首次發(fā)現(xiàn)土地類芽孢桿菌也可用于香蕉枯萎病的防治。本研究獲得的這些生防菌，為香蕉枯萎病的生物防治提供了新的菌種資源。

本研究還發(fā)現(xiàn)，拮抗菌在平皿中對Foc的拮抗活性強弱與其在盆栽試驗中的防病效果高低并不完全一致。如，在平皿中抑菌率較高的菌株Ba63（抑菌率72.65%）在盆栽試驗中的防治效果僅為43.33%，遠低于菌株Bc11的防治效果（68.89%）；同為解淀粉芽孢桿菌，菌株Ba63在平皿中抑菌率顯著高于菌株Ba02（51.32%），而在盆栽試驗中則表現(xiàn)為菌株Ba02的防治效果（60.00%）高于Ba63（43.33%）。這一結果表明僅依靠平板對峙篩選拮抗菌存在一定的缺陷，可能無法篩選到通過誘導寄主抗性等機制發(fā)揮作用的微生物，而錯失一些具有生防潛能的優(yōu)良菌株（Knudsen et al.， 1997；Daayf et al.， 2003）。因此，采取多種篩選方法相結合的手段將是獲得不同生防機制抗病微生物的有效策略。此外，這一結果也暗示了本研究篩選出的7株生防菌除產生抑菌物質外可能存在其他的防病機制。有研究表明，不同種類生防菌的防病機制不同，拮抗菌在平皿上表現(xiàn)出的拮抗活性主要體現(xiàn)了菌株分泌抑菌物質的活性與能力，然而在盆栽防治試驗中，防病效果不僅與抑菌物質相關，還與菌株的定殖能力、生態(tài)競爭力及誘導宿主抗病性等能力相關（Singh， 2014）。而多種防病機制不同的生防菌聯(lián)合應用可能具有更好的防病效果（Parnell et al.， 2016）。本研究篩選出的7株生防菌的防病機制可能存在差異，具有復配增效和增加菌劑防效穩(wěn)定性的應用潛力。

4 結論

本研究從不同作物的根圍土壤中分離篩選出7株對Foc具有較強拮抗活性的細菌，通過形態(tài)學鑒定、生理生化測定及16S rDNA序列分析，7株拮抗Foc細菌分別鑒定為解淀粉芽孢桿菌、洋蔥伯克霍爾德氏菌和土地類芽孢桿菌。其中，土地類芽孢桿菌為香蕉枯萎病生防菌家族的新成員，為香蕉枯萎病的防治提供了新的生防菌資源。同時，分屬于3個種屬的拮抗菌株可作為研制香蕉枯萎病生防菌劑的候選菌株資源，在后續(xù)開發(fā)抗病復合菌劑方面具有良好的應用前景。

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（責任編輯 麻小燕）