張濤 楊慧 朱盛堯 王雨鑫 王瑩 王濟(jì)紅 鄧燕莉

摘要：【目的】對(duì)篩選的貴州望謨八步茶2個(gè)紫芽茶樹品系主要生化成分進(jìn)行比較分析，為望謨八步茶種質(zhì)資源的篩選與茶產(chǎn)品的開發(fā)提供參考?！痉椒ā恳酝儽镜鼐G芽品系為對(duì)照（CK），采用高效液相色譜等方法，對(duì)紫芽品系ZY-1和ZY-2一年四季（4個(gè)月份）1芽2葉的5個(gè)常規(guī)成分、10種兒茶素單體和3種生物堿組分進(jìn)行檢測分析?！窘Y(jié)果】隨季節(jié)變更，紫芽茶樹品系ZY-1和ZY-2 1芽2葉的水浸出物含量變化顯著，可溶性糖含量均呈先增加、后減少、再增加的變化趨勢；游離氨基酸總量均在3月達(dá)最高，花青素含量與茶樹葉色表型表現(xiàn)一致，順序依次為ZY-1>ZY-2>CK，且ZY-1、ZY-2和CK的花青素含量為7.26、3.31和2.48 mg/g。ZY-1和ZY-2的生物堿組分和兒茶素單體隨季節(jié)變化差異顯著（P<0.05，下同），其中，茶葉堿含量呈現(xiàn)顯著降低的趨勢，且均為ZY-1>ZY-2>CK，咖啡堿含量和生物堿總量分別在3和8月積累較多；非酯型兒茶素EC和EGC含量在10月較高，酯型兒茶素GCG、EGCG和EGCG3"Me含量在5和8月較高，非酯型兒茶素和酯型兒茶素含量規(guī)律大致為ZY-2>ZY-1；從兒茶素指數(shù)上看，ZY-1和ZY-2的持嫩性均較好?！窘Y(jié)論】茶樹葉色紫化程度不同的茶葉品系，其在不同季節(jié)主要生化成分含量存在差異，紫芽茶樹品系更適制綠茶和功能型高花青素茶產(chǎn)品。

關(guān)鍵詞：生化成分；兒茶素；生物堿；紫化茶；花青素；季節(jié)性變化

中圖分類號(hào)：S571.1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：2095-1191（2023）02-0516-09

Abstract：【Objective】The main biochemical components of two new strains purple tea trees from Wangmo Babu tea were compared and analyzed in order to provide reference for the resource selection and tea product development of Wangmo Babu tea. 【Method】With the local green tea strains in Wangmo as control（CK）， five conventional components， ten catechins， three alkaloid components of the new strains of purple bud tea ZY-1 and ZY-2 one bud and two leaves were detected by high performance liquid chromatography （HPLC） and other detected methods during four seasons（four months）. 【Result】The water extract content of purple tea ZY-1 and ZY-2 one bud and two leaves changed significantly with the seasonal changes， and the soluble sugar showed a trend of first increasing， then decreasing and then increasing. The total amount of free amino acids reached the highest in March， and the anthocyanin content was consistent with the leaf phenotype as ZY-1>ZY-2>CK， containing 7.26， 3.31 and 2.48 mg/g anthocyanin respectively. The alkaloid components and catechin components of ZY-1 and ZY-2 were significantly different with the seasonal changes（P<0.05， the same below）， and the content of alkaloid in tea showed a significant decrease trend， and presented as ZY-1>ZY-2>CK，and the caffeine content and total amount of alkaloid accumulated more in March and August.The contents of non-ester catechin EC and EGC were higher in October. The contents of ester catechin GCG， EGCG and EGCG3"Me were higher in May and August， and the contents of non-ester catechin and ester catechin were ZY-2>ZY-1. In terms of catechin index， both ZY-1 and ZY-2 had better tender retention. 【Conclusion】The contents of main biochemical components are different in different seasons for the tea strains with different degrees of purple leaf color. The purple tea strains are more suitable for producing green tea and functional high-anthocyanin tea products.

Key words： biochemical component； catechin； alkaloid； purple tea； anthocyanin； seasonal changes

Foudation items： Science and Technology Project of Guizhou （QKHJC〔2019〕1077， QKHZC〔2020〕1Y1003）； Science and Technology Talents Platform Project of Guizhou （QKHPTRC〔2018〕5781-36）； Scientific Recearch Project for Introducing Talents of Guizhou University （GDRJHZ〔2017〕09）

0 引言

【研究意義】茶［Camellia sinensis（L.） O. Kuntze］是一種重要葉用經(jīng)濟(jì)作物，其芽葉色澤變異深受關(guān)注，隨著茶樹資源調(diào)查和種質(zhì)創(chuàng)新目前已選育出白色、黃色和紫色等大量特異茶樹種質(zhì)資源（張向娜等，2020）。葉色特異不僅體現(xiàn)在新梢顏色上，其內(nèi)含生化成分也具有一定特色，黃化和白化茶樹資源中茶多酚含量相對(duì)降低、茶氨酸含量相對(duì)增加（曹冰冰等，2020；金可等，2021），紫化茶樹資源含有豐富的花青素。茶樹芽葉內(nèi)含生化成分種類和含量是決定茶樹鮮葉適制性及其成品茶品質(zhì)的重要因素之一，生產(chǎn)上通常根據(jù)不同季節(jié)芽葉內(nèi)含成分的變化規(guī)律開發(fā)不同特色的茶葉產(chǎn)品（楊興榮等，2015）。八步茶是貴州省望謨縣郊納鎮(zhèn)境內(nèi)中小葉型地方群體茶樹種質(zhì)資源，主要分布在八步村、鐵爐村和冗巖村等地，其實(shí)生苗茶園中茶樹葉色存在顯著變異，有綠色、紫紅色、紫色、淺紅色等。郊納鎮(zhèn)飲茶歷史悠久，由于地處偏遠(yuǎn)山村、長期貧困，八步茶資源未得以全面開發(fā)利用。前期在望謨縣郊納鎮(zhèn)鐵爐村篩選出2個(gè)紫芽茶樹資源，其新梢芽葉呈現(xiàn)不同程度的紫化，經(jīng)過4年觀察發(fā)現(xiàn)其茶樹的芽葉紫化現(xiàn)象長期穩(wěn)定，且長勢較好，茶芽肥碩，葉肉厚軟。對(duì)望謨八步茶2個(gè)紫芽茶樹品系的1芽2葉進(jìn)行品質(zhì)成分比較分析，對(duì)后期茶葉產(chǎn)品研發(fā)和加工以及八步茶資源進(jìn)一步利用與開發(fā)具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】成品茶色、香、味、形與茶鮮葉內(nèi)含成分密切相關(guān)，茶樹芽葉內(nèi)含生化成分含量隨茶芽萌發(fā)時(shí)期、晝長、日照和溫度等季節(jié)氣候條件差異呈現(xiàn)一定的變化（Deka et al.，2020；Zhu et al.，2020）。研究表明花青素的合成受遺傳和環(huán)境因素的共同影響，花青素含量隨葉片發(fā)育先增加后減少，紫色幼嫩葉的花色苷、總多酚和兒茶素含量比成熟葉更高（蔣會(huì)兵等，2018）。春、夏、秋季紫化茶樹新梢的花青素總量變化均表現(xiàn)為先升高再降低的趨勢，且夏季含量最高，芽葉紫色程度越深，花青素含量越高（楊興榮等，2015）；夏季紫色茶樹的茶多酚和兒茶素含量高于綠色品種福鼎大白茶，氨基酸含量則低于福鼎大白茶（周喆等，2018）；紫芽茶樹紫嫣和紫娟在不同季節(jié)的水浸出物、氨基酸和咖啡堿變化趨勢均先降低再升高，春梢最高，夏梢最低，且茶多酚在夏季積累最多，秋季次之，春季最少（譚曉琴等，2021）。生物堿是茶葉中重要的活性成分，對(duì)茶葉滋味起重要作用，同時(shí)具有抗氧化、抗腫瘤等生理作用。嘌呤類生物主要包括咖啡堿、可可堿和茶葉堿等，其種類組成和含量也會(huì)受到茶樹生長環(huán)境和品種差異的影響（馬存強(qiáng)等，2014）。Wang等（2011）對(duì)4—9月生長的茶鮮葉進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，3個(gè)不同品種的嘌呤類生物堿含量隨季節(jié)起伏較大，而咖啡因含量在季節(jié)變化上僅輕微差異。兒茶素類屬于類黃酮類次生代謝物，在祁丹丹（2016）的研究中，季節(jié)對(duì)兒茶素類代謝物的影響較大，春季的綠茶樣品代謝物表型與夏季和秋季有顯著差異，兒茶素類物質(zhì)（原花青素、沒食子兒茶素等）在夏、秋季較高。因此，探索不同茶樹種質(zhì)資源生化成分的季節(jié)性變化，有助于挖掘茶樹種質(zhì)資源的特異性并按季節(jié)開發(fā)相應(yīng)的茶葉產(chǎn)品?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前對(duì)八步茶種質(zhì)資源開發(fā)、茶葉產(chǎn)品研發(fā)等方面的研究報(bào)道較少?！緮M解決的關(guān)鍵問題】以望謨本地綠芽品系為對(duì)照，對(duì)望謨八步茶2個(gè)紫芽茶樹品系的1芽2葉進(jìn)行4個(gè)季度常規(guī)生化成分、生物堿組分和兒茶素組分含量動(dòng)態(tài)變化的比較分析，旨在研究不同葉色八步茶茶樹資源的內(nèi)含成分差異特征，為品種選育、茶類適制性和茶產(chǎn)品開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

以望謨本地綠芽品系（芽葉色澤表現(xiàn)為綠色）為對(duì)照（CK），篩選所得紫芽1（ZY-1，芽葉色澤表現(xiàn)為紫色）和紫芽2（ZY-2，芽葉色澤表現(xiàn)為紅紫色）株系為供試組材料，上述茶樹均種植于望謨縣郊納鎮(zhèn)鐵爐村茶樹種質(zhì)資源圃中。分別于2020年的3月26日、5月21日、8月25日和10月26日（分別代表4個(gè)季節(jié)）采摘長勢良好、無病蟲害的茶樹1芽2葉嫩梢。茶鮮葉嫩梢使用蒸青方式（龔志華等，2006）進(jìn)行固樣，保存于密封袋中，存于-20 ℃冰箱以備后續(xù)檢測。

主要試劑：咖啡堿（Caffeine，CAF）、可可堿（Theobromine，TB）及茶堿（Theophylline，TP）3個(gè)嘌呤堿標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥98%），購自阿拉?。ㄔ噭┥虾Ｓ邢薰荆粵]食子酸（Gallic acid，GA）、兒茶素（Catechin，C）、表兒茶素（Epicatechin，EC）、沒食子兒茶素（Gallocatechin，GC）、表沒食子兒茶素（Epigallocatechin，EGC）、兒茶素沒食子酸酯（Catechin gallate，CG）、表兒茶素沒食子酸酯（Epicatechin gallate，ECG）、沒食子兒茶素沒食子酸酯（Gallocatechin gallate，GCG）、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（Epigallocatechin gallate，EGCG）及表沒食子兒茶素-3-O-甲基-沒食子酸酯（Epigallocatechin-3-O-（3-O-methylgallate），EGCG3"Me）等兒茶素類化合物標(biāo)準(zhǔn)品購自海阿達(dá)瑪斯有限公司。福林酚、碳酸鈉、沒食子酸、堿式乙酸鉛、正丁醇、乙酸乙酯、無水乙醇及甲醇均為國產(chǎn)分析純，均購于貴州博躍賽斯生物科技有限公司。

主要儀器：Pacific TII 7UV型超純水機(jī)［賽默飛世爾科技（中國）有限公司］；UV-6000T型紫外分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司）；高效液相色譜系統(tǒng)Agilent1260型（美國安捷倫公司）。

1. 2 樣品成分測定及方法

1. 2. 1 主要生化成分測定 參照GB/T 8305—2013《茶 水浸出物測定》檢測水浸出物含量；參照GB/T 8313—2018《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測方法》檢測茶多酚含量；參照GB/T 831—2013《茶 游離氨基酸總量的測定》檢測游離氨基酸總量；參照蒽酮比色法（黃秀瓊，2014）測定可溶性糖含量；參照分光光度法（李智，2014）測定花青素含量。

1. 2. 2 生物堿組分和兒茶素組分測定 參照王麗麗等（2014）的HPLC法測定生物堿組分和兒茶素組分。準(zhǔn)確稱取各標(biāo)準(zhǔn)品，用20%的HPLC級(jí)甲醇溶解，定容至10 mL，GA、GC、C和CG制成濃度為200 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，EGC、EGCG、EC、ECG、GCG、EGCG3"Me、可可堿、咖啡堿和茶堿制成濃度為400 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，-20 ℃保存?zhèn)溆谩ＩV條件：采用TSKgel ODS-100Z色譜柱，流動(dòng)相A為2%甲酸水溶液，流動(dòng)相B為甲醇；洗脫梯度：83% A（0 min）→75% A（5 min）→73% A（7 min）→58% A（16 min）→83% A（18 min）。柱溫40 ℃，流速1.0 mL/min，檢測波長280 nm；進(jìn)樣量10 μL。兒茶素指數(shù)（Catechin index，CI）的計(jì)算公式為CI=（EC+ECG）/（EGC+EGCG）（曾珊珊等，2022）。

1. 3 統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel 2010對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，使用SPSS 20.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)（P<0.05）。采用GraphPad Prism 8.0繪制柱形圖。

2 結(jié)果與分析

2. 1 2個(gè)紫芽茶樹品系不同季節(jié)常規(guī)化學(xué)成分含量分析

由圖1可知，ZY-1和ZY-2在不同季節(jié)的常規(guī)生化成分水浸出物含量、茶多酚含量、游離氨基酸總量及酚氨比均有明顯差異（P<0.05，下同）。其中，ZY-1在不同季節(jié)的水浸出物含量均高于ZY-2和CK（除10月），且在5和8月呈顯著性差異，ZY-1的水浸出物含量最高達(dá)50.17%；ZY-1、ZY-2和CK在3和5月的茶多酚均無顯著差異（P>0.05，下同），8月茶多酚的變化趨勢為CK>ZY-2>ZY-1；紫芽茶樹品系ZY-1和ZY-2在不同季節(jié)的游離氨基酸總量有差異且整體上低于綠色芽葉品系；不同季節(jié)2個(gè)紫芽品系茶樹的酚氨比范圍為3.93～6.62，酚氨比最高在5月，ZY-1和ZY-2的酚氨比分別為6.40和6.62，低于綠芽品系酚氨比（7.94），可見ZY-1和ZY-2在茶葉產(chǎn)品適制性上適合加工成綠茶。

2. 2 2個(gè)紫芽茶樹品系不同季節(jié)可溶性糖含量及花青素總量分析

受季節(jié)的影響冬季可溶性糖含量均較高，紫芽茶樹品系ZY-1和ZY-2的可溶性糖含量在10月得到累積，含量最高分別達(dá)9.04%和10.95%，且ZY-2顯著高于ZY-1（圖2-A）。由圖2-B可知，在同一季節(jié)2個(gè)紫芽品系茶樹的花青素總量與綠芽品系存在規(guī)律性的顯著差異，即ZY-1>ZY-2>CK，其中，ZY-1花青素總量最高達(dá)7.26 mg/g，ZY-2花青素總量最高值為3.31 mg/g，綠芽品系花青素總量最高值為2.48 mg/g。ZY-1的花青素總量在不同季節(jié)的變化規(guī)律為8月>5月>10月>3月，ZY-2的花青素總量變化規(guī)律為5月=10月>8月>3月，而CK在4個(gè)季節(jié)的花青素總量均顯著低于ZY-1和ZY-2。

2. 3 2個(gè)紫芽茶樹品系不同季節(jié)生物堿組分分析

由圖3可知，隨季節(jié)性變化望謨八步茶2個(gè)紫芽茶樹品系的可可堿、茶葉堿、咖啡堿及生物堿總量差異明顯。不同季節(jié)2個(gè)紫芽茶樹ZY-1和ZY-2的可可堿含量差異顯著，同一季節(jié)ZY-1和ZY-2的可可堿含量顯著低于CK（除3月），且在8月CK、ZY-1和ZY-2的可可堿含量得到最高累積，分別達(dá)2.09、1.32和1.86 mg/g（圖3-A）。隨著季節(jié)的變化同一紫芽品系茶樹茶葉堿含量呈現(xiàn)顯著降低的趨勢，ZY-1和ZY-2茶葉堿含量最高值分別為4.69和3.61 mg/g；同一季節(jié)紫芽ZY-1茶葉堿含量顯著高于ZY-2和CK，ZY-2茶葉堿含量顯著高于CK（圖3-B）。ZY-1的咖啡堿含量和生物堿總量均隨季節(jié)變化呈降低、升高、再降低的變化趨勢，ZY-1的咖啡堿含量和生物堿總量均在3月較高，10月顯著低于其他月份，而ZY-2的咖啡堿含量和生物堿總量均在8月最高（圖3-C，圖3-D）。

2. 4 2個(gè)紫芽茶樹品系不同季節(jié)兒茶素組分含量分析

GA是一種酚酸物質(zhì)單體，兒茶素類化合物按照是否鏈接沒食子基團(tuán)可分為非酯型兒茶素和酯型兒茶素，均對(duì)茶葉滋味品質(zhì)有重要影響。C、EC、GC和EGC屬于非酯型兒茶素。由表1可知，ZY-1和ZY-2在不同季節(jié)的GA、C、EC、GC和EGC含量及非酯型兒茶素總量均隨季節(jié)變化呈顯著變化。其中，GA含量隨季節(jié)變化呈顯著降低趨勢，ZY-1和ZY-2的GA含量在5和8月較為穩(wěn)定，春季3月時(shí)最高，顯著低于CK。ZY-1、ZY-2和CK的EC、EGC含量及非酯型兒茶素總量在10月積累量最高，ZY-1和ZY-2的EC含量均表現(xiàn)為10和5月高于8和3月，且同一季節(jié)中EC、EGC含量及非酯型兒茶素總量整體上為ZY-1和ZY-2小于CK；而無論是不同季節(jié)還是同一季節(jié)，ZY-1和ZY-2的C和GC含量分別均呈現(xiàn)差異顯著但無規(guī)律性變化，ZY-1的GC含量在5月最高，ZY-2的C和GC含量在8月最高。

CG、ECG、GCG、EGCG和EGCG3"Me屬于酯型兒茶素。由表1還可知，不同季節(jié)或同一季節(jié)里紫色茶樹品系ZY-1和ZY-2的CG、ECG、GCG、EGCG和EGCG3"Me含量及酯型兒茶素和兒茶素總量均隨季節(jié)變化差異顯著。其中，ZY-1和ZY-2的CG和ECG含量隨季節(jié)變化呈先升高后降低趨勢，ZY-1的CG含量最高積累量在5月，ZY-2的CG含量在5和8月較高，ZY-1和ZY-2的ECG含量最高積累量在5月。ZY-1和ZY-2的GCG、EGCG和EGCG3"Me含量及酯型兒茶素和兒茶素總量整體上高積累量出現(xiàn)在8月，GCG含量在8月的變化規(guī)律為ZY-1ZY-2>CK，在5月的變化規(guī)律為ZY-2>ZY-1>CK，在8和10月的變化規(guī)律為ZY-1CK>ZY-1。綜上所述，2個(gè)紫芽品系的非酯型兒茶素和酯型兒茶素含量規(guī)律大致為ZY-2高于ZY-1，但與綠芽品系無顯著差異。

兒茶素指數(shù)一般與茶樹芽葉的持嫩性呈正相關(guān)關(guān)系，其也是決定茶葉外形、色澤和適制性的重要指標(biāo)之一。由圖4可知，不同季節(jié)ZY-1的兒茶素指數(shù)均顯著高于ZY-2和CK，表明其持嫩性更高，可見3和5月茶樹品系持嫩性排序依次為ZY-1>ZY-2>CK，8和10月時(shí)ZY-2與CK間的兒茶素指數(shù)無顯著差異，表明其持嫩性也無顯著差異。同時(shí)，ZY-1的兒茶素指數(shù)隨季節(jié)的變化呈現(xiàn)逐步升高然后降低趨勢，8和5月的持嫩性均較好，10月最低；ZY-2的兒茶素指數(shù)3、5和8月的持嫩性變化不大，10月最低。因此，紫芽品系ZY-1的持嫩性在采茶季均較好，其次為ZY-2和綠芽。

3 討論

3. 1 不同季節(jié)紫芽茶樹品系ZY-1和ZY-2常規(guī)生化成分含量變化

茶樹生化成分含量存在差異不僅受茶樹自身品種遺傳因素影響，還受不同生長時(shí)期的光照、溫度等環(huán)境因子的影響，從而引起茶樹體內(nèi)碳氮代謝的變化，如高溫會(huì)促進(jìn)茶樹碳代謝增強(qiáng)，多酚類物質(zhì)增加，導(dǎo)致氮代謝減弱，茶氨酸和氨基酸總量下降（陳建姣等，2022）。了解不同茶樹資源、不同季節(jié)生化成分的差異，可提高茶樹鮮葉的適制性及茶產(chǎn)品開發(fā)中的茶葉品質(zhì)。本研究中，紫芽品系ZY-1和ZY-2的水浸出物隨季節(jié)變化呈顯著性變化趨勢，其中，5和8月的水浸出物含量均較高?？扇苄蕴浅氏仍黾雍鬁p少再增加的變化趨勢，可溶性糖受氣溫影響較大，一般隨溫度下降其含量會(huì)增加，高含量的可溶性糖便于茶樹寒冬條件下調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓以提高其抗寒抗凍性能（薄曉培等，2016）；ZY-1和ZY-2的可溶性糖含量均在5和10月最高，便于提高茶樹夏季抗旱抗高溫性能及冬季抗旱抗寒性能（黃彪等，2020）。本研究中紫芽品系的游離氨基酸總量均在3月達(dá)最高，含量均大于5.00%，其次為8月，5和10月游離氨基酸總量較低，主要是由于春季氣候溫和，茶樹氮代謝旺盛，氨基酸生成及累積較多（黃慧清等，2022）。同時(shí)，不同季節(jié)ZY-1和ZY-2的游離氨基酸總量為3.23%～5.93%，與游小妹等（2018）發(fā)現(xiàn)18份紫芽材料春季的游離氨基酸總量為3.4%～5.2%，以及譚曉琴等（2021）得出不同季節(jié)紫娟和紫嫣的游離氨基酸總量為3.25%～5.33%的范圍結(jié)果較為相似。名優(yōu)綠茶游離氨基酸含量一般在3.0%以上（黃慧清等，2022），可見本研究中紫芽品系ZY-1和ZY-2從游離氨基酸總量來說是適合加工綠茶的。在相同季節(jié)2個(gè)紫芽品系茶樹的花青素總量均顯著高于綠芽品系，即ZY-1>ZY-2>CK，與其表型表現(xiàn)一致，花青素含量在5和8月較高，該結(jié)果與曹冰冰等（2020）發(fā)現(xiàn)紅紫芽花青素在夏秋季顯著高于春季的結(jié)果相同。部分研究者認(rèn)為紫芽茶樹因含有較高花青素含量較為特殊更適制紅茶（吳穎等，2022），而本研究中不同季節(jié)ZY-1和ZY-2的酚氨比范圍為3.93～6.62，傳統(tǒng)認(rèn)為酚氨比低于8.00適制綠茶、大于15.00適制紅茶，因此紫芽品系茶樹ZY-1和ZY-2對(duì)于綠茶和紅茶均有一定的適制性，推測用于開發(fā)新型高花青素功能型茶產(chǎn)品更合適。

3. 2 不同季節(jié)紫芽品系ZY-1和ZY-2生物堿組分變化

生物堿是茶樹中一類重要的生物活性物質(zhì)，主要包含咖啡堿、可可堿和茶葉堿等（曾珊珊等，2022），咖啡堿是茶葉中主要的生物堿，在生物堿中占比最大，也是構(gòu)成茶滋味苦澀的原因之一。前人研究發(fā)現(xiàn)咖啡堿含量低于4.5%時(shí)與茶葉品質(zhì)呈顯著正相關(guān)，本研究中ZY-1和ZY-2的咖啡堿含量在12.03～33.16 mg/g，因此推測用紫芽ZY-1和ZY-2加工的茶產(chǎn)品中咖啡堿對(duì)茶品質(zhì)起積極的作用。5、8和10月ZY-1和ZY-2的可可堿含量顯著低于綠芽品系；ZY-1和ZY-2的咖啡堿含量均在10月最低，但3和8月均顯著高于5和10月，與王璽（2013）研究中不同季節(jié)咖啡堿含量春秋季均大于夏季較為一致。相關(guān)研究結(jié)果顯示日長、日照和季節(jié)溫度會(huì)引起物質(zhì)組分如生物堿等的季節(jié)性變化（Wei et al.，2010；Bhandari et al.，2019），本研究中隨著季節(jié)的推移ZY-1和ZY-2的茶葉堿含量顯著降低，主要也是受其環(huán)境變化的影響，尤其是ZY-1的茶葉堿在前3個(gè)季節(jié)顯著高于1.00 mg/g，可作為高茶葉堿資源（曾珊珊等，2022）。ZY-1和ZY-2的咖啡堿含量和生物堿分別于3和8月（春秋季）較高，可能由于春季之前基肥供應(yīng)為茶樹生長提供了大量營養(yǎng)，而秋季望謨地區(qū)環(huán)境因子較適宜茶樹氮代謝加快，使得咖啡堿等生物堿含量增加。

3. 3 不同季節(jié)紫芽茶樹品系ZY-1和ZY-2兒茶素組分變化

兒茶素是茶樹中主要的多酚類物質(zhì)，具有良好的生理功能，是茶葉苦澀味和收斂性品質(zhì)的重要影響因子，其各組分含量及比例起關(guān)鍵作用。GA常連接在兒茶素的羥基從而形成酯型兒茶素衍生物，參與兒茶素的氧化影響茶葉品質(zhì)，是一種重要的酚酸類物質(zhì)（張建勇等，2020）。不同茶樹品種的茶葉兒茶素組分在全年的變化規(guī)律明顯，越冬期前兒茶素含量處于低水平，而春夏秋其合成代謝較活躍，除受茶樹品種影響外，還極易受土壤和氣候環(huán)境等外界氣候條件的綜合影響（王璽，2013）。本研究中不同季節(jié)不同茶樹材料ZY-1和ZY-2的酯型兒茶素和兒茶素總量在3和8月積累較多，主要是由于望謨地區(qū)3和8月光照強(qiáng)、溫度適度等生態(tài)因子較適于兒茶素類物質(zhì)大量積累。2個(gè)紫芽品系茶樹的非酯型兒茶素的分布規(guī)律大致為ZY-2>ZY-1，主要是由于望謨地區(qū)山高谷深、溝壑縱橫，氣候溫良，晝夜溫差較大，受環(huán)境和遺傳決定因素的影響，不同季節(jié)不同葉色茶樹兒茶素代謝能力存在一定差異。兒茶素類化合物是茶葉苦澀味和收斂性品質(zhì)的重要影響因子，其各組分含量及比例起關(guān)鍵作用。EGCG是兒茶素的核心組分，含量最高，也是關(guān)鍵的活性成分，不同季節(jié)ZY-1和ZY-2的EGCG含量呈現(xiàn)先降低后升高再降低的趨勢，3和8月積累較高。EGCG3"Me為兒茶素的甲基化產(chǎn)物，ZY-1和ZY-2的EGCG3"Me于8月含量較高，與前人研究中EGCG3"Me在秋季積累含量較高一致（Luo et al.，2019），GCG含量及酯型兒茶素和兒茶素總量整體上高積累量出現(xiàn)在5和8月，與黃慧清等（2022）得出夏秋季兒茶素較春季高結(jié)果相似；非酯型兒茶素不是兒茶素合成反應(yīng)的最終產(chǎn)物，在茶樹體內(nèi)的含量受茶樹新梢發(fā)育、季節(jié)環(huán)境和下游反應(yīng)的影響。紫芽茶樹品系ZY-1和ZY-2的EC、EGC、非酯型兒茶素均在10月達(dá)最高，與張憲林等（2009）的研究得出不同季節(jié)兒茶素單體的含量隨季節(jié)變化而變化的結(jié)果相似。因此可利用不同季節(jié)兒茶素組分特點(diǎn)進(jìn)行相應(yīng)茶產(chǎn)品的加工，從而獲得最佳茶產(chǎn)品。

同一季節(jié)兒茶素總量的變化與綠茶品質(zhì)呈高度正相關(guān)關(guān)系，但在不同季節(jié)則有所區(qū)別，兒茶素指數(shù)能在一定程度上較準(zhǔn)確地反映茶葉嫩度及茶葉品質(zhì)（周玉忠等，2018），芽葉的持嫩性隨兒茶素指數(shù)增大而持嫩表現(xiàn)越好，從而茶葉品質(zhì)提升，反之茶葉品質(zhì)則越低。而本研究中由兒茶素指數(shù)可知，ZY-1和ZY-2的持嫩性均較好，其次為紫芽ZY-2和綠芽；結(jié)合高含量游離氨基酸總量、高含量可溶性糖和酚氨比等指標(biāo)，可發(fā)現(xiàn)紫芽茶樹品系ZY-1和ZY-2均可適合加工綠茶和紅茶，尤其是新型高花青素功能型茶產(chǎn)品。

4 結(jié)論

茶樹葉色紫化程度不同的茶葉品系，其在不同季節(jié)主要生化成分含量存在差異，紫芽茶樹品系更適制綠茶和功能型高花青素茶產(chǎn)品。

參考文獻(xiàn)：

薄曉培，王夢馨，崔林，王金和，韓寶瑜. 2016. 茶樹3類滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)與冬春低溫相關(guān)性及其品種間的差異評(píng)價(jià)［J］. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，49（19）：3807-3817. ［Bo X P， Wang M X， Cui L， Wang J H， Han B Y. 2016. Evaluation on correlations of three kinds of osmoregulation substances in tea fresh leaves with low temperature during winter and spring respectively and their difference among cultivars［J］. Scientia Agricultura Sinica，49（19）：3807-3817.］ doi：10.3864/j.issn.0578-1752.2016.19.012.

曹冰冰，王秋霜，秦丹丹，傅冬和，方開星，姜曉輝，李紅建，王青，潘晨東，李波，吳華玲. 2020. 紅紫芽茶花青素合成關(guān)鍵酶活性與重要酚類物質(zhì)相關(guān)性研究［J］. 茶葉科學(xué)，40（6）：724-738. ［Cao B B， Wang Q S， Qin D D， Fu D H， Fang K X， Jiang X H， Li H J， Wang Q， Pan C D， Li B， Wu H L. 2020. Study on the correlation between the activities of key enzymes involving in anthocyanin synthesis and the contents of important polyphenols in purple tea［J］. Journal of Tea Science，40（6）：724-738.］ doi：10.13305/j.cnki.jts.20201109.001.

陳建姣，呂智棟，劉婕，張晨禹，李云飛，陳佳豪，沈程文. 2022. 遮陰及復(fù)光下茶樹新梢主要碳氮代謝物動(dòng)態(tài)變化［J］. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，53（2）：314-323. ［Chen J J， Lü Z D， Liu J， Zhang C Y， Li Y F， Chen J H， Shen C W. 2022. Danamic changes of main carbon and nitrogen metabolites in tea plants（Camellia sinensis L.） shoots under shading and re-lighting［J］. Journal of Southern Agriculture，53（2）：314-323.］ doi：10.19303/j.issn.1008-0384. 2014.10.011.

龔志華，肖文軍，蔡利婭，蕭力爭，鐘林夏. 2006. 茶葉固樣方法研究［J］. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），（1）：45-48. ［Gong Z H， Xiao W J， Cai L Y， Xiao L Z， Zhong L X. 2006. On tea fixing method［J］. Journal of Hunan Agricultural University（Natural Sciences），（1）：45-48.］ doi：10.3321/j.issn：1007-1032.2006.01.012.

黃彪，劉文靜，吳建鴻，吳建衍. 2020. 不同季節(jié)對(duì)金牡丹烏龍茶主要營養(yǎng)與活性成分影響［J］. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)，11（20）：7418-7423. ［Huang B， Liu W J， Wu J H， Wu J Y. 2020. Effect of different plucking seasons on main nutrients and bioactive components of Jinmudan Oolong tea［J］. Journal of Food Safety & Quality，11（20）：7418-7423.］ doi：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts. 2020.20.042.

黃慧清，楊云，柳鎮(zhèn)章，方舟，林佳琪，湛水秀，占鑫怡，陳常頌，孫云. 2022. 茶樹新品系‘606烏龍茶在不同季節(jié)的品質(zhì)分析［J/OL］. 2022-12-09. 食品工業(yè)科技. ［Huang H Q， Yang Y， Liu Z Z， Fang Z， Lin J Q， Zhan S X， Zhan X Y， Chen C S， Sun Y. 2022. Quality analysis of a new tea line ‘606 Oolong tea in different seasons［J/OL］. 2022-12-09. Science and Technology of Food Industry.］ doi：10.13386/j.issn1002-0306.2022080303.

黃秀瓊. 2014. 不同引種地區(qū)保靖黃金茶1號(hào)品質(zhì)周年變化規(guī)律研究［D］. 長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué). ［Huang X Q. 2014. research on annual variation of quality of Baojing Huangjin 1 tea introduction of different area［D］. Changsha： Hunan Agricultural University.］

蔣會(huì)兵，孫云南，李梅，戴偉東，宋維希，田易萍，夏麗飛，陳林波. 2018. 紫娟茶樹葉片不同發(fā)育期花青素積累及合成相關(guān)基因的表達(dá)［J］. 茶葉科學(xué)，38（2）：174-182. ［Jiang H B， Sun Y N， Li M， Dai W D， Song W X， Tian Y P， Xia L F， Chen L B. 2018. Anthocyanin accumulation and expression of synthesis-related genes in leaves of dfferent developmental stages in Camellia sinensis cv. Zijuan［J］. Journal of Tea Science，38（2）：174-182.］ doi：10.13305/j.cnki.jts.2018.02.008.

金可，黃建安，熊立瑰，劉碩謙，覃小洪，彭靖，李銀花，李娟. 2021. 黃化變異茶樹石門黃葉理化分析及茶氨酸相關(guān)基因表達(dá)研究［J］. 茶葉科學(xué)，41（1）：40-47. ［Jin K， Huang J A， Xiong L G， Liu S Q， Qin X H， Peng J， Li Y H， Li J. 2021. Research of theanine-related genes expressed in etiolated tea plant（Camellia sinensis）［J］. Journal of Tea Science，41（1）：40-47.］ doi：10.13305/j.cnki.jts.2021. 01.005.

李智. 2014. 不同環(huán)境因子調(diào)控茶樹紫色芽葉形成的分子機(jī)制研究［D］. 泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué). ［Li Z. 2014. Effect of the main environmental factors on anthocyanin content and related genes expression of purple tea shoots［J］. Taian： Shandong Agricultural University.］

馬存強(qiáng)，楊超，周斌星，任小盈，李靜，李發(fā)志. 2014. 微生物對(duì)茶葉中嘌呤生物堿代謝的研究進(jìn)展［J］. 食品科學(xué)，35（21）：292-296. ［Ma C Q， Yang C， Zhou B X， Ren X Y， Li J， Li Z F. 2014. Recent progress in microbial metabolism of purine alkaloid in fermented tea［J］. Food Science，35（21）：292-296.］ doi：10.7506/spkx1002-6630-201421057.

祁丹丹. 2016. 基于代謝組學(xué)的綠茶滋味的研究［D］. 北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院. ［Qi D D. 2016. Study of the taste quality of green tea based on metabolomics analysis［D］. Beijing： Chinese Academy of Agricultural Sciences.］

譚曉琴，李偉，王聰明，黃嘉誠，楊洋，唐茜. 2021. ‘紫嫣和‘紫娟茶樹花青素及主要生化成分季節(jié)性的變化［J］. 熱帶作物學(xué)報(bào)，42（1）：168-174. ［Tan X Q， Li W， Wang C M， Huang J C， Yang Y， Tang Q. 2021. Seasonal changes of anthocyanins and main biochemical components in ‘Ziyan and ‘Zijuan tea plants［J］. Chinese Journal of Tropical Crops，42（1）：168-174.］ doi：10.3969/j.issn.1000-2561.2021.01.023.

王麗麗，陳鍵，宋振碩，陳林. 2014. 茶葉中沒食子酸、兒茶素類和生物堿的HPLC檢測方法研究［J］. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，29（10）：987-994. ［Wang L L， Chen J， Song Z S， Chen L. 2014. Simultaneous HPLC determination of gallic acid， catechins and alkaloids in tea［J］. Fujian Journal of Agricultural Sciences，29（10）：987-994.］ doi：10.19303/j.issn. 1008-0384.2014.10.011.

王璽. 2013. 茶樹葉片中主要特征性物質(zhì)的年變化規(guī)律研究［D］. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué). ［Wang X. 2013. A study on annual variation characteristics of the major compounds in tea leaves［D］. Hefei：Anhui Agricultural University.］

吳穎，曲愛麗，紀(jì)榮全，王程安. 2022. 高花青素柏塘紫芽茶適制性的研究［J］. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)，13（12）：3875-3883. ［Wu Y， Qu A L， Ji R Q， Wang C A. 2022. Study on the manufacture suitability of anthocyanin-rich Botang ziya tea［J］. Journal of Food Safety & Quality，13（12）：3875-3883.］ doi：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2022. 12.053.

楊興榮，矣兵，李友勇，蔣會(huì)兵，段志芬，尚衛(wèi)瓊，楊毅堅(jiān)，楊盛美，劉本英. 2015. 紫芽茶樹種質(zhì)資源主要生化成分差異性分析［J］. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，47（12）：14-19. ［Yang X R， Yi B， Li Y Y， Jiang H B， Duan Z F， Shang W Q， Yang Y J， Yang S M， Liu B Y. 2015. Analysis on differences of major biochemical components of purple-bud tea tree germplasm resources［J］. Shandong Agricultural Sciences，47（12）：14-19.］ doi：10.14083/j.issn.1001-4942.2015. 12.004.

游小妹，鐘秋生，林鄭和，陳志輝，單睿陽，陳常頌. 2018. 18個(gè)紫芽新品系芽葉特性及生化成分分析［J］. 茶葉學(xué)報(bào)，59（1）：43-46. ［You X M， Zhong Q S， Lin Z H， Chen Z H， Shan R H， Chen C S. 2018. Characteristics and biochemical composition of purple spring shoots of eighteen tea germplasms［J］. Acta Tea Sinica，59（1）：43-46.］ doi：10.3969/j.issn.1007-4872.2018.01.009.

曾珊珊，陳瀟敏，邵淑賢，廖龍華，吳文晞，趙峰，葉乃興. 2022. 福建苦茶資源不同葉位兒茶素及嘌呤生物堿組分分析［J］. 茶葉學(xué)報(bào)，63（2）：65-72. ［Zeng S S， Chen X M， Shao S X， Liao L H， Wu W X， Zhao F， Ye N X. 2022. Catechins and purine alkaloids in leaves located differently on a plant of various bitter teas in Fujian［J］. Acta Tea Sinica，63（2）：65-72.］ doi：10.3969/j.issn.1007-4872.2022.02.002.

張建勇，王偉偉，崔宏春，薛金金，江和源. 2020. 溫度對(duì)茶多酚制品中兒茶素、沒食子酸和咖啡堿貯藏穩(wěn)定性的影響［J］. 中國茶葉加工，162（4）：69-75. ［Zhang J Y， Wang W W， Cui H C， Xue J J， Jiang H Y. 2020. Effect of temperature on storage stability of tea catechins， gallic acid and caffeine in tea polyphenols products［J］. China Tea Processing，162（4）：69-75.］ doi：10.15905/j.cnki.33-1157/ts.2020.04.011.

張憲林，高麗萍，夏濤，劉亞軍，高可君. 2009. 茶樹新梢中非酯型兒茶素及其合成酶的變化規(guī)律［J］. 茶葉科學(xué)，29（5）：365-371. ［Zhang X L， Gao L P， Xia T， Liu Y J， Gao K J. 2009. Study on the changes of non-galloylated catechins and relative enzymes in tea shoots［J］. Journal of Tea Science，29（5）：365-371.］ doi：10.3969/j.issn.1000-369X.2009.05.006.

張向娜，熊立瑰，溫貝貝，王坤波，劉仲華，黃建安，李娟. 2020. 茶樹葉色變異研究進(jìn)展［J］. 植物生理學(xué)報(bào)，56（4）：643-653. ［Zhang X N， Xiong L G， Wen B B， Wang K B， Liu Z H， Huang J A， Li J. 2020. Advances in leaf color variation of tea plant（Camellia sinensis）［J］. Plant Physiology Journal，56（4）：643-653.］ doi：10.13592/j.cnki.ppj.2019.0378.

周玉忠，陳林波，田易萍，楊方慧，朱興正，陳玫，羅瓊仙，陳春林，鄧少春. 2018. 云南大葉茶新材料兒茶素組分含量季節(jié)變化分析［J］. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，34（32）：78-82. ［Zhou Y Z， Chen L B， Tian Y P， Yang F H， Zhu X Z， Chen M， Luo Q X， Chen C L， Deng S C. 2018. Seasonal variation of catechins components content of new materials of Yunnan large-leaf tea［J］. Chinese Agricultural Science Bulletin，34（32）：78-82.］ doi：10.11924/j.issn.1000-6850.casb17110114.

周喆，孫威江，唐秀華，陳志丹. 2018. 紫芽茶樹不同季節(jié)主要生化成分變化分析［J］. 熱帶作物學(xué)報(bào)，39（5）：888-893. ［Zhou Z，Sun W J，Tang X H，Chen Z D. 2018. The ana-lysis of main biochemical components of purple shoots of tea plant in different seasons［J］. Chinese Journal of Tropical Crops，39（5）：888-893.］ doi：10.3969/j.issn. 1000-2561.2018.05.009.

Bhandari K， De B， Goswami T K. 2019. Evidence based seasonal variances in catechin and caffeine content of tea［J］. SN Applied Sciences， 1. doi：10.1007/s42452-019-1766-8.

Deka H， Barman T， Dutta J， Devi A， Tamuly P， Paul R K， Karak T. 2020. Catechin and caffeine content of tea（Camellia sinensis L.） leaf significantly differ with seasonal variation： A study on popular cultivars in North East India［J］. Journal of Food Composition and Analysis，96：103684. doi：10.1016/j.jfca.2020.103684.

Luo Y， Yu S S， Li J， Li Q， Wang K B， Huang J A， Liu Z H. 2019. Characterization of the transcriptional regulator CsbHLH62 that negatively regulates EGCG3"Me biosynthesis in Camellia sinensis［J］. Gene，699：8-15. doi：10.1016/j.gene.2019.03.002.

Wang L Y， Wei K， Jiang Y W， Cheng H， Zhou J， Zhang C C. 2011. Seasonal climate effects on flavanols and purine alkaloids of tea（Camellia sinensis L.）［J］. European Food Research and Technology，233：1049-1055. doi：10.1007/s 00217-011-1588-4.

Wei K， Wang L Y， Zhou J， He W， Zeng J M， Jiang Y W， Cheng H. 2010. Catechin contents in tea（Camellia sinensis） as affected by cultivar and environment and their relation to chlorophyll contents［J］. Food Chemistry，125（1）. doi：10.1016/j.foodchem.2010.08.029.

Zhu J Y， Xu Q S， Zhao S Q， Xia X B， Yan X M， An Y L， Mi X Z， Guo L X， Samarina L， Wei C L. 2020. Comprehensive co-expression analysis provides novel insights into temporal variation of flavonoids in fresh leaves of the tea plant（Camellia sinensis）［J］. Plant Scien-ce，290. doi：10.1016/j.plantsci.2019.110306.

（責(zé)任編輯 鄧慧靈）