鄭自華，吳雙燕，韋小歡，梁桂燕，張瑞門，韋英明*

（1.廣西大學(xué)農(nóng)牧產(chǎn)業(yè)發(fā)展研究院，廣西南寧 530004；2.鹿寨縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣西柳州 545600；3.羅城仫佬族自治縣水產(chǎn)畜牧養(yǎng)殖服務(wù)中心，廣西河池 546300；4.廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西南寧 530004）

羅城仫佬族自治縣地處大石山區(qū)，氣候炎熱高濕，生態(tài)環(huán)境比較脆弱，是廣西最后脫貧 “摘帽” 的8 個(gè)縣之一。肉牛養(yǎng)殖是羅城自治縣的特色產(chǎn)業(yè)，但是當(dāng)?shù)厝馀．a(chǎn)業(yè)的生產(chǎn)技術(shù)相對落后，母牛繁殖率低、良種率低等因素明顯制約著當(dāng)?shù)氐娜馀．a(chǎn)業(yè)發(fā)展。同期發(fā)情技術(shù)能有效地調(diào)節(jié)母牛的發(fā)情周期，顯著改善繁殖效果，縮短產(chǎn)犢間隔，進(jìn)而提高繁殖效率，是肉牛生產(chǎn)中常用的技術(shù)措施[1]。通過集成和推廣同期發(fā)情、人工授精等繁殖新技術(shù)，引入良種養(yǎng)殖和良種改良本地母牛相結(jié)合的途徑，可快速提高地方良種牛的比率，解決肉牛良種緊缺的問題，提高當(dāng)?shù)氐牧挤N養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益，促進(jìn)肉牛產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展。

同期發(fā)情—人工授精技術(shù)是通過利用外源激素人為調(diào)控母畜的發(fā)情時(shí)間，使母畜集中在一段時(shí)間內(nèi)發(fā)情排卵，再對母畜進(jìn)行定時(shí)人工輸精配種的技術(shù)，使用同期發(fā)情技術(shù)中實(shí)現(xiàn)控制母畜發(fā)情時(shí)間，使母畜可以集中配種、妊娠、產(chǎn)犢，提高集約化養(yǎng)殖的生產(chǎn)效率和經(jīng)濟(jì)效益，該技術(shù)在現(xiàn)代畜牧業(yè)生產(chǎn)中已被廣泛應(yīng)用。但同期發(fā)情—人工授精技術(shù)的效果受到多方面因素的影響，可概括為兩個(gè)大方面的因素，一是內(nèi)部因素，如牛的品種、年齡、繁殖狀況、所處的發(fā)情周期、體況和遺傳基因等；二是外部因素，包括激素處理方案、季節(jié)、工作人員的技術(shù)操作水平等[2]。目前生產(chǎn)上常用孕酮陰道栓（Controlled internal drug release，CIDR）、促性腺激素釋放激素（Gonadotropin-releasing hormone，GnRH）和前列腺素（Prostaglandin，PG）等外源激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，其中以 “GnRH+PG+GnRH” 三種激素結(jié)合使用的方式最為普遍，岳成廣等[2]用三種不同的同期發(fā)情處理方案在夏冬兩季對安格斯牛進(jìn)行同期發(fā)情處理（方案Ⅰ：PG+PG；方案Ⅱ：CIDR+PG+GnRH；方案Ⅲ：GnRH+PG+GnRH）；三組的同期發(fā)情率分別76.70%、90.56%和85.00%，差異不顯著；3 組同期發(fā)情方案在夏冬兩季的同期發(fā)情率均無顯著差異。史佳斌等[3]同樣采用3 種不同處理方案（方案I：CIDR+PGF2a+GnRH；方案Ⅱ：CIDR+GnRH+PGF2a+GnRH；方案Ⅲ：GnRH+PGF2a+GnRH)在夏秋季兩季對延邊黃牛母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)方案Ⅱ的秋季同期發(fā)情率(88.24±5.55)%顯著高于夏季同期發(fā)情率(66.67±4.33)%；但3 組處理方案之間的夏季、秋季同期發(fā)情率對比發(fā)現(xiàn)無顯著性差異。有很多研究報(bào)道，母畜的繁殖性能與不同季節(jié)的溫度、日照和光照時(shí)間等因素有相關(guān)。本文通過探討在不同月份進(jìn)行相同方案的同期發(fā)情處理對西門塔爾牛人工輸精效果的影響，以期對廣西大石山區(qū)地區(qū)母牛繁育方案制訂提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)?zāi)概?/p>

在廣西大石山區(qū)羅城仫佬族自治縣某牛場選擇186 頭西門塔爾能繁母牛，空懷，無生殖道疾病，且經(jīng)直腸檢查觸摸卵巢有功能性黃體。試驗(yàn)時(shí)間為2022 年2—8 月。

1.1.2 凍精

選用西門塔爾良種肉牛凍精，凍精質(zhì)量符合《牛冷凍精液》（GB/T 4143-1984）的規(guī)定。

1.1.3 藥品

前列腺素為氯前列醇注射液（PGF2α），規(guī)格2mL：0.2mg/ 支，齊魯動(dòng)物保健有限公司；戈那瑞林注射液（主要成分為GnRH），規(guī)格2mL：100μg/支，上海全宇生物科技動(dòng)物藥業(yè)有限公司。

1.1.4 器材設(shè)備

0.25 mL 細(xì)管凍精規(guī)格母牛專用輸精槍（廣西蔣氏動(dòng)物用品有限公司）。

1.2 試驗(yàn)處理方法

1.2.1 試驗(yàn)分組及同期發(fā)情法

在2—8 月，每月用同一處理方法同期發(fā)情處理一批母牛，即在上午同一時(shí)段對試驗(yàn)牛肌肉注射氯前列醇注射液2 支（4mL）和戈那瑞林注射液4 支（8mL）。如表1 所示，共處理7 批次母牛。

表1 同期發(fā)情各組處理情況

1.2.2 發(fā)情判定

在進(jìn)行 “PG+GnRH” 激素處理后的第2～5天觀察母牛發(fā)情情況，使用試情公?；蛴^察母牛相互爬跨情況，如果有爬跨或接收爬跨情況，即進(jìn)一步通過直腸檢查進(jìn)行發(fā)情鑒定，如母牛陰戶充血腫脹，陰道粘膜潮紅，陰道有黏液即判定發(fā)情。

1.2.3 人工授精

一般在母牛發(fā)情表現(xiàn)后24h 內(nèi)進(jìn)行人工輸精，具體時(shí)間需結(jié)合母牛陰道黏液情況確定最適輸精時(shí)間，通過直腸檢查觀察陰道黏液粘稠渾濁拉絲易斷時(shí)為最適時(shí)間。進(jìn)行一次人工授精，輸精量為0.25mL。輸精流程為將輸精器械清洗和消毒，保定母牛，用手掏凈母牛直腸宿糞后，再用溫水清洗母牛外陰部并擦拭干凈。將按解凍精液規(guī)范解凍的精液，通過直腸把握子宮頸輸精方式進(jìn)行子宮體輸精，輸精槍打出精液后緩慢抽出輸精槍，并稍把握抬高子宮頸片刻防止精液倒流再緩慢從直腸中抽出手。

1.2.4 妊娠檢查

人工授精2～3 個(gè)月即對母牛進(jìn)行直腸妊娠檢查，通過直腸檢查觸摸子宮的變化判定母牛是否受孕，懷孕母牛的兩側(cè)子宮相比大小不一，子宮間溝明顯，孕角子宮較粗，當(dāng)直腸檢查觸摸子宮有波動(dòng)感時(shí)，即可判定為受胎牛。

2 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)

使用SPSS 26.0 對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和t 檢驗(yàn)，對比組間數(shù)據(jù)差異性，P＞0.05 表示差異不顯著，P＜0.05 表示差異顯著。

3 試驗(yàn)結(jié)果

對186 頭西門塔爾能繁母牛進(jìn)行 “PG+GnRH” 激素處理及人工授精，由表2 可以看出，在不同月份對西門塔爾能繁母牛進(jìn)行“PG+GnRH” 激素處理，后對發(fā)情的母牛進(jìn)行人工輸精1 次，情期受胎率平均為52.8%。在2—5月份進(jìn)行西門塔爾能繁母牛同期發(fā)情及人工授精技術(shù)處理，受胎率為62%以上，這4 個(gè)月份母牛受胎率差異不顯著（P＞0.05）；在6—8 月份進(jìn)行西門塔爾能繁母牛同期發(fā)情及人工授精技術(shù)處理，受胎率為36%左右，這3 個(gè)月同樣差異不顯著（P＞0.05)；夏季（6—8 月）比春季（2—5月）受胎率降低28%左右，差異顯著（P＜0.05)。

表2 同期發(fā)情及人工授精效果統(tǒng)計(jì)表

2022 年2—4 月，聯(lián)合縣級農(nóng)業(yè)部門、牛配種員，針對舍飼條件下，在羅城縣對能繁母牛進(jìn)行“PG+GnRH” 激素處理及人工授精，累計(jì)實(shí)現(xiàn)同期發(fā)情與配種母牛16767 頭，發(fā)情率達(dá)93%，并持續(xù)跟蹤、記錄母牛產(chǎn)仔情況。從記錄結(jié)果來看，截至2023 年2 月，目標(biāo)母牛群累計(jì)產(chǎn)犢12509 頭，產(chǎn)仔率為74.6%，上一年相同時(shí)期母牛自然發(fā)情采用本交和人工輸精方式產(chǎn)犢數(shù)量10779 頭，產(chǎn)仔率為64.3%，相比母牛的繁殖率提高了10.3%。在春秋季節(jié)氣溫適宜的季節(jié)采用同期發(fā)情—定時(shí)輸精技術(shù)集中處理空懷能繁母牛，使人工授精工作得以集中開展，有效的提高了羅城縣母牛的繁殖率。

4 討論

目前利用外源激素進(jìn)行母牛同期發(fā)情的模式大致可分兩種類型：第一類是通過延長母牛發(fā)情周期中的黃體期時(shí)間，常用方法是應(yīng)用孕酮抑制卵泡的發(fā)育，通過放置孕酮陰道栓（CIDR）或皮下埋植方式，使得母畜一直處于黃體期，抑制發(fā)情，而后在同一時(shí)間撤掉孕酮后讓母畜同一時(shí)間集中發(fā)情；第二類是人為縮短黃體期，使用PG或類似物溶解黃體使得卵泡提前發(fā)育，提前進(jìn)入發(fā)情期[4-6]。母牛發(fā)情周期約為18～24d，平均21d，PG 只對發(fā)情周期5～18d 的功能性黃體有溶解作用，如果應(yīng)用PG 進(jìn)行同期發(fā)情處理時(shí)母畜的情期不處于這個(gè)時(shí)段，則激素處理無效，母畜不出現(xiàn)發(fā)情[7]。

氯前列烯醇是PGF2α的類似物,它既具有與PGF2α相似的藥理作用和臨床用途，又克服了PGF2α在體內(nèi)易被代謝破壞,性質(zhì)不穩(wěn)定等缺點(diǎn)，因?yàn)槠渚哂信cPGF2α類似的促進(jìn)黃體溶解的作用，所以常用它來誘導(dǎo)各種家畜的同期發(fā)情[1]。本次實(shí)驗(yàn)采用PGF2α-GnRH 處理母牛后，在2～5d 內(nèi)母牛陸續(xù)出現(xiàn)發(fā)情，發(fā)情率達(dá)95%，取得了很好的發(fā)情效果，與段洪峰等[8]采用CIDR-PGF2α-GnRH類似處理獲得的發(fā)情率相似，其主要原因可能是本次同期發(fā)情的母牛均是處于發(fā)情間期卵巢具有功能性黃體的能繁母牛。氯前列烯醇對功能性黃體有強(qiáng)烈的溶解作用，且兩次注射法優(yōu)于一次注射法，其原因是氯前列烯醇對功能性黃體有溶解作用，而對新生黃體無溶解作用，兩次注射可避免因作用于早期黃體或末期黃體而無效，有更大概率直接作用于功能黃體[4]。趙維等[9]以兩種方式氯前列烯醇誘導(dǎo)紅安格斯牛同期發(fā)情，一次肌注法和二次肌注法（間隔11d）的同期發(fā)情率分別達(dá)77.7%和96.4%，二次注射法同期發(fā)情效果要優(yōu)于一次注射法，獲得更高的同期發(fā)情率。PGF2α-GnRH 同期處理方法，對促進(jìn)舍養(yǎng)母牛發(fā)情效果明顯，能提高舍飼規(guī)?；馀ｐB(yǎng)殖場的配種效率。同在一定時(shí)期范圍內(nèi)，與自由本交相比，該方法可使母牛繁殖率提高10.3%，大大提高了牛群產(chǎn)犢效率。此外，同期發(fā)情定時(shí)輸精能否取得好的效果，取決于是否掌握科學(xué)正確的同期發(fā)情處理方法，規(guī)范的輸精操作和適宜的輸精時(shí)間，此次試驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作，都是由經(jīng)驗(yàn)豐富的配種員進(jìn)行，所以取得了較理想的效果。

母牛同期發(fā)情受胎率在不同季節(jié)受氣溫等氣候因素影響，而存在差異性，呼格吉勒圖等[10]對高寒地區(qū)不同季節(jié)對安格斯和西門塔爾母牛同期發(fā)情效果的影響開展研究，結(jié)果顯示高寒地區(qū)不同季節(jié)同期發(fā)情和人工授精受胎率差異顯著，夏季同期發(fā)情效果好于冬季，因?yàn)楦吆貐^(qū)夏季溫度相對適宜，冬季氣溫過于低影響到母牛的內(nèi)分泌功能進(jìn)而影響到母牛的繁殖性能，這與本文結(jié)論相類似，廣西夏季高溫對母牛繁殖影響較大，而春季氣溫較適宜所以母牛生殖生理功能較為正常，因此進(jìn)行同期發(fā)情定時(shí)輸精受胎率的相對較高。王前[11]在不同季節(jié)使用氯前列烯醇對廣州的奶牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，比較不同季節(jié)自然發(fā)情和同期發(fā)情人工授精受胎率，發(fā)現(xiàn)季節(jié)因素對奶牛同期發(fā)情受胎率有影響，但不如對自然發(fā)情情期受胎率影響大；奶牛炎熱的夏季自然發(fā)情人工輸精受胎率較低，同期發(fā)情處理可提高人工授精受胎率，高溫的季節(jié)奶牛發(fā)情率和受胎率降低，原因主要是可能高溫會導(dǎo)致奶牛體溫升高，內(nèi)分泌紊亂，而秋冬季節(jié)奶牛自然發(fā)情人工輸精受胎率較高，同期發(fā)情對其影響不大。不同季節(jié)的季節(jié)溫度、光照等因素影響，會導(dǎo)致家畜的繁殖機(jī)能差異很大，楊芬俠等[12]采用GnRH+一次PG 法探討不同季節(jié)、體況因素對安格斯牛的同期發(fā)情的影響，其結(jié)果表明，GnRH+一次PG 法能獲得較高的同期發(fā)情率，冬春季（11—4月）的同期發(fā)情率比夏秋季（5—10 月）略高，夏秋季的同期發(fā)情率為86.21%，冬春季為90.00%，兩者差異不顯著，但經(jīng)產(chǎn)母牛的同期發(fā)情處理效果稍優(yōu)于育成牛。牛同期發(fā)情不宜在太冷、太熱的季節(jié)進(jìn)行，最佳操作時(shí)間是秋季，膘情好的母牛也可在春季開展[13]。本次試驗(yàn)通過在不同的月份同期發(fā)情處理，在2—5 月進(jìn)行西門塔爾能繁母牛同期發(fā)情及人工授精技術(shù)處理，受胎率達(dá)60%以上；在6—8 月進(jìn)行西門塔爾能繁母牛同期發(fā)情及人工授精技術(shù)處理，受胎率為33%左右，比2—5 月受胎率低30%左右，可見在廣西大石山區(qū)黃牛同期發(fā)情定時(shí)輸精的效果存在季節(jié)性差異，廣西2—5 月春季氣溫較溫和，對于肉牛生長較適宜，而6—8 月氣候高溫高濕，母牛熱應(yīng)激反應(yīng)較大，可能對母牛的生殖內(nèi)分泌產(chǎn)生較大影響，導(dǎo)致氣候炎熱的夏季受胎率明顯下降。

5 結(jié)論

廣西夏季炎熱高溫高濕，對母牛的生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)影響大，母牛同期發(fā)情人工授精受胎率夏季和春季差異顯著，因?yàn)榇杭練鉁叵鄬m宜，同期發(fā)情、定時(shí)輸精技術(shù)運(yùn)用能獲得相對較高的受胎率，推薦能繁母牛的同期發(fā)情及人工授精技術(shù)運(yùn)用在春季開展。