王宇婷,安可婧,徐玉娟*,彭健,余元善,吳繼軍,肖更生

1(仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院 輕工食品學(xué)院,廣東 廣州,510225)2(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部功能食品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省農(nóng)產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東 廣州,510610)

荔枝(Litchichinensis)屬于無患子科荔枝屬常綠喬木[1],是我國最具特色的熱帶、亞熱帶水果之一,含有豐富的營養(yǎng)和獨(dú)特的風(fēng)味,深受消費(fèi)者的喜愛。荔枝采收季節(jié)集中,其特殊的生理特征使得果實(shí)采摘后極易發(fā)生變色變質(zhì),嚴(yán)重影響了新鮮荔枝的銷路,據(jù)統(tǒng)計(jì)每年荔枝因此而造成的損失率高達(dá)25%～30%[2]。因此,利用現(xiàn)代食品加工技術(shù)將相對過剩的荔枝進(jìn)行深加工、實(shí)現(xiàn)資源充分利用是保障荔枝產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展,提高荔枝附加值的重要途徑。

目前荔枝的加工產(chǎn)品形式主要包括荔枝酒、荔枝醋、荔枝飲料等,在這些產(chǎn)品加工過程中會產(chǎn)生大量皮、核、渣等下腳料,占鮮果重量的40%～50%。這些副產(chǎn)物因含有較高的糖分、果膠等營養(yǎng)物質(zhì),極易被微生物利用而發(fā)生變質(zhì),造成環(huán)境的污染[3]。荔枝果渣具有荔枝特有的香氣成分,富含膳食纖維、酚類和多糖等營養(yǎng)成分,但目前果渣主要被用于飼料行業(yè),缺乏高附加值產(chǎn)品。荔枝果粉可作為食品基料用于面包、蛋糕、飲料、冰淇淋等食品中,因應(yīng)用廣泛、營養(yǎng)豐富、風(fēng)味宜人而具有良好的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和廣闊的市場前景。梁世強(qiáng)[4]在傳統(tǒng)米粉中加入了荔枝果粉,改善了米粉的風(fēng)味,提高了米粉的營養(yǎng)價(jià)值;熊雄[5]使用荔枝果粉作為膳食補(bǔ)充物添加到面包中,提高面包營養(yǎng)價(jià)值,為功能性面包開發(fā)提供依據(jù)。

荔枝渣加工中存在的主要問題是由于荔枝渣中含有大量的果糖、葡萄糖、蔗糖,由果渣制成的果粉流動性差、容易結(jié)塊,因此在粉劑加工前需要進(jìn)行脫糖處理。目前常用的脫糖方法有醇沉法、酶法、水洗法和發(fā)酵法,醇沉法通常需要借助熱水浸提和超聲輔助提取,所需時(shí)間長,過程繁瑣;酶法脫糖效率高,但成本較高;水洗法操作簡單,成本較低;發(fā)酵法脫糖效率較高,品質(zhì)保留好。劉金亮[6]通過對面粉進(jìn)行二次水洗處理,有效分離了面粉中的淀粉多糖,大大提高了面粉的綜合利用率;郭小宇等[7]采用釀酒酵母L610生產(chǎn)乙醇,發(fā)現(xiàn)該酵母對菊芋總糖的利用率最高可達(dá)86%。目前關(guān)于荔枝渣脫糖的內(nèi)容尚未有研究報(bào)道,基于此,本研究選擇水洗法和發(fā)酵法對荔枝果渣進(jìn)行脫糖效果的比較,以及研究脫糖處理對荔枝果粉分散特性和營養(yǎng)品質(zhì)的影響,旨在為工業(yè)化的脫糖處理技術(shù)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

荔枝渣,廣州順昌源綠色食品有限公司。為淮枝去皮去核后果肉榨汁產(chǎn)生的果渣,儲存于-20 ℃?zhèn)溆谩?/p>

釀酒酵母RV002,安琪酵母股份有限公司;DPPH、Trolox、沒食子酸、葡萄糖、Folin-Ciocalteu,上海源葉生物科技有限公司;其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

WF-A2000榨汁機(jī),美的有限公司;BJ-200高速多功能粉碎機(jī),德清拜杰電器有限公司;ALC-210.4電子分析天平,德國ACCULAB公司;PB-10 pH計(jì),賽多利斯公司;HWS24電熱恒溫水浴鍋,上海一恒科學(xué)儀器有限公司;JW-1042低速離心機(jī),安徽嘉文儀器裝備有限公司;SU8000超高分辨場發(fā)射掃描電子顯微鏡,日立高新技術(shù)公司;UV1800紫外分光光度計(jì),日本島津公司;ST85B3-1真空冷凍干燥機(jī),美國Milirock公司;XDW-6B低溫粉碎機(jī),濟(jì)南達(dá)微機(jī)械有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)流程

(1)未脫糖處理:淮枝去皮去核后果肉榨汁產(chǎn)生的果渣。

(2)發(fā)酵脫糖處理:參考李依娜等[8]的方法。酵母粉于50 mL 37 ℃水中活化12 h;荔枝渣與水1∶1混合后,接入樣品量0.02%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的酵母粉,30 ℃下發(fā)酵24 h后過濾。

(2)水洗脫糖處理:參考劉金亮[6]的方法。稱取一定量的荔枝果渣,加入2倍體積的蒸餾水,于室溫下進(jìn)行打漿處理,濾去蒸餾水,重復(fù)2次洗滌。

(3)冷凍干燥:將未處理、發(fā)酵和水洗后的荔枝渣置于-20 ℃冰箱中預(yù)凍,然后放入真空冷凍干燥機(jī),冷阱溫度為-0 ℃,真空度13 Pa,加熱溫度20 ℃,干燥至水分含量為5%。

(4)粗粉:凍干后的荔枝渣采用高速多功能粉碎機(jī),在轉(zhuǎn)數(shù)和功率分別為28 000 r/min和1 200 W條件下打粉30 s。

(5)超微粉碎:用粗粉進(jìn)行超微粉碎處理,在轉(zhuǎn)數(shù)和功率為910 r/min、3 500 W條件下進(jìn)行不同時(shí)間的超微粉碎。

1.3.2 指標(biāo)測定方法

1.3.2.1 總糖含量及脫糖率

采用3,5-二硝基水楊酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法測定總糖[9]。取0.1 g粗粉和超微粉于50 mL燒杯中加入2.5 mL(6 mol/L)的鹽酸溶液,再加入25 mL蒸餾水搖勻,于70 ℃的水浴中加熱20 min后加入2.5 mL(6 mol/L)的氫氧化鈉溶液,并用蒸餾水定容至50 mL,取其中1 mL水解液與2 mL DNS溶液反應(yīng),沸水浴中加熱顯色反應(yīng)3 min,于540 nm下測定吸光值。脫糖率計(jì)算如公式(1)所示:

(1)

式中:按干基計(jì)算,A,未去糖果渣中總糖含量,mg/g;B,去糖后果渣中總糖含量,mg/g。

1.3.2.2 休止角測定

休止角指在重力場中,粉料堆積體的自由表面處于平衡的極限狀態(tài)時(shí)自由表面與水平面之間的角度。本文采用注入法測定,參考任亞梅等[10]的方法有所改動。將漏斗置于繪圖紙上方一定距離,把物料顆粒加入到漏斗中,使物料顆粒從漏斗下口自由流出,紙與填充物出口的距離H為0.9 cm,直到粉末形成的圓錐尖端接觸到填料的出口,測量每種粉末的錐形直徑(2R)。休止角計(jì)算如公式(2)所示:

(2)

式中:H,漏斗尾端距平板的距離,cm;R,圓錐體半徑,cm。

1.3.2.3 滑角測定

滑角指自然堆放在光滑平板上的粉料,隨平板做傾斜運(yùn)動時(shí),粉料開始滑動時(shí)的平板傾斜角?；堑臏y定常用傾斜法,參考任亞梅等[10]的方法。取3 g微粉置于玻璃平板上,然后將玻璃平板傾斜至約90%微粉移動,玻璃平板與水平面之間形成一夾角,該角即為微粉的滑角?；怯?jì)算如公式(3)所示:

(3)

式中:H,平板的垂直距離,cm;L,平板所對應(yīng)的水平距離,cm。

1.3.2.4 堆積密度測定

堆積密度是把粉塵或者粉料自由填充于某一容器中,在填充完成后所測得的單位體積質(zhì)量。將粉料自然填滿10 mL量筒,然后稱量10 mL體積中的樣品質(zhì)量[11]。堆積密度計(jì)算如公式(4)所示:

(4)

式中:m,樣品的質(zhì)量,g;V,樣品的體積,mL。

1.3.2.5 樣品的提取

準(zhǔn)確稱取5 g荔枝果粉置于25 mL離心管中,加入15 mL 80%(體積分?jǐn)?shù))甲醇溶液,超聲波提取30 min 后進(jìn)行離心(8 000 r/min,10 min),取上清液,再重復(fù)上述操作3次,合并上清液,最后用80%甲醇溶液定容至50 mL,-20 ℃條件下貯存, 備用。

1.3.2.6 總酚測定

采用Folin-Ciocalteu法[12]測定總酚含量。取適當(dāng)稀釋的樣品1 mL,加入2 mL福林酚試劑,振蕩搖勻(避光),加入2 mL 50 g/L碳酸鈉溶液,避光反應(yīng)1 h,于760 nm下測定吸光值。按干基計(jì)算,總酚含量以沒食子酸當(dāng)量表示,得到線性回歸方程為y=0.021 8x+0.073 5(R2=0.994 7)。

1.3.2.7 抗氧化活性測定

(1)DPPH自由基清除率測定

參考GURSOY等[13]的方法。樣品組:1 mL適當(dāng)稀釋后的樣品加入5 mL DPPH溶液;空白組:1 mL水加入5 mL DPPH溶液;調(diào)零組:1 mL樣品稀釋液加入5 mL乙醇溶液,避光反應(yīng)10 min,于517 nm下測吸光值。按干基計(jì)算,以Trolox為標(biāo)準(zhǔn)品,測定不同質(zhì)量濃度下的清除率,得到線性回歸方程為y=1.74x+1.432 2(R2=0.999 9)。

(2)ABTS陽離子自由基清除率測定

參考李斌等[14]的方法。取適當(dāng)稀釋后的樣品0.1 mL,加入3.6 mL ABTS溶液,漩渦振蕩30 s,室溫下避光反應(yīng)30 min,于734 nm波長下測吸光值。按干基計(jì)算,以Trolox為標(biāo)準(zhǔn)品,得到清除率的線性回歸方程為y=-0.001 3x+0.576 1(R2=0.998 4)。

1.3.2.8 電鏡掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope,SEM)

將樣品粉末黏在碳導(dǎo)電膠布上,放入離子濺射儀在15 mA下噴鉑金35 s,噴好后放入電鏡樣品倉。抽真空后打開電壓,加速電壓為1.5 kV,觀察樣品形貌。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用Excel 2015進(jìn)行處理分析,所有指標(biāo)重復(fù)測定3次,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差,采用SPSS軟件進(jìn)行顯著性分析,采用Origin 2018進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 總糖含量變化

如表1所示,未處理的荔枝渣總糖含量為155.61 mg/g,發(fā)酵預(yù)處理和水洗預(yù)處理后荔枝果粉總糖含量變?yōu)?4.77～27.63 mg/g d.b和44.03～49.13 mg/g,糖分脫除率分別為81.89%～84.60%和68.3%～71.59%。說明發(fā)酵預(yù)處理和水洗預(yù)處理均能有效降低總糖含量,發(fā)酵預(yù)處理脫糖效果更顯著。這是因?yàn)槔笾υ械奶侵饕钦崽?、果糖和葡萄?而酵母菌對果糖、葡萄糖、蔗糖的利用能力非常強(qiáng), 幾乎可以把這些糖全部代謝為二氧化碳和乙醇[15],此外,經(jīng)前期研究發(fā)現(xiàn),RV002釀酒酵母中的纖維素酶,利用不可溶性膳食纖維將其轉(zhuǎn)化為葡萄糖后,再代謝為二氧化碳和乙醇;而水洗預(yù)處理則使可溶性糖溶解于水中,通過溶解過濾將荔枝渣中的可溶性糖脫除,只能脫除可溶性糖,很難將糖分完全脫除,并且需要消耗大量的水,所以從脫糖效率和成本角度考量,發(fā)酵脫糖預(yù)處理優(yōu)于水洗脫糖預(yù)處理。此外,隨著超微粉碎時(shí)間的延長,荔枝果粉總糖含量也逐漸增加,發(fā)酵預(yù)處理脫糖率由84.60%降低至81.89%;水洗預(yù)處理脫糖率由71.59%降低至68.3%(圖1)。這是由于超微粉碎破壞了荔枝渣細(xì)胞結(jié)構(gòu),促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)活性物質(zhì)釋放,故總糖含量增加[16]。

表1 不同預(yù)處理對荔枝果粉的總糖含量的影響Table 1 Effects of different pretreatments on the total sugar content of litchi fruit powder

圖1 不同預(yù)處理對荔枝果粉脫糖率的影響Fig.1 Effect of different pretreatments on the desugar rate of litchi fruit powder注:不同小寫字母表示顯著性差異(P<0.05)(下同)

2.2 不同預(yù)處理對荔枝果粉休止角、滑角、堆積密度的影響

目前常用休止角和滑角表示粉體的流動性能,休止角和滑角越小,摩擦力越小,粉體流動性越好[17]。如表2所示,未處理的荔枝粗粉休止角和滑角分別為62.26°和38.29°,發(fā)酵預(yù)處理的荔枝粗粉休止角和滑角分別為55.01°和34.51°,水洗預(yù)處理的荔枝粗粉的休止角和滑角分別為57.66°和36.66°,說明發(fā)酵預(yù)處理比水洗預(yù)處理的荔枝粗粉的流動性好,這是因?yàn)槲刺幚砑八搭A(yù)處理的荔枝果粉粉體含糖量較高,會出現(xiàn)團(tuán)聚現(xiàn)象,因此流動性變差。隨著超微粉碎時(shí)間的延長,未脫糖處理的果粉及2種預(yù)處理粉劑的休止角與滑角都逐漸增大,未處理處理的荔枝果粉休止角由62.26°增大到68.01°,滑角由38.29°增大到52.54°;發(fā)酵預(yù)處理的荔枝果粉休止角由55.01°增大到62.77°,滑角由34.51°增大到45.64°;水洗預(yù)處理的荔枝果粉休止角由57.66°增大到63.61°,滑角由36.66°增大到49.83°。這是因?yàn)殡S著超微粉碎時(shí)間的延長,果渣細(xì)胞內(nèi)部的糖分逐漸釋放,粉體表面聚合力和黏著力相應(yīng)增大,致使流動性變差。

表2 不同預(yù)處理對荔枝果粉的分散特性的影響Table 2 Effect of different pretreatments on the dispersion characteristics of litchi fruit powder

堆積密度又稱填充密度,堆積密度越高,粉體疏松性越差[18]。未處理的荔枝果粉堆積密度為0.25～0.34 g/mL,發(fā)酵預(yù)處理的荔枝果粉堆積密度為0.20～0.31 g/mL,水洗預(yù)處理的荔枝果粉堆積密度為0.21～0.32 g/mL,相同超微粉碎條件下,水洗脫糖預(yù)處理的荔枝果粉堆積密度高于發(fā)酵脫糖預(yù)處理,這是因?yàn)榘l(fā)酵預(yù)處理后粉體含糖量低,所得粉體質(zhì)地疏松,顆粒間隙較大,所以堆積密度較小;水洗預(yù)處理含糖量較高、粉體顆粒有粘黏結(jié)塊現(xiàn)象,所以堆積密度較高。此外,隨著超微粉碎時(shí)間的延長,堆積密度增大,這是因?yàn)槌⒎鬯槭狗垠w顆粒變小,空隙減小,堆積密度增大,并且隨著含糖量增加,黏性增加,粉體的堆積密度進(jìn)一步升高。

2.3 不同預(yù)處理對荔枝果粉總酚含量的影響

如圖2所示,未處理的荔枝渣總酚含量為19.82 mg/g,經(jīng)發(fā)酵和水洗預(yù)處理后荔枝果粉總酚含量分別為20.70、17.95 mg/g,說明發(fā)酵預(yù)處理的荔枝果粉總酚含量顯著高于水洗預(yù)處理荔枝果粉,這可能是因?yàn)槔笾χ泻斜奖彼峤獍泵?L-phenylalanine ammonia-lyase,PAL),PAL與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、黃酮類物質(zhì)的合成有關(guān),為多種酚類及類黃酮終產(chǎn)物提供前體,酵母通過誘導(dǎo)PAL活性升高,促進(jìn)酚類物質(zhì)的生成[19];另一方面,酵母菌代謝產(chǎn)生的蛋白酶、纖維素酶和果膠酶可從不溶性基質(zhì)中釋放結(jié)合酚類化合物,并將其水解為游離形式,增加發(fā)酵產(chǎn)物中多酚含量[20];其次,在水洗脫糖處理的過程中,會造成營養(yǎng)物質(zhì)流失,使總酚含量降低。因此,發(fā)酵預(yù)處理的荔枝果粉總酚含量高于水洗預(yù)處理的。此外,隨著超微粉碎時(shí)間的延長,總酚含量逐漸增加,未經(jīng)脫糖處理的荔枝果粉總酚含量由19.82 mg/g增加到23.81 mg/g,發(fā)酵預(yù)處理的荔枝果粉總酚含量由20.70 mg/g增加到25.59 mg/g,水洗預(yù)處理的荔枝果粉總酚含量由17.95 mg/g增加到19.04 mg/g,這是因?yàn)樵辖?jīng)超微粉碎后,細(xì)胞壁破碎,超微粉碎使大量酚類物質(zhì)從細(xì)胞內(nèi)釋放出來,并且有一些結(jié)合酚在超微粉碎過程中轉(zhuǎn)變?yōu)橛坞x酚,更容易被檢測[21]。

圖2 不同預(yù)處理對荔枝果粉總酚含量的影響Fig.2 Effect of different pretreatment on the total phenolic content of litchi fruit powder

2.4 不同預(yù)處理對荔枝果粉抗氧化活性的影響

在本研究中采用DPPH和ABTS兩種方法對荔枝果粉抗氧化能力做出評價(jià)。由圖3可知,根據(jù)Trolox當(dāng)量,發(fā)酵預(yù)處理的清除DPPH自由基的能力及清除ABTS陽離子自由基能力最強(qiáng),其值分別為78.12 mg/g及72.03 mg/g。很多文獻(xiàn)證實(shí)了酚類物質(zhì)含量與抗氧化呈正相關(guān)性[22-23],因此,發(fā)酵脫糖處理使荔枝渣抗氧化活性提高的原因是由于微生物轉(zhuǎn)化促進(jìn)促進(jìn)酚類物質(zhì)的生成,以及微生物使結(jié)合酚轉(zhuǎn)化為游離酚,增加了可被檢測的酚類物質(zhì)。

A-DPPH自由基清除能力;B-ABTS陽離子自由基消除能力圖3 不同預(yù)處理對荔枝果粉抗氧化能力的影響Fig.3 Effect of different pretreatments on the antioxidant capacity of litchi fruit powder

此外,隨著微粉化程度的增加,荔枝渣自由基清除能力與總酚含量變化趨勢一致,未脫糖處理的清除DPPH自由基的能力由85.96 mg/g增至107.14 mg/g,發(fā)酵預(yù)處理清除DPPH自由基的能力由90.90 mg/g增加至111.17 mg/g,水洗預(yù)處理清除DPPH自由基的能力由78.12 mg/g增加至101.90 mg/g;未脫糖處理清除ABTS陽離子自由基能力由69.60 mg/g增加至112.83 mg/g;發(fā)酵預(yù)處理清除ABTS陽離子自由基能力由72.03 mg/g增加至116.49 mg/g;水洗預(yù)處理清除ABTS陽離子自由基能力由65.55 mg/g增加至108.92 mg/g,是因?yàn)殡S著荔枝微粉的粒徑減小,多酚等抗氧化物質(zhì)與提取溶劑的接觸面積增大,粉體的抗氧化活性增高,其次超微粉碎處理使荔枝渣中的抗氧化活性成分更易于溶出,自由基清除率逐漸增加[24]。

2.5 不同預(yù)處理對荔枝果粉微觀結(jié)構(gòu)的影響

不同脫糖預(yù)處理的荔枝粗粉與超微粉的掃描電鏡形態(tài)如圖4所示,荔枝粗粉中,未處理的果粉大小不均、有粘黏現(xiàn)象;發(fā)酵預(yù)處理的果粉表面平整光滑,無明顯褶皺收縮;水洗預(yù)處理的果粉表面有明顯褶皺收縮,粉體表面凹凸不平,有許多孔隙。隨著超微粉碎時(shí)間的延長,未處理的荔枝果粉,表面富集微小粉體,果粉之間黏附現(xiàn)象愈加明顯;發(fā)酵預(yù)處理的荔枝果粉粉體逐漸變小,大小均勻;水洗預(yù)處理的荔枝果粉,隨著超微粉碎時(shí)間的延長,顆粒大小不均一,粒徑較小的顆粒間交互面積增加,說明粉體有團(tuán)簇聚集結(jié)塊的現(xiàn)象[25]。果粉的微觀結(jié)構(gòu)顯示,發(fā)酵脫糖預(yù)處理的果粉顆粒大小更均勻、分散性更好,無明顯結(jié)塊現(xiàn)象,優(yōu)于水洗脫糖預(yù)處理。

a-1為未處理粗粉;a-2為未處理超微2.5 min微粉;a-3為未處理超微5 min微粉;a-4未處理超微7.5 min微粉;b-1為發(fā)酵預(yù)處理粗粉;b-2為發(fā)酵預(yù)處理超微2.5 min微粉;b-3為發(fā)酵預(yù)處理超微5 min微粉;b-4為發(fā)酵預(yù)處理超微7.5 min微粉;c-1為水洗預(yù)處理粗粉;c-2為水洗預(yù)處理超微2.5 min微粉;c-3為水洗預(yù)處理超微5 min微粉;c-4水洗預(yù)處理超微7.5 min微粉圖4 不同預(yù)處理荔枝粗粉與微粉的掃描電鏡形態(tài)(1 000×)Fig.4 SEM morphology of different pretreatment litchi coarse and powder (1 000×)

3 結(jié)論與討論

與未處理的荔枝粉相比,2種預(yù)處理方式均能顯著降低荔枝果粉總糖含量,發(fā)酵預(yù)處理脫糖效率比水洗預(yù)處理更高。與未處理及水洗預(yù)處理的果粉相比,經(jīng)過發(fā)酵預(yù)處理的荔枝果粉的堆積密度、滑角及休止角降低,說明發(fā)酵后的荔枝果粉具有更好的流動性,并且隨著超微粉碎時(shí)間的延長,水洗預(yù)處理果粉出現(xiàn)團(tuán)聚現(xiàn)象,流動性變差。在粉體營養(yǎng)品質(zhì)方面,發(fā)酵預(yù)處理的荔枝果粉的總酚含量、抗氧化能力顯著高于水洗處理的荔枝果粉。電鏡結(jié)果顯示發(fā)酵預(yù)處理的荔枝果粉表面光滑,水洗預(yù)處理的荔枝果粉表面有明顯褶皺收縮,隨著超微粉碎時(shí)間的延長,發(fā)酵處理的荔枝果粉的大小均勻,而水洗預(yù)處理的荔枝果粉有明顯粘黏現(xiàn)象產(chǎn)生。綜上,從脫糖效率、粉體分散性及營養(yǎng)品質(zhì)方面考慮,發(fā)酵脫糖處理顯著優(yōu)于水洗脫糖處理,本研究可為工業(yè)化采用微生物轉(zhuǎn)化脫糖技術(shù)的應(yīng)用提供理論依據(jù)。