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玉米麩皮阿拉伯木聚糖提取工藝優(yōu)化及其凝膠特性研究

2023-08-15 01:10肖宇陳愛君續(xù)曉琪孫桂蓮李克文
食品工業(yè)科技 2023年15期
關鍵詞:麩皮分子量淀粉

肖宇,張 濤,陳愛君,續(xù)曉琪, ,李 莎,孫桂蓮,李克文,徐 虹

(1.南京工業(yè)大學食品與輕工學院,江蘇南京 211816;2.南京財經大學食品科學與工程學院,江蘇省現代糧食流通與安全協同創(chuàng)新中心,江蘇南京 210023;3.保齡寶生物科技有限公司,山東德州 251200)

玉米是重要的糧食作物,也是飼料、釀造、淀粉、生物制藥等行業(yè)關鍵的原材料,在農業(yè)生產和國民經濟中占有重要的地位[1]。玉米麩皮是濕法加工生產淀粉或糖漿的重要副產物,主要用作低價飼料,經濟價值被嚴重低估,每年約有數億噸的玉米麩皮產生[2]。利用廢棄玉米麩皮生產高附加值和營養(yǎng)價值的產品,具有重要的研究價值和應用前景。

玉米麩皮中膳食纖維含量約為60%~70%,主要成分為阿拉伯木聚糖(Arabinoxylan,AX)[3?4]。結構上來看(如圖1),AX 由β-D-吡喃木糖殘基(Xylp)形成線性骨架,α-L-阿拉伯呋喃糖(Araf)組成的側鏈通過C(O)-2、C(O)-3 或C(O)-2,3 鍵連接到主鏈[5],少量阿魏酸(Ferulic acid,FA)通過酯鍵連接到Araf 的C(O)-5 位[6?7]?,F已證實,AX 可以抑制機體膽固醇的升高,降低血糖,作為益生元促進腸道有益菌的增殖等[8]。除了具備良好的生理活性外,AX 可在化學氧化劑以及酶(如漆酶、過氧化氫酶)作用下,耦合交聯形成穩(wěn)定凝膠。例如,漆酶交聯制成的AX 凝膠具有蜂巢結構,將B.longum等益生菌截留在三維網狀結構中,形成益生菌的包埋體[9]。

圖1 玉米麩皮結構示意圖Fig.1 Schematic diagram of structure of maize bran

AX 的分子量、活性基團等結構特征會影響其生理活性、凝膠特性,進而影響AX 的應用[10]。AX 常用的提取方法為堿法,但提取條件不同會導致AX 的分子量、FA 酯鍵水解程度等結構差異[11]。例如采用超聲輔助酶法提取麥麩AX,響應面優(yōu)化提取工藝后AX 平均提取率為17.38%,所得AX 分子量集中分布在1.53×104~2.51×104Da,A/X 分布在0.29~0.81 之間[12?13]。探究不同提取方法所得AX 的結構和性質對于AX 在食品工業(yè)中的進一步應用具有重大意義。目前,關于堿法提取所得AX 氧化交聯形成的凝膠研究較少,堿法提取所得AX 的結構對凝膠特性的影響尚不清楚。本研究選用堿法提取玉米麩皮中的AX,響應面優(yōu)化AX 提取工藝。分析AX 的得率、單糖組成、魏酸含量和分子量等結構參數,并用漆酶對AX 進行氧化交聯,研究氧化后AX 的凝膠特性、凝膠強度、熱穩(wěn)定性等特征,為AX 及其凝膠在食品工業(yè)中的應用提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

玉米麩皮 由保齡寶生物科技有限公司提供;KTSTA 總淀粉試劑盒、耐高溫α-淀粉酶(3000 U/mL)、淀粉葡糖苷酶(3300 U/mL)愛爾蘭Magezyme 公司;Bradford 蛋白濃度測定試劑盒P006 上海碧云天生物技術有限公司;堿性蛋白酶(200 U/mg)上海士鋒生物科技有限公司;β-葡聚糖、漆酶(120 U/g)

南京草本源生物科技有限公司;葡聚糖標準品(分子量分別為150、410、670、1080、2000 kDa)邁瑞爾化學技術有限公司;阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)美國Sigma-Aldrich 有限公司;氫氧化鋇、氫氧化鈉、磷酸二氫鈉、甲醇、三氟乙酸、鹽酸等試劑 均為分析純級,國藥集團化學試劑有限公司。

Mikro220R 臺式高速冷凍離心機 德國Hettich公司;Multiskan FC 酶標儀 美國Thermo Fisher 公司;LGJ-12 立式真空冷凍干燥機 北京松源華興生物有限公司;1260 Infinity II Prime 高效液相色譜儀、XDB-C18色譜柱(Zorbax Eclipse,4.6 mm×150 mm,5 μm)美國Agilent 公司;TSKgel G4000PWXL 色譜柱(7.8 mm×300 mm)日本TOSOH 公司;Nicolet iS20 紅外光譜儀 美國Thermo Fisher 公司;MCR 302旋轉流變儀 奧地利Anton paar 公司。Verios XHR SEM 電子顯微鏡 美國Thermo Fisher 公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 玉米麩皮的組成測定

1.2.1.1 淀粉含量測定 淀粉含量使用總淀粉試劑盒進行測定,稱量100 mg 玉米麩皮,加入0.2 mL 濃度為80%的乙醇溶液。用pH5.0,100 mmol/L 醋酸鈉緩沖液稀釋1 mL 耐高溫α-淀粉酶至30 mL,準確吸取3 mL 加入樣品溶液中。將樣品溶液放入100 ℃水浴鍋沸水浴6 min,冷卻至室溫后放入50 ℃水浴鍋,同時加入淀粉葡糖苷酶0.1 mL,充分反應后稀釋并離心(3000 r/min,10 min)。吸取1 mL上清液到試管中,用去離子水稀釋到10 mL。吸取0.1 mL 稀釋過后的樣品溶液,加入3 mL 的葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑(GOPOD)后立即放入50 ℃的水浴鍋中加熱20 min,充分反應后在510 nm 處測定吸光值,以葡萄糖標準溶液為參考,葡萄糖標準曲線為y=0.6159x+0.0443,R2=0.9921。

1.2.1.2 蛋白質含量測定 使用Bradford 蛋白濃度測定試劑盒進行測定,方法如下:在蛋白質檢測試劑中加入不同濃度梯度的蛋白質標準溶液,室溫下反應5 min 后,在595 nm 處測定吸光值,繪制蛋白質標準曲線。稱量1 g 玉米麩皮,加入6 mL 去離子水充分分散后,離心(6000 r/min,10 min)取上清液,加入考馬斯亮藍G250 試劑,反應后在595 nm 處測定吸光值。蛋白質標準曲線為y=2.3587x+0.4209,R2=0.9951。

1.2.1.3β-葡聚糖含量測定 采用剛果紅法測定玉米麩皮中β-葡聚糖的含量[14]。稱取一定量的玉米麩皮,加入一定體積0.01 mol/L 的NaOH 溶液,充分反應后離心取上清,提取其中的β-葡聚糖。加入過量的硫酸銨溶液后再次離心。準確吸取100 μL 上清液,加入去離子水稀釋為2.0 mL,隨后加入4.0 mL剛果紅染液,室溫下反應一定時間,545 nm 處測定樣品吸光度,以不同濃度β-葡聚糖作標準曲線計算樣品中β-葡聚糖含量,β-葡聚糖含量計算中葡聚糖標準曲線為y=2.4068x+0.1036,R2=0.9958。

1.2.1.4 纖維素和半纖維素的含量測定 采用72%濃硫酸水解法測定纖維素含量[15],稱取適量玉米麩皮,加入5 mL 醋酸和硝酸混合液,沸水浴25 min,冷卻后離心取沉淀,加入10 mL 質量分數為10%的硫酸及10 mL 0.01 mol/L 的重鉻酸鉀溶液,沸水浴10 min,冷卻后加入5 mL 20%的KI 溶液及1 mL質量分數為0.5%淀粉溶液,使用0.2 moI/L 的硫代硫酸鈉滴定測量纖維素。

采用2 mol/L 鹽酸水解法測定半纖維素含量[15]。稱取適量玉米麩皮,加入10 mL 質量分數為80%的硝酸鈣溶液,沸水浴5 min,冷卻后離心取沉淀,加入10 mL 濃度為2 mol/L 的鹽酸,沸水浴45 min。冷卻后離心取上清液,將其調至堿性,用DNS 法測定溶液中的還原糖。所得半纖維素含量即玉米麩皮中的AX 含量。

1.2.2 玉米麩皮的預處理 稱取一定量的玉米麩皮,按1:7(w/v)的料液比加入0.05 mol/L 磷酸緩沖液(pH6.5),在室溫下靜置18 h。然后在75 ℃下水浴加熱,加入耐高溫α-淀粉酶(10 μL/g),攪拌反應1 h,加入淀粉葡糖苷酶,60 ℃水浴鍋加熱,振蕩反應30 min 后加入堿性蛋白酶,攪拌下反應 4 h,沸水浴10 min 滅酶結束反應。棄上清液,沉淀干燥后即得去淀粉玉米麩皮[2],根據1.2.1 中方法測定主要成分,并以此為原料,進行后續(xù)實驗。

1.2.3 AX 的提取及得率的測定 稱取一定量預處理后玉米麩皮,按1:10(w/v)的料液比加入飽和Ba(OH)2溶液,充分混合后在25 ℃下提取4 h。然后對混合物進行離心(9000 r/min,10 min)取上清液,經凍干得到堿法制備AX[16],苯酚-硫酸法測定總糖含量。總糖標準曲線為y=7.8317x+0.0934,R2=0.9935。

AX 得率(S)按下式計算:

式中:C:根據標準曲線所得樣品中的總糖濃度,mg/mL;V:樣品的體積,mL;n:樣品稀釋倍數;W:樣品的質量,g。

1.2.4 單因素對AX 得率影響的研究

1.2.4.1 料液比對AX 得率影響的研究 取去淀粉玉米麩皮10 g,分別按1:10、1:20、1:40、1:60(w/v)的料液比加入飽和Ba(OH)2溶液,充分混合后在25 ℃下提取4 h。然后對混合物進行離心(9000 r/min,10 min)取上清液,硫酸苯酚法測定其中總糖含量,即AX 含量,以此計算得率。

1.2.4.2 提取溫度對AX 得率影響的研究 取去淀粉玉米麩皮10 g,按最優(yōu)料液比加入飽和Ba(OH)2溶液,充分混合后分別在25、45、65、85 ℃下提取4 h。然后對混合物進行離心(9000 r/min,10 min)取上清液,硫酸苯酚法測定其中總糖含量,計算得率。

1.2.4.3 提取時間對AX 得率影響的研究 取去淀粉玉米麩皮10 g,按最優(yōu)料液比加入飽和Ba(OH)2溶液,充分混合后在最優(yōu)提取溫度下分別提取2、4、6、8 h。然后對混合物進行離心(9000 r/min,10 min)取上清液,硫酸苯酚法測定其中總糖含量,計算得率。

1.2.5 AX 提取工藝的響應面優(yōu)化試驗 在單因素實驗的基礎上,選擇料液比(A)、提取溫度(B)、提取時間(C)3 個因素為自變量,以AX 得率(Y)為響應值構建3 因素3 水平的響應面試驗,因素水平設計表如下表1 所示。

表1 因素水平設計表Table 1 Factor level design table

1.2.6 AX 的結構表征

1.2.6.1 AX 中FA 含量測定 稱取50 mg 玉米麩皮提取物,添加2%亞硫酸鈉作為保護劑,按1:10(w/v)料液比加入1%的NaOH 溶液之后,在80 ℃下進行2 h 的避光反應。充分反應后靜置冷卻至室溫,在320 nm 處進行吸光值的測量。取FA 標準品重復上述步驟得標準曲線y=0.036x+0.1859,R2=0.9927。經計算得到樣品中FA 含量。

1.2.6.2 AX 中的單糖組成測定 AX 的單糖組成采用PMP-HPLC 方法測定。準確稱取2 mg 樣品溶于1 mL 2 mol/L 三氟乙酸(TFA)中,120 °C 下水解反應2 h,用NaOH 溶液中和反應體系后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)標記,使用HPLC 串聯紫外檢測器,結合XDB-C18色譜柱進行分析,以阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖作為標準品,分別根據峰的保留時間和紫外信號響應值計算單糖組成,根據峰面積計算Ara 和Xyl 的摩爾比。其中,色譜條件為:流動相為17%的乙腈和83%的0.1 mol/L 磷酸鈉緩沖液(pH6.7),樣品進樣量為20 μL,流速為1 mL/min,柱溫30 ℃,在245 nm 波長處檢測。

1.2.6.3 凝膠排阻色譜法測定AX 的分子量分布AX 樣品的分子量分布采用高效凝膠色譜法測定,HPLC 系統串聯示差檢測器和TSKgel G4000PWXL色譜柱進行分析,以不同分子量的系列葡聚糖(150、410、670、1080、2000 kDa)為標準品,根據標準品出峰時間繪制分子量標準曲線,以樣品出峰時間計算AX 樣品分子量。其中,色譜條件:流動相為0.2 mol/L的Na2SO4溶液,流速為0.8 mL/min,柱溫35 ℃,進樣量為20 μL。

1.2.7 AX 凝膠的制備及凝膠特性研究

1.2.7.1 漆酶氧化交聯制備AX 凝膠 將AX 配制成3%(w/v)溶液,加入漆酶催化氧化交聯(1 mg AX加入0.1 U 漆酶)[17],室溫反應24 h 后,滅酶凍干,分別分散于pH2.0、5.0、8.0 的水溶液中,制備氧化交聯AX 的凝膠體系(Alkaline extract gel,AEG)。

1.2.7.2 紅外光譜分析 稱取一定量AX 以及冷凍干燥后的AEG,溴化鉀作分散劑與樣品按100:1(w/w)的比例混合,充分研磨后壓片,用紅外光譜儀進行分析,測定參數如下:掃描波長范圍400~4000 cm?1。

1.2.7.3 凝膠流變學性質分析 將AEG 置于旋轉流變儀上,用40 mm,角度為1.999°的椎板,間距55 μm,掃描應變3%條件下進行頻率掃描測試,根據儲能模量(G′)和損耗模量(G")分析AEG 的動態(tài)粘彈性。在20~95 ℃范圍內測量G′和G",升溫速度為5 ℃/min,掃描應變?yōu)?%,頻率為1 Hz,進行動態(tài)時間掃描測定[17]。

1.2.7.4 掃描電鏡觀察凝膠微觀結構 稱取一定量AX 以及冷凍干燥后的AEG,噴金增強導電性后進行電子顯微鏡掃描,觀察其結構形態(tài),加速電壓為15 kV。

1.2.7.5 凝膠的熱重分析 稱取一定量冷凍干燥后的AEG,使用熱重分析儀進行熱穩(wěn)定性的測定。儀器條件:氮氣為60 mL/min,升溫速率為10 ℃/min,從30 ℃ 線性升溫至500 ℃。

1.3 數據處理

實驗重復3 次,數據結果用“平均值±標準差”表示,IBM SPSS statistics 19.0 軟件進行分析,方差分析(ANOVA)判斷多重平均值的顯著性,顯著性水平P<0.05 表示具有統計學意義。

2 結果與分析

2.1 玉米麩皮化學組成分析

玉米麩皮的主要成分為纖維素、半纖維素、淀粉、蛋白質等,經測定其化學組成如表2 所示。

表2 預處理前后玉米麩皮化學組成Table 2 Indexes before and after pretreatment

過多的淀粉含量會影響后續(xù)AX 的提取純度,采用耐高溫α-淀粉酶處理使玉米麩皮中淀粉含量降至0.67%±0.18%,同時除去部分水溶性蛋白質,降低蛋白質含量,避免蛋白含量對后續(xù)研究產生影響。

2.2 單因素實驗結果

2.2.1 料液比對AX 得率的影響 按1.2.3 中初始提取方法的AX 得率為4.85%±0.24%。從圖2(A)可知,當飽和Ba(OH)2體積增加,AX 得率迅速上升,然后略有下降。料液比過低時,飽和Ba(OH)2較少,溶液流動性較差,飽和Ba(OH)2無法與玉米麩皮充分接觸,無法將麩皮中的酯鍵斷裂,不利于多糖的溶出,導致提取效率較低。隨著飽和Ba(OH)2體積增加,得率明顯提高,由圖2(A)可知,料液比達到1:40 附近時,AX 的提取進行較為完全,因此選擇1:40 作為提取的最佳料液比。

圖2 單因素對AX 得率的影響Fig.2 Effect of single factor on the yield of AX

2.2.2 提取溫度對AX 得率的影響 由圖2(B)可知,隨著提取溫度上升,AX 得率呈現大幅提升隨后減少的趨勢。當提取溫度達到65 ℃時,AX 得率達到最大值,繼續(xù)提高提取溫度后,AX 得率減小。隨著溫度升高,分子運動加快,飽和Ba(OH)2更加有效地打斷了共價酯鍵,AX 得率提高。溫度過高時,飽和Ba(OH)2易揮發(fā),同時高溫可能會破壞多糖的結構和生理活性[18],因此選擇65 ℃為最佳提取溫度。

2.2.3 提取時間對AX 得率的影響 從圖2(C)中可以看出,AX 得率在4 h 前迅速提高,然后趨于平緩。提取時間小于6 h 時,飽和Ba(OH)2還未充分破壞麩皮內AX 與木質素、纖維素等組分連接的酯鍵,因此隨提取時間延長,AX 得率迅速提高,6 h 后AX 得率略有下降,但無明顯差異,選擇6 h 為最佳提取時間。

2.3 AX 提取工藝優(yōu)化響應面試驗結果

在單因素實驗基礎上,選擇料液比(A)、提取溫度(B)、提取時間(C)3 個因素為自變量,AX 得率(Y)為響應值進行3 因素3 水平的響應面試驗。響應面試驗設計與結果見表3,方差分析結果見表4。

表3 AX 提取工藝優(yōu)化響應面試驗設計與結果Table 3 Response surface test design and results of AX extraction process optimization

表4 二次多項回歸模型方差結果Table 4 Variance results of quadratic multinomial regression model

利用Design-Expert 軟件對表3 試驗結果進行回歸擬合,得到AX 得率對料液比(A)、提取溫度(B)、提取時間(C)的二次多項回歸方程:Y=?57.89230+0.92810A+0.83594B+10.08060C+0.0033 5309AB?0.012944AC+0.00311111BC?0.012124A2?0.00733926B2?0.77137C2。由表4 可知,模型的P值<0.01,極顯著,失擬項P值=0.2649>0.05,不顯著,說明此模型可用于分析預測AX 提取工藝的優(yōu)化程度。根據P值可知,3 個因素對AX 得率的影響主次順序為A>B>C,即料液比>提取溫度>提取時間。一次項A、B、C 和二次項A2、B2、C2、AB 對結果影響極顯著(P<0.01),二次項AC 對結果影響顯著(P<0.05)。

圖3 是料液比、提取溫度、提取時間及交互作用對AX 得率影響的響應面曲線及等高線。由圖3(A)可以看出,當只有提取溫度變化時,AX 得率先增加后下降。當只有料液比變化時,AX 得率同樣表現為先升后降的趨勢,但是變化幅度大于前者,因此料液比對于AX 得率的影響大于提取溫度。同理可從圖3(B)看出,料液比對于AX 得率的影響大于提取時間。從圖3(C)可以看出,提取溫度和提取時間的變化幅度相近,兩者對于AX 得率的影響基本相同。因此,各因素對于AX 得率的影響順序為:料液比>提取溫度>提取時間,與從P值得出的結論相符。

圖3 料液比、提取溫度、提取時間及交互作用對AX 得率影響的響應面曲線及等高線Fig.3 Response surface curves and contours of the interaction of solid-liquid ratio,extraction temperature and extraction time on AX yield

由回歸方程得AX 的最佳提取工藝條件:料液比1:44(g:mL),提取溫度69.38 ℃,提取時間6.33 h。在此優(yōu)化條件下,預測AX 得率達到23.08%。考慮到實驗的可操作性,將最佳的提取條件調整為料液比1:44(g:mL),提取溫度69 ℃,提取時間6.3 h。經實驗,在此最優(yōu)提取條件下AX 得率為23.07%±1.15%,與理論預測值基本一致。

2.4 AX 的結構參數分析

經測定,AX 中FA 含量為9.6±0.32 mg/100 g,研究表明,FA 含量與AX 凝膠特性密切相關,還會影響AX 的生理活性,FA 含量較高的AX 有較好的氧化交聯特性[17]。

AX 的單糖組成如圖4(A)所示,AX 由阿拉伯糖(Ara)和木糖(Xyl)組成。Ara 和Xyl 的摩爾比(A/X)表示阿拉伯木聚糖的支化度,A/X 為2.28±0.11。A/X 與多糖的溶解性有關,A/X 比值越大更易溶解,Ara 取代度的降低會導致水溶解度的下降[19]。來源于青稞麩皮的AX,A/X 為0.81[20];小麥麩皮中堿法提取的AX,A/X 集中在0.84~1.05[21]。

圖4 AX 單糖組成和HPSEC 圖Fig.4 AX monosaccharide composition and HPSEC diagram

AX 的凝膠色譜如圖4(B),圖中為單峰,且峰形尖銳對稱,說明制備的AX 組分單一、純度較高。分子量標準曲線為y=?0.3817x+9.0653,R2=0.9539,AX在9.54 min 出峰,經計算重均分子量為265±6.68 kDa。青稞麩皮中經純化的AX 分子量為300 kDa[20];酶法提取小米糠中的AX,分子量在1.47×106左右[22];小麥麩皮AX 均集中于2200 kDa 和12~130 kDa 范圍內[21]。田貝貝等[23]報道不同分子量和支化度的AX 抗氧化性能存在差異,分子量小且支化度高的AX 清除DPPH 自由基的能力較強。AX 的結構參數提示玉米麩皮中提取的AX 具有良好的潛在生理活性。

2.5 漆酶氧化交聯AX 凝膠特性研究

將未交聯和交聯后的AX 分別溶于不同pH 的溶液中,發(fā)現未交聯的AX 不成凝膠,經漆酶交聯后的AX 在中性、偏堿性的溶液中不會形成凝膠,而在pH2 的溶液中形成凝膠。本研究中AX 在漆酶作用下形成了可溶性AX 交聯中間體,該中間體在低pH溶液中形成凝膠[24]。堿法提取的玉米麩皮阿拉伯木聚糖經漆酶交聯后形成凝膠,示意圖如圖5 所示。

圖5 玉米麩皮AX 凝膠形成示意圖Fig.5 Schematic diagram of maize bran AX gel formation

2.5.1 AX 和AEG 的紅外光譜圖分析 AEG 和AX的紅外光譜圖如圖6 所示,AX 在3400 cm?1附近的吸收峰為-OH 的伸縮振動,其中不對稱CH2基團的C-H 伸縮振動在2929 cm?1。此外,1573 cm?1和1557 cm?1處屬于酚類物質和蛋白質的特定吸收帶,由于制備多糖中蛋白含量極低,該吸收帶表明AX中含有酚類物質阿魏酸基團。紅外譜圖1200~800 cm?1之間常含有多種耦合C-O-C、C-C-O 和COH 振動峰,也屬于多糖的特征峰[25]。其中1041 cm?1處的峰表示C-O 伸縮振動,是木聚糖的典型特征峰[26],結合859 cm?1和923 cm?1處的β-糖苷鍵伸縮振動峰[27],可判斷提取物為典型的木聚糖型多糖。

圖6 AX 和AEG 的紅外光譜圖Fig.6 Infrared spectroscopy of AX and AEG

圖6 中AEG 在1585 cm?1附近的吸收峰為N=N雙鍵的伸縮振動峰,吸收強度大于AX,說明漆酶交聯作用于阿魏酸基團;在1410 cm?1附近的吸收峰為烷烴基團中C-H 的彎曲振動峰,其吸收強度小于AX,以及854 cm?1處的β-糖苷鍵吸收峰變小,表明漆酶交聯作用使多糖結構發(fā)生改變。

2.5.2 AEG 的流變性能 AEG 的動態(tài)粘彈性曲線如圖7(A)所示。儲能模量(G′)是指凝膠因外力作用發(fā)生形變時,由于彈性形變而儲存能量的大小,反映了彈性大??;損耗模量(G")則是指凝膠由于粘性形變而損耗的能量大小,反映粘性大小。G′大于損耗模量G"時即彈性形變大于粘性形變,樣品表現出一定的剛性,反之呈現流體特性,當兩者相等時,為凝膠轉變點。圖7(A)中,AEG 的G′遠大于G",且與頻率無關,說明AEG 表現出典型的凝膠性質。

圖7 AEG 凝膠特性圖Fig.7 Rheological properties of AEG

圖7(B)為AEG 的溫度掃描測定曲線。由圖可知,在20~95 ℃范圍內,隨著溫度的升高,AEG 的G′呈降低趨勢,始終保持大于G",說明AEG 的強凝膠狀態(tài)受溫度影響較小,是穩(wěn)定的凝膠結構。

2.5.3 AEG 的掃描電鏡圖 圖8 為AX 及凝膠的掃描電鏡圖。從圖8(A)可知AX 微觀結構呈不規(guī)則片狀。從圖8(C)可以看出,AEG 具有較為規(guī)律的致密多孔結構,孔徑大小在100 μm 左右,孔壁平滑。這種均勻的蜂窩狀結構,可以提升凝膠運載活性物質的能力,能夠更好地包埋活性物質[28]。楊桔[29]同時使用多孔和無孔的水凝膠負載蛋白質,發(fā)現多孔水凝膠不僅能夠負載更多蛋白質,且釋放速率和最終釋放量都要高于無孔水凝膠。這提示AEG 可用于低pH 的環(huán)境或添加在飲料中,以延緩饑餓感或增加飽腹感,也可作包埋物用于活性成分或藥物的運輸。

圖8 AX 和AEG 的掃描電鏡圖Fig.8 SEM images of AX and AEG

2.5.4 AEG 的熱重分析 AEG 的熱重分析(Thermal gravity analysis,TG)曲線如圖9 所示。從圖中可以看出質量損失分為三個階段。第一階段在30~200 ℃之間,AEG 質量下降了2%左右,這是由于凝膠中殘留自由水的吸熱蒸發(fā)以及部分結合水的解吸所造成的[30]。第二階段在200~270 ℃之間,AEG 質量減少了8%,這是由于多糖(阿拉伯糖、木糖等)在高溫下被分解造成的[31]。第三階段在270~500 ℃之間,AEG緩慢失重,最后形成灰分。從圖中可知,凝膠結構具有較好的熱穩(wěn)定性,可滿足應用中加熱的需求。

圖9 AEG 熱重分析圖Fig.9 Thermogravimetric analysis of AEG

3 結論

本研究以玉米加工副產物麩皮為原料,響應面優(yōu)化AX 的提取工藝,最佳提取工藝為料液比1:44(g:mL),提取溫度69 ℃、提取時間6.3 h,在此工藝條件下,AX 得率為23.07%±1.15%,較優(yōu)化前提升18.22%。經測定AX 單糖組成主要為阿拉伯糖和木糖,A/X 為2.28±0.11,FA 含量為9.6±0.32 mg/100 g,分子量為265±6.68 kDa。結合傅里葉紅外光譜分析發(fā)現,在漆酶作用下AX 的阿魏酸基團發(fā)生改變,交聯后在pH2.0 下可形成穩(wěn)定的凝膠體系,熱穩(wěn)定性好且具有均勻多孔的微觀結構,可用于焙烤食品或低pH 如胃環(huán)境中益生菌包埋等應用。本文為AX 及其凝膠在食品工業(yè)的開發(fā)和應用提供理論基礎。

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