毛銳，林 浩，劉 川，姚 靜，肖全偉，戴 琴

（成都市食品檢驗研究院，國家市場監(jiān)督管理總局重點實驗室（營養(yǎng)與健康化學計量及應(yīng)用），四川成都 611130）

β-受體激動劑（俗稱“瘦肉精”），是一類具有促腎上腺素功能的人工合成化合物，在醫(yī)學上主要用于治療支氣管哮喘、阻塞性肺炎等病癥[1?2]。該類化合物具有苯乙醇胺母核，根據(jù)苯環(huán)上取代基不同，可分為苯酚型（非諾特羅、特布他林、萊克多巴胺、沙丁胺醇、福莫特羅等）和苯胺型（克倫特羅、馬布特羅、溴布特羅、馬噴特羅、克侖潘特等）[3]。β-受體激動劑具有營養(yǎng)物質(zhì)“再分配效應(yīng)”，可促進脂肪分解和蛋白質(zhì)合成，顯著提高家畜瘦肉率[4]，常被不良商家非法用于家畜飼養(yǎng)。人食入β-受體激動劑殘留的畜肉制品后可出現(xiàn)心慌、心悸、惡心、嘔吐等癥狀，造成急、慢性中毒，全國食品安全整頓工作辦公室發(fā)布的整頓辦函〔2010〕50 號已明確將β-受體激動劑類藥物列入食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)名單。

目前β-受體激動劑的常見檢測方法有高效液相色譜法（HPLC）[5]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（HPLC-MS/MS）[6?10]、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）[11]、酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）[12?13]。β-受體激動劑代謝后殘留于動物體內(nèi)的含量非常低，HPLC 檢出限難以滿足檢測要求；GC-MS/MS 測定時需要衍生化，操作繁瑣，影響檢測效率；ELISA 專屬性差，檢測中易出現(xiàn)假陽性；相比之下HPLC-MS/MS 無需衍生，靈敏度高、選擇性強，已成為國內(nèi)外β-受體激動劑定量分析的主要檢測手段。

苯酚型β-受體激動劑在代謝過程中軛合作用較強，進入動物體內(nèi)后極易與硫酸或葡萄糖醛酸形成軛合物[14?15]，因此在建立苯酚型β-受體激動劑多殘留分析方法時，需先對樣品進行酶解，將待測物從軛合狀態(tài)轉(zhuǎn)化為游離態(tài)后再進行提取凈化。畜肉含有豐富的蛋白質(zhì)，脂肪含量高，樣品基質(zhì)復雜，常見的凈化方式主要有固相萃取法[16?17]與QuEChERS 凈化法[18?19]，QuEChERS 法無淋洗、洗脫步驟，與固相萃取法相比更簡便、快速，凈化時僅選擇性吸附雜質(zhì)，不會造成目標分析物損失，在畜肉中β-受體激動劑的檢測上應(yīng)用越來越廣泛。

增強型脂質(zhì)去除填料EMR-Lipid 是一種改良的QuEChERS 技術(shù)，能高選擇性地去除基質(zhì)中的脂類雜質(zhì)，與傳統(tǒng)QuEChERS 法相比更適用于脂肪、蛋白質(zhì)含量較高的樣品，方法穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。目前已有文獻采用QuEChERS EMR-Lipid 凈化法[20]進行畜肉中β-受體激動劑的檢測，但在定量時多數(shù)文獻采用基質(zhì)匹配標準曲線法[21]進行結(jié)果校正，實際檢測工作中發(fā)現(xiàn)，基質(zhì)曲線樣品與待測樣品中蛋白質(zhì)、脂肪等組成不完全相同，β-受體激動劑在不同樣品中的基質(zhì)效應(yīng)存在差異，校正效果有限，影響測定結(jié)果的準確性。同位素內(nèi)標與待測物性質(zhì)相近，二者在前處理及離子化過程中受到的影響基本一致，響應(yīng)比值穩(wěn)定[22]，采用同位素內(nèi)標法定量比基質(zhì)匹配標準曲線法更加準確，但現(xiàn)有文獻[23]在內(nèi)標品種的選擇上有較大局限性，非同位素內(nèi)標與待測物在前處理及離子化過程中受到的影響存在差異，對測定結(jié)果的校正效果不佳。

為提高β-受體激動劑定量分析的準確性，本研究將QuEChERS EMR-Lipid 凈化法與同位素內(nèi)標稀釋技術(shù)相結(jié)合，盡可能多地采用與待測物相對應(yīng)的同位素內(nèi)標進行校正，建立了畜肉中17 種β-受體激動劑藥物殘留的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）檢測方法，在簡化前處理步驟、提高檢測結(jié)果準確性方面具有顯著優(yōu)勢，可滿足食品安全風險監(jiān)測精準定量的技術(shù)要求。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

牛肉、豬肉、羊肉樣品 購自當?shù)厥袌?，用料理機攪碎備用；克侖潘特鹽酸鹽、羥甲基克倫特羅、噴布特羅、鹽酸克侖特羅、硫酸特布他林、萊克多巴胺鹽酸鹽、富馬酸福莫特羅、沙丁胺醇、鹽酸班布特羅、非諾特羅鹽酸鹽標準品 純度均≥96%，德國Dr.Ehrenstorfer 公司；馬噴特羅鹽酸鹽、鹽酸溴布特羅、苯乙醇胺A、氯丙那林、妥布特羅鹽酸鹽、鹽酸馬布特羅、西布特羅標準品 純度均≥99%，德國WITEGA Laboratorien Berlin-Adlershof 公司；馬布特羅-D9鹽酸鹽、班布特羅-D9鹽酸鹽、妥布特羅-D9鹽酸鹽、氯丙那林-D7、噴布特羅-D9鹽酸鹽、特布他林-D9醋酸鹽半水化合物、溴布特羅-D9、苯乙醇胺A-D3、西布特羅-D9標準品 純度均≥99%，德國WITEGA Laboratorien Berlin-Adlershof 公司；萊克多巴胺-D3鹽酸鹽標準品 純度97.0%，加拿大C/D/N Isotopes Inc 公司；克侖特羅-D9、沙丁胺醇-D3標準品 濃度：100 μg/mL，德國Dr.Ehrenstorfer公司；甲醇、乙腈、甲酸 色譜純，賽默飛世爾科技（中國）有限公司；乙酸銨 色譜純，天津市科密歐化學試劑有限公司；實驗用水 超純水，由Milli-Q 型超純水儀制備；β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶>100.000 Units/mL 上海安譜實驗科技股份有限公司；QuEChERS dSPE EMR-Lipid、QuEChERS Final Polish EMR-Lipid 安捷倫科技有限公司。

AB SCIEX QTRAP 5500 三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀 配有電噴霧離子源（ESI），美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司；ACQUITYTM UPLC I-Class 超高效液相色譜儀美國沃特世科技公司；CORTECSTMUPLC?C18柱（3.0 mm×100 mm，1.6 μm）、ACQUITY UPLC BEH C18柱（3.0 mm×100 mm，1.7 μm）美國沃特世科技公司；Eppendorf Centrifuge 5810 R 型高速冷凍離心機 德國艾本德股份公司；IKA VORTEX 3 旋渦混勻器 德國艾卡公司；Heidolph 渦旋振蕩器 德國海道爾夫公司；Mettler-Toledo ME204 型電子分析天平 瑞士梅特勒-托利多集團；BP211D 型電子分析天平 德國賽多利斯集團；Milli-Q 超純水儀 美國默克集團。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準溶液的配制 混合標準溶液的配制：分別稱取適量β-受體激動劑標準品，用甲醇溶解，配制成1 mg/mL 的單一標準儲備液，于?20 ℃冰箱中儲存。取適量各標準儲備液用甲醇稀釋得17 種β-受體激動劑的混合標準溶液。

混合內(nèi)標溶液的配制：分別稱取適量馬布特羅-D9鹽酸鹽、班布特羅-D9鹽酸鹽、妥布特羅-D9鹽酸鹽、氯丙那林-D7、噴布特羅-D9鹽酸鹽、特布他林-D9醋酸鹽半水化合物、溴布特羅-D9、苯乙醇胺AD3、西布特羅-D9、萊克多巴胺-D3鹽酸鹽標準品，用甲醇溶解，配制成0.5 mg/mL 的單一內(nèi)標儲備液，于-20 ℃冰箱中儲存。取適量上述內(nèi)標儲備液及克侖特羅-D9、沙丁胺醇-D3標準品（濃度100 μg/mL），用甲醇稀釋得混合內(nèi)標溶液。

標準曲線工作液的配制：分別準確量取適量β-受體激動劑混合標準溶液及混合內(nèi)標溶液，用10%甲醇水溶液逐級稀釋，配制得濃度為0、0.5、1、2、5、10、20 ng/mL 的標準曲線工作液，內(nèi)標濃度2 ng/mL，臨用現(xiàn)配。

1.2.2 樣品前處理

1.2.2.1 提取 稱取均勻樣品2 g（精確到0.01 g）置50 mL 離心管中，加入0.2 mol/L 乙酸銨緩沖溶液（pH5.2）5 mL、β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶100 μL，2000 r/min 渦旋振蕩1 min，于37 ℃避光水浴2 h。取出后放置至室溫，加入100 ng/mL 混合內(nèi)標溶液40 μL、5%甲酸乙腈15 mL，2000 r/min 渦旋振蕩提取20 min，于4 ℃下以9500 r/min 離心5 min，待凈化。

1.2.2.2 凈化 在裝有QuEChERS dSPE EMR-Lipid粉末的離心管中加入5 mmol/L 乙酸銨溶液5 mL，渦旋30 s 使EMR-Lipid 充分混合。將1.2.2.1 中離心后的上清液全部倒入此管，渦旋1 min，于4 ℃下以9500 r/min 離心5 min。精密吸取上清液8 mL 置另一50 mL 離心管中，倒入Final Drying Pouches-MgSO4粉末（約3.5 g），迅速振搖，渦旋1 min，于4 ℃下以9500 r/min 離心5 min。精密吸取3 mL 上清液置離心管中，在50 ℃水浴下氮氣吹干，加入0.4 mL 10%甲醇水，渦旋30 s 復溶，過0.22 μm濾膜，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定[24]。

1.2.3 色譜條件 CORTECS? UPLC?C18柱（3.0 mm×100 mm，1.6 μm）；柱溫：35 ℃；流速：0.2 mL/min；進樣量5.0 μL；流動相A 為5%甲醇水溶液（含0.1%甲酸），B 為甲醇；梯度洗脫程序：0～8.00 min，10%～30% B；8.00～15.00 min，30%～95%B；15.00～18.00 min，95% B；18.00～19.00 min，95%～10% B；19.00～20.00 min，10% B。

1.2.4 質(zhì)譜條件 電噴霧離子源（ESI）：正離子模式；掃描方式：分時段多反應(yīng)監(jiān)測（Scheduled MRM，sMRM），監(jiān)測窗口（MRM detection window）：60 s，掃描時間（Target scan time）：0.3 s。電噴霧電壓：5500 V；霧化氣（GS1）壓力：60 psi；輔助氣（GS2）壓力：60 psi；氣簾氣（CUR）壓力：20 psi；離子源溫度：450 ℃；碰撞池入口電壓：10 V；碰撞池出口電壓：13 V。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Analyst 1.6.3 軟件采集數(shù)據(jù)，MultiQuant 3.0.2 軟件建立標準曲線、計算結(jié)果，Microsoft Excel 2013 處理數(shù)據(jù)及繪制圖表。本文基質(zhì)效應(yīng)和絕對萃取回收率均采用三個平行樣品計算，以平均值±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 儀器條件的優(yōu)化

2.1.1 色譜條件的優(yōu)化β-受體激動劑是在苯乙醇胺母核上修飾得到的系列化合物，結(jié)構(gòu)相近，分離難度大。本文比較了CORTECS? UPLC?C18柱（3.0 mm×100 mm，1.6 μm）和ACQUITY UPLC BEH C18柱（3.0 mm×100 mm，1.7 μm）對17 種β-受體激動劑的分離效果，妥布特羅、溴布特羅、馬布特羅、克侖潘特因極性相近，在BEH C18柱上難以分離，換用粒徑更小的實心核顆粒CORTECS? UPLC?C18柱分離效果更好，且各化合物峰形尖銳（見圖1），因此選用CORTECS? UPLC?C18柱分離17 種β-受體激動劑。

圖1 17 種β-受體激動劑的提取離子流色譜圖Fig.1 Extracted ion chromatogram of 17 β-receptor agonists

在相同梯度條件下比較了甲醇水、乙腈水兩種流動相體系的分離效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙腈較甲醇有更強的洗脫能力，在乙腈水系統(tǒng)下β-受體激動劑出峰快，分離度更差，因而選用甲醇水系統(tǒng)。電噴霧離子源正離子模式下，流動相中加入適量甲酸可增強待測組分離子化效率，提高檢測靈敏度，本文以甲醇-0.1%甲酸水作為流動相，調(diào)整梯度洗脫程序，盡可能使各組分基線分離，減少組分間離子化競爭。在優(yōu)化后的色譜條件下（見1.2.3）17 種β-受體激動劑分離度良好，均可獲得滿意的檢測靈敏度，優(yōu)化后的譜圖見圖1。

2.1.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化 電噴霧離子源正離子模式下，用流動注射泵將濃度為200 ng/mL 的17 種β-受體激動劑混合標準溶液以5 μL/min 的流速注入質(zhì)譜儀，通過Q1全掃描，找出準確的母離子峰，再對母離子施加一定的碰撞能量進行MS2掃描，獲得各自的二級碎片離子，選取2 個信號較強且干擾小的碎片離子與其母離子組成監(jiān)測離子對。在MRM 模式下，分別對去簇電壓（DP）、碰撞能量（CE）等質(zhì)譜參數(shù)進行優(yōu)化。為了提高方法靈敏度，本研究根據(jù)17 種β-受體激動劑的保留時間，采用智能時間分段的方法進行多反應(yīng)監(jiān)測掃描（Scheduled MRM，sMRM），最終確定的離子對信息及質(zhì)譜參數(shù)見表1。sMRM數(shù)據(jù)采集模式可根據(jù)每個化合物的保留時間自動調(diào)整監(jiān)測窗口，每對離子均有最恰當?shù)难h(huán)時間和駐留時間，能夠顯著提高檢測方法靈敏度[25?26]。

表1 17 種β-受體激動劑的質(zhì)譜參數(shù)Table 1 Mass spectrometric parameters of 17 β-receptor agonists

2.2 酶解條件的確定

GB/T 22286-2008[27]、GB/T 21313-2007[28]測定畜肉中β-受體激動劑時需先將樣品酶解過夜，俞曉蘭等[29]研究表明β-受體激動劑在37 ℃酶解2 h 后水解作用已基本完成，繼續(xù)延長酶解時間對提取效率的影響不顯著，且隨水解時間延長，以特布他林為代表的部分β-受體激動劑水解產(chǎn)物不穩(wěn)定導致測定結(jié)果降低。本文參考該文獻將樣品于37 ℃酶解2 h 后再用QuEChERS EMR-Lipid 凈化，與β-受體激動劑日常監(jiān)管常用的檢測方法[27?28]相比，在保證測定結(jié)果準確性的基礎(chǔ)上縮短了前處理時間，提高了樣品檢測效率。

2.3 同位素內(nèi)標的選擇

本文考察了牛肉、豬肉、羊肉加標樣品前處理后17 種β-受體激動劑的絕對萃取回收率，結(jié)果見圖2，班布特羅、克倫特羅、羥甲基克倫特羅、氯丙那林、馬布特羅、妥布特羅、溴布特羅、苯乙醇胺A、馬噴特羅、克侖潘特絕對萃取回收率大于60%，其余7 種絕對萃取回收率在46.3%～58.9%之間。同位素內(nèi)標與待測物化學結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)相似，在前處理過程中受到的影響基本一致，二者響應(yīng)比值穩(wěn)定，在絕對萃取回收率不高的情況下仍能保證測定結(jié)果的準確性。為實現(xiàn)精準定量分析，本研究在經(jīng)費許可的情況下，盡可能多地購置與待測物相對應(yīng)的同位素內(nèi)標，定量分析時均以自身同位素內(nèi)標進行計算。非諾特羅、福莫特羅、克侖潘特、馬噴特羅、羥甲基克倫特羅未購得對應(yīng)的同位素內(nèi)標，非諾特羅、福莫特羅與萊克多巴胺同屬苯酚型β-受體激動劑，三者具有相近的絕對萃取回收率與基質(zhì)效應(yīng)（見圖2、圖3），故以萊克多巴胺-D3作為非諾特羅、福莫特羅的內(nèi)標?？藖雠颂?、馬噴特羅、羥甲基克倫特羅均為苯胺型化合物，絕對萃取回收率與同為苯胺型的馬布特羅、克倫特羅相近（見圖2），但克倫特羅和羥甲基克倫特羅基質(zhì)抑制效應(yīng)較強（見圖3），以克倫特羅-D9作羥甲基克倫特羅的內(nèi)標可補償基質(zhì)抑制效應(yīng)對羥甲基克倫特羅的影響，故選擇克倫特羅-D9為羥甲基克倫特羅的內(nèi)標，馬布特羅-D9為克侖潘特、馬噴特羅的內(nèi)標。

圖2 牛肉、豬肉、羊肉樣品中17 種β-受體激動劑的絕對萃取回收率Fig.2 Absolute extraction recovery of 17 β-receptor agonists in beef,pork and mutton

圖3 牛肉、豬肉、羊肉樣品中17 種β-受體激動劑的基質(zhì)效應(yīng)Fig.3 Matrix effect of 17 β-receptor agonists in beef,pork and mutton

2.4 基質(zhì)效應(yīng)的考察

基質(zhì)效應(yīng)（ME）計算方法見公式（1），式中A1為待測物溶于有機溶劑中的峰面積，A2為待測物溶于空白基質(zhì)溶液中的峰面積，ME 在±20%以內(nèi)為可接受范圍[30?31]。

基質(zhì)效應(yīng)結(jié)果見圖3，牛肉、豬肉、羊肉對17 種β-受體激動劑均呈現(xiàn)出基質(zhì)抑制效應(yīng)，其中克倫特羅、特布他林ME 絕對值大于20%，具有明顯的基質(zhì)抑制效應(yīng)，其余15 種β-受體激動劑ME 絕對值在5.16%～17.9%之間，基質(zhì)效應(yīng)較弱，表明QuEChERS EMR-Lipid 法凈化效果良好。克倫特羅、特布他林定量分析時均以自身同位素標志物作內(nèi)標，補償了基質(zhì)抑制效應(yīng)對測定結(jié)果的影響，提高了定量準確性。

2.5 QuEChERS 法與MCX 固相萃取法凈化及提取效果對比

以牛肉為例，比較QuEChERS 法與MCX 法對17種β-受體激動劑的凈化效果?；|(zhì)效應(yīng)對比結(jié)果見圖4，兩種前處理方法均呈現(xiàn)基質(zhì)抑制效應(yīng)，大多數(shù)β-受體激動劑基質(zhì)效應(yīng)不明顯，僅有QuEChERS法克倫特羅和特布他林的ME 絕對值略大于20%，表明兩種前處理方法均有較強的基質(zhì)干擾去除效果。

圖4 牛肉樣品QuEChERS 法與MCX 法基質(zhì)效應(yīng)對比圖Fig.4 Matrix effect comparison between QuEChERS method and MCX method in beef samples

牛肉樣品QuEChERS 法與MCX 法的絕對萃取回收率對比結(jié)果見圖5，17 種β-受體激動劑在QuEChERS 法中的萃取回收率普遍高于MCX 法。MCX 柱是混合型陽離子交換柱，具有反相和陽離子交換雙重保留性能，對非極性的堿性化合物具有更高的選擇性。MCX 柱凈化需經(jīng)歷上樣、淋洗、洗脫過程，17 種β-受體激動劑母體結(jié)構(gòu)中苯環(huán)上取代基不同，極性與堿性各有差異，在MCX 柱上呈現(xiàn)出不同的保留特性，同一凈化條件下理化性質(zhì)差異大的化合物易在淋洗中損失或在洗脫中流出不完全，難以兼顧所有化合物的絕對萃取回收率，MCX 凈化下噴布特羅、苯乙醇胺A、福莫特羅的絕對萃取回收率僅有12.3%、16.4%、27.2%。QuEChERS 法使用的EMRLipid 是一種新型吸附材料，該吸附劑結(jié)合體積排阻和疏水作用兩種機制，能高選擇性地去除基質(zhì)中的脂類雜質(zhì)，凈化時僅有雜質(zhì)吸附與脫水過程，不會造成目標分析物損失，對17 種β-受體激動劑能提供更為均衡的絕對萃取回收率，最低絕對萃取回收率也能達到46.3%，與MCX 法相比更適用于多殘留的同時檢測，因而本研究選用QuEChERS EMR-Lipid 法進行樣品前處理。

圖5 牛肉樣品QuEChERS 法與MCX 法絕對萃取回收率對比圖Fig.5 Absolute extraction recovery comparison between QuEChERS method and MCX method in beef samples

2.6 方法學考察

2.6.1 線性范圍與檢出限 取標準曲線系列工作液進樣測定，以標準品與相應(yīng)內(nèi)標的峰面積比為縱坐標，以標準品濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得到線性回歸方程。采用逐步稀釋法，以3 倍信噪比（S/N）為檢出限，10 倍信噪比（S/N）為定量限，結(jié)果見表2。17種β-受體激動劑在0～20 ng/mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，檢出限為0.01～0.09 μg/kg，定量限為0.05～0.31 μg/kg，可滿足檢測要求。

表2 17 種β-受體激動劑線性范圍、回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限及定量限Table 2 Linear equation,correlation coefficient,LOD,LOQ of 17 β-receptor agonists

2.6.2 回收率與精密度 選擇豬肉、牛肉、羊肉陰性樣品，以低（0.5 μg/kg）、中（2.0 μg/kg）、高（5.0 μg/kg）三個濃度進行加標回收試驗，每個濃度水平各6 份，按照1.2.2 項下方法處理樣品后進樣測定，計算方法回收率與精密度，結(jié)果如表3 所示，3 個濃度水平下，豬肉樣品中17 種β-受體激動劑的平均回收率為83.1%～109.3%，相對標準偏差為0.8%～9.8%，牛肉樣品中17 種β-受體激動劑的平均回收率為81.7%～111.8%，相對標準偏差為1.0%～10.2%，羊肉樣品中17 種β受體激動劑的平均回收率為86.5%～111.6%，相對標準偏差為1.0%～10.3%。本方法具有較好的準確度和精密度，可滿足畜肉中17 種β-受體激動劑的檢測要求。12 種以自身同位素標志物作內(nèi)標的β-受體激動劑平均回收率在91.4%～111.8%之間，與部分已有方法[10,23]相比準確度更高，定量更為精準可靠。

表3 17 種β-受體激動劑回收率及精密度（n=6）Table 3 Recoveries and RSD of 17 β-receptor agonists (n=6)

2.7 實際樣品測定

采用本文建立的方法對100 批市售生鮮畜肉中17 種β-受體激動劑進行檢測，其中豬肉31 批，牛肉38 批，羊肉31 批，結(jié)果均為未檢出，暫未發(fā)現(xiàn)生鮮畜肉中β-受體激動劑殘留風險，與GB/T 22286-2008《動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》檢測結(jié)果一致。

3 結(jié)論

本研究采用QuEChERS EMR-Lipid 凈化法及同位素稀釋-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)建立了畜肉中17 種β-受體激動劑藥物殘留的檢測方法。酶解2 h 后的樣品經(jīng)QuEChERS EMR-Lipid 凈化，前處理步驟簡便，凈化效果良好，有效消除了基質(zhì)效應(yīng)影響，同時縮短酶解時間，提高了樣品檢測效率。采用同位素內(nèi)標法定量，補償了樣品前處理過程對測定結(jié)果的影響，17 種β-受體激動劑在0～20 ng/mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，3 個加標濃度水平下平均回收率為81.7%～111.8%，RSD 為0.8%～10.3%，檢出限為0.01～0.09 μg/kg，定量限為0.05～0.31 μg/kg，定量精準可靠，適用于大批量畜肉樣品中多種β-受體激動劑藥物殘留的同時檢測，為動物源性食品風險監(jiān)測提供了技術(shù)支持，具有廣闊的應(yīng)用前景。