馮 鵬,高 嫻,吳明謙,吳萌萌,王 新,陳夢(mèng)茜,陳冰潔,張靖飛*

(1.西安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,陜西西安 710061;2.蒲城縣畜牧發(fā)展中心,陜西蒲城 715500;3.西北農(nóng)林科技大學(xué)西安動(dòng)物醫(yī)院,陜西西安 710065)

貓傳染性腹膜炎(feline infectious peritonitis,FIP)是由貓冠狀病毒(Feline coronavirus,FCoV)引起的慢性、漸進(jìn)性、高致死性的傳染病[1]。臨床上主要以胸、腹膜炎,體腔積液,淋巴結(jié)腫大,全身多臟器出現(xiàn)肉芽腫等癥狀為主要特征,部分患貓出現(xiàn)眼睛混濁、眼前房蓄膿、縮瞳、眼球震顫、視力障礙以及后軀麻痹、痙攣發(fā)抖等癥狀[2]。FCoV主要感染3月齡到5歲的貓,1歲以下的貓更容易感染,純種貓、混養(yǎng)貓更易感。病程一般持續(xù)數(shù)周,該病的致死率較高[3]。本文通過(guò)對(duì)2022年期間西安市某動(dòng)物醫(yī)院12例FIP病例進(jìn)行調(diào)查分析,了解該病的臨床癥狀、診斷和治療方法,并進(jìn)行總結(jié)和歸納,以期為FIP臨床診療實(shí)踐提供有益參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病例 12例貓傳染性腹膜炎病例,發(fā)病貓最小年齡為3.5月齡,最大40月齡。

1.1.2 主要試劑 貓傳染性腹膜炎病毒RT-PCR檢測(cè)試劑盒,世紀(jì)元亨生物科技公司。

1.1.3 主要儀器 BC-2800Vet血常規(guī)分析儀、DP-50Vet超聲儀,邁瑞醫(yī)療器械有限公司;HV-FIA 3000熒光免疫分析儀,海衛(wèi)特醫(yī)療科技有限公司;VetTest-8008生化分析儀,愛(ài)德士生物科技有限公司;E7239X X光機(jī),諦寶誠(chéng)醫(yī)學(xué)影像科技有限公司;V8實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)儀,世紀(jì)元亨生物科技公司;HC-1016高速離心機(jī),安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 臨床基本檢查 問(wèn)診:患貓年齡、免疫、驅(qū)蟲(chóng)和日常飼喂情況,發(fā)病時(shí)間、精神狀態(tài)、食欲、排便、活動(dòng)以及體重變化等情況,既往病史,是否有與其他患貓接觸史,是否出現(xiàn)其他異常情況,是否去其他醫(yī)院進(jìn)行過(guò)診療,以及診療情況。

觀察患貓的精神和營(yíng)養(yǎng)狀態(tài),查看眼部、口腔處黏膜和全身皮膚的外觀狀態(tài),檢查腹圍是否增大或者敏感,測(cè)量體溫、脈搏和呼吸頻率,查看視覺(jué)、神經(jīng)系統(tǒng)狀況,檢查淺表淋巴結(jié)有無(wú)腫大,腹部觸診有無(wú)異常。

1.2.2 血液學(xué)檢查 抽取患貓靜脈血液1.0 mL,用全血進(jìn)行血常規(guī)和血清淀粉樣蛋白(SAA)檢查,分離血清進(jìn)行生化檢查[4]。

1.2.3 影像學(xué)檢查 進(jìn)行X光和B超檢查,查看患貓各臟器影像是否有異常,重點(diǎn)檢查胸、腹腔是否有積液。

1.2.4 RT-PCR檢測(cè)

1.2.4.1 采樣與制備 抽取患貓胸腔積液或者腹腔積液(濕性)[5]200 μL于裂解液管中,顛倒混勻,室溫下靜置3 min,期間再混勻2次。

1.2.4.2 病原RNA提取 按照柱式RNA核酸提取試劑盒(世紀(jì)元亨生物科技公司)說(shuō)明書(shū)操作步驟提取病原RNA。在吸附柱(裝收集管)中加入樣品液,13 000 r/min離心30 s,移去收集管中液體;加入吸附柱洗滌液500 μL,13 000 r/min離心30 s,移去收集管中液體;再加入吸附柱洗滌液500 μL,13 000 r/min離心2 min;將吸附柱移入1.5 mL離心管中,加入50 μL洗脫液,13 000 r/min離心30 s,所得液即為病原RNA。

1.2.4.3 RT-PCR反應(yīng) 吸取5 μL RNA提取液加入反應(yīng)體系管中,離心30 s后放入PCR儀器中,按照說(shuō)明書(shū)RT-PCR反應(yīng)程序進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。

1.2.4.4 結(jié)果判讀 檢測(cè)結(jié)果0

1.2.5 診斷 經(jīng)流行病學(xué)和臨床癥狀初步懷疑,通過(guò)血液學(xué)和影像學(xué)檢查高度懷疑該病,RT-PCR檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性,確診為FIP。

1.2.6 治療 FIP治療主要是使用核苷類似物抑制病毒合成,修復(fù)肝腎損傷,調(diào)理胃腸功能,針對(duì)出現(xiàn)的并發(fā)癥進(jìn)行對(duì)癥治療。同時(shí)要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,增進(jìn)食欲,提高免疫力,減少應(yīng)激反應(yīng)。

1.2.6.1 核苷類似物治療 皮下注射GS-441524,5 mg/kg,每日1次,一般療程為4周,后期根據(jù)臨床癥狀、血液學(xué)和影像學(xué)檢查結(jié)果,判定是否延長(zhǎng)使用藥物[6]。

1.2.6.2 支持修復(fù)治療 口服S-甲硫腺苷氨酸等保肝藥,修復(fù)受損的肝細(xì)胞;補(bǔ)充白蛋白,提升白蛋白指標(biāo);使用腸道益生菌、高免因子等藥物,調(diào)整胃腸功能,增進(jìn)食欲,提高免疫力。

1.2.6.3 對(duì)癥治療 胸、腹腔積液嚴(yán)重時(shí),要進(jìn)行穿刺放液,緩解癥狀;出現(xiàn)脫水、電解質(zhì)紊亂時(shí),靜脈補(bǔ)液、補(bǔ)鹽、調(diào)節(jié)酸堿平衡;出現(xiàn)消化道、呼吸道等癥狀時(shí),須進(jìn)行消炎、止吐、止瀉等對(duì)癥治療。

1.2.6.4 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理 提供營(yíng)養(yǎng)全面豐富的食物,適當(dāng)增加食肉量,可在食物中拌入罐頭、羊奶粉?；謴?fù)期適當(dāng)增加患貓的活動(dòng)量,提高抗病力。

1.2.6.5 減少應(yīng)激 保持患貓治療環(huán)境安靜衛(wèi)生,固定醫(yī)護(hù)人員進(jìn)行護(hù)理,減少人為應(yīng)激。

2 結(jié)果

2.1 臨床癥狀

12只患貓,全部表現(xiàn)精神不振、食欲減退,隨著病程發(fā)展,體重逐漸下降,有7只體溫升高(39.6～40.5℃),2只出現(xiàn)拉稀,5只小便發(fā)黃,7只腹圍增大,6只呼吸頻率加快,1只出現(xiàn)虹膜病變,結(jié)膜發(fā)炎(表1)。

表1 患貓主要臨床癥狀Table 1 Main clinical symptoms of cats

2.2 血液學(xué)檢查

2.2.1 血常規(guī)檢查 患貓表現(xiàn)為輕到中度貧血有7例(7/12)、白細(xì)胞總數(shù)上升5例(5/12)、中性粒細(xì)胞數(shù)量升高6例(6/12)、淋巴細(xì)胞數(shù)量下降8例(8/12)、血小板減少4例(4/12)(圖1)。

圖1 患貓血常規(guī)異常情況Fig.1 Abnormal blood routine of the affected cat

2.2.2 血清淀粉樣蛋白檢查(SAA) 所有患貓SAA值都高于正常值范圍。

2.2.3 生化檢查 生化指標(biāo)表現(xiàn)為:谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高3例(3/12),總蛋白升高5例(5/12),白蛋白降低5例(5/12),球蛋白升高8例(8/12)(圖2)。白蛋白/球蛋白(A/G)全部低于0.6,3例介于0.4和0.6之間,9例低于0.4(見(jiàn)圖3)。

圖2 患貓血液生化檢查異常情況Fig.2 Abnormal blood biochemistry examination of the affected cat

圖3 患貓白蛋白、球蛋白比值分布Fig.3 Distribution of albumin and globulin ratios in infected cats

2.3 影像學(xué)檢查

2.3.1 X光檢查 12只患貓表現(xiàn)為胸腔積液3例(3/12)(圖3)、腹腔積液10例(10/12)(圖4)。

圖4 X光檢查顯示胸腔積液Fig.4 X-ray examination shows pleural effusio

圖5 X光檢查顯示腹腔積液Fig.5 X-ray examination shows peritoneal effusion

2.3.2 B超檢查 腎臟出現(xiàn)異常3例(包括腎臟增大、皮質(zhì)回聲增強(qiáng)、腎臟髓質(zhì)輪圈征等)(3/12)(圖6)、肝臟出現(xiàn)低回聲或回聲不等4例(4/12)(圖7)、淋巴結(jié)病變3例(3/12)。

圖6 B超檢查顯示腎臟形態(tài)不規(guī)則Fig.6 B-ultrasound examination shows irregular renal morphology

圖7 肝周腹水Fig.7 B-ultrasound examination shows perihepatic ascites

2.4 RT-PCR檢測(cè)

對(duì)10只濕性可疑FIP患貓采集胸腔或者腹腔積液,經(jīng)RT-PCR檢測(cè),Ct值全部小于36,并出現(xiàn)了特異性的S型擴(kuò)增曲線,全部判定為陽(yáng)性。圖8為1只患貓的擴(kuò)增曲線圖。

圖8 貓冠狀病毒RT-PCR檢測(cè)Fig.8 FCoV RT-PCR detection

對(duì)另2只干性可疑FIP患貓,需采集房水、腦脊液,因采集難度大,貓主人不愿配合,僅能通過(guò)流行病學(xué)、臨床癥狀、血液學(xué)和影像學(xué)檢查判定為高度可疑病例。

2.5 治療結(jié)果

對(duì)12只患貓進(jìn)行了治療,治療3～5 d后,大多數(shù)患貓食欲和精神狀態(tài)開(kāi)始逐漸改善,1周后,體重呈現(xiàn)上升趨勢(shì),治療4周后,9只患貓康復(fù),但2只于停藥1周后復(fù)發(fā),再按照原治療方案治療后康復(fù),治愈率為75%。2只患貓?jiān)谥委熯^(guò)程的前2周內(nèi)死亡;1只患貓?jiān)谥委? d后,放棄在本院治療。

3 討論

貓感染FIP后主要表現(xiàn)精神不振、食欲減退,隨著病程發(fā)展,體重逐漸下降,部分患貓會(huì)出現(xiàn)體溫升高、腹圍增大、呼吸頻率加快,以及眼部病變和神經(jīng)癥狀,但以上癥狀均不具有特殊性,其他疾病也會(huì)表現(xiàn)。因此,單從臨床癥狀難以確診,需要做進(jìn)一步的檢查和化驗(yàn)。

血常規(guī)、生化等檢查結(jié)果表明,部分患貓出現(xiàn)輕度到中度貧血,白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)和血清淀粉樣蛋白上升伴發(fā)淋巴細(xì)胞下降,以及輕度的肝腎損傷,由于能引發(fā)上述指標(biāo)變化的原因較多,因此無(wú)法根據(jù)以上化驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行確診,不過(guò)血常規(guī)和生化結(jié)果對(duì)輔助診斷和后續(xù)的治療具有很重要的指導(dǎo)意義。

白蛋白/球蛋白(A/G)具有重要的診斷指向性,特別是對(duì)于干性FIP,由于RT-PCR檢測(cè)需要采集房水、腦脊液作為病料,實(shí)際操作中困難較大,因此A/G的比值作為干性FIP診斷的重要依據(jù)。有研究表明,當(dāng)A/G比值<0.4,患FIP的可能非常大,當(dāng)A/G比值>0.6時(shí),基本上能夠排除患有FIP,因此,A/G的比值越低患有FIP風(fēng)險(xiǎn)越大[7]。12只患貓,白蛋白與球蛋白的比值全部小于0.6,并且75%的小于0.4,與上述研究觀點(diǎn)一致。

影像學(xué)檢查對(duì)FIP具有較強(qiáng)的輔助診斷作用。通過(guò)X光、B超檢查,可查出患貓胸、腹腔積液分布和存量,同時(shí)可發(fā)現(xiàn)肝、腎臟、腸系膜淋巴結(jié)等臟器是否異常,特別是干性FIP時(shí),外觀無(wú)明顯癥狀,可通過(guò)B超發(fā)現(xiàn)異常[8]。影像學(xué)檢查對(duì)后續(xù)恢復(fù)狀況的評(píng)估也有很重要的幫助。

RT-PCR檢測(cè)是FIP診斷的金標(biāo)準(zhǔn),其特異性強(qiáng)、檢出率高,特別是對(duì)濕性FIP病例,采樣簡(jiǎn)單,準(zhǔn)確性高,可操作性強(qiáng),是目前臨床主要的確診方法。但是,對(duì)于未形成胸、腹腔積液的干濕FIP病例,需要采集房水、腦脊液作為病料,因采集難度大,采集過(guò)程中可能對(duì)患貓?jiān)斐蓳p害,貓主人往往不愿配合,因此,臨床上通常僅能通過(guò)流行病學(xué)、臨床癥狀、血液學(xué)和影像學(xué)檢查判定為高度可疑病例。

FIP早期癥狀不明顯,較難發(fā)現(xiàn),因此及早建立診斷、進(jìn)行治療是非常重要的。核苷類似物的使用大大提高了FIP的治愈率,據(jù)報(bào)道,該類藥物未被應(yīng)用于臨床前,FIP死亡率可達(dá)90%以上。從治療過(guò)程來(lái)看,核苷類似物治療效果比較明顯的,治療3～5 d,大多數(shù)患貓都表現(xiàn)出好轉(zhuǎn)反應(yīng),一周后,身體機(jī)能恢復(fù)比較明顯,療程一般為4周左右,大多數(shù)患貓能夠康復(fù)。但由于患貓的體質(zhì)差異,該病的治療周期較長(zhǎng),有少量貓會(huì)出現(xiàn)病情的復(fù)發(fā)。因此,要密切關(guān)注患貓的恢復(fù)情況,結(jié)合檢查化驗(yàn)指標(biāo),制定合理的用藥周期。停藥后要定期復(fù)診,降低病情反復(fù)的可能。

在治療過(guò)程中要配合使用其他藥物。核苷類似物的長(zhǎng)期使用可能會(huì)對(duì)肝臟造成一定的毒負(fù)作用,因此,治療中往往會(huì)給患貓使用保肝藥物;為了增強(qiáng)患貓的胃腸功能,提高其抗病力,也會(huì)使用腸道益生菌;此外,針對(duì)不同的癥狀,進(jìn)行對(duì)癥治療,可以減輕病痛,改善身體機(jī)能,使患貓更好地進(jìn)行恢復(fù)。

治療過(guò)程中患貓的精神狀態(tài)和體重可作為轉(zhuǎn)歸的基礎(chǔ)指標(biāo),血液檢查中淋巴細(xì)胞數(shù)量、A/G等指標(biāo)的改善,以及影像學(xué)檢查中各臟器的恢復(fù)也是FIP轉(zhuǎn)好的重要指標(biāo)[9-10]。因此,在治療過(guò)程中要密切關(guān)注患貓的臨床變化,定期進(jìn)行血液學(xué)化驗(yàn)和影像學(xué)檢查,精準(zhǔn)掌握病情的發(fā)展?fàn)顩r,及時(shí)進(jìn)行治療調(diào)整。

目前,尚無(wú)有效的 FIP 疫苗,因此加強(qiáng)日常管理對(duì)FIP的預(yù)防尤為重要。FCoV 抵抗力較弱,常見(jiàn)的消毒劑都可殺滅。提供安靜衛(wèi)生的生活環(huán)境,定期進(jìn)行環(huán)境消毒,保證干凈、營(yíng)養(yǎng)豐富的食物,盡量讓每只貓使用獨(dú)立的糧盆和貓砂盆,及時(shí)清除糞便。每戶養(yǎng)貓數(shù)量不宜過(guò)多,一般不超過(guò)3只,這些措施能夠很好地預(yù)防FIP的發(fā)病。