■ 張國欣 王永海 宋志剛*

（1.山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，山東泰安 271018；2.高密市畜牧業(yè)發(fā)展中心，山東濰坊261500）

豆粕具有極高的營養(yǎng)價值，其蛋白質含量豐富，常作為家禽營養(yǎng)中蛋白質的主要來源。隨著家禽集約化養(yǎng)殖程度的提高、規(guī)模的擴大、市場上對豆粕的需求量也越來越大。然而，豆粕中存在抗營養(yǎng)因子，制粒后顆粒較硬，難以消化，且家禽從攝入食物到排泄時間較短，因此還沒來得及消化的豆粕便隨之排出，造成了資源的浪費和成本的增加。

發(fā)酵豆粕通過微生物發(fā)酵，有效地降解了豆粕中的主要抗營養(yǎng)因子，可改善飼料適口性，對促進動物的健康成長具有重要意義[1-2]。目前學者對發(fā)酵豆粕對蛋雞的影響研究中發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵豆粕組產(chǎn)蛋率、哈氏單位、蛋殼厚度和蛋形指數(shù)均有所提升[3-4]。目前鮮有在海蘭褐蛋雞試驗上進行發(fā)酵豆粕與40%豆粕高比例的替代研究，本試驗以海蘭褐蛋雞為研究對象，研究用發(fā)酵豆粕替代40%豆粕對海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質及免疫功能的影響，旨在為發(fā)酵豆粕替代正常豆粕在家禽飼糧中的應用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料及試驗地點

試驗材料為濕態(tài)發(fā)酵豆粕，由某公司提供，以豆粕為原料，使用乳酸菌、酵母菌和丁酸梭菌等益生菌發(fā)酵制成，活菌總數(shù)為1×108CFU/g。試驗地點在山東農(nóng)業(yè)大學科技創(chuàng)新院畜牧科技實驗站進行。試驗雞舍及配備的蛋雞福利養(yǎng)殖設備均由山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院提供。

1.2 試驗設計

選用48 周齡144 只體型和產(chǎn)蛋率基本一致的海蘭褐蛋雞，隨機分為2 組，每組6 個重復，每個重復12 只。對照飼喂基礎飼糧，試驗組用發(fā)酵豆粕替代40%的正常豆粕（飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1）。試驗期為8 周，每天統(tǒng)計生產(chǎn)性能，第4 周和第8 周結束時測蛋品質，采集血清。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.3 測定指標及方法

1.3.1 生產(chǎn)性能和蛋品質

生產(chǎn)性能：試驗期內(nèi)以重復為單位統(tǒng)計采食量、產(chǎn)蛋數(shù)、產(chǎn)蛋重，計算平均產(chǎn)蛋率、料蛋比、平均蛋重和平均日采食量。

產(chǎn)蛋率（%）=產(chǎn)蛋數(shù)/試驗蛋雞數(shù)量×100

合格蛋率（%）=合格蛋數(shù)/總產(chǎn)蛋數(shù)×100

平均蛋重（g）=產(chǎn)蛋總重量（g）/產(chǎn)蛋總數(shù)（個）

平均日采食量（g）=總采食量（g）/[試驗蛋雞數(shù)量（只）×試驗天數(shù)（d）]

料蛋比=總耗料量（g）/總產(chǎn)蛋重量（g）

蛋品質：第4周和第8周時，分別從每個重復隨機抽取3 個雞蛋，測定蛋品質。采用色差儀（CR-410型，日本美能達公司）測定蛋殼顏色，電子天平稱蛋重，游標卡尺測定雞蛋的長、短徑，蛋殼厚度測量儀（ETG-1061 型，日本Robot-mation 公司）測定蛋殼厚度，蛋殼強度測試儀（EFG-0503 型，日本Robotmation 公司）測定蛋殼強度，多功能蛋品質檢測儀（EMT-5200 型，日本Robot-mation 公司）測定蛋白高度、蛋黃顏色、哈氏單位。

1.3.2 外周免疫指標

第4 周和第8 周時，分別于每個重復中選取體重接近的1 只雞翅下靜脈采血3 mL，收集血清，標記好后于-20 ℃保存待測。用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）檢測血清中內(nèi)毒素（ET）、白細胞介素-1β（IL-1β）和免疫球蛋白A（IgA）的含量。所有的測定程序都嚴格按照制造商的說明進行。批內(nèi)和批間變異系數(shù)（CV）均小于10%。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)用“平均值±標準誤”表示，采用Excel進行初步處理，再用SAS 9.1.3 統(tǒng)計軟件ANOVA 進行單因子方差分析，P<0.05 表示差異顯著，0.05≤P<0.10 表示具有差異顯著趨勢，P>0.05表示差異不顯著。

2 結果與分析

2.1 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能影響

由表2、表3 分析可得，飼糧中用發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕可顯著提高海蘭褐蛋雞1～4 周的合格蛋率（P<0.05），對1～4 周產(chǎn)蛋率、平均日采食量和5～8周的合格蛋率有提升的趨勢（0.05≤P<0.10），對其他生產(chǎn)性能指標無顯著影響（P>0.05）。

表2 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞1～4周生產(chǎn)性能的影響

表3 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞5～8周生產(chǎn)性能的影響

2.2 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞蛋品質影響

由表4 分析可得，飼糧中用發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕對海蘭褐蛋雞第4 周的蛋黃顏色和哈氏單位有降低的趨勢（0.05≤P<0.10），對其他蛋品質指標沒有顯著影響（P>0.05）。

表4 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞第4周蛋品質的影響

由表5 分析可得，飼糧中用發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕對海蘭褐蛋雞第8 周蛋品質沒有顯著影響（P>0.05）。

表5 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞第8周蛋品質的影響

2.3 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞免疫功能的影響

由表6 分析可得，發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕顯著提高了海蘭褐蛋雞第4 周和第8 周血清IgA水平（P<0.05），降低了第4 周血清ET 水平（P<0.05），且第4 周血清IL-1β有降低趨勢（0.05≤P<0.10），其余指標沒有顯著差異（P>0.05）。

表6 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞血清生化指標的影響

3 討論

3.1 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞的生產(chǎn)性能的影響

評估產(chǎn)蛋率與合格蛋率是衡量蛋雞生產(chǎn)性能的主要指標。本試驗研究表明，用發(fā)酵豆粕代替40%普通豆粕對海蘭褐蛋雞第1～4 周合格蛋率有顯著影響，對產(chǎn)蛋率和平均日采食量有提升的趨勢。王偉鋒等[5]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中分別添加1%和3%的發(fā)酵豆粕，與對照組相比，產(chǎn)蛋率出現(xiàn)了顯著降低的現(xiàn)象，其余指標則無顯著差異。而孫亞楠等[6]發(fā)現(xiàn)用2%的發(fā)酵豆粕代替豆粕不僅提高了蛋雞產(chǎn)蛋率，而且還降低了破蛋率；也有學者研究發(fā)現(xiàn)5%的發(fā)酵豆粕使合格蛋率得到顯著提高，而料蛋比等其余指標則無顯著變化[7]。合格蛋率和采食量的顯著提升，是因為豆粕在進行發(fā)酵過程中，使得其中的蛋白質分解為多肽和氨基酸等小分子物質，有利于機體對營養(yǎng)物質的吸收，并且豆粕在發(fā)酵完后會產(chǎn)生一種酸香味，誘食效果較強，可以促進動物的采食[8]。

3.2 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞蛋品質的影響

蛋品質是區(qū)分蛋雞所產(chǎn)雞蛋好壞的主要依據(jù)，從而直接影響雞蛋的商業(yè)價值和種用價值，其外在品質和內(nèi)在品質都是驗證雞蛋好壞的重要指標[9]。蛋黃顏色是蛋黃色澤的一個反映指標，其值越大表示蛋黃顏色越深。在本試驗中，發(fā)酵豆粕替換40%豆粕使海蘭褐蛋雞第4 周蛋黃顏色有所降低，這與李彬等[9]添加5%濕基豆粕顯著降低蛋黃顏色結論相一致，而與吳俊峰等[10]發(fā)現(xiàn)飼料中添加發(fā)酵豆粕使得蛋黃顏色提高則不同，這可能與此次替換豆粕比例較大有關。哈氏單位可以衡量蛋白的新鮮程度，其數(shù)值越大，表示蛋越新鮮。陳慶達[4]等研究表明，日糧中添加7.5%濕性發(fā)酵豆粕可以提高哈氏單位，改善蛋品質。而本試驗結果顯示，用40%發(fā)酵豆粕代替普通豆粕，蛋雞第4周哈氏單位有下降趨勢，結果的差異可能與發(fā)酵豆粕高劑量使用的影響有關，內(nèi)在機制影響還需做進一步的研究。

3.3 發(fā)酵豆粕對海蘭褐蛋雞免疫功能的影響

免疫系統(tǒng)的存在是為了免受致病性細菌的入侵和其他有毒有害物質的侵害[11]，而動物機體免疫力的強弱可由血清中白細胞介素水平和抗體水平來體現(xiàn)[12]。白細胞介素可介導免疫細胞的活化、增殖和分化以及對炎癥反應的調控，以此來保持機體炎癥反應的平衡[13-14]。

IL-1β通過參與細胞生命周期活動來介導機體的炎癥反應[15]，同時還可與TNF-α共同介導其他細胞因子來調節(jié)炎癥反應[16]。

本試驗研究結果顯示，用發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕顯著提高了海蘭褐蛋雞第4 周和第8 周IgA 水平，并且顯著降低了第4 周血清ET 水平，同時第4周血清IL-1β有降低趨勢。第8周的蛋雞血清ET含量對照組和試驗組差異不顯著。腸道菌群與腸道炎癥的產(chǎn)生十分密切，益生菌的減少會降低對致病菌的抑制作用，致病菌可通過破壞腸道黏膜，打破腸道穩(wěn)態(tài)，引起炎癥反應[17]，而陳國營等[18]用枯草芽孢桿菌發(fā)酵的豆粕飼喂蛋雞時，發(fā)現(xiàn)其腸道有害菌數(shù)量顯著下降，有益菌數(shù)量則顯著上升。由此可得出，發(fā)酵豆粕所使用的菌種也起到了至關重要的作用，在目前的研究中，丁酸梭菌有利于維持腸道健康和菌群平衡，還可以緩解腸道損傷，有利于增強動物機體抵抗力[19-20]。乳酸菌同樣作為益生菌的一種，不僅可以抑制細菌的附著[21]，還可以產(chǎn)生氨基酸等營養(yǎng)物質，可提高動物機體對營養(yǎng)物質的吸收，維護腸道健康[22-23]。這也可能是許多學者在進行發(fā)酵豆粕試驗時所得出來試驗結果不盡相同的原因。許麗惠等[24]在發(fā)酵豆粕對黃羽肉雞血清生化指標的影響結果顯示，與對照組相比，試驗組的血清蛋白有不同程度提高，而Nie 等[25]和Ruan 等[26]以及Chiang 等[27]在試驗中同樣也得到了相似的結果。球蛋白是B淋巴細胞所分泌的一種抗體，在體液免疫中發(fā)揮著重要作用，球蛋白含量的增加使得機體抵抗力有所提升，而IgA 水平的提高也進一步印證了Cheng 等[28]的研究結果，發(fā)酵豆粕的添加應用可提高機體的免疫力。

4 結論

在本試驗條件下，用發(fā)酵豆粕代替飼糧中40%豆粕可提高海蘭褐蛋雞合格蛋率和采食量，降低IL-1β因子和ET水平，提高海蘭褐蛋雞IgA水平從而增強了機體免疫力和抵抗力。