王萬(wàn)俊 陸亮 夏天 胡曉東 李偉 吳珍珍 李小月

在發(fā)達(dá)國(guó)家和發(fā)展中國(guó)家，攜帶幽門螺桿菌的患病率分別10%～20%至80%～90%，大多數(shù)攜帶者無(wú)癥狀[1，2]。慢性咽炎發(fā)病率高，發(fā)病后患者主要癥狀為咽部不適、咽部分泌物不易咳出、咽部異物感、刺激感等，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[3]。研究顯示幽門螺桿菌與慢性咽喉炎性疾病之間存在相關(guān)性[4]，幽門螺桿菌檢測(cè)對(duì)該病的治療具有參考意義。為進(jìn)一步了解慢性咽炎患者和反流性咽喉炎患者的幽門螺桿菌感染情況，我院通過(guò)患者外周血清區(qū)分幽門螺桿菌致病性毒素和非致病性毒素抗體型分別獲取幽門螺桿菌感染情況，詳細(xì)資料如下。

資料與方法

1 臨床資料

選取2019 年1 月～2021 年10 月我院就診的慢性咽喉炎性疾病患者250 例，其中反流性咽喉炎122 例，男性50 例，女性72 例。年齡21～62 歲，平均（44.2±2.3）歲；慢性咽炎128 例，男性58 例，女性70例。年齡25～68 歲，平均（43.3±3.1）歲。并隨機(jī)選取同期體檢中心健康體檢者200 例作為對(duì)照組，其中男性88 例，女性112 例,年齡23～55 歲，平均（44.5±22）歲。反流性咽喉炎、慢性咽炎、健康體檢者均空腹采集靜脈外周血5ml，4000r/min 離心15min 后檢測(cè)待用。

2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)

①均經(jīng)?？茩z查確診為慢性咽喉炎性疾??；②均符合慢性咽喉炎性疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)；③患者及家屬對(duì)本研究均知情同意。

反流性咽喉炎診斷標(biāo)準(zhǔn)

咽喉部常規(guī)檢查，咽腔黏膜慢性充血，咽后壁淋巴濾泡增生，咽側(cè)索肥厚，間接喉鏡及纖維喉鏡下見(jiàn)杓間區(qū)黏膜充血，水腫，聲帶充血肥厚。24 h 喉咽食管pH 監(jiān)測(cè)診斷指標(biāo)：24h 咽喉酸反流事件≥3次或喉咽部pH 值＜4.總時(shí)間≥1%或24 小時(shí)內(nèi)喉咽反流面積指數(shù)（reiuxarea index. RAI）＞6.3。咽部pH監(jiān)測(cè)（DX-pH）診斷指標(biāo):直立位時(shí)Ryan 指數(shù)＞9.41和（或）臥位時(shí)＞6.79[5]。

慢性咽炎診斷標(biāo)準(zhǔn)

患者咽部黏膜彌漫性充血，血管擴(kuò)張，呈暗紅色，咽后壁常有少許黏稠分泌物附著[6]。

2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

①各種神經(jīng)疾患引發(fā)的功能性疾??；②近1 個(gè)月來(lái)使用過(guò)激素、抗生素、非甾體類藥物、質(zhì)子泵抑制劑、H2受體阻滯劑、鉍制劑等可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的藥物；③慢性咽喉炎外的呼吸道感染；④嚴(yán)重器質(zhì)性疾病。

3 檢測(cè)方法

幽門螺桿菌抗體分型相關(guān)實(shí)驗(yàn)采用伯勞特（深圳）公司生產(chǎn)的幽門螺桿菌抗體分型檢測(cè)試劑盒，并搭配其對(duì)應(yīng)的免疫印跡儀使用。按照試劑盒說(shuō)明書判讀結(jié)果：出現(xiàn)質(zhì)控帶，且空泡毒素（CagA），穿孔蛋白（VacA）區(qū)帶出現(xiàn)一種或二者同時(shí)出現(xiàn)，則為HPI 型感染；出現(xiàn)質(zhì)控帶、尿素酶A（UreA）和尿素酶B（UreB）區(qū)帶出現(xiàn)一種或二者同時(shí)出現(xiàn)，且未見(jiàn)CagA，VacA 帶，則為HPⅡ型感染；僅出現(xiàn)質(zhì)控帶則為陰性結(jié)果。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究使用SPSS 20.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理并做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料用表示，兩組對(duì)比用t檢驗(yàn)，多組間各進(jìn)行采用單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料用率表示，比較用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

結(jié)果

1 反流性咽喉炎組、慢性咽炎組、對(duì)照組幽門螺桿菌感染情況

表1 顯示，反流性咽喉炎組幽門螺桿菌感染率高于慢性咽炎組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。反流性咽喉炎組和慢性咽炎組幽門螺桿菌感染率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 反流性咽喉炎組、慢性咽炎組及對(duì)照組幽門螺桿菌（HP）感染一覽表

2 反流性咽喉炎組、慢性咽炎組、對(duì)照組不同性別幽門螺桿菌感染見(jiàn)表2。

表2 反流性咽喉炎組、慢性咽炎組及對(duì)照組不同性別間幽門螺桿菌（HP）感染比較表

反流性咽喉炎組女性幽門螺桿菌感染陽(yáng)性率明顯高于慢性咽炎組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=18.778，P=0.000）。反流性咽喉炎組和慢性咽炎組幽門螺桿菌感染陽(yáng)性率無(wú)論男性還是女性，均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=111.672，P=0.000/χ2=48.297，P=0.000）。

3 反流性咽喉炎組、慢性咽炎組及對(duì)照組幽門螺桿菌感染抗體分型情況見(jiàn)表3。

表3 反流性咽喉炎組、慢性咽炎組、對(duì)照組幽門螺桿菌感染陽(yáng)性抗體表達(dá)分型情況一覽表

反流性咽喉炎組幽門螺桿菌I 型抗體表達(dá)明顯高于慢性咽炎組，差異有顯著性意義（χ2=20.317，P=0.000）。反流性咽喉炎組幽門螺桿菌Ⅰ型（HPⅠ）和Ⅱ型抗體（HPⅡ）表達(dá)均高于對(duì)照組（χ2=113.475，P=0.000）。慢性咽炎組幽門螺桿菌I 型和Ⅱ型抗體表達(dá)均高于對(duì)照組（χ2=47.436，P=0.000）。

討論

幽門螺桿菌（H.pylori）是一種革蘭氏陰性桿菌，存在于低pH 值胃液中。胃是幽門螺桿菌的天然儲(chǔ)存庫(kù)，這是一個(gè)被廣泛接受的事實(shí)。自20 世紀(jì)80年代初沃倫和馬歇爾發(fā)現(xiàn)幽門螺桿菌以來(lái)，大量研究證明幽門螺桿菌對(duì)胃和十二指腸潰瘍的發(fā)病率有重要影響[7，8]。HP 是胃炎的主要病因，在消化性潰瘍、胃潰瘍、胃癌和原發(fā)性胃B 細(xì)胞淋巴瘤的發(fā)展中也起著重要作用[9]。

幽門螺桿菌的全身免疫和炎癥反應(yīng)可能與胃腸外系統(tǒng)疾病有關(guān)[10]。最近的研究已經(jīng)確定了幽門螺桿菌感染與心血管、神經(jīng)、皮膚、免疫學(xué)、血液學(xué)、肝膽、眼科和婦科疾病以及糖尿病的發(fā)病機(jī)制之間的潛在關(guān)系[11-13]。幽門螺桿菌在下呼吸道疾病發(fā)展中的作用也已被提出，但病理生理學(xué)關(guān)聯(lián)尚未被證實(shí)[14，15]。感染幽門螺桿菌的胃液和對(duì)胃幽門螺桿菌感染的全身免疫反應(yīng)可能在上呼吸道疾病中發(fā)揮致病作用[16，17]。研究表明，幽門螺桿菌攜帶者兒童或早發(fā)性過(guò)敏性哮喘、變應(yīng)性鼻炎和特應(yīng)性皮炎的風(fēng)險(xiǎn)降低[18，19]。此外頭頸部鱗狀細(xì)胞癌患者（喉部、下咽部、舌頭、扁桃體、鼻咽部和舌根/舌骨）血清樣本中檢測(cè)到幽門螺桿菌抗體[20，21]。人類胃并不是HP 的唯一儲(chǔ)存庫(kù)，它已在牙菌斑、口腔病變和唾液中檢測(cè)到。幽門螺桿菌與慢性咽炎、慢性咽喉炎、慢性扁桃體炎的關(guān)系也日益受到關(guān)注[20-22]。因此本研究檢測(cè)了我院反流性咽喉炎、慢性咽炎和健康體檢者的幽門螺桿菌抗體表達(dá)情況，分析其幽門螺桿菌的感染狀態(tài)，為后續(xù)探討幽門螺桿菌感染精準(zhǔn)治療提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

本研究顯示，反流性咽喉炎組（82.79%）幽門螺桿菌感染率明顯高于慢性咽炎組（60.16%），比較有顯著性差異；同時(shí)反流性咽喉炎組和慢性咽炎組幽門螺桿菌感染率均明顯高于對(duì)照組（22.5%），有顯著性差異。反流性咽喉炎組女性幽門螺桿菌感染陽(yáng)性率明顯高于慢性咽炎組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示女性中幽門螺桿菌感染可能與反流性咽喉炎存在一定的關(guān)聯(lián)。反流性咽喉炎組和慢性咽炎組幽門螺桿菌感染陽(yáng)性率無(wú)論男性還是女性，均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

在HP 多種毒素蛋白中，VacA（空泡毒素）和CagA 是主要的毒素蛋白因子，具有這兩種毒素的菌株感染的黏膜出現(xiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，毒素蛋白可使胃黏膜遭受炎癥和免疫損傷，更易遭受胃酸和胃蛋白酶的侵襲，從而導(dǎo)致各種后續(xù)病變[23，24]。CagA 可以促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移，使胃上皮細(xì)胞腸化，導(dǎo)致癌變[23]。VacA 在參與H．pylori 的致病過(guò)程中發(fā)揮了多種作用，最主要的生物學(xué)特性是在宿主細(xì)胞內(nèi)形成空泡以及促使凋亡[24]。血清學(xué)無(wú)創(chuàng)幽門螺桿菌抗體分型檢測(cè)，可以檢測(cè)HP 不同毒素因子表達(dá)從而區(qū)分致病性感染（I 型抗體表達(dá)VacA/CagA 毒素蛋白陽(yáng)性）和非致病性感染（II 型抗體僅表達(dá)尿素酶陽(yáng)性）。因此幽門螺桿菌感染抗體分型檢測(cè)為區(qū)分致病性HP 感染具有重要意義。

本研究顯示，反流性咽喉炎組幽門螺桿菌I 型抗體表達(dá)（57.38%）明顯高于慢性咽炎組（32.03%），有顯著性差異。反流性咽喉炎幽門螺桿菌I 型抗體（57.38%）和Ⅱ型抗體（25.41%）及慢性咽炎組幽門螺桿菌I 型抗體（32.03%）和Ⅱ型抗體（28.13%）表達(dá)抗體均高于對(duì)照組I 型抗體（12.5%）和Ⅱ型抗體（10%）表達(dá)。

盡管幽門螺桿菌普遍易感，但反流性咽喉炎組的I 型抗體(VacA/CagA 毒素蛋白)表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于慢性咽炎組，差異有顯著性意義，提示表達(dá)VacA/CagA 毒素蛋白的幽門螺桿菌感染促進(jìn)返流性咽喉炎發(fā)生、發(fā)展和疾病進(jìn)程，因此，返流性咽喉炎患者檢測(cè)幽門螺桿菌感染抗體類型，為臨床綜合治療是否選擇根治幽門螺桿菌提供依據(jù)。