郜 志，田 甜*，董穎男，李卉潁，吳思雯，高 微

（1.沈陽(yáng)工程學(xué)院 新能源學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110036；2.沈陽(yáng)大學(xué) 環(huán)境學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110045；3.遼寧省檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證中心 食品檢驗(yàn)檢測(cè)院，遼寧沈陽(yáng) 110015）

若蔬菜水果上的農(nóng)藥殘留清洗不當(dāng)，可通過(guò)呼吸道、皮膚、胃腸道等部位吸收進(jìn)入人體，引發(fā)中毒[1-2]。為此，我國(guó)制定了嚴(yán)格的農(nóng)藥殘留最大殘留量標(biāo)準(zhǔn)。農(nóng)藥殘留檢測(cè)具有以下難點(diǎn)。①農(nóng)藥種類繁多，生產(chǎn)的農(nóng)藥基本是多種復(fù)配而成的混合型農(nóng)藥[3]。因此，常規(guī)檢測(cè)一種或幾種農(nóng)藥殘留的方法已經(jīng)不能滿足實(shí)際需求。②受農(nóng)作物基質(zhì)效應(yīng)的影響，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，其檢測(cè)值可成倍數(shù)偏高或偏低，甚至出現(xiàn)假陽(yáng)性。③農(nóng)藥殘留含農(nóng)藥濃度往往是微量的，想要準(zhǔn)確檢測(cè)出殘留量，檢測(cè)儀器和方法需要更高的靈敏度和精密度。因此，結(jié)合《國(guó)家食品安全監(jiān)督抽檢實(shí)施細(xì)則》（2023 版），篩選近3 年中氣質(zhì)法測(cè)定的40 種農(nóng)藥殘留項(xiàng)目。這40 種農(nóng)藥殘留項(xiàng)目包含有機(jī)磷、有機(jī)氯及氨基甲酸酯類農(nóng)藥，實(shí)現(xiàn)常用農(nóng)藥種類的全覆蓋；同時(shí)在數(shù)量上，包含國(guó)家監(jiān)管、抽檢細(xì)則、風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)規(guī)定農(nóng)藥的70%以上。

韭菜作為基質(zhì)極其復(fù)雜的待測(cè)物[4-5]，其農(nóng)藥殘留不合格率超過(guò)農(nóng)藥殘留不合格率總量的50%，是困擾檢驗(yàn)檢測(cè)行業(yè)的重大難題。目前，農(nóng)藥殘留測(cè)定使用的前處理技術(shù)主要有QuEChERS 法[6]、固相微萃取法[7]、凝膠滲透色譜法[8]、液液萃取法[9]、固相萃取法[10]和加速溶劑萃取法[11]等。QuEChERS法是目前常見(jiàn)的樣品前處理方法[12]。因此，本研究采用新型的納米凈化技術(shù)Sin-QuEChERS Nano 和經(jīng)典的分散固相萃取凈化技術(shù)QuEChERS 兩種方法進(jìn)行對(duì)比，探討適用于快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)韭菜中多種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，以解決食品農(nóng)藥殘留檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在檢測(cè)中面臨的實(shí)際問(wèn)題。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

供試基質(zhì)為韭菜。

正己烷、丙酮和乙腈（色譜純，美國(guó)Fisher Scientific 公司）。

氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（GC-MS/MS-TQ8050型，EI 源，日本島津公司）；高速離心機(jī)（Heraeus Multifu.geX1R 型，中國(guó)上海賽默飛世爾科技有限公司）；渦旋儀（MS3 型，德國(guó)IKA 公司）；電子天平（SB3200 型，瑞士METTLER TOLEDO 公司）；水浴氮吹儀（TTL-DC Ⅱ型，余姚市長(zhǎng)江溫度儀表廠）；超聲波清洗器（SB5200 型，中國(guó)上海必能信超聲有限公司）；QuEChERS 提取包（MQS-1，山東青云公司）；QuEChERS 凈化管（CQJ-24，山東青云公司）；Sin-QuEChERS Nano 凈化柱（復(fù)雜基質(zhì)凈化柱，北京綠錦科技公司）。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

40 種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（1 000 mg·L-1，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所）及其質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1。

表1 40 種農(nóng)藥及內(nèi)標(biāo)物環(huán)氧七氯的質(zhì)譜分析參數(shù)

1.3 儀器檢測(cè)條件

色譜條件：HP-5MS UI 石英毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；升溫程序：40 ℃保持3 min，以40 ℃·min-1的速率升溫至170 ℃，保持0 min，以10 ℃·min-1的速率升溫至310 ℃，保持3 min；進(jìn)樣口溫度：290 ℃；載氣（高純氦氣）流速：1 mL·min-1，恒流方式；進(jìn)樣量：1 μL；不分流進(jìn)樣。

質(zhì)譜條件：電子轟擊源，電子能量70 eV；離子源溫度：280 ℃；接口溫度：280 ℃；溶劑延長(zhǎng)時(shí)間：4.0 min；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式；碰撞氣：氬氣（純度≥99.999%）。

1.4 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制：分別準(zhǔn)確吸取40 種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品0.050 mL 于10 mL 棕色容量瓶中，用乙酸乙酯稀釋至刻度，得到濃度為5.0 μg·mL-1的農(nóng)藥殘留混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，依次稀釋配制成0.01 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1和0.50 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，臨用現(xiàn)配。

內(nèi)標(biāo)貯備液的配制：準(zhǔn)確吸取環(huán)氧七氯標(biāo)準(zhǔn)品0.050 mL 置于10 mL 棕色容量瓶中，用乙酸乙酯稀釋至刻度，得到濃度為5.0 μg·mL-1的內(nèi)標(biāo)貯備液，避光，0 ～4 ℃保存。

混合基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制：空白基質(zhì)溶液氮?dú)獯蹈桑尤?0 μL 內(nèi)標(biāo)貯備液，分別準(zhǔn)確加入1.0 mL 混合標(biāo)準(zhǔn)工作液復(fù)溶、混勻，過(guò)微孔濾膜，待上機(jī)測(cè)定。

1.5 前處理方法

1.5.1 Sin-QuEChERS Nano 法

準(zhǔn)確稱取10 g（精確至0.01 g）粉碎后的試樣于50 mL 塑料離心管中，加入10 mL 乙腈，QuEChERS提取包及1 顆陶瓷均質(zhì)子，劇烈振蕩1 min 后4 200 r·min-1離心5 min。將凈化柱豎直插入裝有提取液的50 mL 離心管中，緩慢壓下凈化柱使得離心管中的提取液自下而上緩慢穿過(guò)凈化管的填料，最終進(jìn)入凈化管的管槽內(nèi)，得到凈化液。準(zhǔn)確吸取1.0 mL 上清凈化液于15 mL 試管中，40 ℃水浴中氮?dú)獯抵两?，加入濃度?.0 μg·mL-1的環(huán)氧七氯內(nèi)標(biāo)溶液20 μL，加入1.0 mL 乙酸乙酯復(fù)溶，渦旋混勻，過(guò)微孔濾膜，備用。

1.5.2 QuEChERS 法

準(zhǔn)確稱取10 g（精確至0.01 g）粉碎后的試樣于50 mL 塑料離心管中，加入10 mL 乙腈，QuEChERS提取包及1 顆陶瓷均質(zhì)子，劇烈振蕩1 min 后4 200 r·min-1離心5 min。吸取6 mL 上清液加到凈化管中，渦旋混勻1 min，4 200 r·min-1離心5 min。準(zhǔn)確吸取1.0 mL 上清凈化液于15 mL 試管中，40 ℃水浴中氮?dú)獯抵两?，加入濃度?.0 μg·mL-1的環(huán)氧七氯內(nèi)標(biāo)溶液20 μL，加入1.0 mL 乙酸乙酯復(fù)溶，渦旋混勻，過(guò)微孔濾膜，備用。

2 結(jié)果與分析

2.1 Sin-QuEChERS Nano 法

在韭菜基質(zhì)中添加濃度為0.20 mg·kg-1的40 種混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，按照1.5.1 步驟進(jìn)行6 個(gè)平行樣品的前處理和質(zhì)譜測(cè)定。40 種農(nóng)藥的相關(guān)系數(shù)、平均回收率及平均RSD 如表2 所示。

表2 Sin-QuEChERS Nano 法測(cè)定40 種農(nóng)藥的相關(guān)系數(shù)、平均回收率和平均RSD 值

2.2 QuEChERS 法

在韭菜基質(zhì)中添加濃度為0.20 mg·kg-1的40 種混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，按照1.5.2 步驟進(jìn)行6 個(gè)平行樣品的前處理和質(zhì)譜測(cè)定。40 種農(nóng)藥的相關(guān)系數(shù)、平均回收率及平均RSD 值如表3 所示。

表3 QuEChERS 法測(cè)定40 種農(nóng)藥的相關(guān)系數(shù)、平均回收率和平均RSD 值

由表2、表3可知，40種農(nóng)藥在0.01～0.50 μg·mL-1內(nèi)線性關(guān)系均良好，相關(guān)系數(shù)（r2）均大于0.995，方法和儀器的靈敏度均滿足對(duì)農(nóng)藥殘留分析的要求。采用Sin-QuEChERS Nano 和QuEChERS 兩種前處理技術(shù)進(jìn)行測(cè)定的平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%，說(shuō)明方法的精密度較好，滿足檢驗(yàn)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)需求。對(duì)比兩種前處理技術(shù)的加標(biāo)回收率結(jié)果可知，部分農(nóng)藥采用Sin-QuEChERS Nano 方法前處理的回收率明顯高于QuEChERS。這是由于Sin-QuEChERS Nano是高分子納米材料，相對(duì)于QuEChERS 中的分散固體萃取組分，其對(duì)農(nóng)藥殘留的吸附性更低，可針對(duì)性地去除色素和復(fù)雜基質(zhì)，使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確，基質(zhì)效應(yīng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響更小。

3 結(jié)論

本文建立了氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定韭菜中40種農(nóng)藥殘留的方法。該方法在線性、精密度上都有良好的表現(xiàn)，符合分析要求。與已報(bào)道的韭菜中農(nóng)藥殘留測(cè)定的多數(shù)方法相比，本方法擴(kuò)展了農(nóng)藥的檢測(cè)范圍，實(shí)現(xiàn)了單次進(jìn)樣，25 min 內(nèi)可全部完成40 種農(nóng)藥殘留分析，靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度均滿足農(nóng)藥殘留分析測(cè)定和限量要求，操作簡(jiǎn)單、便捷，Sin-QuEChERS Nano 前處理技術(shù)與經(jīng)典的前處理技術(shù)相比，其準(zhǔn)確度更高，可作為快速篩查和確證方法，可用于大通量復(fù)雜基質(zhì)日常農(nóng)藥殘留量的分析。