文│董素鳳（遼寧省農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心）

口蹄疫是危害養(yǎng)殖業(yè)的重大傳染病，口蹄疫以偶蹄類動(dòng)物感染為特征，傳播范圍廣，傳播速度快，我國將口蹄疫列為一類動(dòng)物疫病，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求對(duì)該病進(jìn)行強(qiáng)制免疫。疫苗免疫是目前防控口蹄疫最有效的手段，對(duì)口蹄疫免疫相關(guān)技術(shù)進(jìn)行研究探討，進(jìn)而獲得比較滿意的免疫效果非常重要，筆者對(duì)口蹄疫免疫相關(guān)問題進(jìn)行了分析、研究和探討，以期為養(yǎng)殖場(chǎng)戶提供借鑒。

一、口蹄疫病毒的血清型

口蹄疫病毒(FMDV)根據(jù)不同的抗原與抗體交叉反應(yīng)能力的差異被劃分為7個(gè)血清型，分別是O型、A型、C型、亞洲Ⅰ型（Asia）、南非1型（SAT1）、南非2型（SAT2）和南非3型（SAT3）。這些血清型之間沒有交叉免疫性，即每個(gè)類型的病毒抗血清只能中和與之相同類型的病毒，對(duì)其他類型的口蹄疫病毒無效。因此，這七個(gè)血清型的口蹄疫可以視為七種不同的傳染病，需要使用對(duì)應(yīng)的疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防。然而，盡管病原體不同，它們都能引起相同的臨床癥狀。

二、口蹄疫病毒的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白

口蹄疫病毒基因組復(fù)制過程中能夠表達(dá)出多種蛋白質(zhì)。只有四種蛋白質(zhì)能夠被包裝進(jìn)成熟的口蹄疫病毒粒子中，成為其結(jié)構(gòu)的組成部分。這四種蛋白質(zhì)分別是VP1、VP2、VP3和VP4（也按照系統(tǒng)命名法分別叫做1D、1B、1C和1A）。它們被稱為口蹄疫病毒的結(jié)構(gòu)蛋白，此外在完整的病毒粒子中，還含有少量的Vpg（3B），它連接在病毒基因組的5＇端。然而Vpg并不屬于結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)。除了這些結(jié)構(gòu)蛋白外，其他的蛋白質(zhì)留在宿主細(xì)胞中，不被包裝進(jìn)成熟病毒粒子中，這些蛋白質(zhì)被稱為非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)。非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)在口蹄疫病毒的生命周期中起著重要的作用，負(fù)責(zé)病毒的復(fù)制和繁殖等關(guān)鍵生命活動(dòng)。與結(jié)構(gòu)蛋白一樣，非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)也可以刺激宿主動(dòng)物產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。當(dāng)動(dòng)物感染口蹄疫疫苗后，病毒在體內(nèi)復(fù)制過程中會(huì)產(chǎn)生多種非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)，進(jìn)而引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的非結(jié)構(gòu)蛋白抗體。因此，檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)的非結(jié)構(gòu)蛋白抗體可以用于區(qū)分感染性抗體和免疫性抗體。然而這并不是絕對(duì)的，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)表明，即使經(jīng)歷多次口蹄疫病毒免疫的動(dòng)物（例如奶牛），雖然未檢測(cè)到口蹄疫病毒感染，但仍可檢測(cè)到口蹄疫病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白（即口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白檢測(cè)陽性）。因此，僅通過檢測(cè)非結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)可能不足以確定動(dòng)物曾經(jīng)是否感染過口蹄疫病毒。

三、口蹄疫病毒的變異

口蹄疫病毒不但會(huì)發(fā)生變異，而且變異性很高，主要有抗原和致病性變異兩種。

1.抗原性變異?？谔阋卟《镜目乖宰儺愂怯煽谔阋咭職さ鞍椎淖儺愐鸬摹？谔阋卟《竟灿?個(gè)衣殼蛋白，它們是VP1、VP2、VP3和VP4。其中VP4由于位于病毒衣殼的內(nèi)部，變異性最低，VP1位于衣殼蛋白的最外部，變異性也最高。研究表明，四種衣殼蛋白的變異程度順序?yàn)閂P1＞VP2＞VP3＞VP4 。如果抗原變異較大，就可能引起一次大的口蹄疫疫情流行。

2.致病性變異?？谔阋卟《镜闹虏⌒砸踩菀装l(fā)生變異。致病性與病毒的遺傳物質(zhì)有關(guān)，研究表明，口蹄疫病毒核酸的每個(gè)區(qū)域都與病毒的致病性存在或多或少的關(guān)系，由于遺傳物質(zhì)肯定存在逐漸變異的過程，因此，口蹄疫病毒的致病性也會(huì)隨之發(fā)生改變。

四、口蹄疫滅活疫苗能起到的免疫效果

為了客觀了解口蹄疫疫苗的免疫效果，需要正確理解發(fā)病和感染這兩個(gè)概念。發(fā)病是指被病原體感染的動(dòng)物出現(xiàn)臨床癥狀或病理變化，而感染是指病原體在動(dòng)物體內(nèi)或僅在局部部位復(fù)制或存在，但感染的動(dòng)物不一定會(huì)出現(xiàn)臨床癥狀。動(dòng)物接種口蹄疫疫苗后，它們對(duì)口蹄疫病毒的易感性顯著降低，雖然免疫動(dòng)物仍然可能被再次感染，但所需的感染劑量要比未免疫的動(dòng)物大得多。疫苗能夠誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生針對(duì)口蹄疫病毒的保護(hù)力，使得即使感染了病毒，動(dòng)物也可能免于發(fā)病，或者即使發(fā)病臨床癥狀也較輕。免疫接種能夠降低感染動(dòng)物的傳染性，原因是免疫后被感染動(dòng)物的病毒排泄量減少。另外，免疫接種還可以縮短疾病在群體中的持續(xù)感染時(shí)間。一些反芻動(dòng)物如牛和羊?qū)儆诔掷m(xù)感染帶毒動(dòng)物，它們感染口蹄疫后，個(gè)體可以長(zhǎng)時(shí)間攜帶病毒，群體持續(xù)感染時(shí)間更久。然而，多次免疫可以降低群體持續(xù)感染的時(shí)間，具體原因非常復(fù)雜，可能是因?yàn)槊庖呓臃N減少了攜帶病毒的動(dòng)物數(shù)量，或者使得它們失去了傳染其他健康動(dòng)物的能力，使得病毒在群體內(nèi)不能互相傳播。大劑量使用疫苗可以有效減少持續(xù)感染的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)證明，使用高效疫苗可以減少持續(xù)感染的發(fā)生，因此國際疫病獸醫(yī)組織（OIE）規(guī)定在疫區(qū)使用每份疫苗含有6個(gè)PD50以上的疫苗。

盡管口蹄疫疫苗能夠起到良好的免疫效果，但它的免疫效果并不完美，這與大多數(shù)疫苗的效果是相似的。例如，口蹄疫疫苗并不能阻止病毒在動(dòng)物上皮組織中的復(fù)制，因此當(dāng)暴發(fā)疫情時(shí)，接種疫苗的動(dòng)物仍然有可能被感染，只是不會(huì)表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀或病理變化。此外，接種疫苗的牛和羊仍然有可能發(fā)生持續(xù)感染。因此，使用疫苗控制口蹄疫疫情時(shí)其凈化程度往往難以評(píng)估，通常需要較長(zhǎng)的時(shí)間來消滅疫情。只有當(dāng)病毒學(xué)檢驗(yàn)和血清抗體檢驗(yàn)結(jié)果為陰性，并且停止使用疫苗一年后，沒有新的病例出現(xiàn)，我們才能認(rèn)為該國家或地區(qū)是真正的無口蹄疫免疫的地區(qū)。

五、國際上不提倡使用口蹄疫弱毒疫苗

科學(xué)家們經(jīng)過大量長(zhǎng)期的工作發(fā)現(xiàn)，口蹄疫病毒相較于牛瘟病毒和豬瘟病毒來說，較難獲得穩(wěn)定的弱毒株。實(shí)驗(yàn)室培育的弱毒株往往只對(duì)特定的動(dòng)物種類或品種安全有效，不能保證對(duì)其他動(dòng)物同樣適用。此外，口蹄疫病毒存在頻繁的變異，實(shí)驗(yàn)室致弱的病毒在自然環(huán)境中有重新變強(qiáng)的風(fēng)險(xiǎn)。

使用弱毒疫苗還會(huì)嚴(yán)重干擾口蹄疫的診斷和流行病學(xué)研究，使得對(duì)使用該疫苗地區(qū)的疫情評(píng)估變得困難，并且這種影響是長(zhǎng)期的。因此，國際上已經(jīng)全面停止使用弱毒疫苗來控制口蹄疫。

六、口蹄疫滅活疫苗的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

口蹄疫滅活疫苗的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)通常包括物理性狀檢驗(yàn)、微生物檢驗(yàn)、安全性檢驗(yàn)和效力檢驗(yàn)，這些檢驗(yàn)旨在確保疫苗的質(zhì)量和安全性。物理性狀檢驗(yàn)主要是通過檢查疫苗的外觀、劑型、黏度和穩(wěn)定性，以確保疫苗呈乳白色或淡粉紅色，并且是穩(wěn)定的雙相油乳劑（W/O/W）疫苗。微生物檢驗(yàn)旨在確保疫苗不含有任何異源微生物，以確保疫苗的純度和無菌性。安全性檢驗(yàn)通常是通過將疫苗注射到豚鼠動(dòng)物體內(nèi)，觀察是否出現(xiàn)口蹄疫癥狀或明顯毒性反應(yīng)來評(píng)估疫苗的安全性。效力檢驗(yàn)的目的是評(píng)估疫苗的免疫效果。通常會(huì)將疫苗按不同劑量注射到一定數(shù)量的體內(nèi)，待一定時(shí)間后用強(qiáng)毒進(jìn)行攻擊。根據(jù)被保護(hù)動(dòng)物的數(shù)量使用Reed-Muench方法計(jì)算出每頭份疫苗的PD50（半數(shù)保護(hù)劑量），這是評(píng)估疫苗效力的指標(biāo)。通常要求每頭份疫苗至少含有3個(gè)PD50，PD50數(shù)值越高，疫苗的效力越好。這些檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)可以保證口蹄疫滅活疫苗的質(zhì)量和安全性，以確保其有效預(yù)防口蹄疫病毒的傳播和感染。

七、不使用破乳疫苗

口蹄疫滅活疫苗的劑型是水包油包水的雙相油乳劑（W/O/W），而豬口蹄疫O型合成肽疫苗的劑型是油包水的單相油乳劑（W/O）。在儲(chǔ)存一段時(shí)間后，疫苗瓶的上部或下部可能會(huì)有約5%的無色透明油相分離出來。這種現(xiàn)象是正常的，在使用前只需將疫苗瓶搖勻即可。如果出現(xiàn)大量的油水分離，也就是所謂的破乳現(xiàn)象，那就應(yīng)該避免使用這種疫苗。盡管破乳疫苗不會(huì)對(duì)短期免疫效果產(chǎn)生影響，但其免疫效力的持續(xù)期可能無法達(dá)到要求，因此應(yīng)該避免使用破乳疫苗。

八、口蹄疫首免后要加強(qiáng)免疫一次

研究結(jié)果表明，動(dòng)物在初次免疫后免疫抗體的滴度較低，個(gè)體之間的抗體水平差異較大，并且抗體的持續(xù)時(shí)間也較短。然而，通過加強(qiáng)免疫，免疫記憶作用會(huì)使得抗體的滴度迅速提高，抗體的持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)，同時(shí)也降低了抗體效價(jià)的離散度?？贵w效價(jià)離散度是衡量動(dòng)物群體免疫效果的重要指標(biāo)。離散度越小，表示畜群的整體免疫水平越整齊，畜群的群體免疫力越高，對(duì)口蹄疫的抵抗能力也越強(qiáng)。因此，動(dòng)物在初次免疫后需要在一個(gè)月后再進(jìn)行一次加強(qiáng)免疫，以達(dá)到更好的免疫效果。

九、盡量減少免疫副反應(yīng)的發(fā)生

在接種疫苗之前，我們應(yīng)該仔細(xì)閱讀疫苗的說明書和標(biāo)簽。按照操作規(guī)程和免疫程序進(jìn)行接種，以避免人為因素導(dǎo)致免疫副反應(yīng)的發(fā)生。在開展大范圍免疫之前，應(yīng)該先進(jìn)行小范圍免疫，確認(rèn)沒有出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)后再逐步擴(kuò)大范圍，最終覆蓋整個(gè)群體。從冰箱中取出的疫苗應(yīng)該恢復(fù)到室溫后再進(jìn)行接種。如果在炎熱的季節(jié)進(jìn)行預(yù)防接種，最好選擇在清晨或傍晚進(jìn)行，避免高溫時(shí)接種引發(fā)不適應(yīng)。接種時(shí)可以采用小劑量多次分點(diǎn)注射的方式，先進(jìn)行小劑量接種，觀察2小時(shí)后再繼續(xù)小劑量接種，直到接種的總劑量達(dá)到廠家規(guī)定的劑量為止。對(duì)于大動(dòng)物，也可以選擇后海穴注射接種方法。

在進(jìn)行免疫接種之前，要仔細(xì)調(diào)查和觀察動(dòng)物的健康狀況。對(duì)于病弱的動(dòng)物和臨產(chǎn)的母畜，可以暫時(shí)不進(jìn)行接種，待其恢復(fù)健康或生產(chǎn)后再進(jìn)行補(bǔ)充免疫。在接種疫苗之前，要準(zhǔn)備好抗過敏藥物，以備對(duì)可能出現(xiàn)過敏反應(yīng)的動(dòng)物進(jìn)行緊急救治。

除了正確的免疫操作，加強(qiáng)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理也能提高動(dòng)物的健康水平。合理使用免疫增強(qiáng)劑，飼喂全價(jià)飼料，并適當(dāng)增加氨基酸、維生素A、B、C、D、E、葡萄碳酸鈣和抗應(yīng)激制劑等營養(yǎng)物質(zhì)，可以減少過敏反應(yīng)的發(fā)生。在接種前后兩天，最好不要使用消毒藥、抗生素、抗球蟲藥和抗病毒藥。