董榮榮，丁偉，吳簫

青島市婦女兒童醫(yī)院檢驗科，山東青島 266033

急性呼吸道感染（ARIS）是全球兒童住院和死亡的主要原因之一，包括急性上呼吸道感染、急性支氣管炎、肺炎等，具有發(fā)病率高、傳播快、流行廣等特點［1］。呼吸道感染可由多種病原體引起，包括細(xì)菌、病毒、支原體和衣原體等，其中最常見的是病毒感染。2020 年自新型冠狀病毒肺炎爆發(fā)后，勤洗手、戴口罩及保持社交距離等措施的推行使得急性呼吸道感染患兒的數(shù)量大幅減少。呼吸道感染的臨床癥狀缺乏特異性，且易受年齡、季節(jié)、地域等因素的影響。了解兒童急性呼吸道感染的病原體分布特征，有利于臨床診斷病因及后續(xù)選擇治療藥物。我們對2020 年1 月1 日—2021年12 月31 日青島市婦女兒童醫(yī)院收治的7 006 例有呼吸道感染癥狀患兒的血清常見呼吸道病毒IgM 抗體檢測結(jié)果進(jìn)行調(diào)查分析，總結(jié)青島地區(qū)兒童呼吸道病毒感染的流行病學(xué)特征，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2020 年1 月1 日—2021 年12 月31日于青島市婦女兒童醫(yī)院就診的有呼吸道感染癥狀的患兒7 006例，其中男4 055例、女2 951例，男女比例1.37：1；年齡15 天～16 歲，按年齡分為＜1歲4 285 例、1～2 歲1 050 例、3～6 歲1 071 例、7～12歲525 例、12～16 歲組75 例；患兒均為青島地區(qū)常住居民，依據(jù)《諸福棠實用兒科學(xué)》第8版診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］符合急性呼吸道感染，排除支氣管異物、支氣管哮喘急性發(fā)作、支氣管肺發(fā)育不良等非感染原因住院患兒。就診時間為春季（3～5 月）1 382 例、夏季（6～8月）1 505 例、秋季（9～11 月）1 927 例、冬季（12～次年2 月）2 192 例，就診時間2020 年3 392 例、2021 年3 614例。本研究經(jīng)本院倫理委員批準(zhǔn)，經(jīng)患兒家屬知情同意。

1.2 急性呼吸道感染患兒血清呼吸道病毒IgM 抗體檢測 7 006 患兒均采集空腹靜脈血 3 mL，室溫下放置1 h，3 000 r/min，離心10 min，分離血清，實驗步驟：準(zhǔn)備耗材，加樣至載玻片溫育，載玻片上包被呼吸道合胞病毒（RSV）、甲型流感病毒（IFA）、乙型流感病毒（IFB）、副流感病毒（PIV）、腺病毒（ADV）、肺炎支原體（MP）、肺炎衣原體（CP）和嗜肺軍團(tuán)菌（LP）的抗原，室溫30 min 后加入PBS 吐溫緩沖液沖洗，加異硫氰酸熒光素標(biāo)記的羊抗人IgM 抗體室溫溫育30 min，PBS 吐溫緩沖液沖洗，60%甘油封片，熒光顯微鏡下觀察呼吸道病毒的熒光。實驗嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作流程進(jìn)行，每次實驗均設(shè)置陰性、陽性對照。

1.3 呼吸道病毒流行病學(xué)特征分析 采用Microsoft Excel 2003 表格匯總患兒年齡、性別、檢測日期、呼吸道病原體IgM 抗體結(jié)果，總結(jié)不同季節(jié)、年齡和性別的患兒呼吸道病毒感染的流行病學(xué)特征。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS25.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料以例或%表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher 確切概率法。P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 7 006 例患兒血清呼吸道病毒IgM 抗體檢測結(jié)果 7 006 例患兒中檢出呼吸道病原體IgM 抗體陽性者2 767 例（39.49%，2 767/7 006）。4 055 例男性患兒中檢出IgM 抗體陽性者1 543 例（38.05%，1 543/4 055），2 951 例女性患兒中檢出IgM抗體陽性者1224 例（41.48%，1 224/2 951），與男性比較，女性患兒血清呼吸道病毒IgM 抗體陽性率高（χ2=8.388，P=0.004）。2 767 例血清呼吸道病毒IgM 抗體陽性患兒中單一病毒IgM 抗體陽性1 477 例（53.38%，1 477/2 767），2種及以上病毒IgM 抗體陽性1 290 例（46.62%，1 290/2 767）。病毒IgM 抗體陽性率從高到低依次為MP（27.72%）、IFB（18.66%）、IFA（11.08%）、RSV（5.82%）、PIV（1.40% ）、LP（1.14%）、ADV（0.51%）、CP（0.17%）。

2.2 不同性別患兒血清呼吸道病毒IgM 抗體陽性率比較 不同性別患兒血清呼吸道病毒IgM 抗體陽性率見表1。由表1 可見，與男性比較，女性患兒MPIgM抗體陽性率高（χ2=33.462，P＜0.05）。

表1 不同性別急性呼吸道感染患兒血清呼吸道病毒IgM抗體陽性率（%）

2.3 不同年齡患兒血清呼吸道病毒IgM抗體陽性率比較 不同年齡急性呼吸道感染患兒血清呼吸道病毒IgM 抗體陽性率見表2。由表2 可見，與其他年齡比較，0～12月患兒血清RSV IgM抗體陽性率高，3～6歲患兒血清IFA、PIV、ADV IgM 抗體陽性率高，7～12歲患兒血清IFB、MP IgM抗體陽性率高，13～16歲患兒血清CP、LP IgM 抗體陽性率高（χ2分別為

表2 不同年齡急性呼吸道感染患兒血清呼吸道病毒的IgM抗體陽性率（%）

183.419，1 270.741，2 210.638，2 575.997，34.210，90.528；P均＜0.05）。

2.4 不同季節(jié)患兒血清呼吸道病毒IgM 抗體陽性率比較 不同季節(jié)急性呼吸道感染患兒血清呼吸道病毒陽性率見表3。由表3 可見，與其他季節(jié)比較，冬季急性呼吸道感染患兒血清IFA、IFB、PIV、ADV、MP、LPIgM 抗體陽性率高（χ2分別為31.967、46.497、 23.616、 14.600、 83.300、 31.983；P均＜0.05）。

表3 不同季節(jié)急性呼吸道感染患兒血清呼吸道病毒IgM抗體陽性率（%）

3 討論

ARIS 是兒童時期易發(fā)疾病之一，也是兒童時期的常見病和多發(fā)病，兒童80%的呼吸道感染是由非典型病原體感染引起，以病毒和支原體感染居多［3］，其感染與年齡、季節(jié)、地域等都有一定的關(guān)系，且不同時期流行病學(xué)也有一定程度的差異［4-5］。研究［6］表明，不同地區(qū)因氣候、環(huán)境、衛(wèi)生習(xí)慣等的差異，常見的呼吸道病原體感染率不同。兒童時期，由于免疫系統(tǒng)發(fā)育尚不完善，不但對病原體易感，還容易合并感染。呼吸系統(tǒng)疾病起病急，如不及時治療容易誘發(fā)其他系統(tǒng)的疾病，嚴(yán)重者將危及兒童的生命健康。因此，定期分析兒童呼吸道疾病的流行病學(xué)可為呼吸道疾病的預(yù)防控制提供一定的參考依據(jù)，為臨床診治提供一定的理論依據(jù)。

本研究7 006 例有呼吸道癥狀的患兒中呼吸道病原體IgM 抗體檢出率達(dá)39.49%，略低于北京地區(qū)的檢出率［7］，高于梅州地區(qū)的檢出率［8］，一方面與檢測試劑和方法有關(guān)，另一方面說明了呼吸道病原體感染有地域差別。2019年1月爆發(fā)新型冠狀病毒肺炎，國家采取了一系列防控措施，有效的遏制了新冠疫情的傳播，本研究分析疫情防控期間兒童呼吸道病原體的檢出率與之前報道的2018 年檢出率56.79%［9］相比有明顯的下降，可見新冠肺炎防控措施同樣也可有效的降低新冠病毒以外的呼吸道病原體的感染。本研究呼吸道病毒IgM 抗體在不同性別中總體檢出率存在一定的差異，比較每種病原體后證實差異取決于支原體感染，其他病原體感染無性別差異。這與之前文獻(xiàn)［10-12］的支原體感染中女童陽性率高于男童的觀點一致，一方面可能是由于女童自身的內(nèi)環(huán)境造成了對肺炎支原體的易感性，另一方面也可能是因為相對于男童，女童更傾向于室內(nèi)活動，密閉的室內(nèi)環(huán)境促進(jìn)了MP 的傳播。不同年齡段8 種病原體IgM 抗體的檢出率也不同，檢出率居前三位的為MP、IFB 及IFA，感染率最低的為CP。這與魏紅璐等［13］報道的重慶地區(qū)和張家云等［14］報道的武漢地區(qū)流行狀況不一致。這與不同地區(qū)所處的地理位置不同，溫度濕度不一致有關(guān)。RSV IgM 抗體檢出率以0～12 月組最高，且在0～12 月組內(nèi)8 種病原體中RSV 的檢出率也是最高。這與文獻(xiàn)［15-16］報道的RSV 在＜1 歲嬰兒中感染率最高一致，表明RSV可能對嬰兒有較高的致病性，這與嬰兒自身免疫系統(tǒng)尚不完善，從母體獲得的抗體又不足以抵抗RSV的感染有關(guān)。但本研究RSV 感染季節(jié)的差異與其報道的不一致，文獻(xiàn)［16］認(rèn)為RSV 秋冬季感染率較高，本研究得出四季無差異性，這與研究對象不同有一定的關(guān)系，也與青島地區(qū)特定的海洋性氣候有關(guān)。RSV是公認(rèn)的嬰幼兒嚴(yán)重呼吸道感染最常見的病毒之一，全世界每年約有340 萬人因此住院［16］，但目前尚無針對RSV的特定疫苗。

流感病毒具有較強(qiáng)的變異性，且受人類生活方式、環(huán)境和氣候的影響較大。本研究顯示在疫情防控期間不同季節(jié)不同年齡段中IFB IgM 抗體的檢出率均高于IFA，感染的高峰年齡段均在3～6 歲和7～12 歲，這兩個年齡段的兒童基本處于幼兒園生活和小學(xué)生活階段，群體比較集中，處于教室等相比密閉的環(huán)境中，空間上促進(jìn)了呼吸道病原體的傳播。兩種流感病毒的高峰感染季節(jié)均為冬季，有關(guān)部門應(yīng)持續(xù)關(guān)注流感病毒的流行動態(tài)，在高峰季節(jié)到來之間及時為廣大兒童接種流感疫苗，以減少流感病毒對兒童的危害。PIV IgM 抗體在3～6 歲和冬季檢出率最高，13～16 歲和夏季檢出率最低，這與LIU 等［17］報道的副流感病毒的感染率與平均濕度呈負(fù)相關(guān)較一致，青島地處沿海地區(qū)，夏季濕度很高，冬季相對較低。副流感病毒的致病程度與其亞型存在一定的關(guān)系，不同亞型的季節(jié)分布模式有一定的差異，本研究局限在于檢測的為病原體IgM，無法分辨具體型別。但發(fā)病的高峰年齡＜5 歲，多數(shù)患兒為輕癥患者，屬于自限性疾病，但對于免疫力低下的患兒容易發(fā)展成重癥甚至致命。目前主要是以對癥支持治療為主，本研究結(jié)果提示臨床醫(yī)生在冬季尤其是3～6 歲兒童，診治過程中應(yīng)考慮到PIV 的感染［18］，以便及時制定診療方案。

ADV 感染的高峰年齡為1～2 歲和3～6 歲，＜1歲嬰幼兒不但存有母體獲得的保護(hù)性抗體且大多數(shù)處于母乳喂養(yǎng)階段，乳汁中含有大量sIgA，對ADV的入侵起到了抵抗作用，故發(fā)病率較低，而在1～6歲年齡段，自母體獲得的保護(hù)性抗體逐漸減少，自身免疫系統(tǒng)發(fā)育尚未完善，抗ADV 特異性抗體產(chǎn)生又不足，6 歲以上的患兒，其免疫系統(tǒng)功能日漸增強(qiáng)并趨于完全，加之以往可能暴露于ADV 而產(chǎn)生了主動免疫，所以發(fā)病率較低。ADV 具有較強(qiáng)的感染性，交叉感染率可達(dá)60%，易引起局部爆發(fā)，尤其是人群聚集的場所［19］，感染的高峰季節(jié)為冬季，冬季室外氣溫低，開窗通風(fēng)時間減少，室內(nèi)空氣質(zhì)量差，造成了病毒聚集，易感染人體。

CP 在所有病原體中感染率最低，四季均有感染但無季節(jié)差異性，感染率也與性別無關(guān)，感染的高峰年齡段為7～12 歲。這與鄭穎［20］的研究有一定的差異，她認(rèn)為CP 的感染有季節(jié)特異性，春季高發(fā)。相同點是高發(fā)年齡為7 歲以上，無性別差異。張宙等［21］的研究認(rèn)為高發(fā)年齡為5～16 歲，高峰感染季節(jié)為秋季。一定程度上表明CP 的感染因地區(qū)和氣候有一定的差異。LP 廣泛存在于水和土壤中，是一種水源性微生物，常存在于淋浴噴頭、空調(diào)冷卻塔等處，以氣溶膠形式通過呼吸道傳播，并可與多種細(xì)菌混合感染，形成“難治性肺炎”［22］。本研究發(fā)現(xiàn)LP的高發(fā)季節(jié)為冬季，與王淑云等［23］報道的山東地區(qū)冬季和較高年齡兒童發(fā)病率高一致，由于冬季氣溫變化較大，兒童對溫度變化較為敏感，因此容易感染，且冬季較冷，開窗通風(fēng)時間通常較短，不利于室內(nèi)空氣更換。

綜上所述，MP、IFB、IFA 是青島地區(qū)兒童呼吸道感染的主要病原體。除RSV 和CP 外，其余病原體高發(fā)季節(jié)均為冬季。根據(jù)該地區(qū)兒童呼吸道病原體的流行病學(xué)特征，可制定針對易感兒童的預(yù)防措施，如在感染高峰季節(jié)，對兒童密集的場所做好通風(fēng)，加強(qiáng)空氣流通，做好環(huán)境監(jiān)測，減少聚集；對已感染兒童應(yīng)及早診治，減少交叉感染；還可根據(jù)流行病學(xué)特征提高對疾病的認(rèn)識與了解，減少誤診漏診。本研究有一定的局限性，標(biāo)本為單中心來源，檢測指標(biāo)僅為病原體的IgM 抗體可能存在一定的局限性。