王博偉

（廊坊市安次區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 河北廊坊 065000）

豬流行性腹瀉病毒（porine epidemic diarrhea virus，PEDV）可感染不同日齡、品種的豬只，其中以哺乳仔豬和育肥豬的易感性高。豬群感染后臨床主要表現(xiàn)為持續(xù)性水樣腹瀉，消瘦，嘔吐，采食量下降。種豬和育肥豬感染一周后大多能夠耐過，逐漸恢復(fù)正常，病死率極低，愈后良好，但一周齡以內(nèi)的新生仔豬感染后發(fā)病率可達(dá)100%，死亡率高達(dá)50%～100%[1]。該病自20 世紀(jì)七八十年代在歐洲豬場首次發(fā)現(xiàn)后，便迅速開始在世界范圍內(nèi)廣泛流行。期間隨著疫苗的大量使用發(fā)病率已經(jīng)逐漸趨于平穩(wěn)，直至2010 年，高毒力PEDV 毒株的發(fā)，導(dǎo)致豬流行性腹瀉（porine epidemic diarrhea，PED）在全球范圍內(nèi)又一次廣泛流行。為了有效降低豬流行性腹瀉的發(fā)生率，掌握該病科學(xué)的防控策略，世界各國的科研人員和獸醫(yī)工作者對該病的感染機(jī)制和防控措施進(jìn)行了不懈的研究。本文結(jié)合近幾年來豬流行性腹瀉病毒的研究進(jìn)展對該病的感染機(jī)制及綜合防治措施進(jìn)行綜述。

1 豬流行性腹瀉病毒病原學(xué)概述

PEDV 屬冠狀病毒科，α 冠狀病毒屬成員。PEDV 病毒外觀多為球形，粒子直徑范圍為：50～140 nm。病毒內(nèi)部由核衣殼和核芯構(gòu)成，外部有囊膜包裹，囊膜表面分布著放射狀排列的纖突，纖突長約10 nm。PEDV 基因組全長28 kb，病毒5'UTR 有復(fù)雜的二級結(jié)構(gòu)，含病毒轉(zhuǎn)錄和復(fù)制元件；3'UTR 有特殊的RNA 結(jié)構(gòu)和復(fù)制酶結(jié)合的位點，參與調(diào)控病毒RNA 的復(fù)制和合成[2]。主要編碼4 個結(jié)構(gòu)蛋白：纖突蛋白（S），小膜蛋白（E），囊膜蛋白（M）)和衣殼蛋白（N）和一個輔助蛋白ORF3。

PEDV 對低溫有一定的抵抗力，在pH 值4～9 的環(huán)境中相對穩(wěn)定，沒有血凝活性。對消毒劑敏感，容易被2%氫氧化鈉、甲醛、氯仿、酚類等多種消毒劑滅活。

2 豬流行性腹瀉病毒的主要感染機(jī)制

豬流行性腹瀉病毒的發(fā)病機(jī)制與感染豬只日齡、病毒毒力、疫苗接種途徑和接種劑量存在相關(guān)性。通常人們認(rèn)為糞-口傳播是PEDV 傳播的主要途徑。但隨著規(guī)模化豬場生物安全制度的不斷完善和研究機(jī)制的不斷深入，有學(xué)者認(rèn)為PEDV 可能還存在其他的感染途徑。李昱辰等[3]通過噴鼻感染試驗證明PEDV 能夠通過鼻腔感染，引起仔豬腸道發(fā)病，并對PEDV 在仔豬體內(nèi)經(jīng)鼻腔黏膜擴(kuò)散至腸道的具體機(jī)制進(jìn)行了研究。國外也有關(guān)于PEDV 稱能夠通過氣溶膠傳播的相關(guān)報道。

PEDV 主要感染豬腸上皮細(xì)胞，感染后造成腸上皮細(xì)胞變性，腸絨毛萎縮，脫落，腸道完整性降低，水分流失進(jìn)入腸腔出現(xiàn)高滲透壓，感染后的腸細(xì)胞功能紊亂，從而導(dǎo)致消化和吸收不良性腹瀉的發(fā)生。S 蛋白作為PEDV 重要的功能蛋白之一，與其他冠狀病毒的S 蛋白一樣，具有能夠與受體分子發(fā)生相互作用的結(jié)構(gòu)區(qū)域，是病毒感染宿主細(xì)胞的第一步，病毒通過S 蛋白與宿主細(xì)胞表面的入侵受體結(jié)合后，通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)吞途徑入侵宿主細(xì)胞。研究表明PEDV 與受體結(jié)合后會引起細(xì)胞的微絲骨架重排，改變細(xì)胞膜表面形態(tài)，為成功入侵宿主細(xì)胞提供了有利條件[4]。關(guān)于PEDV 的主要入侵受體，研究人員曾經(jīng)一度認(rèn)為是氨肽酶N（APN），但在隨后的研究中發(fā)現(xiàn)APN 可能不是PEDV 的唯一功能受體，PEDV 是否還存在其他的入侵受體，對此尚無定論。

病毒入侵宿主細(xì)胞后釋放基因組，以基因組RNA 為模板，利用宿主細(xì)胞的酶系統(tǒng)、細(xì)胞器和原材料進(jìn)行自身的復(fù)制和組裝。病毒在復(fù)制過程中會破壞宿主細(xì)胞的細(xì)胞器，影響宿主細(xì)胞的酶活性，改變宿主細(xì)胞的生命活動，誘導(dǎo)宿主細(xì)胞完全自噬，造成宿主細(xì)胞功能障礙。在PEDV 感染后期，宿主細(xì)胞的凋亡率明顯升高，并呈現(xiàn)出明顯的時間與劑量依賴性[5]。學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，PEDV 木瓜樣蛋白酶（PLP）在病毒誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中發(fā)揮重要作用，也有學(xué)者認(rèn)為PEDV 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡是通過線粒體中細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）介導(dǎo)而產(chǎn)生[6,7]。病毒粒子組裝完成后，以出芽的方式形成成熟的病毒粒子，然后通過胞吐作用釋放出細(xì)胞外。研究表明在病毒釋放過程中E 蛋白起著重要作用[8]。上述研究說明，PEDV 對宿主細(xì)胞的影響隨著感染時間而不斷變化的，感染初期主要通過誘導(dǎo)自噬抑制細(xì)胞凋亡，從而完成病毒自身復(fù)制，感染后期則通過誘導(dǎo)宿主細(xì)胞凋亡，而釋放出更多的病毒粒子到細(xì)胞外。

3 豬流行性腹瀉病毒的防治措施

3.1 免疫接種

疫苗接種是預(yù)防傳染病發(fā)生流行的重要措施，因地制宜制定科學(xué)合理的免疫程序是重中之重。對于豬流行腹瀉的防治可以選用豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗，或滅活苗進(jìn)行免疫，通常使用活苗+活苗，或活苗+滅活苗。建議免疫程序為：后備母豬在配種前增加兩次免疫，經(jīng)產(chǎn)母豬每年進(jìn)行兩次普免，分娩前30 d 免疫1 次。2010 年，隨著PEDV 變異株的出現(xiàn)，我國各地區(qū)養(yǎng)殖場出現(xiàn)大規(guī)模的PED 疫情，主要由于傳統(tǒng)的CV777 毒株的疫苗對PEDV 變異株的感染沒有保護(hù)作用[8]。但目前，市場上已經(jīng)有針對PEDV 變異株的感染的疫苗，如：豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗（SD/L 株+LW/L 株），豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗（WH-1R 株+AJ1102-R 株）等，廣大生豬養(yǎng)殖戶可以根據(jù)自身具體情況進(jìn)行疫苗的選擇。

3.2 生物安全綜合防控

有效的生物安全措施是阻止傳染病和病原微生物進(jìn)入豬場的重要途徑，嚴(yán)格的衛(wèi)生和生物安全措施可以有效防止豬流行性腹瀉病毒入侵。要防止豬流行性腹瀉的發(fā)生，從根源上解決豬流行性腹瀉問題困擾，就必須要優(yōu)化豬場的生物安全方案。外防輸入，內(nèi)防擴(kuò)散。嚴(yán)格把關(guān)靠近養(yǎng)殖場的所有社會車輛，對飼料車、售豬車等必須進(jìn)入豬場的車輛必須嚴(yán)格按照車輛三級洗消程序進(jìn)行消毒、烘干；加強(qiáng)對豬只銷售環(huán)節(jié)的關(guān)注，售豬時采用三段趕豬模式：第一段為豬舍內(nèi)趕豬；第二段為豬舍門口到售豬臺；第三段為守住臺到裝豬車。場內(nèi)人員禁止進(jìn)入售豬車內(nèi)，出場豬只不得趕回豬舍；所有進(jìn)入養(yǎng)殖場的人員必須進(jìn)行洗澡消毒，按照場區(qū)要求進(jìn)行隔離，更換場內(nèi)衣物和鞋子后才能夠進(jìn)入場區(qū)；生活物資及其其他進(jìn)場物資，要在消毒間進(jìn)行熏蒸、氣霧或者臭氧消毒后才能后帶入場內(nèi)。

養(yǎng)殖場內(nèi)部布局合理，生產(chǎn)區(qū)和生活區(qū)的衣物、用具、鞋靴等不可混用，各豬舍之間的物料、工具等也不得交叉使用。發(fā)病豬舍和其他健康單元之間設(shè)置隔離帶，為防止病毒擴(kuò)散，人員、物資盡量要實現(xiàn)單向流通。為避免沖水污染，可將發(fā)病豬舍的下水道出口堵住，不使用水沖糞，同時盡量減少用水量。發(fā)病豬只產(chǎn)生的糞尿等統(tǒng)一進(jìn)行打包，就地處理，病死豬只或胎衣等就地深埋，不得堆積到公共糞池[9]。加強(qiáng)對豬舍的消毒工作，對發(fā)病豬舍的墻面、地面、欄舍、器具及物料等進(jìn)行徹底消毒后，使用高錳酸鉀等進(jìn)行熏蒸，之后開窗通風(fēng)，再次進(jìn)豬前，使用白石灰乳會產(chǎn)床進(jìn)行白化，切斷傳播途徑，降低連續(xù)發(fā)病概率。

3.3 病情控制

豬場一旦發(fā)生豬流行性腹瀉感染后首先要將病情上報上級獸醫(yī)主管部門，及時隔離患病豬群，防止病毒擴(kuò)散。排查致病源，選擇合理的治療方案進(jìn)行綜合治療，治療期間不得隨意使用抗生素類藥物。其次，對于發(fā)病豬群進(jìn)行靜默飼養(yǎng)，盡量減少人員和豬群流動，為避免豬只脫水，應(yīng)該供給充足的飲水供豬只自由飲用。對病死豬只按要求進(jìn)行無害化處理，及時淘汰沒有飼養(yǎng)價值的僵豬。最后，加強(qiáng)對豬群的飼養(yǎng)管理工作，對隔離豬舍和病豬接觸的物品、器具、車輛等進(jìn)行的嚴(yán)格消毒處理。隔離豬舍飼養(yǎng)員禁止串舍，盡量減少和其他豬舍飼養(yǎng)員的接觸機(jī)會，防止交叉感染。

另外，要做好母豬和仔豬的日常護(hù)理：豬場發(fā)生豬流行性腹瀉后對14 日齡以上的仔豬進(jìn)行緊急斷奶，對于小日齡無法斷奶的仔豬，灌服IgA 抗體含量較高的初乳，10 mL/次，2 次/d。加強(qiáng)對緊急斷奶仔豬的護(hù)理，適當(dāng)補(bǔ)充水分，口服補(bǔ)液鹽，飼料中添加抗菌肽、電解質(zhì)、多維等提高仔豬抵抗力，大群用藥防治繼發(fā)感染。務(wù)必注意斷奶仔豬的保溫工作，必要時需增加保溫?zé)?、保溫箱等供暖措施，同時加強(qiáng)夜間防護(hù)，減少經(jīng)濟(jì)損失?！?/p>