張進(jìn)好

（興隆縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局大杖子獸醫(yī)站，河北 承德 067306）

肉牛副結(jié)核病是由副結(jié)核分枝桿菌引起的發(fā)病率較低，但是感染率、致死率很高，是危害肉牛養(yǎng)殖的重要疫病之一。該病潛伏期長、病程時(shí)間長、發(fā)病率低，并且初期發(fā)病不是很明顯，診斷不準(zhǔn)確、不及時(shí)，易誤導(dǎo)治療，導(dǎo)致該病長期潛伏在牛群中。一旦出現(xiàn)外部及內(nèi)部誘因，促使帶菌牛發(fā)病，治愈率非常低。因此，在肉牛養(yǎng)殖過程中，應(yīng)對(duì)該病開展流行病學(xué)、臨床特征、實(shí)驗(yàn)室診斷、防控方法的分析研究，以提高該病的防控水平，保障肉牛的健康生長。

1 流行病學(xué)特征

1.1 流行特點(diǎn)病?；虿≡瓟y帶牛，其分泌物、排泄物被病原污染的飲水、飼料、牛舍的基礎(chǔ)設(shè)施等都是傳染源。道感染副結(jié)核分枝桿菌主要經(jīng)消化道感染，也可通過子宮感染。犢牛感染主要是通過母體感染，（1）吸吮病母牛的乳汁，（2）胎盤垂直感染。該病好發(fā)生于春秋季節(jié)，但是無明顯的季節(jié)性特征，發(fā)病肉牛與攜帶病原病?？上蛲獠凯h(huán)境排出桿菌，污染生活環(huán)境中的物品，導(dǎo)致該病散發(fā)，甚至引起地方性流行，對(duì)肉牛養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的損害。

1.2 病原特性肉牛副結(jié)核病別名為副結(jié)核性腸炎，病原為副結(jié)核分枝桿菌，該菌為放線菌，外形短粗，細(xì)長并稍有彎曲，形態(tài)一般不典型，長約0.5～1.5 μm，單個(gè)排列或是分枝狀排列。此菌無莢膜、無長鞭毛，培養(yǎng)難度大，培養(yǎng)基中無需加入抗酸細(xì)菌。該菌對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)，在土壤中副結(jié)核分枝桿菌可生存1 年，在干燥環(huán)境中能存活長達(dá)17 個(gè)月，可長期在肉牛生存環(huán)境中潛伏，具有高的感染概率。

1.3 易感動(dòng)物該病的易感動(dòng)物，是牛、羊、駱駝和鹿。尤以30～60 d 的犢牛易感，感染后長期潛伏在犢牛身體不發(fā)病，當(dāng)犢牛長至3～5 歲時(shí)發(fā)病。成年牛感染率較低，但此菌生存能力強(qiáng)，長期存在于肉牛的生活環(huán)境中，經(jīng)由成年肉牛消化道感染，病原潛伏幾個(gè)月后開始發(fā)病。母牛感染后，在其妊娠、分娩、哺乳等期間好發(fā)病。

1.4 發(fā)病機(jī)理副結(jié)核分枝桿菌經(jīng)消化系統(tǒng)進(jìn)入肉牛腸道，然后入侵小腸粘膜，由于小腸分泌黏液較多，腸液較少且?guī)в幸欢ǖ拿?，腸道環(huán)境適合該菌生存。副結(jié)核分枝桿菌開始大量繁殖，直接損害小腸，并逐漸擴(kuò)散至大腸，最終導(dǎo)致小腸及大腸粘膜受損，形成大量的上皮樣細(xì)胞，致使肉牛腸道組織增生變厚，增厚可達(dá)3～20 倍，當(dāng)病情發(fā)展至一定程度，會(huì)逐漸產(chǎn)生硬且彎曲的褶皺，腸道粘膜受到大量皮樣細(xì)胞的壓迫，正常的消化功能受損，病牛無法吸收到足夠的營養(yǎng)而日益消瘦。

1.5 疾病危害該病潛伏期長，數(shù)個(gè)月甚至是數(shù)年，為慢性傳染病，肉牛感染桿菌后先不發(fā)病，成為了該菌的攜帶者，如果不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)隱性感染的帶菌病牛，該菌則會(huì)持續(xù)污染肉牛的生存環(huán)境，導(dǎo)致其它健康肉牛感染，傳播范圍廣且危害大。犢牛感染成年后發(fā)病概率為4%左右，致死率為100%。由于現(xiàn)階段對(duì)該病還無有效的藥物及治療方法，在發(fā)病肉牛群中很難徹底根除。

2 臨床特征

2.1 疾病類型

2.1.1 肺結(jié)核 肉牛在肺結(jié)核發(fā)病初期，出現(xiàn)典型的肺部病癥，在飲水或運(yùn)動(dòng)后，病牛有干咳癥狀，發(fā)展至嚴(yán)重程度時(shí)，咳嗽癥狀加重，出現(xiàn)濕咳，咳嗽次數(shù)增加，呼吸短促，肺部聽診有摩擦音，體表觀察可發(fā)現(xiàn)鼻孔流出黏液，觸摸牛的體表，會(huì)摸到淋巴結(jié)腫大，部分病牛有貧血表現(xiàn)，測量體溫正常，而有的病牛會(huì)體溫稍高。

2.1.2 淋巴結(jié)核 淋巴結(jié)腫大是結(jié)核病的典型表現(xiàn)，肉牛在患上淋巴結(jié)核后，機(jī)體淋巴結(jié)所在區(qū)域，通常腫大非常明顯，病情較重時(shí)會(huì)出現(xiàn)破潰。如果是縱隔淋巴結(jié)病變，位于病牛的縱隔內(nèi)，其中包括了氣管、食道、心臟等，當(dāng)其腫大明顯時(shí)會(huì)直接壓迫食道，可導(dǎo)致病牛慢性膨氣。如果是咽喉淋巴結(jié)核，淋巴腫大壓迫咽喉，會(huì)影響吞咽功能。

2.1.3 乳房結(jié)核 母牛在患該病后，乳房出現(xiàn)硬結(jié)，淋巴結(jié)腫大明顯，變硬變腫，觀察到乳房表面凹凸不平。如果是哺乳期的母牛則分泌母乳變少，乳汁質(zhì)量較差，稀薄且有少量膿塊，病情發(fā)展至后期不再分泌母乳。

2.2 臨床表現(xiàn)該病為慢性病，病程0.5～2 年，病情發(fā)展緩慢，癥狀時(shí)輕時(shí)重。在發(fā)病的初期，病牛無明顯的臨床表現(xiàn)，時(shí)有腹瀉，易誤導(dǎo)該病的診斷，養(yǎng)殖戶將該病當(dāng)做普通的腹瀉治療，從而延誤治療時(shí)機(jī)。如果按照腹瀉治療，在一段時(shí)間內(nèi)對(duì)疾病有控制作用，當(dāng)病牛受到應(yīng)激時(shí)，如母牛妊娠、更換飼料、驚嚇等會(huì)直接引發(fā)該病，而且臨床癥狀變得越發(fā)明顯，精神沉郁、逐漸消瘦、腹瀉嚴(yán)重。病情發(fā)展至后期，病牛出現(xiàn)頑固性腹瀉，持續(xù)性下痢，糞便惡臭、帶血，呈黏液狀且?guī)в袣馀?，病牛體重下降速度加快，高度消瘦、食欲廢絕，最終因衰竭而死。

2.3 病理剖檢該病主要損害肉牛的消化道，集中在空腸、回腸和結(jié)腸前段，腸系膜淋巴結(jié)有明顯的腫大并呈索狀。經(jīng)對(duì)病死牛的剖檢發(fā)現(xiàn)，腸道病變部位腸黏膜厚度增加明顯，存在硬且彎曲的褶皺，并存在充血表現(xiàn)，以及渾濁黏液。尤其是回腸變硬增厚，疾病改變非常明顯。腸道中的內(nèi)容物較少，以液體居多。由于該病為人畜共患病，在病理剖檢過程中，需加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)，做好剖檢的各項(xiàng)記錄，并對(duì)病?；顒?dòng)場所，接觸到的事物等，進(jìn)行全面徹底的消毒，避免疾病傳播蔓延。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 結(jié)核菌素(PPD)診斷PPD 變態(tài)反應(yīng)對(duì)技術(shù)條件要求不高，實(shí)際操作較為簡單，是肉牛副結(jié)核病常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法，實(shí)際應(yīng)用中檢測率高，缺點(diǎn)是受人工操作水平的影響，容易出現(xiàn)假陽性問題，應(yīng)注重診斷操作的規(guī)范化，精確控制牛副結(jié)核菌素的劑量。具體操作流程如下，（1）注射前處理，小于90 d 的犢牛注射部位是肩胛位置，其它牛注射部位是牛頸側(cè)，在中上1 cm 位置剪毛；（2）牛型結(jié)核分枝桿菌PPD 劑量控制，所有肉牛的注射劑量為0.1 mL；（3）實(shí)際操作方法，注射之前先涂抹5%碘酒，然后再使用75%酒精擦拭，開始皮內(nèi)注射，需在肉牛的皮膚上出現(xiàn)小泡；（4）注射觀察，在完成注射的72 h 后，觀察注射部位有無炎性表現(xiàn)，針對(duì)有腫脹、熱痛的病牛再次注射，72 h 后觀察炎性反應(yīng)。

3.2 抗酸染色法診斷（1）制作病料，從病牛的直腸中取出糞便，放入生理鹽水中充分?jǐn)嚢?，然后離心取沉渣作為病料，將病料放在涂片上，靜置干燥后，使用酒精燈烘烤，頻率為每5 s 烘烤4 次；（2）在涂片上滴入石碳酸復(fù)紅染液，使用酒精燈再次烘烤，當(dāng)出現(xiàn)蒸汽后停止，等待染色5 min；（3）用清水沖洗涂片，去除涂片上殘留的染液，并去除病料上的殘留水分；（4）脫色處理，在涂片上滴入脫色劑，使用清水沖洗，反復(fù)進(jìn)行脫色處理，直到病料無紅色；（5）使用清水去除涂片上的脫色液，然后去除病料上的水分；（6）使用亞甲藍(lán)復(fù)染液再次對(duì)病料染色，等待30 s 后用清水沖洗，去除殘留水分，靜置涂片完全干燥后，采用顯微鏡觀察，如果觀察到抗酸性著色副結(jié)核分枝桿菌，證明肉牛感染該病。

3.3 分離培養(yǎng)法診斷（1）分離培養(yǎng)法選擇使用AF-1 培養(yǎng)基；（2）為了保證分離培養(yǎng)的質(zhì)量，分別從病牛解剖的回腸上、糞便中獲取樣品，獲取的樣品匯集到一起放入40 mL0.75%的HPC 液中，在室溫下放置48 h，使用滴管取上層清液，滴入至AF-1培養(yǎng)基中；（3）將培養(yǎng)基放入37.5 ℃的恒溫箱。經(jīng)過28 d 的恒溫培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中才可出現(xiàn)看得見的菌落，使用抗酸染色法進(jìn)行疾病的診斷。

3.4 ELISA 試劑盒診斷直接使用副結(jié)核分枝桿菌抗體檢測診斷試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，按照ELISA 試劑盒使用說明書操作即可，檢測結(jié)果肉眼就可判斷。副結(jié)核分枝桿菌在酶的催化作用下，抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合，并放大該反應(yīng)，在實(shí)驗(yàn)室診斷肉牛副結(jié)核病中的應(yīng)用，具有操作簡單、診斷速度快，以及檢測特異性與敏感性高等優(yōu)點(diǎn)。

4 防控方法

4.1 牛犢期間防控如果妊娠母牛感染或攜帶副結(jié)核分枝桿菌，則在犢牛出生后立即與母牛隔離，嚴(yán)禁該母牛哺乳犢牛。犢牛吸食的母乳需經(jīng)過巴氏消毒處理，母乳在60 ℃的條件下，滅菌0.5 h，消滅母乳中的桿菌，避免母乳感染副結(jié)核病現(xiàn)象。牛犢在6 月齡階段進(jìn)行2 次該病診斷，對(duì)感染的牛犢立即淘汰，未感染病菌的牛犢放入牛群混養(yǎng)。犢牛生長至出欄，每年2 次該病檢測，針對(duì)發(fā)病或未發(fā)病的帶菌牛犢隔離飼養(yǎng)，防止該病在不同年齡段牛群之間的傳播，進(jìn)而阻斷該病的傳播。

4.2 牛群防控密切關(guān)注牛群動(dòng)態(tài)，在飼養(yǎng)管理過程中參照該病臨床癥狀，對(duì)肉牛進(jìn)行觀察、觸摸等，像是咳嗽、淋巴結(jié)情況、糞便形狀，以及反復(fù)腹瀉、逐漸消瘦等，當(dāng)發(fā)現(xiàn)疑似癥狀后，立即隔離并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，及時(shí)準(zhǔn)確判斷肉牛是否感染牛副結(jié)核病，防止隱性感染牛向養(yǎng)殖環(huán)境中排菌，感染到其他健康肉牛。同時(shí)上報(bào)給動(dòng)物防疫部門，在第一時(shí)間阻斷疫情傳播，將疫病傳播鏈控制在最小程度，避免地方性流行。

4.3 加強(qiáng)引進(jìn)肉牛前后防控（1）引進(jìn)前的防控，觀察肉牛的健康精神狀態(tài)、被毛是否光澤、采食情況、運(yùn)動(dòng)情況等，并進(jìn)行病菌實(shí)驗(yàn)室檢測，確定有無感染該病菌，同時(shí)做好其他疫病檢測，防止引進(jìn)肉牛攜帶任何病菌；（2）引進(jìn)后的防控，對(duì)引進(jìn)的犢牛、后備母牛等進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，經(jīng)過半年時(shí)間3 次檢測后，確定沒有攜帶該病菌才可放入牛群混養(yǎng)，以避免該病的外部輸入。

4.4 接種疫苗防控目前市場上有專門對(duì)該病的疫苗，比如，全菌疫苗在預(yù)防該病中有著良好的表現(xiàn)，滅活疫苗可用于發(fā)生感染的牛群接種，可起到凈化牛群的作用，如牛副結(jié)核滅活疫苗，疫苗是將副結(jié)核分枝桿菌P18 株、P10 株等接種在培養(yǎng)基中，經(jīng)過濕熱滅活后接種，可預(yù)防肉牛感染該病。在犢牛出生1 周后，剪去胸部被毛，消毒后皮下注射1 mL。實(shí)行嚴(yán)格的肉牛副結(jié)核病疫苗接種免疫程序，維持肉牛體內(nèi)高的抗體水平，降低肉牛感染疫病的概率。

4.5 飼養(yǎng)管理科學(xué)化防控該病以預(yù)防為主，通過加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，可對(duì)該病有預(yù)防作用。（1）為肉牛成長提供全價(jià)營養(yǎng)，保證飼料品種多樣，在肉牛不同生長階段，針對(duì)性的添加維生素、礦物質(zhì)、微量元素等，以提高肉牛的抗病能力，避免該病的出現(xiàn)；（2）做好牛舍的衛(wèi)生與消毒工作，每天清潔牛舍，保持牛舍環(huán)境的干燥衛(wèi)生，定期噴灑低毒消毒藥劑，比如噴灑來蘇爾，消除牛舍環(huán)境中隱藏的副結(jié)核分枝桿菌，避免肉牛接觸感染現(xiàn)象。同時(shí)注意每天清潔飲水設(shè)施與料槽，并定期進(jìn)行消毒，不留有任何消毒死角；（3）適當(dāng)增加肉牛的運(yùn)動(dòng)量，專門設(shè)立運(yùn)動(dòng)場地，每天定時(shí)安排肉牛運(yùn)動(dòng)，必須保證1 h 的運(yùn)動(dòng)量，尤其是太陽光照較好的情況下，讓肉牛到戶外運(yùn)動(dòng)接受光照，可促進(jìn)肉牛鈣吸收，殺滅體表部分病菌，增強(qiáng)肉牛體質(zhì)，提升該病的機(jī)體防御能力。

5 結(jié) 語

肉牛在感染牛副結(jié)核分枝桿菌后，持續(xù)向生活環(huán)境中排菌，形成長期的危害，具有地方性流行的特征，防治難度非常大。目前在該病預(yù)防及治療方面，還未有特效藥物及治療手段，治愈的可能性較低，從其流行病學(xué)特征來看，該病應(yīng)以預(yù)防為主，因此，需要加強(qiáng)對(duì)該病臨床特征、實(shí)驗(yàn)室診斷等的研究，及時(shí)發(fā)現(xiàn)病情，提高診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，保證該病的防控有的放矢，實(shí)現(xiàn)對(duì)該病的及時(shí)有效控制。