摘 要：獼猴桃果皮中富含多酚類化合物，本研究以徐香果皮為原料，采用超聲波輔助乙醇法和響應(yīng)面法優(yōu)化提取多酚工藝，然后對(duì)粗多酚進(jìn)行純化，最后利用液質(zhì)聯(lián)用分析多酚中的單體物質(zhì)，并對(duì)酚類單體的抗氧化活性進(jìn)行探究.結(jié)果表明，提取徐香果皮中多酚的工藝為：液料比23.74∶1、溫度70 ℃、乙醇濃度52.21%、提取時(shí)間30 min.經(jīng)過液質(zhì)聯(lián)用可知與數(shù)據(jù)庫匹配度達(dá)80%以上且含量較多的酚類單體的為兒茶素、阿魏酸、4-香豆酸、反式肉桂酸、柚皮素.抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明兒茶素、阿魏酸、4-香豆酸及柚皮素的抗氧化活性較高，反式肉桂酸的抗氧化活性較弱，此研究對(duì)獼猴桃皮渣多酚資源的開發(fā)利用提供了理論依據(jù).

關(guān)鍵詞：獼猴桃； 多酚； 工藝優(yōu)化； 抗氧化活性

中圖分類號(hào)：TS255.1""" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

Study on extraction of polyphenols from kiwifruit-xuxiang peel and its antioxidant activity of monomers

Abstract：The kiwifruit rind is a rich source of polyphenolic compounds.In this study，the polyphenol extraction process was optimized using an ultrasound-assisted ethanol method and a response surface method for the extraction of Xuxiang peels.This was followed by the purification of crude polyphenols and the analysis of monomer substances in the polyphenols by LC-MS.Finally，the antioxidant activities of the phenolic monomers were investigated.The results indicated that the extraction of polyphenols from the peel of Xuxiang proceeded as follows：a liquid-to-material ratio of 23.74∶1，a temperature of 70 ℃，an ethanol concentration of 52.21%，and an extraction time of 30 min.Following LC-MS analysis，the phenolic monomers that exhibited a match with the database of greater than 80% and were more abundant were identified as catechin，ferulic acid，4-coumaric acid，trans-cinnamic acid，and naringenin.The results of the antioxidant assay demonstrated that catechin，ferulic acid，4-coumaric acid，and naringenin exhibited higher antioxidant activity，while trans-cinnamic acid exhibited weaker antioxidant activity.This provides a theoretical foundation for the development and utilization of polyphenol resources in kiwifruit.

Key words：kiwifruit； polyphenols； process optimization； antioxidant activity

0 引言

獼猴桃（Actinidia chinensis Planch.）原產(chǎn)于中國(guó)，被認(rèn)為是最具有商業(yè)價(jià)值的水果之一［1］，其富含碳水化合物、脂質(zhì)、脂肪酸、蛋白質(zhì)、維生素，酚類化合物、黃酮類、葉綠素和類胡蘿卜素等多種活性物質(zhì)［2］，其中酚類化合物，也稱為單寧，是最常見的次生代謝成分［3］，通常以酚酸和類黃酮形式存在，如兒茶素、沒食子酸、咖啡酸和綠原酸等.多酚主要存在于植物的根、葉、皮和果實(shí)中［4］，含量?jī)H次于木質(zhì)素、纖維素和半纖維素［5］.

隨著對(duì)多酚類化合物的探究，大量的研究表明其具有無殘留、無抗藥性、無毒副作用等優(yōu)點(diǎn)［6］.同時(shí)多酚化合物是有效的抗氧化劑，可將活性氧（ROS）、羥基自由基（·OH-）和過氧化氫（H2O2）等捕獲在體內(nèi)，這有助于防止或緩解氧化性疾病帶來的傷害［7］.多酚在食品和藥物領(lǐng)域的應(yīng)用開發(fā)已成為主流.已有研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)嗜酸乳桿菌zrx02發(fā)酵后的蘋果，可將多酚轉(zhuǎn)化為易于消化和吸收的小分子進(jìn)而提高抗氧化活性［8］.Brown等［9］ 也發(fā)現(xiàn)多酚可以影響骨骼的代謝過程，防止骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生.在功能性食品和藥物研發(fā)的領(lǐng)域里，這些研究都為酚類化合物在抗氧化能力方面的高價(jià)值用途提供了理論依據(jù)，并且近年來發(fā)現(xiàn)人工合成的抗氧化劑在應(yīng)用的同時(shí)對(duì)人體健康有害，因此天然抗氧化劑依舊是大眾的首要選擇.

提取是酚類化合物分離、鑒定和應(yīng)用的關(guān)鍵步驟［10］.多酚的提取方法一般分為傳統(tǒng)提取法和新型提取法.傳統(tǒng)提取法包括浸漬法、滲透法、煎煮法；新型提取法包括有機(jī)溶劑法、超聲輔助提取法、微波輔助提取法、超臨界流體萃取法等.其中超聲波提取法是一種具有綠色、低成本等特點(diǎn)的新型技術(shù)［11］，也是從自然資源中提取植物化學(xué)物質(zhì)的有效方法［12］.

獼猴桃作為富含多酚類化合物的水果，通常被認(rèn)為是天然抗氧化劑的潛在來源之一［13］，然而據(jù)統(tǒng)計(jì)每年在獼猴桃加工的過程中會(huì)有大量的果皮被丟棄［14］，這不僅會(huì)引起極大的經(jīng)濟(jì)和環(huán)境問題，還會(huì)導(dǎo)致資源的浪費(fèi).因此本研究采用超聲波輔助乙醇法和響應(yīng)面法優(yōu)化提取多酚的工藝，同時(shí)提高徐香果皮中多酚的得率，然后利用大孔樹脂的吸附與解吸能力純化粗多酚，并采用LC-MS分析出純化后多酚中的具體成分，并探究這些酚類單體的抗氧化活性，為天然活性物質(zhì)的提取和天然抗氧化劑的合成提供可靠的理論依據(jù).

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

徐香獼猴桃購(gòu)買于陜西省西安市周至縣.在收獲期獲得可食用且成熟度相似的徐香獼猴桃，削皮，烘干磨粉得到樣品，放于4 ℃冰箱備用.沒食子酸、無水乙醇、福林酚、無水碳酸鈉、大孔樹脂D101、DM130、HPD400、NKA-9、AB-8、X-5、1，1-二苯基-2-苦基肼基（DPPH）、K3［Fe（CN）6］、TCA溶液、FeCl3、磷酸緩沖鹽溶液均購(gòu)自索萊寶生物科技有限公司；兒茶素、阿魏酸、4-香豆酸、柚皮素、反式肉桂酸均購(gòu)自上海麥克林生化科技有限公司.

1.2 儀器與設(shè)備

臥式鼓風(fēng)干燥箱（101-1AB）：黃曄菲斯福實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；數(shù)控超聲波清洗器（KQ3200E）：昆山市儀器有限公司；高速離心機(jī)（Velocity 18R）：英國(guó) Dynamica公司；紫外可見分光光度計(jì)（SP-1920）：上海光譜儀器有限公司；精密電子天平（GL-2020）：北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；高速萬能粉碎機(jī)（DE-200g）：徽州普潤(rùn)日用品有限公司；恒溫?fù)u床（TS-300s）：杭州米歐儀器有限公司；pH計(jì)（PHS-25）：上海儀電科學(xué)儀器有限公司；實(shí)驗(yàn)室超純水機(jī)（Clever-S15）上海芷昂儀器有限公司.

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 多酚的提取與檢測(cè)

取樣品粉末0.2 g，加入一定濃度的提取液無水乙醇，設(shè)置適當(dāng)?shù)某暡l件.提取結(jié)束后12 000 rpm離心10 min，取上清液1 mL定容至100 mL，靜置5 min后取1 mL至10 mL容量瓶種，并在容量瓶?jī)?nèi)加入0.5 mL福林酚試劑、3 mL 0.7%無水碳酸鈉，加水定容至10 mL，暗反應(yīng)2 h后在765 nm測(cè)其吸光度.

1.3.2 單因素實(shí)驗(yàn)

在1.3.1節(jié)的基礎(chǔ)上改變液料比、提取液濃度、超聲溫度和時(shí)間這四個(gè)條件并計(jì)算多酚濃度，以提取物中的最大多酚含量為指標(biāo)，在隨后的響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)中確定設(shè)計(jì)水平.

1.3.3 Box-Behnken design （BBD）

在1.3.2節(jié)試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)之上，根據(jù)BBD試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，選擇對(duì)多酚得率影響顯著的因子，以獼猴桃果渣多酚得率為響應(yīng)值，設(shè)計(jì)三因素三水平的BBD試驗(yàn)，使用 Design-Expert、Excel軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸分析，得到多酚提取的最佳條件.

1.3.4 多酚的純化

利用大孔樹脂DM130、D101、DM130、HPD400、NKA-9、AB-8、X-5，比較吸附率、解吸率以及回收率篩選出最佳樹脂，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行靜態(tài)和動(dòng)態(tài)吸附研究.

1.3.5 液質(zhì)聯(lián)用分析

采用Thermo Scientific UltiMate 3000 HPLC系統(tǒng)進(jìn)行色譜分離.液相條件如下：色譜柱：Accucore aQ 100*2.1 mm，2.6 μm；柱溫25 ℃；波長(zhǎng)190～800 nm全掃；速度0.2 mL/min；流動(dòng)相A：0.1%甲酸的乙腈溶液，流動(dòng)相B：0.1%甲酸的水溶液；梯度洗脫條件：t=0-6-15-18-18.1-24，A%=5-20-90-90-5-5.采用Thermo scientific Q Exactive[JP2]進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè).質(zhì)譜條件如下：噴霧電壓3 200 v；毛細(xì)管溫度300 ℃；鞘氣40.00 Arb；輔助氣8.00 Arb；[JP]最大噴霧電流100 μA；探頭加熱器溫度300 ℃；離子源ESI+/-ms.

1.4 酚類單體抗氧化實(shí)驗(yàn)

1.4.1 DPPH自由基清除能力測(cè)定

根據(jù)Liu等［15］的方法進(jìn)行修改.將五種單體稀釋為不同濃度.將2 mL DPPH-乙醇溶液與2 mL 不同濃度的酚類單體搖勻后避光靜置30 min，在波長(zhǎng)517 nm 處測(cè)得的吸光度值記為A2；用等量無水乙醇代替DPPH-乙醇溶液作為對(duì)照，在波長(zhǎng)517 nm 處測(cè)得的吸光度值記為A1；用等量蒸餾水代替酚類單體為空白，在波長(zhǎng)517 nm 處測(cè)得的吸光度值記為A0.以Vc為陽性對(duì)照，每個(gè)樣品平行三次實(shí)驗(yàn)，按公式（1）計(jì)算：

DPPH 自由基清除率（%）=（A0-A2+A1）/A0×100%（1）

1.4.2 ABTS自由基清除能力測(cè)定

根據(jù)Lu等［16］的方法進(jìn)行修改.將3 mL ABTS稀釋液與1 mL不同濃度的酚類單體樣品溶液，加入10 mL具塞比色管中，搖勻后避光6 min，在波長(zhǎng)734 nm處測(cè)得的吸光度值記為A2；用等量磷酸緩沖液代替ABTS稀釋液作為對(duì)照，在波長(zhǎng)734 nm處測(cè)得的吸光值記為A1；用等量蒸餾水代替酚類單體樣品溶液作為空白，在波長(zhǎng)734 nm處測(cè)得的吸光度值記為A0.以Vc為陽性對(duì)照，每個(gè)樣品平行三次實(shí)驗(yàn)，按公式（2）計(jì)算：

ABTS自由基清除率（%）=（A0-A2+A1）/A0×100%（2）

1.4.3 還原鐵離子的測(cè)定

根據(jù)Apáti等［17］的方法進(jìn)行修改.取1 mL不同濃度的單體溶液于試管中，加入 1 mL 1%鐵氰化鉀溶液和1 mL磷酸緩沖液（pH=6.8），混勻，放置于50 ℃水浴中反應(yīng)30 min.取出后冷卻，再加入1 mL 10 %三氯乙酸溶液，混勻，吸取1 mL上清液至10 mL具塞比色管中，各加入1 mL 0.1%三氯化鐵溶液和4 mL蒸餾水，靜置20 min，在波長(zhǎng)700 nm處測(cè)定吸光度值，每個(gè)樣品平行三次實(shí)驗(yàn).

1.5 數(shù)據(jù)處理

所有的實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用 Excel 2019、Origin 2019分析并以圖片和表格的形式呈現(xiàn).

2 結(jié)果與討論

2.1 單因素實(shí)驗(yàn)

不同液料比對(duì)多酚含量的影響如圖1（a）所示.由圖可知，徐香果皮中的酚類化合物得率隨液料比的增加呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢(shì)，最大得率為15.39 mg/mL.料液比的增加提高了溶劑的滲透率，增強(qiáng)了多酚從細(xì)胞中的溶出量［18］，但當(dāng)料液比繼續(xù)增加時(shí)，酚類化合物的結(jié)構(gòu)可能會(huì)被高濃度的乙醇破壞，從而減少多酚得率［19］.本實(shí)驗(yàn)選擇20∶1～30∶1 mL/g的液料比范圍，作為提取徐香果皮多酚的響應(yīng)面因素范圍.

不同溫度對(duì)多酚含量的影響如圖1（b）所示.由圖可知，徐香果皮中的酚類化合物得率隨溫度的增加呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢(shì)，最大得率為18.17 mg/mL.溫度升高時(shí)介質(zhì)粘度降低，分子運(yùn)動(dòng)加快，擴(kuò)散系數(shù)和溶解度增大［20］，從而使得多酚的溶解更加容易.然而多酚在較長(zhǎng)時(shí)間里處于高溫狀態(tài)，可能會(huì)發(fā)生降解或轉(zhuǎn)化［21］.本實(shí)驗(yàn)選擇50 ℃～70 ℃的溫度范圍，作為提取徐香果皮多酚的響應(yīng)面因素范圍.

不同乙醇對(duì)多酚含量的影響如圖1（c）所示.由圖可知，徐香果皮中的酚類化合物得率隨溫度的增加呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢(shì)，最大得率為19.45 mg/mL.在一定的濃度范圍內(nèi)溶劑濃度的增加可以破壞多酚與多糖等物質(zhì)間的氫鍵，促使多酚溶出，但隨著溶劑濃度進(jìn)一步增大，溶劑與皮渣多酚的極性差異也隨之增大，反而會(huì)使提取率降低［22］.本實(shí)驗(yàn)選擇50%～70%的溫度范圍，作為提取徐香果皮多酚的響應(yīng)面因素范圍.

不同超聲時(shí)間對(duì)多酚含量的影響如圖1（d）所示.由圖可知，徐香果皮中的酚類化合物得率隨著時(shí)間的增加而變化平緩，沒有其他三個(gè)因素的變化明顯.

Nayak等［23］研究發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)時(shí)間的提取可能會(huì)造成酚類化合物降解.Vergara等［24］的研究也表明天然產(chǎn)物具有溫度敏感性特征，高溫使得酶降解氧化以及不溶性化合物之間的聚合，從而多酚產(chǎn)量降低.綜合考慮成本、得率、時(shí)間等因素，徐香果皮中多酚的提取時(shí)間選擇30 min.

2.2 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)

2.2.1 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

提取徐香果皮多酚的響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果見表1所示，回歸與方差分析結(jié)果見表2所示.使用Design-Expert.12軟件對(duì)表1的數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸分析，得到二次回歸方程，其中Y：徐香果皮中的多酚得率，A：溫度，B：乙醇濃度，C：液料比.

Y=19.48+0.458 8A-0.921 2B+0.03C-0.452 5AB-0.225 0AC+0.195 0BC-0.483 3A2-0.873 3B2-0.305 7C2

由表2可知，模型顯著（Plt;0.01），且模型的失擬相并不明顯（Pgt;0.05），這表明模型沒有明顯的誤差存在.表2中的R2和R2adj也表明了模型具有較高的擬合度，并與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的擬合度較好，因此適用于徐香多酚提取過程的分析和優(yōu)化.由Y方程可知乙醇濃度對(duì)徐香果皮中的多酚得率影響最大，其次是溫度.

2.2.2 交互作用結(jié)果分析

影響徐香果皮中多酚提取的三個(gè)因素的響應(yīng)面如圖2～4所示.由圖2和圖3、圖4可知，響應(yīng)面曲率較小，說明AB和AC、BC的相互作用較不顯著，對(duì)多酚的提取影響較小，與方差結(jié)果一致.通過Design-Expert.12可得徐香果皮中多酚的最優(yōu)提取方法：液料比23.74∶1，溫度70 ℃，乙醇濃度52.21%，提取時(shí)間30 min.在此條件下進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，得到多酚實(shí)際得率20.07 mg/g，達(dá)到預(yù)測(cè)值的99.45%，與預(yù)期數(shù)值相當(dāng)接近.因此，基于Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)的最優(yōu)工藝參數(shù)準(zhǔn)確和可靠.

2.3 多酚的純化及鑒定

2.3.1 大孔吸附樹脂的篩選

純化徐香果皮多酚的大孔樹脂如圖5所示.由圖可知，六種大孔吸附樹脂的吸附率差距較小，但其中HPD400的解吸和回收能力最強(qiáng)，解吸率和回收率分別達(dá)到92.48%和76.87%，為了后續(xù)實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行，選擇樹脂HPD400對(duì)徐香果皮中的多酚進(jìn)行純化.

2.3.2 靜態(tài)吸附與解吸實(shí)驗(yàn)

圖6（a）表示樹脂HPD400對(duì)徐香果皮中多酚的靜態(tài)動(dòng)力吸附曲線，如圖所示樹脂對(duì)多酚的吸附量在0～40 min內(nèi)快速上升，然后上升速率變緩，最終在210 min左右趨于平衡.這是因?yàn)樵谖降某醪诫A段中，樹脂表面有大量位點(diǎn)吸附酚類化合物，然而隨著吸附的進(jìn)行，可用位點(diǎn)的數(shù)量逐漸減少，并且分子之間的排斥作用和傳質(zhì)阻力逐漸增加，從而導(dǎo)致后續(xù)吸附困難［25］.HDP400樹脂對(duì)樣品中多酚的吸附率在70%以上，且吸附時(shí)間在正常范圍內(nèi)，說明所選樹脂的吸附能力較好，適合后續(xù)的純化實(shí)驗(yàn).

圖6（b）表示樹脂HPD400對(duì)徐香果皮中多酚的靜態(tài)動(dòng)力解吸曲線，如圖所示樹脂對(duì)多酚的吸附量在270 min時(shí)被乙醇解吸至平衡狀態(tài)，乙醇對(duì)樣品中多酚的解吸效果良好，且解吸率大于85%，說明所選樹脂純化能力較好，適合此次的純化實(shí)驗(yàn).

圖6（c）表示不同上樣濃度對(duì)吸附率的影響.由圖可知當(dāng)徐香果皮中多酚的濃度為2.5 mg/mL時(shí)樹脂的吸附效果最好，且吸附率隨著上樣液濃度的增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，這可能是因?yàn)槎喾訚舛仍黾拥耐瑫r(shí)雜質(zhì)的含量也增多，這些雜質(zhì)附著在樹脂上導(dǎo)致多酚的吸附量下降.

由圖6（d）可知，當(dāng)乙醇濃度達(dá)到70%時(shí)解吸率達(dá)到最大值97.61%.乙醇可以破壞多酚和樹脂之間的氫鍵促使多酚被解吸下來，所以隨著乙醇濃度的增加解吸率也隨之增加.當(dāng)乙醇濃度過高時(shí)，不僅會(huì)導(dǎo)致解吸劑和多酚之間的極性差異增大，還會(huì)引起非多酚類物質(zhì)的解吸［26］，因此選擇70%的乙醇作為洗脫劑較為合適.

2.3.3 動(dòng)態(tài)吸附與解吸實(shí)驗(yàn)

在動(dòng)態(tài)吸附過程中，上樣流速和解吸流速是影響吸附的重要因素.不同流速下樹脂對(duì)徐香果皮中多酚的吸附效果如圖7（a）所示.上樣流速過快時(shí)多酚無足夠的時(shí)間與樹脂表面活性位點(diǎn)發(fā)生相互作用，從而導(dǎo)致多酚流失.但當(dāng)上樣流速過慢時(shí)，吸附時(shí)間會(huì)增加，這不利于接下來的實(shí)驗(yàn)，因此選擇2 mL/min作為上樣流速.

不同流速下樹脂對(duì)徐香果皮中多酚的吸附效果如圖7（b）所示，流速為2 mL/min和3 mL/min時(shí)的峰均無明顯拖拽現(xiàn)象，但流速較小時(shí)的峰型更集中且流出液中的多酚含量更多，因此選擇2 mL/min作為樹脂HPD400對(duì)多酚的洗脫速度.

2.3.4 液質(zhì)聯(lián)用實(shí)驗(yàn)

粗多酚經(jīng)大孔吸附樹脂純化后使用液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS）進(jìn)行成分分析，總離子流圖如補(bǔ)充材料所示，結(jié)合數(shù)據(jù)庫（mzCloud，mzVault，chemspider）分析，一共有294種化學(xué)成分匹配度達(dá)80%以上.在294種成分中選擇含量較多的多酚類化合物：兒茶素、阿魏酸、4-香豆酸、反式肉桂酸、柚皮素進(jìn)行抗氧化活性的研究.

據(jù)表3中的峰面積分析出五種單體在徐香果皮多酚樣品中的含量不同，其中，4-香豆酸和阿魏酸的含量最多，反式肉桂酸的含量最少.

2.4 單體抗氧化活性研究

如圖8（a）所示，阿魏酸的清除能力最強(qiáng)，在0.25 mmol的低濃度下清除率達(dá)到93.77%，這可能是因?yàn)榘⑽核峋哂?-甲氧基、羧酸基團(tuán)與相鄰的不飽和C-C雙鍵等結(jié)構(gòu)，這些獨(dú)特的序列有助于提高其清除自由基的能力［27］.在此體系中兒茶素的抗氧化能力僅次于阿魏酸，在0.25 mmol到4 mmol的范圍內(nèi)，清除率隨著兒茶素濃度的升高呈上升的趨勢(shì)，最高達(dá)到93.85%.對(duì)香豆酸和柚皮素對(duì)DPPH自由基也有一定的清除能力，并顯示劑量依賴關(guān)系.兩者在最高濃度16 mmol下的清除率為58.35%和85.24%，IC50分別為10.36 mmol和8.37 mmol.但反式肉桂酸沒有表現(xiàn)出明顯的清除效果.

由圖8（b）可知，反式肉桂酸對(duì)ABTS自由基的清除率較低，其余四種單體的清除活性較高，清除率均在95%以上.

鐵的還原能力如圖8（c）所示，其中，兒茶素的還原能力最強(qiáng)，之后依次是阿魏酸、對(duì)香豆酸、柚皮素.這四種活躍的金屬離子螯合劑對(duì)Fe3+的還原力均在一定的濃度范圍里急速增長(zhǎng)，然后再趨于平穩(wěn)，反式肉桂酸的還原能力卻一直處于平緩狀態(tài)，但是肉桂酸衍生物具有很強(qiáng)的自由基清除性能，尤其是對(duì)香豆酸和阿魏酸這類將羥基與肉桂?；Y(jié)合的衍生物［28］，這可能是因?yàn)榉恿u基和自由基反應(yīng)形成共振穩(wěn)定的苯氧基，并且存在的丙烯側(cè)鏈與其共軛雙鍵可以通過共振提高苯氧基自由基穩(wěn)定性，從而提高這類衍生物的抗氧化活性［29］.兒茶素和柚皮素的結(jié)構(gòu)是典型的類黃酮骨架，此類抗氧化劑苯環(huán)上的羥基極易失去氫電子，所以可以作為良好的電子供體發(fā)揮抗氧化能力［30］.

3 結(jié)論

本研究通過超聲波輔助乙醇法和響應(yīng)面法得到了提取徐香獼猴桃中酚類化合物的最佳提取工藝：液料比23.74∶1，溫度70 ℃，乙醇濃度52.21%，提取時(shí)間30 min.利用大孔吸附樹脂純化酚類化合物后通過LC-MS可知，與數(shù)據(jù)庫匹配度達(dá)80%以上且含量較多的酚類單體是兒茶素、阿魏酸、4-香豆酸、反式肉桂酸和柚皮素.最后在探究抗氧化活性的過程中發(fā)現(xiàn)兒茶素、阿魏酸、4-香豆酸、柚皮素都表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化活性，反式肉桂酸的抗氧化活性較弱，這與單體的結(jié)構(gòu)、取代基位置、穩(wěn)定性等因素都有關(guān).

本研究結(jié)果對(duì)獼猴桃多酚資源的開發(fā)利用具有重要的意義，有助于為過量的徐香獼猴桃工業(yè)副產(chǎn)品殘留物找到可持續(xù)的解決方案，也為以后其他獼猴桃品種的研究提供了理論依據(jù).

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